Pulpa Değerlendirilmesi için Doğrudan Selüloz-kapatma Modelinin Geliştirilmesi Yara İyileşmesi ve Farelerde Onarım dentin oluşumu

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Bu pulpa yara iyileşmesi ve in vivo onarım dentin oluşumunun değerlendirilmesi için farenin dişler üzerinde kapatma doğrudan kağıt hamuru yapmayı bir adım adım bir yöntem açıklanmaktadır.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Song, M., Kim, S., Kim, T., Park, S., Shin, K. H., Kang, M., Park, N. H., Kim, R. Development of a Direct Pulp-capping Model for the Evaluation of Pulpal Wound Healing and Reparative Dentin Formation in Mice. J. Vis. Exp. (119), e54973, doi:10.3791/54973 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Protocol

Fareleri Jackson Laboratory'den satın alındı ​​ve Deney Hayvanları UCLA Tıp Bölümü (DLAM) bir patojen içermeyen vivaryum tutuldu. Deneyler Başbakan'ın Hayvancılık Araştırma Komitesi (ARC # 2016-037) onaylanmış kurumsal kurallarına göre yapılmıştır.

1. Fare Anesthetization

  1. Sekiz haftalık dişi C57 / BL6 fareler kullanın (n = 3).
  2. ketamin (fare ağırlığı 80-120 mg / kg) / ksilazin (5 mg / fare ağırlığındaki her bir kg) çözeltileri kullanılarak fareler anestezi ve 10 ml / kg'lık bir dozda intraperitonal (ip) verilmesi.
  3. ketamin hazırlanması (80-120 mg / kg) / ksilazin (5 mg / kg) çözeltiler ve 10 mL / kg bir dozda intraperitonal (ip) olarak onları yönetmek.
  4. fareler tamamen ayak tutam yaparak anestezi onaylayın.

2. Selüloz-kapatma İşlemi

  1. Farenin ağzına ağız tutucu yerleştirin.
  2. O böyle masada ağız yuvasını Güvenlireklam yukarı bakacak.
  3. İlk maksiller molar tamamen görünür böylece ağız üstüne mikroskobu (10X) yerleştirin.
  4. hamuru şeffaf dentin aracılığıyla görünür oluncaya kadar 200.000 rpm'de yüksek hızda piyasemene ¼ yuvarlak bur kullanarak, ortada diş minesi parçası kaldırın. bur hamuru maruz bırakmayın.
  5. Bir 15. endodontik K-dosya (150 mikron çapında) kullanılarak, dentin ile delmek ve hamuru maruz kalmaktadır.
    NOT: dentin enkaz hamuru içine itilmiş almaz böylece Özel bakım alınmalıdır. Bu üç aylık K-dosyayı dönen ve sonra dışarı K-dosya çekerek önlenebilir.
  6. Üreticinin talimatlarına uygun olarak, steril H2O ile MTA karıştırın. Sunun ve kaşif ucuyla maruz hamuru üzerine MTA yerleştirin. nazik dokunarak maruz hamuru içine MTA paketi kağıt noktasının (ince) arka tarafını kullanın. Kağıt noktasının kalın tarafı düz ve bu nedenle izin verirmaruz hamuru içine MTA düzgün yoğunlaşması için.
  7. Sadece diş kapsayan% 35'lik fosforik asit pürüzlendirici koyarak 15 saniye boyunca diş etch. o dişeti dokuları tahriş edebilir gibi etchant yerleştirme sınırlamak için özel özen gösterin.
    NOT: dağlayıcı bir şırınga gelir ve diş yapıştırıcılar diş üzerine Mikromekanik bağ aracılık etmek akabilmesi için diş yüzeylerinin pürüzlendirin için kullanılır. viskoz olduğundan, kendi kendine yeten bir diş üzerine doğrudan küçük miktarlarda uygulanması ile yapılabilir.
  8. pürüzlendirici kaldırmak için negatif basınçlı emiş kullanın. Hafifçe etchant ve artıklar kaldırmak için H 2 O ile ıslatılır pamuk bir pelet kullanın. dağlayıcı tamamen diş kaldırılana kadar bu adımı tekrarlayın.
  9. bir sıkıştırılmış hava silgi kullanarak, yavaşça diş kurutun.
  10. Kağıt noktasının ters kullanarak diş yapıştırıcıları uygulayın.
  11. 3 saniye basınçlı hava kullanılarak yapışkan tabaka ince olun.
  12. Cure kür ışık birimini kullanarak 20 saniye boyunca diş yapıştırıcılar.
  13. MTA ile kapaklandı diş üzerine küçük miktarlarda akışkan kompozit yerleştirin. diş oluklarına içine kompozit akmaya explorer ucu kullanın.
  14. Bunu polimerize bir ışıkla sertleşen birimini kullanarak 30 saniye boyunca kompozit Cure. Kompozit tam kürünü ve sert explorer kullanarak doğrulayın.

3. Ameliyat sonrası bakım

  1. Hemen kağıt hamuru kapatma işleminden sonra karprofen (5 mg / kg) deri altından (sc) uygulayınız.
  2. Onlar uyanmadan sıcak hayvanları tutmak için düşük güçte bir ısıtma pedi üzerinde fareler yerleştirin.
  3. konut vivari fareler dönün.

4. Doku Alımı

  1. 5 sonra - 6 hafta, izofluran ile tam bir anestezi koşulları altında servikal dislokasyon ile farelerin euthanize.
  2. Dikkatle kafatasının tabanından maksilla çıkarın ve 50 ml tüp içine koydu. entir Fixgece boyunca 4 ° C 'de, kağıt hamuru başlıklı diş ve PBS içinde% 4 paraformaldehid, pH 7.4 içinde karşı sınırlanmamış diş hem de içerir, ve daha sonra% 70'lik bir etanol çözeltisi içinde saklayın e maksilla.
    NOT: Paraformaldehyde toksik ve kanserojen olduğunu. standart operasyon prosedürleri (SOP) 'de belirtildiği gibi doğru kullanımı paraformaldehit izlenmelidir.
  3. uCT tarama kullanarak fare maxillae tarayın. % 70 etanol ile ıslatılmış gazlı bez ile örnekleri sarın ve 15 ml hücre kültürü tüp koyun, tarama sırasında maxillae güvenceye almak için.

5. uCT Tarama

  1. uCT tarama için numune hazırlayın. Kısaca,% 70 etanol ile ıslatılmış gazlı bez ile örnekleri sarın ve bir jenerik 15 ml hücre kültürü konik tüp sabitleyin. üreticinin talimatlarında belirtildiği gibi, uCT tarama sahneye tüp monte edin.
  2. 145 uA bir akıma, 55 kVp bir gerilim ve 2 bir pozlama süresi X-ışını kaynağı Set00 ms.
  3. 20 mikron çözünürlükte ve 0.5 mm Al filtre ile uCT tarayıcı ile görüntü elde etme gerçekleştirin.
  4. Görüntüyü yeniden ve 11 görselleştirmek.
  5. uCT Tarama işlemi tamamlandıktan sonra, 2 hafta içinde% 5 EDTA ve PBS içinde% 4 sakroz (pH 7.4) dekalsifikasyon başlar.

6. Doku İşleme ve Boyama

  1. parafin dekalsifiye dokuları gömün. gömmeden önce, hemen birinci molar için ön bir sagital kesim yaparak maksilla kırpın. gömme birlikte, birinci molar uzunlamasına kesit kesme yüzeyi olacak şekilde, aşağı doğru, bu yüzey yerleştirin.
  2. mikrotom kullanılarak, 5 mikron kalınlığında slaytlar hazırlamak. kağıt hamuru sınırı alanlar genellikle bir dönüm noktası olarak kullanılabilir distopalatal (DP) kök ile örtüşmektedir. Işık mikroskobu altında histoloji incelenmesi ve uCT görüntüleri karşılaştırarak ilgi belirli bir bölgede tespit.
  3. H & E boyama, depara içinffinize ve ksilen (2x) ve seri olarak seyreltilmiş, etanol (% 100 EtOH 2x,% 95 EtOH 2x,% 70 EtOH 1x) ile slaytlar rehidrate.
  4. akan musluk suyu ile slaytlar durulayın.
  5. 2.5 dakika boyunca Hematoksilen çözümü ile Leke ve musluk suyu ile durulayın.
  6. 1 dakika boyunca% 95 etanol içinde slaytlar batırın.
  7. 1 dakika süreyle Eosin çözeltisi ile Leke musluk suyu ile yıkayın.
  8. seri olarak seyreltilmiş, etanol (% 70 EtOH 1x,% 95 EtOH 2x,% 100 EtOH 3x) ve ksilen (3x) ile kurutmak.
  9. montaj çözümü ile slaytlar monte edin.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Burada, fareler dişlerde pulpa kaplama gerçekleştirmek için adım adım uygulandığını göstermiştir. Farelerde kapatma hamuru önemli yönlerinden biri uygun cihazı sahip olmaktır. Bu bağlamda, 10X güç büyütme ile mikroskop olan esas (Şekil 1A) 'dir. Diş Sınıf-I-benzeri hazırlık oluşturmak için, biz 200.000 rpm (Şekil 1B) bir elektrik yüksek hızda piyasemene bir ¼ tur çapak kullanılır. Seçenek olarak ise, basınçlı hava kullanımı da dahil olmak üzere başka herhangi bir motor, bir diş hazırlamak için de kullanılabilir.

Şekil 2A-2E olarak, pulpa kaplaması gerçekleştirmek için temsili adımlar gösterilmektedir. Sınıf-I-benzeri terkibin, (Şekil 2b) uygulandı. Bir su püskürtme işlemi sırasında fareler boğmak olduğundan, kullanımı tavsiye edilmez. Bu nedenle, yumuşak ve intermi ile dişin hazırlanması için esastırttent aşırı ısınmayı önlemek için okşar. basınçlı hava kullanımı, aynı zamanda, soğutma etkisini sağlamak için önerilir. Bu onarıcı dentin oluşumu (Şekil 2C) veri yorumlama engel olabilecek bir endodontik dosya ile hamuru teşhir ederken, kağıt hamuru içine dentin enkaz itmek için değil dikkat çekmek. Bu basınçlı hava kullanılarak önlenebilir. Benzer şekilde, MTA hamuru içine çok basmadan maruz hamuru konulmalıdır. MTA yerleştirme nazik dokunarak hareketleri (Şekil 2B) ile kağıt noktasının ters kullanılarak elde edilebilir. MTA yerleştirilmesini takiben, diş diş üzerine kompozit bağlanmasına müdahale edebilir oluklar içinde kalan MTA kaldırmak için H 2 O batırılmış pamuk pelet kullanılarak temizlenmelidir. Kompozit restorasyon geleneksel yöntemler (akışkan kompozitler, diş yüzeylerinin oyulması yapıştırıcı ile doldurma ve yapıştırma ve yerleştirilmesi ve sertleştirme de dahil olmak üzere, kullanılanŞekil 2E).

Altı hafta kuafaj sonra, fareler hasat edildi ve üstten görünüm kompozit (Şekil 3A) hala bozulmamış olduğunu doğrulamak için fotoğraflandı. uCT tarama onarıcı dentin hamuru meydana geldiğini göstermektedir, kağıt hamuru başlıklı grup (Şekil 3B) pulpa alan önemli durgunluk göstermiştir. Dekalsifiye doku numuneleri daha histolojik in vivo onarım dentin oluşumunu incelemek için H & E boyama tabi tutuldu. Kontrol grubunda, odontoblastik tabakalar (OB) dentin (- 4C Şekil 4A) kenarlarında belirgin belirgindi. Buna karşılık, kağıt hamuru başlık grubu pulpa alan (- 4F Şekil 4D) oluşan onarıcı dentin (RD) önemli miktarda vardı. İlginçtir ki, daha yakından inceleme onarıcı dentin (RD) dentinin tipik bir özelliği sergilenen ortaya (örneğin, s dentin tübülleri, kırmızı ok) temsil eden tritiye hatları, yanı sıra bu kemiğin (örn osteositlerde temsil tuzağa osteoblastlar, siyah ok başları). Bu dentin matriks protein 1 (DMP1ve), odontojenik farklılaşma 12 için bir marker için boyanmış zaman (Şekil 5A ve 5B) kapatılmamış dişin karşılaştırıldığında, biz hamuru başlıklı diş hamuru DMP1ve ekspresyonunda önemli bir artış bulunan , onarıcı dentin hamuru içinde oluştuğunu göstermektedir.

Şekil 1
Şekil 1: Küspe-kapatma Prosedür için donatım Kur. (A) fare dişi görselleştirilmesi için bir mikroskop (10X). (B) yüksek hızda el aleti ve hamuru ortaya çıkarmak için bir Sınıf I preparatın hazırlanması için elektrik motoru motoru.= "_ Blank"> bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

şekil 2
Şekil 2: Kapatma İşlemi Temsilcisi Adımlar. (A) fare maksiller birinci molar hazırlıksız diş. (B) çeyrek yuvarlak bur kullanarak ilk emaye kaldırma. Endodontik dosyasını kullanarak (C) Hamuru maruz kalma. Maruz hamuru (D) MTA yerleştirme. (E) diş üzerinde Kompozit restorasyon yerleştirme. Bar 500 mikron temsil eder. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 3,
Şekil 3: Klinik Sunum ve uCT TaramalıFarelerde Selüloz-kapatıldı ve Sınırlandırılmamış diş g. (A) hamuru kaplı diş (solda) ve kapağını açıp dişin (sağ) fare maxillae oklüzal görünümü. (B) maxillae enine kesit uCT ve görüntüler. Bar 500 mikron temsil eder. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 4,
Şekil 4: In Vivo Onarım Dentin Formasyonu histolojik kanıtı. 100X, 200X ve 400X'lik bir fare kapağını açıp maksiller birinci molar (AC) H & E boyama. 100X, 200X ve 400X'lik bir fare hamuru kaplı maksiller birinci molar (DE) H & E boyama. RD = onarıcı dentinin;, bar, 100 mikron (OB = odontoblast katmanları temsil siyah ok uçları =osteositlerde; kırmızı ok = dentin tübülleri). Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 5,
Şekil 5: DMP1ve İmmünohistokimyasal Boyama. 400X'lik bir fare kapağını açıp maksiller birinci molar (A) DMP1ve boyama. 400X'lik bir fare hamuru kaplı maksiller birinci molar (B) DMP1ve boyama. Bar 100 mikron temsil eder. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Şu anda, dental pulpa kök hücrelerin (DPSCs) 13 odontojenik farklılaşma dental materyaller, iskeleler, ya da büyüme faktörlerinin in vivo etkilerini doğrulamak için birkaç farklı deneysel model vardır. Bu modeller gibi böbrek kapsül gibi bir organ DPSCs ektopik otolog transplantasyon, ya da iskeleler 14,15 ile immün sistemi baskılanmış farelere DPSCs deri altına nakli sayılabilir. Bununla birlikte, bu yöntemler DPSCs üzerindeki odontojenik etkisi ortotopik hamur ortamında gerçekleştirilmez olması ile sınırlıdır. Diğer yandan, bir diş üzerinde hamur veya hamur kapaklama prosedürlerine ortotopik transplantasyon büyük hayvanlar 16,17 kullanılmaktadır. bu modeller ortotopik ortamda odontojenik potansiyelinin değerlendirilmesinde değerli olmasına rağmen, bu modellerin kullanılması hamuru yara iyileşmesi ve onarıcı dentin oluşumu sınırlı mekanik anlayışlar sağlayarak, doğada büyük ölçüde gözlemsel olduğunu. Bu yazıda farelerde hamuru kuafajı gerçekleştirmek için detaylı bir yöntem mevcut. Bu adım adım prosedürü tarama uCT ile analiz, kağıt hamuru kapatma malzemeleri yerleştirerek maxillae hasat, Sınıf-I-benzeri boşluğu hazırlanması, fareler anestezi ve onarıcı dentin oluşumu için doku örnekleri değerlendirirken içerir. Bizim hamuru-kapatma fare modeli araştırma toplumda yaygın olarak bulunmaktadır transgenik ya da nakavt fareler, kullanımını sağlayarak onarım dentinin bağlamında vivo pulpa yara iyileşmesinin temel moleküler mekanizmaların araştırılması vesile olacaktır.

Son zamanlarda yapılan çalışmalar, dentin oluşumu 18,19 gözlendiği pek çok fare modelleri gösterdi. Saito ve diğ. gerici değil, onarıcı, dentin oluşumunu uyarır pulpa maruz kalmadan Sınıf-I-benzeri hazırlık yarattı. gerici dentin ve onarıcı dentin Hem üçüncül dentin olarak sınıflandırılırHangi dişin dış stimülasyon takip oluşturur. Ancak, mevcut odontoblast oluşturduğu gerici dentin, farklı olarak, onarım dentin hamuru açıkta kalır ve odontoblastik tabakalar 20 ihlal olan bu gibi DPSCs olarak odontoblast-benzeri hücreler, tarafından oluşturulur. Bu nedenle, klinik gerçek bir kağıt hamuru kapatma işlemini temsil etmez. Başka bir çalışmada, cam iyonomer hamuru poz 19 kap için kullanılmıştır. Ancak, klinik çalışma cam iyonomer kronik inflamasyon kaynaklı, ama onarıcı 21 dentin değil gösterdi. Bu bağlamda, daha iyi kağıt hamuru sınırı fare modeli hastalarda gerçek kağıt hamuru kapatma işlemini temsil eder.

Biz daha 6 hafta sonra fareler hasat zaman, onarıcı dentin oluşumu hamuru oda ve kök kanallarının (Şekil 4) boyunca meydana dikkat çekicidir. Böyle bir gözlem biz jun de onarıcı dentin oluşumunu tahmin edildiği gibi, oldukça beklenmedik birkağıt hamuru sınırı malzeme ve kağıt hamuru ile ction. Bununla birlikte, kağıt hamuru güçlü bir mineralizasyon özellikle genç hastalar 22, klinik görülmektedir. Bu çalışmada kullanılan 8 haftalık fareler "genç yetişkinler" 23 olarak kabul edilir, çünkü bu fareler yine de önemli odontojenik potansiyeli barındıran bu sayede, bir olasılık var. Nedenle, farelerde onarım dentin oluşumu yaşlanma etkilerini incelemek için faydalı olacaktır.

Bizim histolojik incelemeler onarıcı dentin açıkça pulpa kapaklı diş kuruldu rağmen reparatif dentin tübüllerine varlığı (kırmızı ok) ve osteositlere (siyah ok başları) ile kanıtlandığı gibi, hem dentin ve kemik oluşumu özellikleri vardı, ortaya dentin (Şekil 5). Bu gözlemler onarıcı dentin oluşumu lokal odontoblast gibi dental pulpa kök hücrelerinin yanısıra infiltratin bulunan neden olabileceğini düşündürmektedirÇevredeki kemikten g mezenkimal kök hücrelerin.

tartrat-dirençli asit fosfataz (TRAP) lekelenmesi ile saptandığı haliyle dentin oluşturucu hücreler ile karşılaştırıldığında, biz hamuru içinde herhangi bir dentin yıkıcı hücreler bulunan (veriler gösterilmemiştir). Nitekim, pulpa veya periapikal iltihabı diş çevresinde kemik yüzeylerinde osteoklast oluşumunu indükler, fakat nedeniyle olduğu gibi henüz bilinmeyen mekanizmalar 24 dentin yüzeylerinde. Unutmayın ki, mevcut dentin ve yeni oluşan onarıcı dentin (Şekil 4) arasında net bir sınır vardı. Bir önceki çalışmada da benzer bir fenomen gösterdi; Diş bisfosfonat veya osteoklast fonksiyonlarını inhibe her ikisi de anti-RANKL antikoru varlığında ekstrakte edildi, varolan yaprak yapılı kemik ve yeni oluşturulan dokunmuş kemiği 25 arasında açık demarcations vardı. Bu kavram daha hamuru dentin-rezorbe hücrelerin yokluğunu desteklemektedir. Topluca, bizim kurulan fare modeli p olurhamuru yara iyileşmesi ve in vivo onarıcı dentin oluşumu mekanizmalarını incelemek için eşsiz fırsatlar rovide.

kağıt hamuru sınırı fare modelinde bir sınırlama yoktur. İnsanlarda ve farelerde arasındaki genetik Makyaj net bir şekilde farklıdır. Bütün Genom insan ve farede dizilenmiştir ve fareler ve insanlarda 26,27 arasındaki protein kodlama bölgeleri ile ilgili olarak% 85 benzerlik vardır. Bu fikri doğrultusunda, bu hayvanlarda kapatma hamuru ilişkin bulgular mutlaka insanlarda 28 bu yansıtmadığını öne sürüldü. Bununla birlikte, hayvan modelleri yaygın olarak, romatoid artrit 29 sistemik şok 31 osteoporoz 30 lipopolisakarit (LPS) uygulama için ovariactomy kaynaklı kemik kaybı ve ligasyonu için kollajen kaynaklı arterit gibi, in vivo olarak insan hastalıklarının, özetlemek için araştırma eden kullanılan periodontitis 32 yerleştirme. Bu tür, kağıt hamuru kapatma mou olarakse modeli hamuru yara iyileşmesi ve in vivo onarıcı dentin oluşumu moleküler mekanizmaları incelemek için gerekli olacaktır. Bununla birlikte, sadece diğer hayvan modelleri, yorumlanması ve kağıt hamuru-kapatma fare modelinde elde edilen bulgulara doğrulama gibi dikkatle değerlendirilmelidir.

Özetle, bu çalışma farelerde kapatma başarılı hamuru göstermektedir. Diğer bilinen modellerin aksine, bu hamuru-kapatma fare modeli hamuru rejenerasyonu ve onarıcı dentin oluşumu sağladığından alanında paha biçilmez bir araştırma aracı sağlayacaktır: En altta yatan mekanizmaları aydınlatmak için yaygın olarak kullanılabilir genetiği değiştirilmiş fare suşları kullanmak için 1) bir fırsat moleküler düzeyde ve 2) ekonomik verimli bir şekilde örneklem büyüklüğü artırılarak istatistiksel olarak anlamlı sonuçlar elde etmek. Daha ileri çalışmalar in vivo onarım dentin oluşumu objektif ölçümü, onarıcı dentin oluşumu yaşa bağlı etkiler, değerlendiril dahil bekliyorklinik kullanıma hamuru-kapatma malzemelerin yon ve uygun pulpa yara iyileşmesi ve onarıcı dentin rejenerasyonu için gerekli olan moleküler belirleyicileri doğrulama.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

Bu çalışma NIDCR / NIH R01DE023348 (RHK) ve University of California, Los Angeles Bölümü Akademik Senatosu Araştırma Konseyi Fakültesi Araştırma Bursu (RHK) tarafından desteklenmiştir.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
BM-LED stereo microscope MEIJI Techno Microscope 
Optima MCX-LED  Bien Air Dental 1700588-001 Electic motor engine
isoflurane Henry schein animal health NDC 11695-0500-2
1/4 round bur Brasseler 001092T0
Endodontic K-file Roydent 98947
ProRoot MTA Dentsply PROROOT5W MTA
Paper point Henry schein 100-3941
Ultra-Etch Ultradent product Inc. Phosphoric acid etchant
OptiBond SoloPlus Kerr 29669 Adhesives
Coltolux LED Coltene/whaledent Inc. C7970100115 Curing light unit
Characterization tint Bisco T-14012 Flowable composite
Skyscan Breuker 1275 uCT scanner
Microm Thermo HM355S Microtome
Hematoxyline-1 Thermo Scientific 7221
Eosin-Y Thermo Scientific 7111
Cytoseal 60 Thermo Scientific 8310-16 Mounting solution

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Dye, B., Thornton-Evans, G., Li, X., Iafolla, T. Dental caries and tooth loss in adults in the United States, 2011-2012. NCHS Data Brief. (197), 197 (2015).
  2. Bagramian, R. A., Garcia-Godoy, F., Volpe, A. R. The global increase in dental caries. A pending public health crisis. Am J Dent. 22, (1), 3-8 (2009).
  3. Koliniotou-Koumpia, E., Tziafas, D. Pulpal responses following direct pulp capping of healthy dog teeth with dentine adhesive systems. J Dent. 33, (8), 639-647 (2005).
  4. Tarim, B., Hafez, A. A., Cox, C. F. Pulpal response to a resin-modified glass-ionomer material on nonexposed and exposed monkey pulps. Quintessence Int. 29, (8), 535-542 (1998).
  5. Tziafa, C., Koliniotou-Koumpia, E., Papadimitriou, S., Tziafas, D. Dentinogenic responses after direct pulp capping of miniature swine teeth with Biodentine. J Endod. 40, (12), 1967-1971 (2014).
  6. Dammaschke, T., Stratmann, U., Fischer, R. J., Sagheri, D., Schafer, E. A histologic investigation of direct pulp capping in rodents with dentin adhesives and calcium hydroxide. Quintessence Int. 41, (4), 62-71 (2010).
  7. Jegat, N., Septier, D., Veis, A., Poliard, A., Goldberg, M. Short-term effects of amelogenin gene splice products A+4 and A-4 implanted in the exposed rat molar pulp. Head Face Med. 3, 40 (2007).
  8. Paterson, R. C., Radford, J. R., Watts, A. The response of the rat molar pulp of two proprietary calcium hydroxide preparations. Br Dent J. 151, (6), 184-186 (1981).
  9. Sela, J., Ulmansky, M. Reaction of normal and inflamed dental pulp to Calxyl and zinc oxide and eugenol in rats. Oral Surg Oral Med Oral Pathol. 30, (3), 425-430 (1970).
  10. Maurice, C. G., Schour, I. Experimental cavity preparations in the molar of the rat. J Dent Res. 34, (3), 429-434 (1955).
  11. Skyscan, N. V. NRecon user manual. Available from: http://bruker-microct.com/next/NReconUserGuide.pdf (2011).
  12. Sohn, S., et al. The Role of ORAI1 in the Odontogenic Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells. J Dent Res. 94, (11), 1560-1567 (2015).
  13. Kim, S., Shin, S. J., Song, Y., Kim, E. In Vivo Experiments with Dental Pulp Stem Cells for Pulp-Dentin Complex Regeneration. Mediators Inflamm. 2015, 409347 (2015).
  14. Gronthos, S., Mankani, M., Brahim, J., Robey, P. G., Shi, S. Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo. Proc Natl Acad Sci U S A. 97, (25), 13625-13630 (2000).
  15. Yu, J., et al. Odontogenic capability: bone marrow stromal stem cells versus dental pulp stem cells. Biol Cell. 99, (8), 465-474 (2007).
  16. Zhu, X., et al. Transplantation of dental pulp stem cells and platelet-rich plasma for pulp regeneration. J Endod. 38, (12), 1604-1609 (2012).
  17. Iohara, K., et al. Dentin regeneration by dental pulp stem cell therapy with recombinant human bone morphogenetic protein 2. J Dent Res. 83, (8), 590-595 (2004).
  18. Saito, K., Nakatomi, M., Ida-Yonemochi, H., Ohshima, H. Osteopontin Is Essential for Type I Collagen Secretion in Reparative Dentin. J Dent Res. (2016).
  19. Hunter, D. J., et al. Wnt Acts as a Pro-Survival Signal to Enhance Dentin Regeneration. J Bone Miner Res. (2015).
  20. Goldberg, M., Kulkarni, A. B., Young, M., Boskey, A. Dentin: structure, composition and mineralization. Front Biosci (Elite Ed). 3, 711-735 (2011).
  21. Nascimento, A. B., Fontana, U. F., Teixeira, H. M., Costa, C. A. Biocompatibility of a resin-modified glass-ionomer cement applied as pulp capping in human teeth). Am J Dent. 13, (1), 28-34 (2000).
  22. Bogen, G., Kim, J. S., Bakland, L. K. Direct pulp capping with mineral trioxide aggregate: an observational study. J Am Dent Assoc. 139, (3), 305-315 (2008).
  23. Miller, R. A., Nadon, N. L. Principles of animal use for gerontological research. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 55, (3), 117-123 (2000).
  24. Shah, A., Song, M., Cao, Y., Kang, M. K., Kim, R. H. Osteoclasts are absent in pulpal and periapical inflammatory lesions. J Dent Res. 95, 1503 (2016).
  25. Williams, D. W., et al. Impaired bone resorption and woven bone formation are associated with development of osteonecrosis of the jaw-like lesions by bisphosphonate and anti-receptor activator of NF-kappaB ligand antibody in mice). Am J Pathol. 184, (11), 3084-3093 (2014).
  26. McPherson, J. D., et al. A physical map of the human genome. Nature. 409, (6822), 934-941 (2001).
  27. Gregory, S. G., et al. A physical map of the mouse genome. Nature. 418, (6899), 743-750 (2002).
  28. Hilton, T. J. Keys to clinical success with pulp capping: a review of the literature. Oper Dent. 34, (5), 615-625 (2009).
  29. Holmdahl, R., Bockermann, R., Backlund, J., Yamada, H. The molecular pathogenesis of collagen-induced arthritis in mice--a model for rheumatoid arthritis. Ageing Res Rev. 1, (1), 135-147 (2002).
  30. Kalu, D. N., Chen, C. Ovariectomized murine model of postmenopausal calcium malabsorption. J Bone Miner Res. 14, (4), 593-601 (1999).
  31. Yokochi, T. A new experimental murine model for lipopolysaccharide-mediated lethal shock with lung injury. Innate Immun. 18, (2), 364-370 (2012).
  32. Abe, T., Hajishengallis, G. Optimization of the ligature-induced periodontitis model in mice. J Immunol Methods. 394, (1-2), 49-54 (2013).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics