Author Produced

リバーシブル胆汁うっ滞ラットモデルの作成

* These authors contributed equally
Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

胆汁うっ滞は、一般に外科医と消化器内科の両方によって発生する病態です。可逆胆汁うっ滞モデルラットの作成は、ラットの小さいサイズとユニークなhepatopancreatobiliary解剖学の観点から挑戦することができます。このビデオの記事では、可逆的胆汁うっ滞モデルの作成を示しています。

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Subhas, G., Bhullar, J., Mittal, V. K., Jacobs, M. J. Creation of Reversible Cholestatic Rat Model. J. Vis. Exp. (51), e2692, doi:10.3791/2692 (2011).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

胆汁うっ滞は、一般に外科医と消化器内科の両方によって発生する病態です。胆汁うっ滞は、様々な生理的変化を引き起こし、栄養状態や手術成績に影響を与える可能性があります。肝臓や他の臓器に発生する病態生理学的変化の研究は重要である。様々な研究が胆汁うっ滞ラットモデルで行われている。

我々は、虚血再灌流障害におけるメチルプレドニゾロンの役割を見て我々の最近の研究では可逆的胆汁うっ滞モデルラットを使用。可逆胆汁うっ滞モデルを作成するための様々な手法が記載されている。可逆胆汁うっ滞モデルラットの作成は、ラットの小さいサイズとユニークなhepatopancreatobiliary解剖学の観点から挑戦することができます。このビデオの記事では、可逆的胆汁うっ滞モデルの作成を示しています。

このモデルは、このような消化管で、栄養生理学的、病理学、組織学的および免疫学的変化の変化を調べるなど、様々な研究で使用することができます。このモデルは、胆汁うっ滞および主要な肝手術に関する様々な治療的介入の効果を確認するために使用することができます。

Protocol

1。ラット胆管の解剖学

平均胆管径および長さはそれぞれ、1ミリメートルと29 mmであった。幽門と十二指腸乳頭間の平均距離は28 mmであった。胆管に開いて二つ膵管があります - 前部ダクトが左側に開き、後部ダクトは右側に開きます。これらの主要なダクトに加えて、膵臓のすべての3つの部分を排出マイナーダクトの数は、胆管に直接開きます。6

2。法

全ての動物実験は倫理的な研究のための健康ガイドラインの国立研究所との合意で実施され、機関の研究委員会および動物ケア委員会によって承認された。 8週齢雄性Sprague - Dawleyラットをこのデモのために使用されていました。ラットは、ウィルミントン、マサチューセッツ州のチャールズリバー研究所から入手し、すべては300グラムを超えるであった。ラットは、標準的な実験室の食事へのアクセスを持っていたし、標準的な実験室条件下​​で一緒に収容された。

ラットは最初はイソフルランで麻酔し、マス​​クを介してイソフルランと手術中に麻酔下に保った。 2cmの正中切開は剣状突起から開始された。筋膜が開かれた後は、肝臓の葉は、センのリトラクターで頭側で撤回された、と十二指腸は綿棒を用いて尾側に撤回した。胆管が十二指腸に入る管状構造として同定された。胆管は、緊張下に置かれ、部分的に切開し。 0.6ミリメートルと0.9mmの外径の内径を持つ無菌5センチメートル長いポリエチレンチューブを使用した。この管の一端は、熱シールし、もう一方の端を穏やかに面取りされた。面取り端は、胆管に渡されました。これは、近位および胆管の開口部から遠位の両方の8から0ナイロン縫合糸を使用して所定位置に固定されました。密封端とともに、残りのチューブが腹腔内に配置された。手術部位は、通常の生理食塩水で洗浄した。腹部は、4から0ポリグラクチンの縫合で、2層で閉鎖された。白線は連続縫合で閉鎖され、中断された皮膚縫合を仕込んだ。皮膚の接着剤は、皮膚に塗布した。ラットは適切な水分補給を確実にするには、毎日の体重のモニタリングと標準的な実験条件の下で回復させた。

胆汁うっ滞の反転動作の場合、ラットでは、前述のようにイソフルランを用いて麻酔した。腹部は、以前の切開部位を介してオープンしました。管を同定し、腹腔から取り出した。管の周囲の大網癒着は鈍と鋭的剥離を使用して解放されます。十二指腸のサイトは、十二指腸造瘻術管の快適なポジショニングのために同定された。財布の文字列の縫合、直径2-3 mmの、その後8から0ナイロンを使用して配置した。十二指腸は、この財布の文字列の縫合糸の内部にオープンしました。チューブの密閉端を適当な長さに切断されました。胆汁の自由な流れが確保されました。チューブのこの端末は、その後、十二指腸に入れ、財布の文字列の縫合糸が締まっていた。腹部は層状に灌漑し、閉鎖された。

以前の研究では、総胆管十二指腸吻合術は異なる手法を用いて行ったここで、ラットは12週間生存したとラットは、その期間中に健康であった。またこの研究では、2週間の期間、胆管の閉塞を受けたラットの総胆管十二指腸吻合術後の生化学的および組織学的変化の反転を確認した。7

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

胆汁うっ滞は、胃腸系の変化の無数につながります。研究は免疫系と栄養状態の変化を見て行われている。1-3胆汁うっ滞は、肝手術の転帰に影響を与えることができる。研究は胆汁の存在下で肝手術の予後を改善するために実行されている。医学研究の向上と4-5、さらなる研究が胆汁うっ滞に行われます。したがって、それは良い胆汁うっ滞モデルを持つことが必要です。ラットは、それが容易に入手可能であるため、実験動物として好ましい操作が簡単で、安価でhepatopancreatobiliaryシステムを研究するための頑丈なモデルです。6は、我々は今後の研究で使用することができる可逆的胆汁うっ滞モデルの作成 ​​を示すこのビデオの記事を通じ。

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

利害の衝突は宣言されません。

References

  1. Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats. Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).
  2. Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats. Hepatology. 25, 636-641 (1997).
  3. Abe, T. Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice. Hepatology. 40, 414-423 (2004).
  4. Saiki, S. Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats. Ann Surg. 230, 655-662 (1999).
  5. Subhas, G. Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver. Am J Surg. 199, 377-380 (2010).
  6. Kara, M. E. The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach. Ann Anat. 187, 105-112 (2005).
  7. Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice. J Surg Res. 23, 321-331 (1977).

Comments

1 Comment

  1. Dear Dr. Subhas,
    When is your next study coming out? I enjoyed your video, all ²0 seconds.

    Reply
    Posted by: Gokulakkrishna S.
    September 26, 2012 - 3:24 PM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics