La bassa solubilità e il debriefing cellulare più grande sono le principali difficoltà della dissociazione del tessuto vascolare. Il nostro metodo di digestione in due fasi è molto adatto per la dissociazione del tessuto carotideo e può essere utilizzato per preparare sospetti di singole cellule per altri vasi con piccole modifiche, rendendolo molto utile nella ricerca cardiovascolare. Questo protocollo è adatto per ottenere più tipi di cellule nell’arteria carotide e può essere facilmente ripetuto senza apparecchiature speciali.
In futuro, miriamo a utilizzare le sottoclassi cellulari scoperte dal sequenziamento di ioni a singola cellula per la terapia mirata delle malattie cardiovascolari.
Summary
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Qui descriviamo un protocollo di digestione cellulare in due fasi per la preparazione di una sospensione unicellulare delle arterie carotidi di topo.
Li, F., Zhu, Z., Du, Y., Zhu, L., Tang, C. Preparation of a Single-Cell Suspension from Mouse Carotid Arteries for Single-Cell Sequencing. J. Vis. Exp. (203), e65863, doi:10.3791/65863 (2024).