만성 실험에 장착 전극 또는 Microdialysis 프로브를위한 라이트 - 치료 치과 접착제 수지의 응용

Biology

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Summary

이 보고서에서는, 우리는 전극이나 만성적인 실험에 microdialysis 프로브의 설치 기반에 대한 가벼운 치료 치과 수지의 새로운 응용 프로그램을 제안합니다. 이 자료는 두개골에 직접 접착 수 있습니다.

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Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Application of Light-cured Dental Adhesive Resin for Mounting Electrodes or Microdialysis Probes in Chronic Experiments. J. Vis. Exp. (6), e249, doi:10.3791/249 (2007).

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Abstract

만성 녹음 실험에서, 자기 치료 치과 아크릴 수지는 전극 또는 microdialysis - 프로브의 장착 기지로 사용되었습니다. 이러한 acrylics이 뼈에 결합하지 않기 때문에, 나사는 앵커로 사용되었습니다. 그러나, 핀치즈 드나 마우스 같은 작은 실험 동물에 그들의 craniums은 매우 연약하고 성공적으로 앵커를 물을 수 없습니다. 이 보고서에서는, 우리는 전극이나 만성적인 실험에 microdialysis 프로브의 설치 기반에 대한 가벼운 치료 치과 수지의 새로운 응용 프로그램을 제안합니다. 이 자료는 두개골에 직접 접착 수 있습니다. 따라서, 앵커 나사가 필요 없으며 수술 분야는 상당히 줄일 수 있습니다. 과거의 경험이 결합 효과 이상 이개월 유지 보여줍니다. 자료 고분 고 분한하고 가능한 아르 시간이 종래의 수지의 창이 몇 분 거리에 있습니다. 그러나 이러한 치과 접착제 근무 시간의 창 상당히 넓은하고 조정합니다.

Protocol

1 단계. 프로브 주입의 준비

  1. 마취 (비디오에 표시되지 않음)

    interperitoneal 300ml의 주사 (12.5 밀리그램 / kg 체중)와 외과 마취의 안정 수준을 생산 xylazine (25 MG / kg) 혼합 각 새 마취.

  2. stereotaxic 프레임에 머리를 수정

    귀 바 '압력의 로컬 통증을 줄이기 위해 Xylocaine (TM) 젤리를 사용합니다. 조류의 머리는 귀 바, 45 °의 각도로 머리를 가지고 부리 홀더 구성된 stereotaxic 장치에서 해결되었습니다. 이식에 대한 stereotaxic 수술하는 동안, 열 제어 외과 패드에 의해 조류의 시신을 따뜻하게 (온도 = 34 ~ 36 ° C).

  3. 외과 영역을 소독

    수술하기 전에 isodine (TM)으로 수술 부위를 소독.

2 단계. Stereotaxic 위치

  1. 기준점 정렬

    람다 (Y - 포인트) 마크 Y - 포인트 염료 채워진 피펫과 함께하는 더미 프로브 (유리 micropipette)를 맞춥니다. 마지막 추적 연구 남은 Dextran - TMR은 비디오에 사용되었습니다.

  2. 피부의 절개

    피부를 제거하고 두개골의 표면을 쉽게받을 수 있습니다. 그런 다음, 면화 면봉으로 두개골의 표면을 청소하십시오.

  3. 가짜 정맥의 위치 (수평 방향)

    대상 사이트 (AP 축과 래터럴 조정)에 더미 정맥으로 이동

  4. 소형 craniotomy 및 두라 메이터의 절개.

    craniotomy에 대한 좋은 포셉 및 두라 메이터의 incisions에 대한 훌륭한 주사 바늘 (30 G)를 사용합니다. 그런 다음, 두개골의 표면을 청소하십시오.

  5. 가짜 정맥의 최종 위치 (주입)

    microdialysis 프로브 - 목표는 지역 위 0.30 mm에서 가이드 정맥의 끝부분을 찾습니다. 깨끗하고 건조한 표면이 거친 결합이 필요하기 때문에 마지막으로, 다시 두개골의 표면을 청소하십시오.

3 단계. 두개골 표면 전처리

(치과 제품의 "직접 작성 복원"에 대한 유사한 절차가 등장한다.)

  1. 프라이머 처리
    1. 접시에 A와 B를 혼합 PRIMAR 액체.
    2. 작은 브러시와 함께 두개골의 표면에 혼합물을 적용합니다.
    3. 30 초 동안 둡니다.
    4. 부드러운 공기 흐름과 건조. (세척하지 마십시오.)

  2. 접착제의 응용
    1. 작은 브러시와 함께 두개골의 표면에 접착제를 적용합니다.
    2. 부드러운 공기 흐름을 적용합니다. (세척하지 마십시오.)
    3. 20 초 동안 빛을 치료.

4 단계. 합성 수지 장착

  1. 일반 충전기로 마운트 수지

    일반 충전기를 사용할 수없는 경우, 마이크로 주걱 대신 사용할 수 있습니다.

  2. 라이트 치료
  3. 증분 설치

    증분 설치는 수지의 완전한 반응을 보장하는 것이 좋습니다.

    증분 설치를위한 모든 설치하기 전에 접착제를 적용합니다.

  4. 최종 경화에 대한 합성 수지 및 가벼운 치료를 몰드.
  5. 수술의 끝

외과 영역을 청소 (Gentamicin의 연고) 항생제 적용하고, stereotaxic 불꽃에서 동물을 제거합니다. 그런 다음, 온도 제어 챔버 (온도 = 33-35 ° C) 후 마취 회복을 위해 동물을 유지.

마찬가지로 비디오와 같이, 더 이상 문제는 수술 후 다음날에있는 동물의에서 관찰되지 않았습니다.

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Discussion

종래의 자기 경화 아크릴 수지의 응용 프로그램에 비해 도입 기술은 몇 가지 중요한 장점이 있습니다 :

1. 직접 결합 :
셀프 경화 아크릴 잠시 동안 뼛속까지 장착할 수 있지만 그것은 뼛속까지 준수하지 않습니다. 따라서, 앵커리지 나사는 (그림 2A 참조) 마운트베이스를 수정해야합니다. 반면, 광 경화 수지는 뼈가 직접 있도록 나사가 필요하지 않습니다 (그림 2B)로 결합 수 있습니다. 따라서, 장착베이스의 크기가 상당히 줄어들 수 있습니다. 당신이 그것의 "금속 프라이머"를 사용하면 또한, 광 경화 수지는 또한 몇 가지 금속을 준수합니다. 변수 자료 결합의이 기능은 우리에게 응용 프로그램의 다양한 수 있습니다.

그림 2는 기존 자경성 acrylics (2A) 및 가벼운 치료 접착제 수지를 (2B)를 사용하여 주입을 사용하여 주입을 보여줍니다. 2A에서 앵커 나사가 장착 기지 문제를 해결하는 데 사용됩니다. 2B에서 장착베이스의 크기로 인해 빛을 경화 수지의 두개골과 같은 나사을 준수한다는 사실을 상당히 줄일 수 것은 필요는 없습니다.
그림 2

2. 처리하기 쉬운 :
기존 수지의 처리 시간 창이 몇 분 내에 비교적 짧습니다. 그것은 높은 유동성을 가지고 있으며, 처음에는 다루기 쉬운 아니합니다. 그러나, 일단 화학 반응이 시작, 반응은 발열의 가열에 의해 가속 및 수지는 짧은 시간에 더 열심히 될 수 있습니다. 광 경화 수지에 대한 처리 시간 창이 상당히 넓은하고 조절합니다. 그것이 가벼운 치료 때 기본적으로, 수지는 처음부터 그 순간으로 지속적인 탄력을 유지.

3. 반응은 열을 생성하지 않습니다
자기 경화 수지의 반응을 치료하는 것은 발열의 수 있습니다. 장착베이스 두께 때,이 열이 축적과 조직을 손상될 수 있습니다. 광 경화 수지의 반응은 열을 생성하지 않고 자료 biocompatible입니다.

4. 손 LED 조명을 만들었 :
조명 장치와 같은 재료 및 특수 장비의 비용 문제가 될 수 있습니다. 그림 3에서, 우리는 많은 비용이되지 않는 손 LED 조명 장치를 만들었을 소개합니다. 이 손으로 만든 가벼운 치료 장치는 고가의 상용 단위에 대한 대체로서 사용할 수 있습니다.

그림 3A 빛의 단위의 회로 다이어그램을 보여줍니다. 그림 3B는 서로 평행하게 접착 및 화이트 보드 마커의 소유자에 삽입 세 개의 LED를 보여줍니다.


그림 3 - 회로도 손으로 만든 조명 장치와 사진 (B)을 (에서)

이 기술은 생선, 마우스, 토끼, 고양이와 원숭이 등의 실험 동물에 전극 또는 microdialysis 프로브의 만성 주입에 적용됩니다.

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Disclosures

실험 동물의 두뇌의 실험 과학 연구소, RIKEN (RIKEN - BSI) 및 연구소의 동물 윤리위원회를 승인에 대한 지침에 따라 실시되었다.

Acknowledgements

우리가이 일을하는 동안 그들의 친절 지원하고 유익한 조언을위한 RIKEN - BSI 우리의 동료 주셔서 감사합니다. 교수님 시게미 모리 교수 G 보르 Juh SZ, DRS에게 진심으로 감사드립니다. 내가 고급 연구 대학원 대학, 일본에서 대학원 과정 중에 microdialysis 방법을 공부하는 것이 좋다 Kiyoji 마쓰야마, 카탈린 AK kesi 및 RP D Dobolyi. 마지막으로, 우리는 비디오 녹화에서 지원 씨 크리스 Sarnecky 박사 Akitsugu 다카스 감사합니다.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
Bengalese finches Animal Two adult male , Body weight: 14.2 g and 14.8 g
Microdialysis probe Tool EICOM total weight of probe, guide cannula, cap nut and dental adhesive resin: 0.65 to 0.78 g.
Light-cured dental adhesive resin system Kuraray Medical Inc +Light cured composite resin (CLEARFIL AP-X). +Dual-cure dental adhesive system with the self-etching primer and bonding agent (CLEARFIL Liner Bond IIΣ).
Surgical instruments Stereotaxic frame, surgical microscope, thermal controlled surgical pad and thermal controlled recovery chamber. Plain plugger for handling composite resin. Microspatula or sharp curette to ablate periosteum and muscles.Injection syringe and needle (30G) for inducing anesthesia.Small scissors. Fine forceps for making small craniotomy.
Light-unit Rolence Enterprise Inc Ultra-Lite 500E
Microscope Konan Medical KOM300 with C-mount adaptor
3- CCD camera Tool Hitachi HV-D30

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References

  1. Adell, A., Artigas, F. In vivo Brain microdialysis: Principles and applications. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Boulton, A., Baker, G., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
  2. Kendrick, K. Microdialysis in large unrestrained animals: neuroendocrine and behavioral studies of acetylcholine, amino acid, monoamine and neuropeptide release in the sheep. Microdialysis in the Neuroscience. Robinson, T., Justice, J., Bateson, A. 7, Elsevier. Amsterdam. 327-348 (1991).
  3. Oakley, B., Schafer, R. Experimental Neurobiology: A laboratory Manual. University of Michigan Press. Ann Arbor. (1978).
  4. Okumura, T., Yamashita, Y., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese Finch I. A Biological study. Soc. Neurosci Abst. 33, (2007).
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  6. Yamashita, Y., Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese finch. Proceeding of the 2nd International Symposium on Mobiligence, 101-104 (2007).

Comments

1 Comment

  1. Very useful and detailed!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 13, 2009 - 3:13 PM

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