IonFlux : النظام الآلي المشبك مع تصحيح البساطة قارئ اللوحة -- إعلان

Application Notes
 

Sign in to register to receive emails with product information.

Summary

والمشبك IonFlux تصحيح النظام الآلي يوفر سرعة عالية ، وفعالة من حيث التكلفة فحص القناة الايونية لمجموعة واسعة من التطبيقات الكهربية. تبادل سريع المجمع ، وتكلفة منخفضة لكل نقطة بيانات وصيغ ملائمة لوحة جيدا جعل النظام المثالي لكل من يجند والجهد بوابات أهداف القناة الايونية. وHT IonFlux يوفر الرائدة في صناعة البيانات 10000 نقطة في اليوم الواحد ، في حين أن 16 على IonFlux صحيح المشبك التصحيح الآلي لأداء التكلفة تقريبا للتلاعب المشبك التصحيح اليدوي.

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

القنوات الأيونية تلعب دورا حاسما في تنظيم الجهاز العصبي المركزي وفسيولوجيا الأعصاب والعضلات. ونتيجة لذلك قد تورطت بها في العديد من الحالات المرضية مثل مرض السكري والصرع ، والأهداف الرئيسية للأدوية الجديدة. الأسلوب المشبك التصحيح هو المعيار الذهبي لتقييم نشاط أيون القناة في المختبر. عندما تنفذ بطريقة ميكانيكية ، ويقتصر على فحص المشبك التصحيح لنقاط البيانات حوالي 10 في اليوم الواحد ، وهو أقل بكثير من الحد الأدنى اللازم لاكتشاف المخدرات مجدية وجهود التنمية. المنصة الملكية IonFlux يستخدم التكنولوجيا بليت حسنا ميكروفلويديك لأتمتة طريقة المشبك التصحيح التي مرت في شكل جيد لوحة مريحة والعالية التي تأتي في طرازين تحجيم لاستيعاب مجموعة واسعة من التطبيقات ، بما في ذلك الجهد وكلا القنوات الأيونية يجند بوابات. هي مناسبة لHT IonFlux لفحص إنتاجية عالية في اكتشاف المخدرات والتنمية. هذا الإصدار هو قادر على انتاج ما يصل إلى 10000 نقاط البيانات في اليوم الواحد. لإنتاجية إضافية ، يمكن المحتشدة ما يصل إلى أربعة أنظمة HT IonFlux حول التعامل مع الروبوت السائلة واحد ليصل إلى 40000 نقاط البيانات في اليوم الواحد. تكلفة منخفضة لكل نقطة بيانات واستخدام الحد الأدنى من المجمع جعل مثالية HT IonFlux لفحص المخدرات ، وتطوير الأدوية ، وعلم السموم والسلامة ، وأيون البحوث القناة. وIonFlux 16 هو حل فعالة من حيث التكلفة للتطبيقات التي المعتدلة مثل تطوير خط الخلية ، وفحص متحولة ، وتطوير الفحص. للمرة الأولى على الإطلاق ، للمستخدمين الوصول إلى true التصحيح الآلي المشبك التكنولوجيا بتكلفة مماثلة لتلاعب المشبك التصحيح اليدوي.

Protocol

1. IonFlux النظام نظرة عامة

  1. ويتألف نظام IonFlux صك الفوق ، وهو جهاز ميكروفلويديك الملكية في شكل قياسي لوحة SBS جيدا ، وحيازة كاملة وتحليل حزمة البرامج.
  2. خلافا لغيرها من الصكوك الآلي المشبك التصحيح ، القارئ IonFlux يحافظ على مساحة صغيرة جدا والتي تمثل بشكل وثيق ، قارئ لوحة. تناسبها بسهولة على الفوق ، والتكامل المتاحة مع شائعة الاستخدام الآلي مختبر الروبوتات ، وتمكين IonFlux لتناسب بسهولة في مسارات العمل القائمة الفرز عالية الإنتاجية وكذلك مختبرات البحوث.
  3. ويستخدم IonFlux تسجيل الفرقة ، مما يعني وجود مصححة يبلغ عدد سكانها 20 زنزانة في كل منطقة التسجيل ، ويتم حساب المتوسط ​​التيارات على إنتاج نقطة بيانات واحدة. هذا النهج تنتج نسبة عالية من النجاح ، ويقلل من تأثير التقلبات الخلية.
  4. يمكن لكل لوحة 384 256 مركبا جيدا عملية فريدة من نوعها وتنتج 512 نقاط البيانات. لوحة 96 - جيدا استخدامها مع عمليات IonFlux 16 64 مركبات ، وتنتج 128 نقاط البيانات.
  5. لديها القدرة على تشغيل عالية الإنتاجية شاشات الكهربية يفتح الباب أمام مجموعة واسعة من التجارب القناة الايونية. وتشمل التطبيقات الشائعة تجارب مع قنوات بوابات يجند مثل مستقبلات GABA والنيكوتين ، وقنوات بوابات الجهد مثل الصوديوم والبوتاسيوم القنوات ، والسموم التي تركز على سلامة القناة hERG البوتاسيوم. ويمكن أيضا شاشات خط متحولة والخلية أن يؤديها. علاوة على ذلك ، يتيح تحليل IonFlux التعبير الفنية للقنوات أيون.

2. الحصول على البيانات وتحليل

  1. نظام IonFlux يأتي مع حزمة برامج متقدمة للحصول على البيانات وتحليلها. بمجرد أن يتم تحميل البرنامج ، سوف يرى المستخدم ثلاث شاشات رئيسية هي : الإعداد ، وقت التشغيل ، وتحليل البيانات.
  2. وضع الإعداد يحتوي على كافة الضوابط اللازمة لتحديد تجربة. في هذا الوضع ، يتم تهيئة التجارب ويتم تعيين لوحة أو نصفه. كما يتم استيراد الجدول من المركبات المستخدمة في انشاء واسطة.
  3. في علامة التبويب تسلسل تجريبية ، يتم تعيين المعلمات للمراحل أربعة من التجربة : رئيس الوزراء ، فخ ، فاصل ، والحصول على البيانات. هنا ، يتم تعريف بروتوكولات الجهد.
  4. وضع التشغيل تظهر البيانات كما يجري جمعها. نافذة الاجتياح في الوقت الحقيقي يعرض التيارات المتولدة خلال كل نبضة الجهد لكل قناة. وأفادت التقارير أيضا التقدم التجريبية.
  5. وضع تحليل البيانات يمكن مراجعة سريعة وتحليل التجارب المكتملة. يتم توفير الأدوات اللازمة لعرض تمشيط وتعقب البيانات ، فضلا عن تسجيل أحداث معينة مثل مقدمة المركب. وحدة نمطية خريطة هيت يساعد على تحديد المركبات الواعدة في الشاشة. يمكن بسهولة جميع البيانات يتم تصديرها في شكل CSV. اكسل لتطبيقات قواعد البيانات وغيرها.

3. تطبيقات IonFlux -- المغيرون GABAA

  1. يمكن تنفيذ مجموعة واسعة من التجارب وشاشات الهدف على نظام IonFlux. هنا ، ويتجلى مثال للمقايسة جهري الانسان GABA A - المستقبلة ، التي أعرب عنها في الخلايا من HEK293 ميليبور. وتشارك هذه القناة كلوريد يجند بوابات في تثبيط الجهاز العصبي المركزي ، مما يشكل هدفا هاما في المخدرات ، والصرع والأرق والقلق.
  2. لإجراء فحوصات الفرز ، وتعرضت فرق الخلية لEC20 تركيزات GABA يجند الأم ، في وجود تركيزات المواد تصاعدي المغير التي تربط في موقع تفارغي على مستقبلات.
  3. مخططات تبين منحنيات الاستجابة للجرعة لجهري two تفارغي إيجابية في فئة البنزوديازيبين ، وهما تريازولام الديازيبام ، والتي تم الحصول عليها من القيم EC50 3 نانومتر وميكرومتر 0.5.
  4. ثم تقرر التحول المغير تعتمد في تقارب واضح من خلال تطبيق GABA تراكميا تركيزات مختلفة GABA في وجود تركيز ثابت من المغير ، في هذه الحالة ، 3 ديازيبام ميكرومتر.
  5. يتم تمكين هذا النوع من التجارب من خلال تصميم التدفق من خلال fluidic المتاحة في الصكوك IonFlux. وكان لتحول EC50 GABA بنحو 1 ميكرومتر لخفض تركيزات نظرا لتقارب ملزم زيادة في وجود المغير.

4. تطبيقات IonFlux -- الحاجزون من قناة الصوديوم hNav1.8 متعلق بالخلايا العصبية

  1. الصك IonFlux يسهل أيضا تجارب دوائية أخرى ، بما في ذلك مثال نموذجي هو موضح هنا لحاصرات للقناة العصبية hNav1.8 الصوديوم ، قناة الجهد بوابات المتورطين في إدراك الألم. في هذا الاختبار ، تم تنشيط نا + القناة ، التي أعرب عنها في الخلايا عن طريق الخطوات HEK293 المشبك من الجهد -120 بالسيارات إلى 0 بالسيارات ، وتطبق في كل ثانية.
  2. هذا البروتوكول يتيح ذلك معلومات عن كتلة منشط للقناة ، والقناة منذ إعادة تدخل الدولة تقع بين depolarizatالأيونات. موضحة التراكمي مانع منحنيات الاستجابة للجرعة التخدير ليدوكائين المحلية وتتراكائين ، وتقديم قيم IC50 من 320 ميكرومتر وميكرومتر 34 ، على التوالي.
  3. في الرسم البياني الثاني ، مقارنة تقارب يدوكائين لhNaV1.8 إلى أنه بالنسبة لhNaV1.7 ، وآخر الجهد بوابات قناة + نا تشارك في الإحساس بالألم. تم العثور على IC50 hNaV لتكون 1.7 إلى 3 ملم ، مما يكشف عن انخفاض تقارب عشرة أضعاف هذه القناة عندما يربط يدوكائين ، مقارنة مع hNaV1.8.

5. تطبيقات IonFlux -- hERG الفرز

  1. يمكن أيضا أن تستخدم أداة IonFlux لتطبيقات السلامة مثل الصيدلة hERG الفرز. وقد تورط القناة hERG البوتاسيوم في القلب الاحداث السلبية المرتبطة بالمخدرات المتنوعة في السوق ، مما أدى إلى انسحابهم ، والمطلوب الآن أن يتم فحص كل دواء جديد ضد مركبات هذه القناة.
  2. أجريت مانع منحنيات الاستجابة للجرعة مميزة للقنوات hERG الجهد الاعتماد وأعرب تشو عن خلايا في ثلاثة مجمعات الإشارة استخداما ، وهي تيرفينادين ، وcisapride كينيدين.
  3. تظهر الرسوم البيانية ملف نموذجي الحالية التي تم الحصول عليها عندما يتم تنشيط قنوات hERG بواسطة بروتوكول two نبض ، وهو أمر ضروري نظرا لسعره تعطيل السريع ، كما تستخدم للكشف عن التيارات hERG الذيل. تظهر الرسوم البيانية تفعيل الجهد والاعتماد على خصائص تصحيح الحالي hERG سجلت في الصك IonFlux.
  4. تكرار هذه التسجيلات عن كثب السلوك المقبولة القناة ممثلة في الأدب. مانع منحنيات الاستجابة للجرعة تكشف IC50 القيم المرجعية للمركبات ثلاثة من 60 نانومتر ، NM 160 ، و 1 مم.

Disclosures

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics