Name: Subaraknoid Kanama bir fare modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-11-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 40 s
Description: Keşfedin farelerde endovasküler filament perforasyonu kullanarak subaraknoid kanama modeli oluşturma yöntemini. Bu standart prosedür, intrakraniyal basınç ve serebral perfüzyon izleme tekniklerini içerir ve nörolojik araştırmalar için değerli bir araçtır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Güncel araştırma Solorz-Zak Araştırma Vakfı tarafından finanse edilmektedir.

Tüm cerrahi işlemler etik incelemeye tabi ve Yukarı Bavyera hükümeti (referans numarası: 55.2-1-54-2532.3-13-13 ve -2532-136-11) tarafından onaylanmıştır. Hayvanlar yaklaşık 25 g bir vücut ağırlığına sahip erkek C57BL / 6 fareleri bulunmaktadır. 1.. Hayvan Preparasyon <ol><li> Bir odacık içine fare koyarak anestezi neden. Hayvan bilincini kaybedene kadar% 5 izofluran ile odasını yıkayın. </li><li> Periton boşluğu içine enjekte edilir, önceden karıştırılmış anestezi: fentanil (0.05 mg / kg), midazolam (5 mg / kg) ve medetomidin (0.5 mg / kg). İşlem sırasında önce ve düzenli olarak refleksleri kontrol edin. Anesteziyi muhafaza etmek üzere saat başı başlangıç ​​miktarının üçte birini yeniden enjekte. </li><li> Bir 20 G venöz kateter 11 yapılmış bir tüp ile orotracheally entübasyon. Entübasyon eğimli bir platform (30 °) üzerinde hayvan düzeltmek için, bükülmüş forseps ile dilini geri operasyon mikroskobu altında ses telleri görselleştirmek ve trakea içine tüp takıninspirasyon sırasında. </li><li> Yüzükoyun pozisyonda fare yerleştirin ve pamuklu bir parça veya bir microcapnograph ile tüpün doğru yerleşimini kontrol edin. </li><li> Respiratöre entübasyon tüpü bağlayın. 180-220 nefes / dak ve 200-250 ul bir vuruş hacmi bir frekans ile% 25 oksijen ile takviye oda havası ile fare havalandırın. </li><li> Microcapnograph için entübasyon tüpü bağlayın. Havalandırma frekansını ayarlayarak 30 mmHg son ekspirasyon pCO 2 koruyun. </li><li> Bir rektal sıcaklık probu yerleştirin ve 37 ° C iç vücut ısısını korumak için de bir ısıtma pedi üzerine hayvan. </li><li> Sağ arka pençe üzerinde halka şeklindeki Pulsoximeter sensörü uygulanır. </li><li> Bir makas ile kafatası üzerinde cildi açın. Kesi yaklaşık 0.5 cm uzunluğunda ve kulak ve gözün arasında olmalıdır. </li><li> Temporal kemik bir neşter ile sol temporal kas teşrih. </li><li> Lazer Doppler debimetre (LDF) prob tutkalsol temporal kemik. Tutkal sertleşir kadar sabit bir pozisyonda probu tutun. </li><li> Sol temporal kemik içine bir diş matkap ile yaklaşık 1.5 mm çapında bir delik delin. Isı hasarı önlemek için tuzlu su ile kemik soğutun. </li><li> Kafatası boşluğunun içine ICP probu yerleştirin. Beyin doku hasarı ve kanama önlemek için dorsal mümkün olduğunca ileri itin. </li><li> Prob doğru pozisyonda ise, düzeltmek, ve çimento ile mühür. 5 dakika için çimento kurumasını bekleyin. </li><li> Sırtüstü pozisyonda dikkatle fareyi çevirin. </li><li> Sürekli kan basıncı izlenmesi için, sol femoral arter kateterize. </li><li> Kan basıncı izleme cihazı için femoral kateter bağlayın. </li></ol> 2. SAK İndüksiyon <ol><li> Çene sternum bir makasla (2 cm) ile deriyi açın. Açık açık bağ dokusunu incelemek ve bir kenara tükürük bezleri itin. </li><li> Sol karotis arter (CCA) ortaya çıkarmak ve harekete geçirmek. KoruCCA gibi aynı bağ dokusu kılıf çalışır vagus siniri,. Kranial Taşı ve aynı tekniği kullanarak ICA ve ECA ortaya çıkarmak ve harekete. </li><li> Kadar cranially mümkün ECA Arter. </li><li> ECA&#39;nın etrafında filament için iki tane daha önceden düzenlemek ligasyonu. </li><li> Microclips ile geçici CCA ve ICA tıkamak. Bir mikroklip aplikatör ile microclips yerleştirin. Klipleri nazikçe geri çekerek doğru uygulanır emin olun. </li><li> Bir gemi makas ile ECA içine filament yerleştirilmesi için bir delik açın. </li><li> ECA içine 12 mm uzunluğa sahip bir Prolene 5-0 filament yerleştirin. </li><li> Bir danışıklı ligasyonu ile ekleme siteyi kapatın. </li><li> CCA ve ICA bir mikroklip aplikatör ile microclips çıkarın. </li><li> ICP yükselir kadar ICA içine bir forseps ile filament ilerlemek. ICP ani yükselişi kanama uyarıldığını gösterir. </li><li> Hemen filamanın çekiniz ve pr hem kapatarak ECA Arterardışık earranged ligasyonu. Bu ekleme sitenin dışında kanama önler. </li><li> Cilt yarayı dikin. </li><li> Başka bir 20 dakika boyunca hayvanın fizyolojik parametreleri izlemek. </li><li> ICP ve LDF probları kaldırmak ve cilt yara sütür. </li></ol> 3. Deney Sonu <ol><li> PBS içinde 20 ml% 4 PFA (4 ° C) ve ardından tuzlu su (oda sıcaklığı) 20 ml transcardially hayvan serpmek. </li><li> Kafatasının dışında beyin teşrih. Orta hatta ve yörünge boşlukların arasındaki kafatası kesti. Daha sonra beyinden gelen kemik soyun. </li><li> Subaraknoid aralığa kan dağılımını değerlendirmek. </li></ol> 4. Survival Cerrahi Durumunda Düşünceler (video gösterilmemiştir) <ol><li> Doğrudan anestezi indüksiyon sonrası postoperatif analjezi için Carprofen (4 mg / kg subkutan) enjekte edilir. Postoperatif gözlem süresi boyunca Carprofen (4 mg / kg deri altından), her 24 saat enjekte edilir. </li&gt; <li> Bunun yerine invaziv kan basıncı ölçümü invaziv olmayan kan basıncı izleme sistemi kullanır. </li><li> Nalokson (1.2 mg / kg), flumazenil (0.5 mg / kg) ve atipamezol (2.5 mg / kg) deri altından maddeler antagonize anestezi enjektö sonlandırılması için. </li><li> Hayvan ekstübe. </li><li> Refleksleri kazanmak sonra önceden ısıtılmış odasına hayvan koymak. 24 saat boyunca, yaklaşık 32 ° C &#39;de hayvan tutun. </li><li> Hayvanlar ameliyattan sonra ilk saatlerde spontan solunum ve genel durum düzenli olarak kontrol edilir. Beyin sapı etkilenen ise hayvanların solunum problemleri ve ötenazi olmalı. </li><li> Hayvanlar genel durumu ve vücut ağırlığı gibi nörolojik ve duyu eksikliklerinin 15 için her gün kontrol edilir. </li></ol>

<ol><li>Cahill, J., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subarachnoid+hemorrhage%3A+is+it+time+for+a+new+direction%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Subarachnoid hemorrhage: is it time for a new direction.</a> Stroke. 40, 86-87 (2009).</li>
<li>van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subarachnoid+haemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Subarachnoid haemorrhage.</a> Lancet. 369, 306-318 (2007).</li>
<li>Lin, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage-induced+cerebral+vasospasm%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">A murine model of subarachnoid hemorrhage-induced cerebral vasospasm.</a> J. Neurosci. Methods. 123, 89-97 (2003).</li>
<li>Altay, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+subarachnoid+hemorrhage+to+induce+vasospasm+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">A novel method for subarachnoid hemorrhage to induce vasospasm in mice.</a> J. Neurosci. Methods. 183, 136-140 (2009).</li>
<li>Feiler, S., Friedrich, B., Scholler, K., Thal, S. C., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardized+induction+of+subarachnoid+hemorrhage+in+mice+by+intracranial+pressure+monitoring%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Standardized induction of subarachnoid hemorrhage in mice by intracranial pressure monitoring.</a> J. Neurosci. Methods. 190, 164-170 (2010).</li>
<li>Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+blood+flow+and+cerebral+perfusion+pressure+in+a+new+noncraniotomy+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> Stroke. 26, 1086-1091 (1995).</li>
<li>Veelken, J. A., Laing, R. J., Jakubowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Sheffield+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Stroke. 26, 1279-1283 (1995).</li>
<li>Kamii, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amelioration+of+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+in+transgenic+mice+overexpressing+CuZn-superoxide+dismutase%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Amelioration of vasospasm after subarachnoid hemorrhage in transgenic mice overexpressing CuZn-superoxide dismutase.</a> Stroke. 30, 867-871 (1999).</li>
<li>Parra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+subarachnoid+hemorrhage+associated+cerebral+vasospasm%3A+methodological+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol.+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse model of subarachnoid hemorrhage associated cerebral vasospasm: methodological analysis.</a> Neurol. Res. 24, 510-516 (2002).</li>
<li>Broderick, J. P., Brott, T. G., Duldner, J. E., Tomsick, T., Leach, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Initial+and+recurrent+bleeding+are+the+major+causes+of+death+following+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Initial and recurrent bleeding are the major causes of death following subarachnoid hemorrhage.</a> Stroke. 25, 1342-1347 (1994).</li>
<li>Thal, S. C., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+intraoperative+monitoring+of+blood+pressure+and+arterial+pCO2+during+surgical+anesthesia+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Non-invasive intraoperative monitoring of blood pressure and arterial pCO2 during surgical anesthesia in mice.</a> J. Neurosci. Methods. 159, 261-267 (2007).</li>
<li>Hockel, K., Trabold, R., Scholler, K., Torok, E., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+anesthesia+on+pathophysiology+and+mortality+following+subarachnoid+hemorrhage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Transl.+Stroke+Med%22%5BJournal%5D)">Impact of anesthesia on pathophysiology and mortality following subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Exp. Transl. Stroke Med. 4, 5(2012).</li>
<li>Wang, Z., Schuler, B., Vogel, O., Arras, M., Vogel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+is+the+optimal+anesthetic+protocol+for+measurements+of+cerebral+autoregulation+in+spontaneously+breathing+mice%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">What is the optimal anesthetic protocol for measurements of cerebral autoregulation in spontaneously breathing mice?</a> Exp. Brain Res. 207, 249-258 (2010).</li>
<li>Schwartz, A. Y., Masago, A., Sehba, F. A., Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat%3A+a+refinement+of+the+endovascular+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Experimental models of subarachnoid hemorrhage in the rat: a refinement of the endovascular filament model.</a> J. Neurosci. Methods. 96, 161-167 (2000).</li>
<li>Feiler, S., Plesnila, N., Thal, S. C., Zausinger, S., Scholler, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+matrix+metalloproteinase-9+to+cerebral+edema+and+functional+outcome+following+experimental+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Cerebrovasc.+Dis%22%5BJournal%5D)">Contribution of matrix metalloproteinase-9 to cerebral edema and functional outcome following experimental subarachnoid hemorrhage.</a> Cerebrovasc. Dis. 32, 289-295 (2011).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

SAK sonrası tedavi seçenekleri kısıtlı ve çoğunlukla etkisiz vardır. Bu nedenle post-hemorajik beyin hasarının patofizyolojisi daha yeni tedavi hedefleri belirlemek ve yeni tedavi yaklaşımları geliştirmek için anlaşılması gerekir. Standardize ve genetiği değiştirilmiş hayvanlar, yani farelerde, iyi tekrarlanabilir hayvan modelleri gibi soruşturma için çok önemlidir. Yakından insanlarda patofizyolojiye benzer olarak cwp modeli SAK için yaygın olarak kullanılan bir model haline gelmiştir, ancak farelerde kullanım...

SAK hastalar için en yararlı sonuç ile inme alt tipi olduğu: Hastaların% 40 kanama 1 sonra bir ay içinde ölür ve hayatta kalanlar nadiren klinik olarak olumlu bir sonuç var. Spontan UAHS (% 80) büyük çoğunluğu, çoğunlukla arter, baziler arter ve orta serebral arter (MCA) 2 iletişim anterior ve posterior boyunca yer intrakranial anevrizmaların yırtılması kaynaklanır. Bu anevrizma hayvanlarda Modele zordur ve bu nedenle SAK hayvan modelleri ya da subaraknoid boşluk / beyin veya ventriküllere subaraknoid kabın endovasküler delme ile kan enjeksiyonu ile gerçekleştirilir. Kan hacmi doğrudan 3 kontrol edilebilir gibi cisterna magna içine otolog kan enjeksiyonu yapmak kolay ve tekrarlanabilir. Ne yazık ki SAK fizyopatolojinin bazı yönleri, örneğindamar yaralanması, bu prosedür ile model olamaz. SAK indüksiyonu için başka bir teknik yaklaşım, bir intrasisternal ven 4 açılmasıdır. Ancak, MCA şube intraluminal CWP modelleri insanlarda patofizyolojisi en yakın 5 prosedür olarak görünmektedir. Yöntem, Veelken ve arkadaşları 6,7 ile Bederson ve arkadaşları tarafından ve aynı zamanda geliştirilmiş ve ilk olarak sıçanlarda tarif edilmiştir. Daha sonra intraluminal perforasyon modeli farelere 8,9 uyarlanmıştır. Bir filament dış karotid arter (ECA) içine sokulur ve iç karotid arter (ICA) ile kafa tabanına ilerletilir. MCA dallanma noktasında filaman gemi deler ve kafatası tabanında subaraknoid boşluk içine bir kanama neden olur. Kan daha sonra çatlamalar ve kan damarları boyunca kalan subaraknoid alana dağıtır. Kanama perforasyon yerinde pıhtı oluşumu durdu, ama rebleedings, WH edilirich hastalarda 10, oluşabilir genellikle zararlıdır. Buna göre, endovasküler lif modeli son yıllarda yaygın olarak kullanılan SAK modeli oldu. Filaman perforasyon modelinde en sık bahsedilen dezavantajı kanama hacmi doğrudan kontrol edilemeyen ve bu nedenle de değişken olabilir olmasıdır. Bu değişkenlik anlamlı hayvan fizyolojisi ve post-hemorajik ICP sıkı kontrolü ile azaltılabilir. Fareler, genetik olarak modifiye edilmiş suşların çok sayıda mevcut olan büyük avantaj vardır. Ancak, küçük boyutları için cerrahi işlemler büyük türleri, örneğin, sıçan ya da tavşan daha karmaşık olma eğilimindedir. Bu nedenle farelere sıçanlar için geliştirilen tekniklerin küçültülür genellikle fareler hemoglobin saturasyonu ve kalp hızı izleme için çok sınırlı bir vücut ağırlığı ve kan hacmi noninvaziv kan basıncı ve kan gazı analizi için teknikleri yanı sıra gibi örneğin istenen sonuçlara yol açmazmümkün uygulanmalıdır. Buna uygun olarak, mevcut yayının amacı farelerde SAK için filaman delme modeli tanımlamak için ve bu model bir standart ve yüksek ölçüde tekrarlanabilir biçimde yapılabilir ne kadar göstermektir.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Equipment</strong</td></tr><tr><td>>operation mikroskobu</td><td>Leica</td><td>KL2500</td><td></td></tr><tr><td>izofluran buharlaştırıcı</td><td>Harvard</td><td>Instruments Sürekli Akışlı Buharlaştırıcı</td><td></td></tr><tr><td>solunum cihazı</td><td>Hugo Sachs</td><td>Minivent 845</td><td></td></tr><tr><td>mikrokapnograf</td><td>Hugo Sachs</td><td>Type 340</td><td></td></tr><tr><td>sıcaklık kontrol cihazı</td><td>FHC</td><td>DC Sıcaklık Kontrol Cihazı</td><td></td></tr><tr><td>diş matkabı</td><td>Paggen</td><td>Labset- N</td><td></td></tr><tr><td>ICP monitörü</td><td>Codman</td><td>ICP monitörü</td><td></td></tr><tr><td>kan basıncı monitörü</td><td>AD Instruments</td><td>Bridge Amp FE221</td><td></td></tr><tr><td>şırınga pompası</td><td>Dünya Hassas Aletler</td><td>SP101IZ</td><td></td></tr><tr><td>pulsoksimetre</td><td>Kent Scientific</td><td>MouseSTAT</td><td></td></tr><tr><td>LDF</td><td>Perimed</td><td>Periflux 5000</td><td></td></tr><tr><td>analog veri monitörü</td><td>AD Instruments</td><td>Power Lab 16/35<</td>td colspan="4"><<td></td></tr><tr>strong>Malzeme</></td></tr> <tr><td>ICP prob fiksasyonu için çimento LDF prob fiksasyonu için</td><td></td> Speiko Karboksilat çimento <td>tutkalı Bob Smith Industries Siyanoakrilat yapıştırıcı (Maxi Cure ve Insta Set)</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>venöz kateter</td><td>Johnson Johnson Jelco</td><td>kanatlı i.v. kateter; Femoral kateter için REF 4076</td><td>modifiye entübasyon tüpü</td></tr><tr><td>tüpü</td><td>borusu Smiths Medical</td><td>İnce Delikli Polietilen Boru; İç çap 0,28 mm, Dış çap 0,61 mm; REF 800/100/100</td> damar perforasyonu için <td>30 cm uzunluğa kadar kesilmiş</td></tr><tr><td>filament</td><td>Ethicon</td><td>Prolene 5-0</td><td>12 mm uzunluğa kadar kesilmiş</td></tr><tr><td>cerrahi ekipman</td><td>İnce Bilimsel Aletler</td><td>forseps medikal #5, damar makası 8 cm, mikroklips 4 mm çene</td><td></td></tr></tbody></table>

