Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Science Education
Cell Biology

A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.

מבוא לחלוקת תאים
 
Click here for the English version

מבוא לחלוקת תאים

Overview

חלוקת תאים היא התהליך שבאמצעותו תא אב מתחלק ומוליד שני תאי בת או יותר. זהו אמצעי רבייה עבור אורגניזמים חד-תאיים. באורגניזמים רב-תאיים, חלוקת התאים תורמת לצמיחה, התפתחות, תיקון ויצירת תאי הרבייה (זרע וביצים). חלוקת תאים היא תהליך מוסדר היטב, וחלוקת תאים חריגה יכולה לגרום למחלות, במיוחד סרטן.

המבוא של JoVE לחטיבת התאים יכסה היסטוריה קצרה של תגליות ציון הדרך בתחום. לאחר מכן אנו דנים במספר שאלות ושיטות מרכזיות, כגון ניתוח מחזור תאים והדמיה חיה של תאים. לבסוף, אנו מציגים כמה יישומים נוכחיים של טכניקות אלה במחקר חטיבת התא.

Procedure

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

חלוקת תאים היא תהליך שבאמצעותו תא אחד מייצר שני תאי בת או יותר. אורגניזמים חד-תאיים, כמו שמרים, מתרבים לפי חלוקת תאים, בעוד שאורגניזמים רב-תאיים, כמונו, משתמשים באותו תהליך כדי לפתח, לגדל ולתחזק את הרקמות שלנו. הידע של מה שולט חלוקת תאים נורמלית הוא קריטי כדי להבין איך שיבוש של תופעה זו יכול ליזום תהליכים פתולוגיים.

סרטון זה מציג היסטוריה קצרה של תגליות בתחום חלוקת התאים, מדגיש שאלות מרכזיות שנשאלות על ידי ביולוגים של תאים, סוקר כלים בולטים הנמצאים בשימוש ומציג כמה יישומים של ימינו.

בואו נתחיל על ידי סקירת כמה מחקרים ציון דרך שהניחו את הבסיס של מחקר חטיבת התא.

קיומם של תאים דווח לראשונה בשנות ה-1600 על ידי אנטון ואן ליוונהוק ורוברט הוק. הם התחזקו על ידי חידושים במיקרוסקופיה, והחזירו את הרעלה לעולם המיקרוסקופי הבלתי נראה. התצפית הראשונה שהתאים יכלו לחלק נעשתה בשנות ה-30 של המאה ה-19 על ידי שני בוטנאים, ברתלמי דומורטייה והוגו פון מוהל, שגילו שתא צמח אחד יכול להוליד שניים על ידי חלוקה. בעקבות תגלית זו, בשנת 1838, בוטנאי - מתיאס יעקב שליידן - ופיזיולוגי - תיאודור שואן - הבחין בדמיון בתאי צמחים ובעלי חיים. זה הוביל את שוואן להנחות את שני עקרונות תורת התאים, הראשון: "כל האורגניזמים החיים מורכבים מתא אחד או יותר"; שנית: "תאים הם אבני הבניין הבסיסיות של כל החיים." כמעט עשרים שנה לאחר מכן, רופא בשם רודולף Virchow פרסם את העקרונות השלישיים של תורת התאים, אשר הצהיר: "כל התאים נובעים תאים קיימים."

בשנת 1876, ולטר פלמינג, בעת צפייה בחלוקת תאים, הבחין בהפרדה של מבנים דמויי חוט. לכן, הוא טבע את המונח "מיטוזה", הנגזר מהמילה היוונית מיטוס שפירושה חוט. מאוחר יותר גילו אדוארד ואן בנדן ותיאודור היינריך בוברי כי חוטים אלה הם למעשה כרומוזומים, המחולקים בעזרת מיקרוטובולות הנובעות ממבנים הידועים כיום כצנטרוזומים. בנדן, יחד עם אוסקר הרטוויג ואוגוסט וייסמן, הסבירו גם הם את המיוזה – סוג אחר של חלוקה המייצרת תאים כמו גיימטים. הם הראו כי מיוזה, שלא כמו מיטוזה, כרוך סיבוב אחד של שכפול DNA אבל שני סיבובים של חלוקת התא, וכתוצאה מכך חציית מספר הכרומוזום מההורה לתאי הבת.

במחצית השנייה של המאה העשרים, מדענים החלו להתעניין בוויסות מחזור התא, תהליך שבו תא עובר דרך סדרה של שלבים המובילים לחלוקתו. אחת התגליות החשובות ביותר בתחום זה הגיעה בשנת 1972 מלילנד הארטוול ועמיתיו. באמצעות זני שמרים, הם הוכיחו כי ישנם גנים הממלאים תפקיד חשוב בהנחיית תאים בשלבי מחזור התא, וד"ר הארטוול ציין אותם כגנים מחזור חלוקת התא או "CDC של".

תגלית נוספת הגיעה בשנת 1983 על ידי טים האנט, שלמד קיפודי ים. הוא זיהה חלבונים המתנדנדים בשפע שלהם בסנכרון עם שלבי מחזור התא. בשל אופי התנודות שלהם, הוא קרא לחלבונים האלה "ציקלינים", ועכשיו אנחנו יודעים שצ'יקלינים הם רגולטורים מרכזיים של מחזור התא. ארבע שנים לאחר מכן, סר פול אחות ועמיתיו הראו כי גנים CDC, במיוחד CDC2, היה שמור מאוד בין שמרים ובני אדם. יחד, תגליות אלה הגדילו באופן משמעותי את הבנתנו את חלוקת התאים, וכך זכו לפרס נובל בשנת 2001.

כעת, לאחר שבדקנו כמה דגשים היסטוריים, בואו נבחן כמה שאלות בסיסיות העומדות בפני תחום חלוקת התאים היום.

נתחיל אולי בשאלה הרחבה ביותר בחלוקת התאים: אילו גנים ומסלולי איתות תאיים מווסתים את מחזור התא? ידוע כי שכפול וחלוקה נשלטים על ידי סדרה של מתגים ביוכימיים המפעילים או משביתים את תהליכי מחזור התא. חוקרים פועלים לשפוך יותר אור על המולקולות המשפיעות על ההתקדמות או העיכוב של מחזור התא.

ביולוגים מעוניינים גם לזהות את הגורמים החוץ תאיים הממריצים או מעכבים את חלוקת התאים. תאים עשויים להגביר את חלוקת התאים בתגובה לרמזים כימיים חיצוניים הנקראים מיטוגנים. מדענים עובדים כדי להבין אילו רמזים חיצוניים מעוררים או מעכבים חלוקת תאים.

חלוקת תאים חריגה יכולה להוביל להתפשטות תאים מוגברת או מופחתת. התפשטות תאים מוגברת גורמת למחלות כמו סרטן. חוקרים גילו כי מוטציות בגנים מסוימים המכונים אונקוגנים מעורבים בייזום סרטן. בנוסף, מדענים גילו גם מספר חלבונים הממלאים תפקיד קריטי בהתקדמות הגידול. עם זאת, מספר גורמים הגורמים לגידול עדיין אינם ידועים, וביולוגים חותרים קשה לחשוף אותם.

עכשיו שיש לכם תחושה של חלק מהשאלות שלא נענו, בואו נסתכל על כמה כלים מחקריים שבהם ביולוגים משתמשים כדי למצוא תשובות.

בתערובת של תאים המפרידים באופן פעיל, שיעור התאים הקיימים בכל שלב במחזור התא יכול להיקבע על ידי ניתוח מחזור התא. זה נעשה בעזרת צבעים מיוחדים, כמו ברומודוקסיאורידין או BrdU. זהו אנלוגי תימידין ומשלב את עצמו בגדיל ה- DNA המסונתז החדש במהלך שכפול ה- DNA. לפיכך, הוא מתייג תאי פאזה S בלבד. מצד שני, תרכובות פלואורסצנטיות כמו propidium idodide (PI) מכתימים את כל ה- DNA, אך כמות הגבול PI יכולה לעזור להבחין בין תאים בשלבים שונים. השלב האחרון הוא לנתח את התאים המוכתמים באמצעות ציטומטריית זרימה, ונתונים המתקבלים חושפים התפלגות תאים בין שלבי מחזור תאים שונים.

ההתקדמות בטכניקות ההדמיה מאפשרת כעת התבוננות ישירה בחלוקת התאים. מדענים יכולים כעת להכתים תאים באמצעות צבעי פלואורסצ'ין, או לבצע מניפולציה גנטית כדי לגרום לביטוי של חלבונים פלורסנטיים. לאחר מכן, הם יכולים לצפות ישירות בתאים חיים המפרידים באמצעות מיקרוסקופיה לשגות זמן.

לבסוף, מדענים גם פיתחו דרך לכמת את מספר החלוקות שתאים ספציפיים עוברים בתוך אוכלוסיית תאים מעורבים. זה נעשה באמצעות "צבעי מעקב הניתנים לכימות". צבעים אלה שימושיים מכיוון שהאות שהם מייצרים הופך עמום יותר מכיוון שהוא מדולל באמצעות חלוקת תאים. ניתן להשתמש בעוצמת הפלואורסצנטיות הפוחתת כדי לזהות תאים בדורות שונים. בנוסף, ההבדל בין עוצמת הפלואורסצנטיות הגבוהה ביותר לנמו הנמוכה ביותר יכול לספק תובנה לגבי מספר הפעמים התאים עברו חלוקה.

כעת, כאשר אתם מכירים כמה גישות נפוצות לחקר חלוקת התאים, בואו נבחן כיצד שיטות אלה מיושמות.

כפי שנדון קודם לכן, גנים ממלאים תפקיד מרכזי בבקרת מחזור התא. כאן, מדענים חקרו את ההשפעה של מוטציה גנטית על חלוקת התאים בזחלי Drosophila. הם ביצעו צלבים גנטיים כדי לייצר זבובים עם מוטציות ספציפיות, ולאחר מכן באמצעות ניתוח מחזור התא בחן את ההשפעות של המוטציה בתוך רקמת הכנף המתפתחת.

באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית, מדענים יכולים גם לבחון ישירות כיצד תרופות משפיעות על חלוקת התאים בסרטן. בניסוי זה, החוקרים התעניינו בקביעת האופן שבו תרופה פוטנציאלית, JP-34, השפיעה על חלוקת התאים הסרטניים. התוצאות הראו כי תאים סרטניים שטופלו ב- JP-34 עברו כשל מיטוטי ומוות תאים.

לבסוף, מדענים משתמשים בצבעי מעקב כדי לזהות הבדלים בשיעורי התפשטות התאים. כאן, הם השתמשו בצבע מעקב לכימות המסמן קרום התא כדי לחקור הבדלים בחלוקת התאים של תאי מערכת החיסון השונים. ניתוח נתוני ציטומטריית הזרימה גילה כי קצב ההתפשטות שונה בין סוגים שונים של תאי מערכת החיסון.

הרגע צפית בהקדמה של ג'וב למחלקת התאים. בסרטון זה סקרנו כמה מהתגליות הגדולות בחלוקת התאים, שאלות מפתח שנשאלות כיום על ידי ביולוגים של תאים, כלים בולטים המועסקים במעבדות חטיבת התאים והיישומים הנוכחיים שלהם. כמו תמיד, תודה שצפית!

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

לא הוכרזו ניגודי אינטרסים.

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter