Tubal Cytology of the Fallopian Tube als een veelbelovend hulpmiddel voor vroegtijdige detectie van eierstokkanker

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.

If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.

 

Summary

We hebben een tubale cytologische methode onderzocht door de eileiders direct na de chirurgische excisie te testen als een instrument voor vroegtijdige detectie van eierstokkanker. Hier presenteren wij een protocol voor het verzamelen van eileiderscellen van vers ontvangen chirurgische specimens.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Chen, H., Klein, R., Arnold, S., Wang, Y., Chambers, S., Zheng, W. Tubal Cytology of the Fallopian Tube as a Promising Tool for Ovarian Cancer Early Detection. J. Vis. Exp. (125), e55887, doi:10.3791/55887 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Momenteel wordt algemeen aanvaard dat de overgrote meerderheid van hoogwaardig sero-carcinoom (HGSC) van eierstokken afkomstig is van de eileider. Als gevolg van het gebrek aan markers of hulpmiddelen voor identificatie van eierstokkanker, blijft de vroege detectie van HGSC echter uitdagend. Directe bemonstering van de eileider kan de gevoeligheid vergroten voor het detecteren van neoplastische cellen wanneer de tumor niet grof zichtbaar is. Wij ontwikkelden een procedure om eileiderscellen rechtstreeks te verzamelen uit vers ontvangen chirurgische specimens, die een uitstekende correlatie met histologische bevindingen hebben laten zien. Deze aanpak legt de basis voor het toekomstige nut van minimaal invasieve laparoscopische screening bij hoge risico patiëntenpopulaties.

Introduction

Ovarium hoogwaardig sero carcinoma (HGSC) is het meest voorkomende en dodelijke type eierstokkanker, en blijft een belangrijke bedreiging voor de volksgezondheid. In het afgelopen decennium hebben onderzoekers voorgesteld dat de overgrote meerderheid van HGSC-gevallen voortkomen uit de eileider in plaats van de eierstok zelf 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 . Sero-tubaal intraepitheliaal carcinoom (STIC) wordt algemeen aanvaard als de voorloper van HGSC 1 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 . Tot nu toe blijft de vroege detectie van eierstokkanker moeilijk. Het huidige screeningsprotocol met gecombineerd kankerantigeen 125 (CA-125) en transvaginale echografie heeft aangetoondWeinig effect op de sterfte van de patiënt 12 , 13 . Endometrial sampling voor ovariale kanker detectie heeft een zeer lage gevoeligheid getoond 14 . Twee pionierstudies 15 , 16 onderzochten het gebruik van laparoscopische directe bemonstering van goedaardige eileiders en kenmerken de cytologische eigenschappen van goedaardig tubaal epithelium. Wij geloven dat directe bemonstering van de eileider ook een praktische en eenvoudige manier is om STIC of HGSC op een vroeg stadium te detecteren wanneer de tumor niet door beeldvorming wordt geconfronteerd.

Hoewel het uiteindelijke doel het nut is van minimaal invasieve laparoscopische screening bij patiënten met risicofactoren, zijn de onmiddellijke doelstellingen van de huidige studie: 1) het vaststellen van de basislijn cytologische eigenschappen van goedaardige tubale epithelia; En 2) om de gevoeligheid en specificiteit van tubale cytologie te testen bij het detecteren van eierstokkankerErs en kankerprecursoren. Daarom ontwikkelden we de volgende baseline tubal cytology methode om de effectiviteit van dit protocol te testen bij het detecteren van HGSC en zijn voorloper STIC 17 . In deze studie hebben we gebruik gemaakt van het grote volume regelmatig ontvangen chirurgische specimens, en voerde directe bemonstering van de chirurgische uitgesneden eileider uit naast de routine-brutoprocedures.

In onze recente studie 17 is gebleken dat de cytologische diagnose van kwaadaardig of vermoedelijk maligniteit zeer correlated is met de histologische diagnose van HGSC (100%). Daarnaast identificeerde de tubale cytologische evaluatie intratubale neoplasie in de enige twee histologisch bevestigde STIC-gevallen die bij deze studie betrokken waren. Wij zijn van mening dat tubale cytologie een groot potentieel heeft bij vroegtijdige detectie en waardevolle informatie voor patientenbeheer biedt.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Een Institutional Review Board goedkeuring is ontvangen van de Universiteit van Arizona voor het uitvoeren van deze studie. Geinformeerde patiënten toestemmingsformulieren werden verkregen.

1. Patient Selection

OPMERKING: De goedkeuring van een Institutional Review Board is verkregen bij de Universiteit van Arizona. In totaal werden 38 patiënten aangeworven. De leeftijd van de patiënten varieerde van 32 tot 86 jaar met een gemiddelde van 55 jaar, van wie 26 patiënten postmenopauze waren en 12 patiënten waren pre-menopauze.

  1. Verkrijg geïnformeerde toestemming van elke patiënt.

2. Collectieprocedure van de eileiderbuiscellen

OPMERKING: De patiënten die in de huidige studie zijn opgenomen, waren allemaal gepland voor totale hysterectomie en bilaterale salpingo-openhorectomie voor profylactische risicoreductie of maligniteit. De details van de operatie waren onbekend voor patholoog die de cytologie studie uitvoerde.

  1. Onmiddellijk na surgiCal excision, onderzoek het verse weefselmonster inclusief baarmoeder, bilaterale eierstokken en bilaterale eileiders om de bilaterale eileider te identificeren.
  2. Verzamel en plaats fallopische buiscellen binnen de 30 minuten van de bloedtoevoer in de conserveringsoplossing (zie tabletten van het materiaal). Het aanbevolen conserveermiddel is een op basis van methanol gebufferde conserveermiddel.
    OPMERKING: Gebruik een zachte aanrakingsborstel voor de tubale celverzameling (aanstaande stappen). Met uitzondering van zeldzame gevallen waarin de eileider losgemaakt is van de baarmoeder, wordt een borstelkop geïntroduceerd om cellen van de tubale fimbria te verzamelen, meestal wanneer de eileider aan de baarmoeder is bevestigd.
    1. Met behulp van een kleine pincet, plaats de penseel (zie Tabel van Materialen ) in het lumen van de eileider door het fimbriae einde. Draai langzaam met de klok mee en beweeg de borstel naar voren door het infundibulaire gedeelte van de herfstOpiaanse buis, dan de ampulla tot het de muskus bereikt.
    2. Draai de borstel tegen de klok langzaam om en draai de borstel langzaam om. Zorg ervoor dat de maximale snelheid van de borstel binnen het lumen lager is dan 1 cm / s.
    3. Spoel de penseel in de conserveringsoplossing (in een flesje) door de poets 10 keer in de oplossing te draaien en wervelen.
    4. Draai de injectieflacon vast.
    5. Noteer de informatie van de patiënt en de lateraliteit van het monster.
    6. Bewaar de injectieflacon in een koelkast van 4 ° C (maximaal 6 maanden).

3. Tubal Cytology Slide Preparation

  1. Laad de monsterflacon in de geautomatiseerde processor voor het voorbereiden van een dia.
    OPMERKING: Wij maken gebruik van de geautomatiseerde processor voor diavoorbereiding. De volgende stappen worden automatisch uitgevoerd nadat het monster in de processor is geplaatst: (i) De cellen en puin worden gescheiden en verspreid door de rotatie van het testfilter in het monsterflacon. (Ii) Tubale cellen worden verzameld vanuit het buitenoppervlak van het filter door een zacht vacuüm. (Iii) Het filter is omgekeerd en tegen de dia ingedrukt om de cellen te laten hangen aan het cirkelgebied binnen de dia. (Iv) De dia is verder in een cel fixatief bad gefixeerd en klaar voor kleuring en cytologie analyse. Helaas is er geen alternatieve handmatige methode, die resulteert in resultaten met een vergelijkbare kwaliteit.

4. Gewijzigd Papanicolaou Staining Protocol

  1. Vlek de glijbanen gemaakt uit stap 3.1 door de geautomatiseerde non-gyn stain procedure te laten uitvoeren, zoals geïllustreerd in Tabel 1 .
    OPMERKING: De kleurmethode vertegenwoordigt een wijziging van de Papanicolaou-vlektechniek die we routinematig gebruiken voor niet-gynaecologische monsters. We gebruiken een geautomatiseerde tissue processor om sommige dia's te vleken. We kozen voor de non-Gyn staining procedure over de Gyn staining procedure in deze studie. Het gebruikte Eosin is EA-65, in plaats van de gebruikte EA-50Gynaecologische specimens (Pap smear specimen). Bovendien is OG-6 in de Gyn-kleuringprocedure, die voornamelijk is voor plaveiselkleuring, niet opgenomen in de kleurprocedure, aangezien er geen sprake is van plaveiselcellen in deze studie. EA65 (Eosin Azure) is een tegenvlekoplossing die bestaat uit 3 kleurstoffen: Eosin Y, Fast Green FCF en Bismarck Brown Y. De procedure is geïllustreerd in Tabel 1 .
  2. Voer als volgt een handmatige snelle Pap-vlekprocedure uit.
    1. Dip de dia in stap 3.1 in 95% ethanol, 10 keer, waarbij elke dip ongeveer 1 s drijft.
    2. Doe de dia in H 2 O, 10 keer, met elke dip ongeveer 1 s.
    3. Breng de dia in hematoxyline voor 10 - 60 s.
    4. Doe de dia in H 2 O, 10 keer, met elke dip ongeveer 1 s.
    5. Dip de dia in 95% ethanol, 10 keer, met elke dip ongeveer 1 s.
    6. Laat de dia in de EA65 voor 1 tot 3 minuten verschijnen.
    7. Dip de dia intO H 2 O, 10 keer, met elke dip ongeveer 1 s.
    8. Dip de dia in 95% ethanol, 10 keer, met elke dip ongeveer 1 s.
    9. Dip de dia in xyleen tot de dia wordt duidelijk.
      OPMERKING: Dit is een gewijzigde Papanicolaou-kleurprocedure. Deze methode wordt gebruikt als een snellere vlekmethode voor gevallen met beperkte tijd of ruimte, zoals on-site fijne naald aspiratie en STAT-monsters. Deze procedure zorgt voor vergelijkbare kwaliteit kleuring als de geautomatiseerde Non-Gyn vlekken procedure. De procedure is geïllustreerd in tabel 2 .

5. Spin cellen op Slides

OPMERKING: Er worden drie cytospin glijbanen gemaakt voor elk monster. Eén dia is H & E gekleurd voor de morfologische vergelijking met de cytologie dia. Twee onbeschadigde glijbanen werden gemaakt voor de toekomstige IHC-kleuring. De gedetailleerde stappen van dit gedeelte zijn niet de focus van dit document; Daarom zullen we ze niet in uitgebreide d. BesprekenIJZE.

  1. Bereid een cytocentrifuge met een gelabelde dia, specimen trechter en filter voor elk monster dat moet worden onderzocht.
  2. Concentreer de cellen door centrifugeren gedurende 5 minuten bij 200 x g.
  3. Verwijder ongeveer de helft van de supernatant en zet de cellen opnieuw op met zachte pipettering.
  4. Voeg 200 μl van elke celsuspensie toe aan een specimen trechter.
  5. Spin bij 250 xg gedurende 5 minuten. Verwijder de dia (s) van de cytocentrifuge voorzichtig en overbrengen naar 95% Ethanol voor fixatie.
  6. Luchtdroog voor kleuring en voor langdurige opslag.
    OPMERKING: Afhankelijk van de celdichtheid op de laatste dia's kan stap 5.2 en stap 5.3 worden overgeslagen of aangepast. In deze studie vereisen we tenminste 2 celclusters aanwezig per hoogvermogenweergave voor voldoende cellulaire dichtheid.

6. Sectie en uitgebreid onderzoek naar het Fimbriated End (SEE-FIM) Protocol

  1. Fix het hele monster (inclusief baarmoeder, bilaterale eileiders en eierstokken)In 10% formalin voorafgaand aan de brutering om afschilfering te minimaliseren.
  2. Verwijder de eileiders uit de baarmoeder op de eicel met een kleine tang en een schaar. Als de adhesie aanwezig is, dissekteer het fimbriate uiteinde van het ovieroppervlak zorgvuldig door gebruik te maken van kleine tang en een schaar; Deze stappen zijn van cruciaal belang om de kruisverontreiniging van het bloed tussen de eierstokken en de eileiders te minimaliseren door hun intieme nabijheid.
  3. Amputeer het infundibulum en fimbriae segment (de distale 1.0 - 2.0 cm eileider) van de rest van het monster.
  4. Secteer het infundibulum en fimbriae in lengterichting met 2 mm intervallen. Verstuur alle afdelingen in toto voor histologisch onderzoek.
  5. Secteer de isthmus en ampulla met intervallen van 2 - 3 mm en stuur volledig in.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Uit onze eerdere studie bleek dat monsterneming rechtstreeks uit de uitgesneden eileider met behulp van een zachte aanwijzingsborstel kwantitatief en kwalitatief adequaat voorbeeld kon leveren voor verdere cytologische evaluatie. Daarnaast zorgt de combinatie van geautomatiseerde diavoorbereiding en gemodificeerde Papanicolaou-kleuring de patoloog om de cytologische details beter te visualiseren om een ​​nauwkeurige diagnose te maken. Een voorbeeld van een handmatige snelle papvlek van een specimen uit een goedaardige eileiderbuis wordt geïllustreerd in figuur 1 . Zoals getoond in figuur 1 , resulteert de penseelmanoeuvre in een voldoende steekproef van het monster. Bovendien biedt de handmatige, snelle Pap-vlek een goede resolutie van nucleaire details en cytoplasmatische doorzichtigheid, die essentieel zijn voor de nauwkeurige evaluatie van de tubale cellen.

De vergelijking tussen de handmatige snelle Pap stAin van een cytologische dia en de H & E-kleuring van een cytospin dia is weergegeven in figuur 2 . Een van de voordelen van de bovengenoemde diavoorbereiding in vergelijking met conventionele smeer is dat het een veel schonere achtergrond heeft en een betere resolutie van nucleaire details en cytoplasmatische transparantie heeft. Een voorbeeld van SEE-FIM van het Fallopian Tub Protocol is aangetoond in Figuur 3 . Zoals getoond in Figuur 1 is de aanwezigheid van twee celpopulaties (geciliateerde cellen en secretaire cellen) een kenmerk van goedaardig tubaal epithelium. De histologie van representatieve delen van de fimbria en ampulla wordt getoond in figuur 4 . De penseelmanoeuvre toont een lichte verstoring van de villi-structuur in ongeveer een derde van het monster.

In onze vorige studie 17 is de tubale cytologische diagnose gecorreleerd met de histologische diaGnosis van HGSC zeer goed (100%). De cytologische verschijning van maligniteit toont driedimensionale clusters die bestaan ​​uit cellen met prominente nucleolen en anisonucleose ( Figuur 5a ). In tegenstelling hiermee presenteerde de atypische reactieve cytologie als hoekige bladen samengesteld uit atypische cellen met kleine nucleolen en matige anisonucleose zonder driedimensionale clustering ( Figuur 5b ). HGSC-achtige celgroepen werden opgemerkt in de context van hoekige vellen van normale epitheelcellen ( Figuur 6 ).

Figuur 1
Figuur 1: Voorbeeld van een handmatig snel papje vlekken van het benigne tubal epithelium. ( A ) Achtergrondcellen. Achtergrondcellen omvatten kleine celclusters die bestaan ​​uit grote secretorische cellen en kleine geciliateerde cellen, enkel groot (vermoedelijk secRetoriecellen) en kleine (vermoedelijk ciliated cellen) cellen, verspreid grote en kleine blote kernen. ( B ) Kleine cel cluster bestaande uit kleine ciliated cellen en grote secretory cellen (pijl). ( C ) Strip van gechiliede epithelium (pijl). ( D ) Tubal epithelium met mesotheliale lakens. Opgemerkt de clinging ciliated cellen aan de periferie (pijl). Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 2
Figuur 2: Vergelijking tussen handmatig snel papje vlekken van een cytologisch glijbaan ( A ) en H & E kleuring van een cytospin glijbaan ( B ). Een goedaardige hoekige celcluster is aanwezig in het midden van zowel de Pap-vlek- als H & E-vlekglijbanen. Beide methoden bieden goedResolutie voor cytologische evaluatie van het monster. Echter, de papvlekken van de cytologischloor leverden een schonere achtergrond op. Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 3
Figuur 3: Illustratie van SEE-FIM van de Fallopian Tube. Let op de longitudinale doorsnede van het infundibulum en fimbriae segment en de dwarsdoorsnede van de isthmus en ampulla. Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 4
Figuur 4: Histologie van benigne tubal epithelium.( A ) Fimbriae segment. Het tubale epithelium bestaat uit twee afzonderlijke celpopulaties: kleine ciliated cellen (pijlen) en grote niet-geciliateerde secretorische cellen (cirkels). Lichte villa storing is genoteerd. ( B ) Ampulla sectie. Let op de vingerachtige fimbria. ( C ) Milde verstoring van villi structuur (pijl). Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 5
Figuur 5: Vergelijking tussen atypische cluster ( a ) en driedimensionale maligne cluster ( b ) . Maligne cytologie toont driedimensionale clusters die bestaan ​​uit cellen met prominente nucleolen en anisonucleose ( b ). Atypische cytologie toont hoekvormig velS samengesteld uit atypische cellen met kleine nucleoli en gematigde anisonucleose. Opmerking: er is geen driedimensionale clustering aanwezig ( a ). Dit cijfer is aangenomen uit referentie 17 .

Figuur 6
Figuur 6: Correlatie tussen Cytologische en Histologische Verschijnselen van Intraepitheliale Neoplasie. (A) Cytologische intratubal neoplasie. Cytologische intratubale neoplasia die de aanwending van driedimensionale contour en significante anisonucleose en grote kersenrode nucleolen (cirkel) zien binnen de context van hoekige vellen normale epitheliale cellen (pijl). ( B ) Corresponderende chirurgische pathologie sectie met tubaal intraepitheliaal carcinoom. Let op de zeer dysplastische cellen (cirkel) die grenst aan de relatief normale uitstralingsepithelcellen (pijl). Dit cijfer is geweestAangenomen uit referentie 17 . Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken.

</ Table>

Tabel 1: Non-Gyn Stain Steps.

95% ethanol 5 minuten
H2O 10 sec
hematoxylin 15 sec - 3 min
Gedistilleerde H2O 5 minuten
95% ethanol 30 sec
EA65 2 - 5 min
95% ethanol 30 sec
95% ethanol 30 sec
100% ethanol 30 sec
100% ethanol 30 sec
xyleen 30 sec
xyleen 5 minuten
95% ethanol 10 dips
H2O 10 dips
hematoxylin 10 sec-1 min
Gedistilleerde H2O 10 dips
95% ethanol 10 dips
EA65 1 - 3 min
95% ethanol 10 dips
100% ethanol 10 dips
xyleen Dip tot duidelijk

Tabel 2: Handmatige Snelle Pap Stain Stappen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Profylactische bilaterale salpingectomie of salpingo-openhorectomie is aangetoond dat het risico op het ontwikkelen van HGSC bij hoge risicopopulaties, zoals vrouwen met BRCA genmutaties en sterke familiale kankergeschiedenis, vermindert. De steriliteit en de chirurgische menopauze die door de operatie veroorzaakt worden, zijn echter ernstige gevolgen en zorgen voor een moeilijke beslissing, vooral voor vrouwen van de vruchtbare leeftijd. De vorige studie heeft een uitstekende correlatie tussen tubale cytologie en histologie 17 getoond. Wij zijn ervan overtuigd dat tubale cytologie op laparoscopisch verzamelde fallopische buiscellen een groot potentieel heeft om een ​​praktisch, minimaal invasieve hulpmiddel voor vroegtijdige kankerdetectie te worden.

De meest kritische stappen voor het succesvol verzamelen van eileiderscellen zijn: 1) de tijd tussen de bloedbevestiging en de verzameling van cellen; En 2) Zachte en correcte manoeuvre van de zachte aanraakborstel.

De tijd (binnen 30 minutenEs) tussen klemmen en het verzamelen van cellen is van cruciaal belang voor het behoud van de morfologie en nucleaire details van de verzamelde cellen. Effectieve communicatie tussen pathologen en de chirurgen zorgt ervoor dat het monster binnen deze periode op de verzamelplaats wordt afgeleverd. De overgrote meerderheid van de gevallen die in de studie zijn opgenomen, werden uitgevoerd in de bevroren sectie kamer. Om de tubale cellen succesvol te verzamelen, moet de persoon die de verzameling uitvoert, zo goed mogelijk proberen om te voorkomen dat de borstel het serosale oppervlak van de eierstok raakt door de storingsimplicatie als de zaak kwaadaardig is. Soms kan dit moeilijk zijn door de nabijheid van de betrokken organen en de complexiteit van de anatomie van het specimen. Scheiding van eileiders uit het hele specimen voor de verzameling kan worden gerechtvaardigd.

De zachte aanraakpenseel die in deze studie wordt gebruikt, kan een groot aantal cellen verzamelen die dan gemakkelijk kunnen worden overgedragen aan glijbanen of een flesje voor conserveermiddelen,En heeft een vriendelijke aanraking die is ontworpen om trauma aan het kanaal te minimaliseren. Bovendien moet de hele manoeuvre traag en zacht zijn om de vale structuren van de slijmvlies te voorkomen. In sommige gevallen kan het moeilijk zijn om de borstel door de obstructie door de hele eileider te laten passeren. Desalniettemin is het belangrijk om zo veel mogelijk te proberen cellen van het fimbriae en infundibulaire gedeelte te verzamelen, omdat men ervan uitgaat dat de meerderheid van de HGSC afkomstig is van het distale einde van de eileider. De collectie mag echter niet doorgaan als de integriteit van het monster mogelijk in gevaar kan komen.

Op basis van onze ervaring kan het specimen gedurende enkele maanden in conserveringsoplossing worden opgeslagen zonder de morfologie van de verzamelde cellen in gevaar te brengen. De Papanicolaou vlek is een veelgebruikte cytologische kleuringstechniek in cytopathologie. De belangrijkste voordelen van deze kleurprocedure zijn: 1) goede definitie van nucleair detail;En 2) cytoplasma transparantie. In deze studie worden twee gemodificeerde Papanicolaou vlekprocedures gebruikt voor het verwijderen van de cytologie-dia's, waaronder de geautomatiseerde Non-Gyn-kleurprocedure en de Quick Pap-vlekprocedure. Beide procedures zorgen voor een uitstekende en betrouwbare diafleuring, die een goed behoud van nucleaire en cytoplasmatische details laat zien, en een schone achtergrond. Hoewel de cytospin dia's over het algemeen een grotere achtergrond hebben, vergeleken met cytologie dia's, hebben hun H & E-vlek een soortgelijke kwaliteit van celkleuring aangetoond. De H & E-kleuring van deze slides kan een geschikte alternatieve methode zijn voor tubale cytologieanalyse als er geen automatische processor beschikbaar is.

Het SEE-FIM protocol wordt gebruikt voor het vermenigvuldigen van alle eileiders die in deze studie zijn opgenomen, inclusief goedaardige en kwaadaardige gevallen. Het SEE-FIM protocol werd aanvankelijk ontwikkeld voor BRCA-positieve profylactische bilaterale salpingo-openhorectomy-exemplaren, die een standaard risicoreductie optie fOf BRCA mutatie dragers. Dit protocol laat de maximale blootstelling van de tubal plicae toe, waaruit de STIC vermoedt te zijn. Dit wordt momenteel gebruikt als de gouden standaard voor het detecteren van HGSC tubal extensie en STIC. De correlatie tussen tubale cytologische bevinding met SEE-FIM histologische bevinding is cruciaal voor deze studie om de efficiëntie van het huidige protocol te valideren.

Een zorg voor tubale celverzameling met behulp van een zachte aanraakborstel is dat de manoeuvre de integriteit van het tubale epithelium kan storen en de latere nauwkeurige histologische interpretatie van chirurgische specimens, in het bijzonder de plaatsing van tumor, belemmeren als maligniteit wordt geïdentificeerd. Op basis van onze ervaring blijkt dat ongeveer een derde van de gevallen lichte verstoring van de villi op histologieanalyse toont, die in het algemeen geen interferentie maakt met de uiteindelijke interpretatie van de tubale histologie.

Onze vorige studie heeft aangetoond dat tubale cytologie gevoelig en specifiek isIc in het detecteren van HGSC en STIC. Het zal van groot belang zijn om verder te testen of de combinatie van tubale cytologie met biomarkers kleuring zoals P53 en IMP3 de gevoeligheid en specificiteit van het detecteren van serieuze kanker van tubale oorsprong kan verhogen. Toekomstige studie zal zich richten op het ontwikkelen van een laparoscopische procedure voor fallopianepitheliummonsterneming in vivo .

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende financiële belangen hebben.

Acknowledgments

De auteurs willen het Department of Pathology, University of Arizona, erkennen voor de financiële ondersteuning. Het project wordt gedeeltelijk ondersteund door het beursgenootschap Mark en Jane Gibson aan WZ.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Cytobrush plus GT gentle touch of Medscand sample collection kit CooperSurgical C0112
ThinPrep preservCyt solution HOLOGIC 234005
ThinPrep 2000 Processor HOLOGIC 70031-001
Papanicolaou Stain, EA 65 sigma aldrich HT40432
95% Ethanol sigma aldrich 652261
100% Ethanol sigma aldrich 493538
Xylene sigma aldrich 214736
Hematoxylin sigma aldrich H9627
Sakura Tissue Tek 2000 tissue processor SAKURA TISSUE-TEK VIP 2000
Mayo Dissecting Scissors,5.5 straight Pilgrim medical equiment FA710-45
Chemware Forceps United state plastic corp 76122
Tissue-Tek Accu-Edge Trimming blades,short SAKURA 4785
Tissue-Tek Accu-Edge Trimming blades handle,short SAKURA 4786

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Carlson, J. W., et al. Serous tubal intraepithelial carcinoma: its potential role in primary peritoneal serous carcinoma and serous cancer prevention. J Clin Oncol. 26, (25), 4160-4165 (2008).
  2. Kurman, R. J., Shih Ie, M. The origin and pathogenesis of epithelial ovarian cancer: a proposed unifying theory. Am J Surg Pathol. 34, (3), 433-443 (2010).
  3. Lee, Y., et al. A candidate precursor to serous carcinoma that originates in the distal fallopian tube. J Pathol. 211, (1), 26-35 (2007).
  4. Li, J., Fadare, O., Xiang, L., Kong, B., Zheng, W. Ovarian serous carcinoma: recent concepts on its origin and carcinogenesis. J Hematol Oncol. 5, 8 (2012).
  5. Przybycin, C. G., Kurman, R. J., Ronnett, B. M., Shih Ie, M., Vang, R. Are all pelvic (nonuterine) serous carcinomas of tubal origin? Am J Surg Pathol. 34, (10), 1407-1416 (2010).
  6. Zheng, W., Fadare, O. Fallopian tube as main source for ovarian and pelvic (non-endometrial) serous carcinomas. Int J Clin Exp Pathol. 5, (3), 182-186 (2012).
  7. Carcangiu, M. L., et al. Atypical epithelial proliferation in fallopian tubes in prophylactic salpingo-oophorectomy specimens from BRCA1 and BRCA2 germline mutation carriers. Int J Gynecol Pathol. 23, (1), 35-40 (2004).
  8. Leunen, K., et al. Prophylactic salpingo-oophorectomy in 51 women with familial breast-ovarian cancer: importance of fallopian tube dysplasia. Int J Gynecol Cancer. 16, (1), 183-188 (2006).
  9. Piek, J. M., et al. Dysplastic changes in prophylactically removed Fallopian tubes of women predisposed to developing ovarian cancer. J Pathol. 195, (4), 451-456 (2001).
  10. Crum, C. P., et al. The distal fallopian tube: a new model for pelvic serous carcinogenesis. Curr Opin Obstet Gynecol. 19, (1), 3-9 (2007).
  11. Jarboe, E. A., et al. Tubal and ovarian pathways to pelvic epithelial cancer: a pathological perspective. Histopathology. 53, (2), 127-138 (2008).
  12. Menon, U. Ovarian cancer screening has no effect on disease-specific mortality. Evid Based Med. 17, (2), 47-48 (2012).
  13. Buys, S. S., et al. Effect of screening on ovarian cancer mortality: the Prostate, Lung, Colorectal and Ovarian (PLCO) Cancer Screening Randomized Controlled Trial. JAMA. 305, (22), 2295-2303 (2011).
  14. Otsuka, I., Kameda, S., Hoshi, K. Early detection of ovarian and fallopian tube cancer by examination of cytological samples from the endometrial cavity. Br J Cancer. 109, (3), 603-609 (2013).
  15. Dhanani, M., Nassar, A., Dinh, T. Classification of Fallopian Tube Cytology Sampling to Develop a Model for Future Peritoneal and Ovarian Cancer Screening. J Am Soc Cytopathol. 3, (5), S35-S36 (2014).
  16. Rodriguez, E. F., Lum, D., Guido, R., Austin, R. M. Cytologic findings in experimental in vivo fallopian tube brush specimens. Acta Cytol. 57, (6), 611-618 (2013).
  17. Chen, H., Klein, R., Arnold, S., Chambers, S., Zheng, W. Cytologic studies of the fallopian tube in patients undergoing salpingo-oophorectomy. Cancer Cell Int. 16, 78 (2016).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics