Modélisation des troubles du spectre de l’alcoolisation fœtale chez le poisson-zèbre pour caractériser l’impact d’un environnement embryonnaire défavorable sur le comportement social adulte

L’objectif de notre laboratoire est de comprendre comment les gènes interagissent avec le développement du cerveau pour influencer le comportement. Dans notre laboratoire, nous utilisons le poisson-zèbre pour comprendre comment un facteur environnemental comme l’exposition à l’alcool pendant le développement entraîne des changements dans les gènes d’un poisson-zèbre, et donc influence le développement du cerveau et conduit à des changements de comportement. Notre objectif global est de comprendre si le profil génétique d’une personne la rend plus ou moins susceptible d’être affectée par une exposition embryonnaire à l’alcool. Donc, dans notre domaine, nous utilisons actuellement le suivi automatisé, ce qui augmente le débit, et nous utilisons l’édition génétique avancée comme la technologie CRISPR. L’association de ces deux éléments nous permet de mieux comprendre comment les interactions gène-environnement entraînent des changements de comportement. Ce que nous avons pu montrer pour la première fois, c’est que le poisson-zèbre pouvait être utilisé pour modéliser les déficits sociaux associés aux troubles du spectre de l’alcoolisation fœtale. Dans le passé, le poisson-zèbre a été utilisé pour modéliser les conséquences les plus graves de l’exposition prénatale à l’alcool. Plus précisément, ils servaient à rechercher des défauts physiques causés par des doses élevées d’alcool pendant de longues périodes. Dans le domaine, nous ne savions pas si le poisson-zèbre pouvait être utilisé pour modéliser les défauts sociaux associés aux troubles du spectre de l’alcoolisation fœtale. Nous avons pu montrer pour la première fois que l’utilisation d’une faible dose d’alcool pendant une très courte période de temps entraîne des défauts sociaux chez les poissons-zèbres adultes.

[Instructeur] Pour commencer, positionnez des réservoirs de 1,4 litre sur la largeur d’un réservoir de 37 litres. Couvrez l’arrière et le fond du réservoir de 37 litres avec du plastique ondulé blanc pour améliorer le contraste entre le poisson expérimental et l’arrière-plan. Positionnez ensuite le plastique ondulé sur la paroi extérieure des réservoirs de 1,4 litre pour améliorer le contraste du stimulus social pour le poisson expérimental. Ensuite, insérez du plastique ondulé blanc entre les réservoirs de 1,4 litre et de 37 litres pour empêcher les poissons de se voir pendant l’habitation. Positionnez l’appareil photo à une distance appropriée pour capturer la longueur du réservoir de 37 litres et la moitié des réservoirs de 1,4 litre. Utilisez des lumières de hotte d’aquarium équipées d’une lampe T8 à spectre complet de 15 watts pour éclairer le réservoir de 37 litres. Utilisez un générateur de séquences aléatoires en ligne pour randomiser tous les essais avant d’effectuer les tests comportementaux. Remplissez ensuite le réservoir de 37 litres désigné pour le test comportemental avec de l’eau adaptée au support du boîtier. Assurez-vous que la température de l’eau s’aligne sur celle du support du boîtier dans une plage de 2 degrés Celsius et que les niveaux d’eau dans tous les réservoirs sont identiques. Marquez des incréments de 5 centimètres sur la longueur du réservoir de 37 litres en haut et en bas pour créer 10 zones de 5 centimètres chacune pour un réservoir d’essai de 50 centimètres. Ensuite, sélectionnez deux mâles et deux femelles de la même cohorte que le poisson expérimental pour agir comme stimulus social. À l’aide d’un filet, attrapez le poisson expérimental de 16 semaines dans le réservoir du logement et placez-le dans un récipient avec de l’eau pour poissons. Placez ensuite le poisson expérimental au centre de l’arène d’essai. Vérifiez que les paramètres de détection correspondent aux préférences de l’utilisateur en fonction du logiciel choisi avant de lancer l’essai de 20 minutes. Pendant les 10 premières minutes, maintenez la barrière opaque entre les réservoirs de 37 litres et de 1,4 litre. Ensuite, retirez soigneusement les barrières opaques, permettant au poisson expérimental de voir le stimulus social. L’exposition embryonnaire à l’éthanol a atténué la réponse des bancs, car ces poissons n’ont pas réussi à s’approcher du banc. Les poissons témoins ont réagi beaucoup plus fort au banc vivant que les poissons exposés à 1 % d’alcool. En présence du stimulus social, les poissons témoins ont passé plus de temps dans la zone 1 que les poissons traités à l’éthanol. L’exposition embryonnaire à l’éthanol n’a pas altéré la mobilité, car il n’y a pas de différence entre les groupes entre les zones pendant l’accoutumance lorsque le stimulus social n’est pas présent. Il n’y a pas de différence dans le temps que les poissons passent dans la zone 1 lorsque le stimulus social n’est pas visible.