subaraknoid kanama bir fare modeli

A Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

Bu Video yayında subaraknoid kanama (SAK), standart bir fare modeli sunulmuştur. Kanama Willis perforasyon (KİP) endovasküler Çemberi tarafından uyarılan ve intrakranial basınç (ICP) izleme ile kanıtlanmıştır. Böylece arteriyel dolaşımı çevreleyen subaraknoid boşluk ve serebellar çatlaklar homojen bir kan dağılımı elde edilir. Vücut ısısı, sistemik kan basıncı, kalp hızı ve hemoglobin doygunluk: Hayvan Fizyolojisi, entübasyon, mekanik ventilasyon, ve çeşitli fizyolojik ve kardiyovasküler parametreler sürekli on-line izleme tarafından yapılmaktadır. Bu şekilde serebral perfüzyon basıncı sıkı bir şekilde ekstravaze kan daha az değişken bir hacim içinde elde izlenebilir. Bu farelerde endovasküler filament perforasyon daha iyi standardizasyonu sağlar ve tüm model yüksek tekrarlanabilir yapar. Bu nedenle, vahşi tip ve genetik ve farmakolojik çalışmaları için patofizyolojik hazırly değişmiş fareler.

Ölüm oranı Cerrahi teknik hakim sonra prosedür ameliyat sırasında hiçbir ölüm temin etmez. Aynı zamanda kanama hemen hemen bütün hayvanlarda elde edilebilir. Postoperatif mortalite hayvanların çoğu ameliyattan sonra (Şekil 5) 1. gün ölüyor ile% 30-40 olduğunu. ICP SAK sonrası değerleri Kanama önce ICP yaklaşık 4 mmHg. 120 mmHg ICP keskin bir artış sonuçlar kanama. ICP değerler daha sonra, 5 dakika ile yaklaşık 30 mmHg <stro...

Willis perforasyon intralüminal Circle subaraknoid kanama standartlaştırılmış bir fare modeli tarif edilmektedir. Gemi perforasyon ve subaraknoid kanama intrakranial basınç izleme tarafından izlenir. Buna ek olarak, çeşitli çok önemli parametreler kaydedilir ve fizyolojik koşulları sağlamak için kontrol edilir.

Subaraknoid Kanama bir fare modeli

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid  hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of  Willis ...

Bu prosedürün genel amacı, farelerde standart bir subaraknoid kanamayı indüklemektir. Bu, ameliyat sırasında fizyolojik durumları denetlemek için önce anestezi uygulanmış hayvanın izleme cihazlarına bağlanmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adım, kanama indüksiyonu için anahtar parametreler olarak serebral perfüzyon ve intrakraniyal basınç ölçümü için sensörler uygulamaktır.Daha sonra, subaraknoid kanama endovasküler filament perforasyonu ile indüklenir. Son adım, ekstravaze kan dağılımını görselleştirmek için hayvanı perfüze etmek ve beyni izole etmektir. Bu tekniği Rex yerine farelerde uygulamanın en büyük avantajı, transgenik hayvanlardan yararlanabilmemizdir.Genel olarak, bu yönteme yeni olan bireyler mücadele edecektir çünkü farelerde entübasyon, multimodal fizyoloji izleme ve damar hazırlığının gerçekleştirilmesi oldukça zordur. Cerrahi adımların öğrenilmesi zor olduğu için bu yöntemin görsel gösterimi çok önemlidir. Prosedürü göstermek, laboratuvarımdan bir doktora öğrencisi olan Catherine Shula olacak.Bu SAH modelini gerçekleştirme konusunda iki yıldan fazla deneyime sahiptir. Başlamak için, mikroskop altında çalışan eğimli bir platform üzerinde anestezi uygulanmış bir hayvan, ses tellerini bulmak için dilini bükülmüş forseps ile geri çeker. Bir kez 20 gauge venöz kateterden yapılmış bir tüp ile inspirasyon sırasında entübe görüntülendi.Ardından, fareyi yüzüstü konuma getirin ve doğru yerleştirilmişse bir parça pamuk veya mikro kapnograf ile tüpün doğru yerleştirilip yerleştirilmediğini kontrol edin. Entübasyon tüpünü solunum cihazına bağlayın. Fareyi% 25 oksijen ile takviye edilmiş oda havası ile havalandırın.Entübasyon tüpünü mikro kapnografa bağlayın. Havalandırma frekansını ayarlayarak son ekspiratuar kısmi karbondioksit basıncını 30 milimetre Cıva'da tutun. Bir rektal sıcaklık probu yerleştirdikten sonra, vücut ısısını korumak için hayvanı bir ısıtma yastığına yerleştirin 37 santigrat derecede, sağ arka pençeye dairesel bir nabız oksimetresi sensörü yerleştirin.Ardından, gözden kulağa bir kesi yapın. Cildi geri çekin ve sol temporal kası temporal kemikten ayırın. Maruz kaldıktan sonra, sol temporal kemiğe bir lazer doppler akış ölçer Probu yapıştırın.Yapıştırıcı sertleşene kadar probu sabit bir konumda tutun. Delme sırasında sol temporal kemiğe yaklaşık 1,5 milimetre çapında bir delik açın. Kemiği tuzlu su ile soğutun.Isı hasarını önlemek için, kafa içi basınç probunu kafa boşluğuna yerleştirin ve doku hasarını ve kanamayı önlemek için mümkün olduğunca dorsal olarak ileri doğru itin. Prob doğru bir şekilde yerleştirildikten sonra, çimento ile sabitleyin ve kapatın ve beş dakika kurumasını bekleyin. Çimento kuruduğunda, fareyi dikkatlice sırtüstü pozisyona çevirin.Standart teknikleri kullanarak, sürekli kan basıncı izlemesi için sol femoral arteri kateterize edin. Yerleştirildikten sonra, femoral kateteri kan basıncı izleme cihazına bağlayın. İlk olarak, cildi sternumdan çeneye köreltmek için makasla açın.Bağ dokusunu inceleyin ve sol ortak karotis arteri ortaya çıkarmak için tükürük bezlerini bir kenara itin. Aynı bağ dokusu kılıfında bulunan vagal sinire zarar vermemeye dikkat ederek CCA'yı çevre dokudan izole edin. Daha sonra, iç karotis arteri ve dış karotis arteri dikkatlice açığa çıkarın ve izole edin.İzole edildikten sonra, ECA'yı mümkün olduğu kadar bağlayın, daha sonra bir aplikatör oklüdü, CCA ve ICA'yı geçici olarak mikro klipslerle kullanmak üzere ECA çevresinde iki ek ligasyon önceden düzenleyin. Doğru uygulandıklarından emin olmak için klipsleri yavaşça geri çekin. Kanama indüksiyonu için 12 milimetre uzunluğunda bir prolin beş sıfır filament kullanıyoruz.Kap makası kullanarak ECA'ya küçük bir delik açın ve filamenti yerleştirin. Filament yerine oturduktan sonra, önceden düzenlenmiş ligasyonlardan birini kullanarak yerleştirme bölgesini kapatın. Ardından, kanamayı başlatmak için mikro klipsleri mikro klips aplikatörüyle çıkarın.ICP yükselene kadar filamenti ICA'ya ilerletin. ICP'nin ani bir yükselişi kanama indüksiyonunu gösterir, filamenti hemen geri çekin ve önceden düzenlenmiş her iki ligasyonu art arda kapatarak ECA'yı bağlayın. Bu, yerleştirme bölgesinden kanamayı önler.Deri yarasını dikin ve hayvanın fizyolojik parametrelerini 20 dakika daha izleyin. Bu sürenin sonunda, trans kardiyal perfüzyondan sonra hem ICP hem de LDF problarını çıkarın. Beyni çıkarın ve kanamadan önce subaraknoid boşluktaki kan dağılımını değerlendirin, ICP yaklaşık dört milimetredir.Cıva kanaması, ICP'nin 120 milimetreye kadar keskin bir şekilde artmasına neden olur. Cıva ICP değerleri daha sonra yaklaşık 30 milimetre cıvada beş dakika içinde stabilize olur. Ek olarak, kanamadan hemen sonra kan basıncı yükselir.Kanama indüksiyonundan sonra indüksiyon temsili lazer doppler akış ölçer değerleri, serebral perfüzyon reperfüzyonunda hakaretten sonraki beş dakika içinde bireysel olarak farklı bir seviyeye dramatik bir azalma olduğunu göstermektedir. Bu örnekte, beyni besleyen arterler ve serebellar çatlaklar boyunca kan dağılımı gözlenir. Kanamadan üç saat sonra, kırmızı çizgiler beyni besleyen arterler boyunca kan dağılımını gösterir.Kanamanın ipsilateral tarafı, görülen kontralateral hemisferden daha fazla kan ile kaplıydı. İşte 49 erkek, C 57 BL altı farede SAH'ı takip eden sağkalım eğrisi. Bu prosedürü denerken, geliştikten sonra tekrarlanabilir miktarda kanamayı güvence altına almak için fizyolojik koşulları izlemek önemlidir.Bu teknik, subretinal kanama alanındaki araştırmacıların, hakaretten sonra erken dönemde serebral iskeminin yol mekanizmalarını keşfetmelerinin yolunu açtı.

a-murine-model-of-subarachnoid-hemorrhage

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Anevrizmal subaraknoid kanama (SAK) zaman bir anevrizma rüptürü subaraknoid boşluğa oluşur kanıyor. Subaraknoid kanama birkaç yıl önce olduğu gibi aynı olmaya devam ediyor sonra bu olay gelen morbidite ve mortalite gelişmiş tedavi yaklaşımları nedeniyle bir düşüş, vazospazm riski olmuştur da. Serebral vazospazm başlatan olayları tanımlamak için kapsamlı ve tekrarlanabilir hayvan modeli kurmanın önemi Barry tarafından 1979 yılında deneysel vazospazm modelinde sıçanların ilk kullanımından bu yana...

Deneysel Subaraknoid Kanama Sonrası Gecikmeli Serebral Vazospazm değerlendirin A Düşük Mortalite Rat Modeli

Video, bir fare modelinde endovasküler perforasyon yoluyla subaraknoid kanamanın indüksiyonunu göstermektedir. Ortak karotis artere ve bifurkasyonuna erişmek için anestezi uygulanmış farenin boyun bölgesinde bir kesi yapılır. İntrakraniyal arter dalını delmek için arterlerden bir filament sokulur ve subaraknoid kanamaya neden olur.

Endovasküler Perforasyon Yoluyla Bir Fare Modelinde Subaraknoid Kanama İndüksiyonu

Bu video, bir subaraknoid kanama sıçan modeli oluşturma prosedürünü göstermektedir. Anestezi uygulanmış bir sıçan, intrakraniyal basıncı ve serebral kan akışını ölçmek için problarla implante edilir. Hedef bölge belirlenir ve iğne ön kiazmatik bir pozisyonda yerleştirilir. Otolog kan daha sonra subaraknoid boşluğa enjekte edilir, kafa içi basıncı arttırır ve serebral kan akışını azaltır ve model oluşturulur.

Otolog Kan Enjeksiyonu ile İndüklenen Subaraknoid Kanama Sıçan Modelinin Kurulması

Tavşandaki deneysel intrakraniyal basınç kontrollü kan şantı subaraknoid kanama (SAK) modeli, standart prosedürleri birleştirir - subklavyen arter kanülasyonu ve transkutanöz sisterna magna ponksiyonu, SAK sonrası insan patofizyolojik durumlarının yakından taklit edilmesini sağlar. Adım adım talimatlar sunuyoruz ve başarılı deneysel SAK oluşturma için temel cerrahi noktaları tartışıyoruz.

Subaraknoid Kanama Akut ve Geç sekeli Çalışmaları Tavşan Kan şant Modeli: Teknik Yönleri

Bu makalenin amacı mikro bilgisayarlı tomografi ve serebral vasospasm ölçmek için kullanılan tüm gemi parçaları hacimleri belirlenmesi sonra farelerde serebrovasküler ağaç 3 boyutlu rekonstrüksiyon sağlayan bir yöntem sunmaktır fare modelleri subaraknoid kanama.

Subaraknoid kanama, bir fare modeli serebral Vasospasm miktar hacimsel bir yöntemi

Bu protokolde, otolog tam kandan cisterna magna'ya çift enjeksiyon la standart laştırılmış subaraknoid kanama (SAH) fare modeli tanımlanmıştır. Çift enjeksiyon prosedürünün yüksek standardizasyon derecesi mortalite ile ilgili göreceli güvenlik ile SAH bir orta-akut modeli temsil eder.

Subaraknoid Kanama Modeli olarak Cisterna Magna içine Kan Çift Doğrudan Enjeksiyon

Subaraknoid kanama insanda yüksek mortalite ve morbidite yükü taşımaya devam etmektedir. Durum ve patofizyolojisi hakkında daha fazla araştırmayı kolaylaştırmak için, kiazmatik öncesi, tek enjeksiyon modeli sunulmaktadır.

Bir sıçan modelinde deneysel subaraknoid kanamayı indüklemek için kiazmatik öncesi, tek otolog kan enjeksiyonu

Burada, doğru kanama bölgesini sağlamak ve diğer ilgili intrakraniyal patolojileri dışlamak için operasyondan 24 saat sonra manyetik rezonans görüntüleme (MRG) ile kombine edilen endovasküler filament perforasyonu ile indüklenen standartlaştırılmış bir SAH fare modeli sunulmaktadır.

Manyetik Rezonans Görüntüleme (MRG) ile Kombine Subaraknoid Kanama için Endovasküler Perforasyon Modeli

Fizyolojik ve patofizyolojik ortamlarda terapötik bileşiklerini değerlendirmek için de kullanılabilir deri yara iyileşmesinin Bir murin modeli.

Yara Şifa murin Modeli

Anevrizma endogreft dışlama sonra histolojik ve biyokimyasal değişiklikler hala belirsiz. Bir fare anevrizma üzerinde endogreft implantasyon yeni bir model tarif. Kalıcı dolaşan kan akışı arayüzü ve yeni endovasküler biyomalzemeler değerlendirme olan ve olmayan trombüs analizi sayesinde, bu model daha iyi endovasküler anevrizma dışlama patobiyolojisi anlamanıza yardımcı olacaktır.

Endovasküler Aort Anevrizma Onarımı Yeni Bir murin Modeli

Keşfedin farelerde endovasküler filament perforasyonu kullanarak subaraknoid kanama modeli oluşturma yöntemini. Bu standart prosedür, intrakraniyal basınç ve serebral perfüzyon izleme tekniklerini içerir ve nörolojik araştırmalar için değerli bir araçtır.

Subaraknoid Kanama bir fare modeli

Daha fazla video keşfet