October 11th, 2014
Obwohl ein bekanntes Modell, stellt das Meerschweinchen noch eine Nische in der experimentellen Tierforschung und der begrenzten Daten über die Ausführung der meisten Verfahren zur Verfügung. Hier präsentieren wir Ihnen vier verschiedene Ansätze, um Nicht-Terminal in vivo Blutentnahme Techniken entweder bewusst oder betäubt Meerschweinchen.
Das übergeordnete Ziel dieses Videos ist es, die Methodik von vier verschiedenen Blutentnahmetechniken bei Meerschweinchen zu veranschaulichen. Die gezeigten Verfahren sind nicht endgültig, es sei denn, das Probenvolumen oder die Anzahl der Proben überschreitet die Richtlinien für die Blutentnahme. Bei Versuchstieren sehen wir hier die Ursache für die Vena usus lateralis und die Vena tarsal.
Die Vena ous verläuft dorsal und lateral über das Fußwurzelgelenk. Von jedem Hinterbein sollten maximal drei Proben entnommen werden, pro Probe können etwa 100 bis 400 Mikroliter Blut entnommen werden. Zur notwendigen Ausrüstung gehören ein Elektrorasierer, ein warmes Wasserbad, ein sauberes Handtuch, etwas Watte, ein Desinfektionsmittel wie 70%iger Alkohol, sterile Nadeln, 21 oder kleinere Sammelröhrchen.
Und wenn es darum geht, den Blutzucker und den AccuCheck-Probenehmer zu messen, kann die Blutentnahme aus der Cepheus- oder Tarsalvene bei Meerschweinchen ohne Betäubung durchgeführt werden. Das Meerschweinchen wird von einem geschulten Assistenten zurückgehalten und es sollte eine septische Technik angewendet werden. Die Haare, die den Fußwurzelbereich bedecken, werden mit einem Elektrorasierer rasiert und das Hinterbein gewaschen und in einem lauwarmen Wasserbad erwärmt.
Neben der Reinigung des Beins werden dadurch die Venen erweitert und sichtbarer. Das Hinterbein wird gestreckt und eine Stase erreicht, indem ein sanfter Druck nach unten knapp über dem Knie ausgeübt wird, so dass die Vene unmittelbar vor der Probenahme sichtbar wird. Die rasierte Stelle wird mit einem Desinfektionsmittel abgewischt.
Die Vene wird mit einer Nadel oder einer Lanzette punktiert, und das Blut kann in einem Kapillar- oder Mikrot-Röhrchen gesammelt werden. Wenn Blut entnommen wurde, wird die Stauung gelindert und sanfter Druck mit einem Stück Watte ausgeübt Um die Blutstillung zu erleichtern, sind hier die oberflächlichen Arterien und Venen auf der dorsalen Oberfläche des Meerschweinchenohrs zu sehen. Diese Gefäße können für die Blutentnahme verwendet werden, wenn nur ein sehr kleines Volumen benötigt wird.
Ein Beispiel könnte die Blutzuckermessung sein. Das Meerschweinchen wird sanft zurückgehalten, während das Ohr zugänglich bleibt. Die Einstichstelle muss vor der Probenahme septisch vorbereitet werden, eine Rasur ist jedoch nicht erforderlich.
An der Basis des Ohres kann leichter Druck ausgeübt werden, um die Venen besser sichtbar zu machen. Die Vene wird mit einer Nadel oder einer Lanzette punktiert und das Blut in einem Kapillarröhrchen gesammelt oder sofort mit dem AccuCheck-Probensystem auf den Blutzuckerspiegel analysiert. Wenn Blut entnommen wurde, sollte sanfter Druck auf die Einstichstelle ausgeübt werden, um die Blutstillung zu erleichtern.
Dieses Bild zeigt die Position des Meerschweinchens bei der Haldenblutentnahme und die Ursache der Halsvene. Der Eingriff wird ausschließlich an einem betäubten Tier durchgeführt. Zu den notwendigen Geräten gehören Medikamente für die Anästhesie und Elektrorasierer, Watte, ein Desinfektionsmittel wie ein Stethoskop mit 70% Alkohol, eine neutrale Augensalbe, Ein-Milliliter-Spritzen, sterile Nadeln, normalerweise 23 oder 25.
Gorge Heparin und EDTA können verwendet werden, um Spritzen vor der Probenahme zu spülen, um eine Gerinnung zu verhindern. Es gibt eine Vielzahl von Anästhesieprotokollen für Meerschweinchen. In diesem Fall werden die Tiere durch eine ausgewogene Anästhesie mit einer Mischung aus Solit-Fliesen-Sinus und Butif betäubt, die subkutan in den Hals injiziert wird.
Diese Mischung kann mit Kochsalzlösung verdünnt werden, um die Dosierung genauer zu machen. Nach der Injektion sollte das Meerschweinchen in seinen Käfig zurückgebracht und ruhig gelassen werden. Der Umgebungseffekt ist in der Regel nach etwa 10 Minuten zu sehen und hält 30 bis 40 Minuten vor der Probenahme an.
Die Tiefe der Anästhesie wird durch Überprüfung der Reflexe beurteilt und zum Schutz der Augen wird eine neutrale Augensalbe verabreicht. Die Halsvene wird mit dem Meerschweinchen auf den Rücken gelegt und die Vorderbeine vierteljährlich eingezogen. Der Bereich wird rasiert und aseptisch präpariert, das Schlüsselbein wird abgetastet und eine 23-Schlucht-Nadel, die auf einer Ein-Milliliter-Spritze montiert ist, wird etwa einen Zentimeter lateral der Mittellinie eingeführt, gerade kranio dorsal zum Schlüsselbein.
Die Spritze sollte in einem leichten Winkel nach oben und medial gehalten werden. Sobald die Haut durchdrungen ist, wird ein leichter Unterdruck auf die Spritze ausgeübt, da die Halsschlagader recht oberflächlich liegt und eine Einführtiefe von etwa drei bis vier Millimetern ausreichend ist. Wenn die Probe entnommen wurde, lösen Sie die Spannung der Vorderbeine und üben Sie leichten Druck auf die Einstichseite aus.
Das Tier kann dann in einen Auffangkäfig zurückgebracht werden, muss aber überwacht werden, um die Blutstillung und die Genesung von der Narkose zu gewährleisten. Wenn sich das Meerschweinchen vollständig von der Narkose erholt hat, kann es in seinen Stall zurückkehren. Die anatomischen Merkmale des Meerschweinchens unterscheiden sich geringfügig von denen anderer Nagetiermodelle, und eine Modulation der Probenahmetechniken ist erforderlich, um artspezifischen Unterschieden Rechnung zu tragen und innerhalb kürzester Zeit Proben von ausreichender Qualität zu erhalten.
Sowohl langfristig als auch kurzfristig. In vivo ist in Studien häufig eine wiederholte Blutentnahme erforderlich. Die Wahl der Technik sollte sorgfältig abgewogen werden, um Stress und Beschwerden zu reduzieren und das Überleben sowie die Einhaltung der Anforderungen an die Stichprobengröße und die Zugänglichkeit zu gewährleisten.
Alle beschriebenen Methoden wurden gründlich getestet und erfolgreich für die wiederholte in vivo Blutentnahme eingesetzt. In Studien in unserer Forschungseinrichtung stellt das Meerschweinchen eine Nische in der experimentellen Tierforschung dar, aber es gibt nur begrenzte Daten über die Durchführung grundlegender Verfahren. In diesem Videopaper haben wir vier verschiedene Ansätze für die nicht-terminale In-vivo-Blutentnahme bei bewussten oder anästhesierten Tieren vorgestellt, vorausgesetzt, dass das Probenvolumen und die Anzahl der Proben die Richtlinien für die Blutentnahme bei Labortieren nicht überschreiten.
Diese Verfahren werden für die Anwendung bei Meerschweinchen empfohlen, wenn wiederholte Blutentnahmen erforderlich sind. In Ihrem Studienprotokoll.
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Dieses Video zeigt vier nicht-terminale Blutentnahmetechniken bei Meerschweinchen, sowohl in wachen als auch in anästhesierten Zuständen. Diese Methoden sind entscheidend für Forscher, die mit diesem Modellorganismus arbeiten, bei dem begrenzte prozedurale Daten verfügbar sind.