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March 16, 2019
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この技術システムは、現場の疾患ベクター昆虫に対する農薬の有効性を測定し、マップを使用して有効性を可視化するユニークな方法を提供します。このシステムの主な利点は、標的昆虫の範囲に対して複数の環境にわたって適用され、比較することができる均一なプロセスであるということです。このシステムの中核は、コロニー飼育センチネル蚊が自然の生息地で戦略的に配置され、農薬スプレーにさらされる小さなケージの配列の使用です。
農薬の有効性の空間的および時間的パターンは、センチネルケージにおける死亡率のパーセントから導き出され、地理情報システムでマッピングされ、視覚化されます。大人のセンチネルケージを構築するには、まずローリングディスクカッター、ストレートエッジ、およびまな板を使用して、バルクチュールヤードからセンチネルケージごとに2つの5〜5インチチュールメッシュ正方形を準備し、チュールメッシュスクエアを50個のバッチでワンクォート再密封可能なビニール袋に保存します。次に、新しいハーフパイント段ボールアイスクリームカップの底からフラット段ボールディスクを押して、オープンエンドの2対3インチのシリンダーを作成し、2つのアイスクリームカップの蓋から段ボールディスクを取り外して、シリンダーの両端に1つのオープンエンドのベゼルを作成します。
次に、1 つのベゼルの下に 1 つのチュール メッシュスクエアをトラップし、円柱にメッシュをしっかりと固定します。センチネルケージごとに、フックアンドループケーブルタイをゴムバンドに固定し、ベゼルの周りのゴムバンドをメッシュスクエアで固定します。センチネルケージを50個のバッチで50個のバッチに入れ、50個のベゼルと50のチュールメッシュスクエアを含む別の袋を袋に入れます。
センチネルケージの準備ができたら、きれいな白い11 1/2から17インチの紙を均等に横切って二酸化炭素麻酔室から80匹の麻酔付き蚊を慎重に振り出し、タイマーを4分間設定します。ピストル吸引器を使用して、20人の成人女性のバッチを迅速に選択して個々のオープンセンチネルケージに移します。すぐにベゼルが付いたチュールメッシュの正方形をケージシリンダーの開いた上端に置き、押し下げてセンチネルケージアセンブリを完成させます。
蚊はストレスで死ぬ可能性があります。したがって、農薬毒性を正確に評価するためには、環境ストレスを最小限に抑えるためにセンチネルケージを貯蔵冷却器に迅速に生産し、積み込むために十分な訓練を受けた人員を持つことは重要です。チュールが所定の位置に配置されたら、シリンダの側面にフックアンドループケーブルタイを配置してセンチネルケージの両端に横になるようにゴムバンドをピボットします。
その後、綿ボールから10%スクロース溶液の大部分を絞り出して、自由に滴り落ちる直前に湿ったままにし、センチネルケージの片側のチュールメッシュに対してゴムバンドの下に綿のボールをそっと押し込み、蚊に簡単にアクセスできるようにします。すべてのメスが取り除かれたら、別の機械的な吸引器を使用して、凍結のために残りのオスの蚊のすべてを収集し、45〜50個のセンチネルケージごとに48クォート断熱ピクニッククーラー1つの4〜5層に10〜12個のケージをロードし、ケージが下のケージを完全に覆わないように各層をわずかに相殺します。その後、折りたたまれた13ガロンのゴミ袋と濡れたタオルで最上層を覆い、ダクトテープを使用して、折り畳まれた段ボールをクーラーの上唇の前隅に留めて空気交換を促進し、過熱を防ぎます。
センチネルグリッドとコントロールエリアを確立するには、噴霧器からの距離、スプレーラインに沿った距離、植生や障害物から噴霧浸透する距離、および地上の高さを捉えたセンチネルケージの位置のグリッドを設計します。300フィートの測定テープリールを使用して、噴霧器とスプレーラインに沿って便利な間隔をマークします。地面の上の極の少なくとも48インチとグリッド設計に従って地面にセンチネルケージ取り付けポールをインストールし、明確に永久的なマーカーと、そのユニークな位置のためのコードで各極にラベルを付けます。
生息地が農薬噴霧分散に自然に植生や障害物の課題を提供しない場合は、各センチネルケージポールの隣に上部を開いた1立方フィートの段ボール箱を横に置き、シミュレートされたrefugia内にセンチネルの場所を追加することを検討してください。箱を通る空気の流れは1つ以上の側面の1/2インチの穴を掘削することによって調節することができ、各箱はまた、その独特な位置コードおよび永久的なマーカーでラベル付けされるべきである。スプレーラインの基本的な長さはグリッドの寸法と一致する必要がありますが、開始点と停止点はグリッドの前後に十分に設定する必要があります。
スプレーラインの基本長の約10%を始点と終点に加え、避けられない変化と風のパターンの欠陥を考えると、グリッド全体が露出する機会を増やします。フックとループのケーブルタイを使用してセンチネルケージをポールに貼り付け、10%スクロース溶液を持つ確実な綿ボールがゴムバンドの下に残っていることを確認し、各ケージにポールの位置コードとケージのプレスプレー死亡率をラベル付けします。両方のチュール メッシュの端が地面に垂直になるように、ボックスの側面に箱のケージを配置し、同じ方法でボックス ケージにラベルを付けます。
すべてのケージがラベル付けされ、治療および制御領域の両方に展開され、すべての主要な人員が準備を伝えた場合、スプレーオペレータに風速と方向の最終チェックを行い、必要に応じて指定されたスプレーラインまたは代替スプレーラインから空中、地上、またはポータブル噴霧器農薬アプリケーションを開始させます。経験豊富なアプリケーターがフィールドトライアルの設計を支援し、ターゲット領域が適切な用量の農薬を受け取ることを確実にするために、潜在的な気象変化を鋭く認識することが重要です。スプレー後の保持時間の直後に、各センチネルケージ内の蚊のポストスプレー死亡率を、収集時に永久的なマーカーで記録します。
スプレー後6時間、使い捨てのニトリル手袋を使用して、ストレージトレイからケージを1つずつ拾って観察し、ユニークなロケーションコード、スプレー前と後の死亡率カウント、およびデータ記録のための各ケージからの6時間の死亡率カウントを呼び出します。すべてのポストスプレー データが記録されたら、地理情報システムを使用して、各ケージのコード データからすべての固有のセンチネル ケージの位置をマッピングし、これらの場所の属性テーブルの 4 つの死亡率に対してアボット補正死亡率の 4 つの列を作成します。治療領域内のユニークなセンチネルの位置すべてにわたる 4 つの死亡率期間のそれぞれに対して、死亡率の補間カバレッジを作成し、青色から赤のスペクトルにストレッチされた色の凡例を使用してこれらの補間カバレッジをマップに追加し、センチネルケージの位置にラベルを付けます。
基になる衛星画像を使用して処理領域のマップを拡張し、北向き矢印、縮尺記号、凡例、タイトルなどの適切なマップ要素を追加します。次に、気象グラフと別の風の上昇極プロットのインセットを追加して、スプレー期間全体の風、風速、変動性、死亡率の変動を示し、補間死亡率カバレッジを解釈できるようにし、各死亡率期間の表面の完成した地図画像をエクスポートします。この代表的な一連のスプレーでは、熱霧農薬噴霧器、農薬、および環境は一定に保たれ、水、ディーゼル、およびBVA13鉱油が3つの試験を横切って溶媒として使用されるように農薬希釈剤を変化させた。
特に、BVA13で農薬を希釈すると死亡率はほとんど認められず、農薬を水中で希釈するとほぼ100%の死亡率が観察され、希釈剤としてのディーゼルの影響はセンチネルケージの地理的位置の影響を受けているように見えた。この実験の差し込み風のバラ図は、西グリッドの空間死亡率の角度と完全に一致する風の角度を明らかにし、農薬がすべてのセンチネルケージに到達する機会を持つように、スプレートラックがさらに東に始まるべきであることを示すことに留意すべきである。死亡率データが表形式でのみ考慮される場合、実験計画におけるこの弱点を見逃し、農薬によって接触していない領域からのゼロ死亡値に偏った農薬応用機器に低い全体的な有効性を割り当てるのは簡単かもしれません。
最高品質の死亡率データについては、スプレーの前後にセンチネルケージを保管および取り扱う際には注意を払い、同様に治療領域と制御領域の両方のケージが環境にさらされることを確認してください。質の高いデータ テーブルの場合は、データを慎重に貼り付けて、正しい情報が正しいラベルの列の対応するポイント(特に各死亡率期間のデータ)に合うようにすることが重要です。私たちは、成虫ベクター蚊をセンチネルとして使用してこのシステムを実証しましたが、未熟な蚊は、様々な環境でスプレーされた幼虫のサイトを収集し、評価するために水で満たされた小さな400 mlプラスチックカップにセンチネルとして配置することもできます。
センチネルと性システムは、有効性の絶対的な尺度ではありませんが、異なる条件下で農薬の相対的な有効性を比較したり、同じ条件下で異なる農薬を比較する能力を証明しています。
迷惑と病気ベクトル昆虫をターゲット公衆衛生殺虫剤の有効性は異なる生態ゾーンにわたって統一されません。複数の環境間で農薬の標準的な評価を支援する電子地図を派生させる農薬効果の歩哨として拘束の媒介昆虫を用いた技術のシステムをご紹介します。
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Britch, S. C., Linthicum, K. J., Aldridge, R. L., Golden, F. V., Walker, T. W. Visualizing Efficacy of Pesticides Against Disease Vector Mosquitoes in the Field. J. Vis. Exp. (145), e58440, doi:10.3791/58440 (2019).
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