Environment
This content is Open Access.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Manipulatie van kleur patronen in springen spinnen voor gebruik in gedrags-experimenten
Summary May 21st, 2019
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Het doel van dit protocol is het manipuleren van de kleur patronen van springen spinnen en andere zeer kleine geleedpotigen met verf om te studeren vragen met betrekking tot seksuele selectie, seksueel kannibalisme, predatie, aposematism, of enig ander gebied van dierlijke kleuring.
Transcript
Om te begrijpen hoe en waarom kleuren evolueren, hebben we experimenten nodig waarbij we dierkleurpatronen manipuleren. Kleine dieren zijn vaak onderbestudeerd omdat hun kleuren zijn moeilijk te manipuleren. Het belangrijkste voordeel van het direct manipuleren van kleurvlekken is dat deze methode geen invloed heeft op het uiterlijk van de rest van het dier, of hun natuurlijke verlichtingsomgeving verandert.
We laten zien hoe onderzoeken emailverf en make-up kunnen toepassen op springende spinnen. Deze zelfde methoden werken ook op een verscheidenheid van andere kleine, kleurrijke, en understudied geleedpotigen. Ik zou adviseren eerst een poging om een dood exemplaar te schilderen, zodat er geen haast om de perfecte verf consistentie en hoeveelheid op de micro borstel te verkrijgen.
Visuele demonstratie van deze methode is essentieel omdat het moeilijk is om uit te leggen wat de juiste verf consistentie is, hoe de verf toe te passen, welke hoek de borstel zou hebben, bijvoorbeeld. Om te beginnen sluit u een ontledenmicroscoop aan op een camera en computer, om gemakkelijker foto's van de uitkomst te maken. Schakel alle drie de apparaten in en start de software die de camera-invoer verwerkt.
Selecteer vervolgens de relevante zoom waarop de uiteindelijke foto wordt genomen. Plak een insect montage pin of een kleine spijker in een bal van niet-verharding modellering klei die ongeveer de grootte van een druif. Plaats de modellering klei en pin setup onder de microscoop en pas de doelstellingen, zodat ze ruwweg richten op het hoofd van de pin waar de spin zal worden gemonteerd.
Plaats vervolgens een extra dunne insectenmontagespeld in een nieuwe bal van niet-verhardende modelleringsklei en plaats dit naast de microscoop. Zet de volgende materialen op een georganiseerde manier naast de microscoop. Een klein stukje absorberend papier, Een stuk wit printerpapier, de verf die wordt aangebracht, aparte containers verfverdunner voor elke kleur die wordt toegepast, plus een om transparant en schoon te houden, individuele microborstels voor elke kleur, en één microbrush om alleen met schone dunner te worden gebruikt.
Met behulp van een tandenstoker, voeg een druppel verf aan een open plastic schotel. Voeg verfverdunner en gebruik de tandenstoker om de twee te mengen tot de juiste consistentie, waar de verf is volledig gehomogeniseerd, maar niet te vloeibaar. Gebruik een microbrush om de gemengde verf op het witte printerpapier te testen.
Zet vervolgens een erwt formaat druppel van water gebaseerde lijm op een hoek van de printer papier. Voeg eerst een zeer kleine hoeveelheid lijm toe aan de kop van de montagepen of nagel die eerder werd bereid en onder de microscoop werd geplaatst. Schuif de verdoofde spin van zijn flacon voorzichtig op de tafel met zijn ventrale kant omhoog, zodat u de spin niet op de tafel tikt of laat vallen.
Houd de modelklei met beide handen vast en zorg ervoor dat beide handen stevig tegen de tafel staan. Druk vervolgens voorzichtig op de speldenknop met lijm op het borstbeen van de spin, zodat de spin iets zal stuiteren en zijn benen zal verlengen onder de kleine uitgeoefende druk. Herpositioneren van de montage setup onder de microscoop, zodat het te schilderen gebied naar boven en in focus.
Eerst testen we de consistentie van de verf en passen deze indien nodig opnieuw aan. Probeer altijd eerst de verf op het printerpapier aan te brengen, om de verfkwaliteit in de borstelharen te controleren. Voordat u de spin aanraakt, is het van cruciaal belang om ervoor te zorgen dat de verf de juiste consistentie heeft en dat er alleen de juiste hoeveelheid verf op de microborstel zit.
Terwijl je door de microscoop kijkt, gebruik je de dominante hand om de punt van de borstel in het gezichtsveld te brengen en ervoor te zorgen dat de borstelharen niet te veel verf bevatten. Als er te veel verf op de borstel, veeg een deel van het op de printer papier. Raak vervolgens de borstel aan op de spin op het grootste gebied dat moet worden overgeschilderd.
Dit zal onthullen of de consistentie en de hoeveelheid van de verf juist is, dat is wanneer de verf iets en langzaam doorweekt in het haar of schubben van de spin. Als er geen verf wordt aangebracht, laat de borstel in de verf en herhaal dit proces, te beginnen met het testen van de verf op het printerpapier. Als de verf snel binnenweek en overloopt in een gebied dat niet door verf bedekt mag worden, veegt u de borstel op het absorberende papier en herhaalt u het proces vanaf het begin door de verf op het printerpapier te testen.
Als u het gezicht van de spin schildert, gebruikt u de extra dunne speld in de niet-dominante hand om de voorpoten en pedipalpen ingelast te houden. Afhankelijk van de borstels en verf, overwegen schilderen beide zijden van het gezicht voordat u probeert om het centrale gebied tussen de ogen te schilderen, als het schilderij op de zijkant gebieden kunnen worden verbonden door het houden van de borstel parallel aan het gezicht van de spin en inducerende capillaire actie. Bij het schilderen van de pedipalps of benen, zorg ervoor dat geen joins raken met een verhardende verf, en zorg ervoor dat er geen verf op de mannelijke sperma levering organen op de onderkant van het distale segment van de pedipalpen.
Na het schilderen van de ene kant van het gezicht van de spin, is het handig om de spin onder de microscoop te draaien, zodat de andere kant van het gezicht met dezelfde dominante hand kan worden geschilderd. Schilderen moet zowel zorgvuldig als snel worden gedaan, voordat de spin ontwaakt uit anesthesie. Ten slotte, uitzoomen met de microscoop om de algehele kleur manipulatie te inspecteren en voor te bereiden op een foto te nemen.
Schakel eerst het doel over naar de cameramodus. Neem met behulp van de computersoftware een foto terwijl u ervoor zorgt dat de geselecteerde zoom de geselecteerde zoom is die op de microscoop is geselecteerd, zodat een schaalbalk wordt toegevoegd. Wanneer de spin begint te bewegen, houd de pin, zodat de spin voorpoten zijn het aanraken van de spin flacon.
Indien nodig, voorzichtig helling van de pin om te helpen de spin trek zich weg van de gedroogde lijm en laat de spin zelf vrij te laten. In deze studie, de kleine gezichten van Habronattus pyrrithrix mannetjes zijn kleur gemanipuleerd. Met behulp van de technieken die hier worden aangetoond, verschillende graden van kleur manipulaties zijn effectief.
Inclusief volledig verbergen van kleuren, of het verminderen of verbeteren van hun intensiteit. Voor de mannetjes die hier worden getoond, is het doel om het aantal rode vlekken te verhogen of te verminderen dat door mannetjes tijdens verkering wordt getoond. Sommige mannetjes hebben hun natuurlijke rode gezichten verborgen met grijs email verf, terwijl anderen hebben hun kleuren onderhouden door het schilderen over de natuurlijke rode met rode email verf als een controle.
Evenzo, omdat sommige spinnen hebben rode vlekken toegevoegd aan de pedipalpen om de hoeveelheid rode kleur vlekken weergegeven te verhogen, grijze verf wordt gebruikt om de pedipalp van de andere mannetjes te dekken, zodat alle mannetjes hebben verf toegepast op het gevoelige gebied. Echter, met spinnen uit verschillende groepen geschilderd op exact dezelfde gebieden, om te controleren voor een mogelijk negatief effect van de verf, is niet altijd haalbaar. In een andere studie wordt de rode kleur verwijderd met behulp van een zwarte eyeliner die dezelfde spectrale eigenschappen heeft als de onderliggende nagelriem van het mannetje, terwijl de andere mannelijke kleuren intact en natuurlijk blijven.
Voor de natuurlijk uitziende mannetjes, dezelfde hoeveelheid eyeliner wordt toegepast op het gebied op de top van het carapace, net achter de voorste mediane ogen, om de controle voor een mogelijke geur of algehele toxiciteit van het product. Het gedrag van beide soorten mannen wordt vergeleken in een bepaalde context om eventuele subtiele verschillen die kunnen wijzen op toxiciteit of onbedoelde effecten van de verven te beoordelen. Sham behandelde mannetjes en mannetjes van wie de gezichten zijn geschilderd met eyeliner, worden twee bij twee in aanwezigheid van een vrouw, en specifieke mannelijke gedragingen worden waargenomen.
In dit geval onthullen alle vergelijkingen geen verschillen tussen behandelingen. Daarom kan worden geconcludeerd dat er geen vooroordeel wordt ingevoerd voor een van de behandelingscategorieën. Evenzo, wanneer afzonderlijk geïntroduceerd om een vrouwelijke kooi, mannetjes geschilderd met grijze of rode email verf en niet gemanipuleerde mannen, presenteren geen verschillen in gedrag.
Daarom kan worden geconcludeerd dat de geschilderde mannetjes op natuurlijke wijze handelden. Om de spin op geen enkele manier te bekomeren, is het belangrijk om te voorkomen dat er verf op het mondgedeelte of de spermatoevoerorganen wordt toegevoegd. Men moet ook geen verf toevoegen of achterlaten op de ogen of gewrichten van de spin.
Kleur gemanipuleerde spinnen of andere geleedpotigen kunnen worden gebruikt in gedragsexperimenten om de rol van kleur te begrijpen in een verscheidenheid van context, variërend van verkering, tot mannelijke, mannelijke interacties, tot het vermijden van roofdieren. Het gebied van dierlijke kleuring wordt meestal gedreven door het werk aan grotere gewervelde dieren, zoals vogels. Met verkleinde kleurmanipulatietechnieken kunnen we nu meer vragen stellen over kleur bij kleine dieren.
Please enter your institutional email to check if you have access to this content
has access to
BackLogin to access JoVE
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
To receive a free trial, please fill out the form below.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You
Thank You
Thank You
