Visualisere effekten af pesticider mod sygdom vektor myg i feltet

Environment
 

Summary

Effekten af folkesundheden pesticider målretning gener og sygdom-vektor insekter er ikke ensartet på tværs af forskellige økologiske zoner. Her præsenterer vi et system af teknikker, der anvender fangenskab vektorinsekter som sentinels for pesticider effekten for at udlede elektroniske kort støtte en standard vurdering af pesticider på tværs af flere miljøer.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Britch, S. C., Linthicum, K. J., Aldridge, R. L., Golden, F. V., Walker, T. W. Visualizing Efficacy of Pesticides Against Disease Vector Mosquitoes in the Field. J. Vis. Exp. (145), e58440, doi:10.3791/58440 (2019).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Effekten af folkesundheden pesticider målretning gener og sygdom-vektor insekter som myg, sand fluer og skidt-avl fluer er ikke ensartet i hele økologiske zoner. Du kan bedst kan beskytte folkesundheden og veterinære fra disse insekter, skal de miljømæssige begrænsninger af pesticider undersøges for at informere effektivt brug af de mest hensigtsmæssige pesticidformuleringer og teknikker. Vi har udviklet et forskningsprogram til at evaluere kombinationer af pesticider, pesticidudbringningsudstyr og ansøgning teknikker i hot-golde ørken, hot-fugtige tropiske, varmt og køligt tempererede og urbane steder til at udlede pesticider bruge retningslinjer specifikke mål insekt og miljøet. At disse ender designet vi et system af protokoller til at understøtte effektiv, omkostningseffektiv, bærbare og standardiseret evaluering af en række forskellige pesticider og udstyr på tværs af flere miljøer. Kernen i disse protokoller er brugen af en række små bure med koloni-opdrættet sentinel myg (voksne og immatures) og sand fluer (voksne), strategisk arrangeret i naturlige habitater og udsat for pesticider spray. Rumlige og tidsmæssige mønstre af pesticiders effekt er afledt af procent dødelighed i sentinel bure, og derefter kortlagt og visualiseres i et geografisk informationssystem. Kort over sentinel dødelighed data kan sammenlignes statistisk, evaluere relative effekt af et pesticid på tværs af flere miljøer eller studere flere pesticider i en enkelt miljø. Protokoller kan ændres til at rumme en række forskellige scenarier, herunder for eksempel, lodret orientering af sentinels i baldakin levesteder eller samtidige afprøvning af jorden og sprøjtning metoder.

Introduction

Effekten af folkesundheden pesticider målretning gener og sygdom-vektor insekter som myg, sand fluer og skidt-avl fluer er ikke ensartet på tværs af ørken, tropiske, tempereret, eller urban økologiske zoner1. Visse vigtige arter i disse tre grupper af insekter er vigtige vektorer af parasitter, vira, filarial orme og bakterier, der forårsager betydelige sygdomme hos mennesker, kæledyr og husdyr på verdensplan. For bedst at beskytte folkesundheden og veterinære, skal de miljømæssige begrænsninger af pesticider undersøges for at informere effektivt brug af de mest hensigtsmæssige pesticidformuleringer og teknikker. Folkesundheden pesticid producenter er ikke påkrævet af US Environmental Protection Agency til at angive den forventede effekt af en formulering på tværs af en række miljøer eller målet insekter, men disse pesticider anvendes til myg og vektor kontrol på tværs af flere økologiske zoner i USA og rundt om i verden.

Vi har udviklet et forskningsprogram at vurdere talrige kombinationer af pesticider og pesticidudbringningsudstyr og -teknikker i hot-golde ørken, hot-fugtige tropiske, varmt og køligt tempererede og urban placeringer, for at udlede pesticidanvendelse retningslinjer særlige mål insekt og miljø1. I dette program evaluerer vi pesticider at målet voksen stadier af myg og sand fluer (adulticides) og umodne stadier af myg (larvicides) ved hjælp af pesticidudbringningsudstyr, der er hånd sted, lastbil eller fly-monteret, og installeret i faste placeringer. Derefter, fire store udendørs pesticider ansøgning teknikker evalueres: (1) ultra-lav lydstyrke (ULV) eller termisk tåge aerosol plads sprays af adulticides designet til hurtig knockdown målet insekter, (2) en variant af den første teknik i som flydende larvicides anvendes med ULV eller termisk tåge for kort eller lang sigt undertrykkelse af umodne stadier af målet insekter, (3) timet dug sprays fra faste placeringer designet til at frastøde eller dræbe og (4) lav volumen (LV) kold tåge sprays af resterende pesticider designet til at anvende langvarige giftige eller frastødende belægninger på en bred vifte af naturlige eller kunstige substrater. Præsenteres her er de detaljerede metoder for udførelse teknikker (1) og (2) ovennævnte. Metoder for (3) vil blive præsenteret i separate undersøgelser, og teknikker i (4) er beskrevet kort i tidligere publikationer2,3,4.

For at opnå denne komplekse forskningsprogram, designet vi et system af protokoller til at understøtte effektiv, omkostningseffektiv, bærbare og repeterbare/standardiseret evaluering af aerosol adulticide og larvicide teknikker med forskellige pesticider/udstyr kombinationer på tværs af flere miljøer. Kernen i disse protokoller er brugen af koloni-opdrættet sentinel myg (voksne og immatures) og sand fluer (voksne) til at angive rumlige og tidsmæssige mønstre af pesticiders effekt. Ved adulticide ansøgninger, er sentinel voksne myg eller sand fluer indeholdt i lille engangsbrug engangs bure fordelt i struktureret arrays gennem målområdet og en ubehandlet kontrolkultur område. For larvicide programmer fordeles små single-brug engangs kopper på samme måde for at indsamle sprøjtede larvicide dråber for senere indførelse af vand og sentinel koloni-opdrættet umodne myg. Næste, vi optage procent dødelighed i sentinel bure, eller procent voksen udvikling i sentinel kopper på bestemte intervaller efter spray og bruge disse data til at producere elektroniske kort af rumlige og tidsmæssige virkning i et geografisk informationssystem (GIS), som kan være kvantitativt i forhold mellem og blandt miljøer.

Ved hjælp af sentinel bure af kolonien opdrættet insekter at evaluere pesticid effektivitet i feltet er en veletableret praksis5,6, og ved hjælp af tomme plast sentinel kopper til indsamling af sprøjtede larvicide er ved at opstå i litteraturen7 . Men vores elektroniske kortlægning af effekten at visualisere rumlige og tidsmæssige mønstre af dødelighed er en nyskabelse, som i høj grad forbedrer undersøgelse af dødeligheden ellers præsenteret i flade tabelformater. Høj overførselshastighed buret lastning system og modulære bur installation system kan tilpasses til forskellige scenarier beskrevet her er også unikt for vores program. Andre forskningsprogrammer tilgang vurdering af pesticider ansøgninger i feltet forskelligt. Nuværende populære metoder omfatter opfange og analysere dye-mærket pesticid dråber fra sprøjtemidler i feltet på spinning glas dias8 eller akryl stænger9, som er en veletableret producerer procesdata, der kan tilknyttes elektronisk og visualiseret.

En ulempe er at Dråbestørrelse og tæthed målinger fra samling media skønnes kun fra en lille andel af den samlede samling overflade, med software-assisteret mikroskopi af felter holdning der er desværre meget subjektive. Også, kort over droplet distribution og tæthed ikke fuldt ud illustrere pesticid effektivitet, fordi antagelsen er, at tilstedeværelsen af en tærskel antal dråber af en vis størrelse automatisk angiver målet insekt dødelighed. Denne antagelse tager ikke højde for dødelighed fra fordampningsemissioner produkter fra dråber gennem målområdet, kan også fremkalde dødelighed10, eller at et lavere antal dråber eller andre droplet størrelser kan dræbe nogle andelen af target individer. Det oprindelige rationale10,11,12 er, at en aerosol pesticid er designet til at krænke små dråber på aktivt flyvende målet insekter. Men vores observationer i området, herunder reduktioner i naturlige populationer efter sprøjtning når målet insekter ikke aktivt flyvende, foreslå at dråber eller fordampning produkter fra dråber er ved at nå mål, som ikke er flyvende, men snarere skjulte i hvile refugier (ikke-offentliggjorte data 2011). Også, vi har observeret i analysen af et felt spray program (via samtidige droplet capture, pesticid aktive ingrediens opsamling og sentinel bure), kort over droplet distribution, aktive ingrediens distribution og dødelighed ikke er overensstemmende) upublicerede data 2010).

En anden populær tilgang til vurdering af pesticiders effekt implementering af sentinel bure i et gitter, afgrænset i en flad nyslået homogene område uden forhindringer pesticid plume, og på i nærheden af ideelle meteorologiske betingelser (f.eks. konsekvent Vind < 10 mph og vind retning vinkelret på linjen spray). Stadig, andre tilgang dette ved at måle effektivitet med sentinels placeret i vindtunneler14. Disse tilgange giver ét perspektiv om pesticiders effekt, men er mindre tilbøjelige til at realisere operationelle effektivitet under ikke-ideelle markforhold (heterogene levesteder, som omfatter forhindringer for pesticider flow og variabel hvis ikke under optimale meteorologiske forhold). Søger beviser til støtte for absolut effektivitet er ikke realistisk. Operationelle betingelser er sjældent ideelle, og at vælge formuleringer baseret på tests i vindtunneler eller direkte anvendelse i manipuleret parker kan være vildledende.

I vores forskning bruger vi naturlige felt websteder og givet vejrforhold (men ikke i regn eller ekstrem vind, der ligger uden for rammerne af et operationelt program). Dette er sandsynligvis mere informativ for operationelle vektor kontrol når observere rimelig effekt i en pesticidformulering trods dårlige miljøforhold, heterogene levesteder og forhindringer for pesticider flow. Når det er muligt, anbefales det at supplere sentinel insekt dødelighed data med før - og efter - surveillance af naturlige mål insekt populationer i områderne behandling og kontrol som en bro mellem kontrolleret eksponering og indså, at eksponering for de fokale pesticid. Overvågning af naturlige populationer er imidlertid ikke tilstrækkeligt at fastslå, om pesticidudbringningsudstyr producerer dødelighed i en målpopulation eller hvorvidt målet insekter faktisk flytte fra målområdet efter afsløring af modkørende pesticid aerosoler.

Uanset forbehold til enhver evaluering af pesticid sprøjtemidler i feltet bevarer elektroniske kortlægning af mortalitetsdata i en GIS (i modsætning til flade præsentation af dødelighed data i tabeller) de kvantitative attributter i stand til at strenge sammenligning på tværs af forsøg og også giver mulighed for hurtig, visuel vurdering. Med data fanget i GIS, forskere kan fastsætte tærskler for pesticider effekten og visualisere den relative evne af fokale pesticid på tværs af flere miljøer, eller de kan sammenligne kapaciteter af flere pesticider inden for en enkelt miljø på tværs af en vifte af udbringningsudstyr og teknikker.

Protocol

Bemærk: Denne protokol er skrevet specielt til markforsøg rettet mod voksne myg. Oplysninger om ændringer, der er nødvendige for umodne myg, andre voksne sentinel insektarter og unikke scenarier er inkluderet i diskussionen.

1. sentinel insekt opdræt og Sentinel bur præparater

  1. Konstruere voksen sentinel bure
    1. Bestemme det samlede antal sentinel bure til feltundersøgelse af herunder behandling og kontrol og antallet flergangsbestemmelser planlagt, hvorefter der tilsættes 5% for at udligne tab som følge af skader eller usædvanlig dødelighed (Se trin 2.1). Forberede 5 x 5 i tyl mesh firkanter (2 pr. sentinel bur) ved hjælp af en rullende disk cutter, lige kant og skærebræt med bulk tyl yardage. Butik tyl mesh firkanter i partier af 50 i 1 qt genlukkelig plastposer.
    2. Forberede sentinel bure ved forsigtigt at skubbe de fladt pap diske ud af bunden af nye ½ pt pap is kopper at skabe åbne 2 x 3 cylindre. For hver kop, fjerne de pap diske ud af 2 låg til at oprette open-ended kanter (1 for hver ende af cylinderen). Sikre en tyl mesh pladsen til den ene ende af cylinderen ved fældefangst det under ringen som ringen bliver stramt monteret til cylinderen.
    3. For hvert sentinel bur, Fastgør en krog og løkke kabelbinderen til en elastik og sikre elastik omkring den bezel, der er på plads. Taske sentinel bure i partier af 50, med en separat pose indeholdende 50 kanter og en taske af 50 tyl mesh firkanter.
      Bemærk: Tyl maskestørrelse skal være minimale hullet størrelse til at indeholde de særlige sentinel arter skal placeres i buret. Aedes aegypti myg kræver f.eks en mindre maskestørrelse end Culex quinquefasciatus myg.

Figure 1
Figur 1: Sentinel bur forberedelse. (A) vist her er to personale lastning sentinel bure med bedøvet myg fordelt på et stort hvidt ark papir. Stakken af tyl mesh firkanter i forgrunden klar til placering på venter åben sentinel bure skal bemærkes. (B) vist er flere indlæst sentinel bure, afventer placeringen af 10% saccharose vatkugler og Genjustering af elastikken. (C) vist er sentinel bure i en køligere, klar til installation i feltet. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

  1. Planlægning og opdræt koloni insekter
    1. For sentinel insekter, skal du vælge en art, der er mest hensigtsmæssige for miljø, sæson og medicinsk trussel i den placering, hvor retssagen finder sted. Overveje koloni kapaciteter og udviklingstid til voksen for at arter; Overvej for eksempel, hvis kolonien vil være i stand til at give antallet af prøver, der er nødvendige for antallet af sentinel bure kræves inden for tidsrammen.
    2. For alle opdræt, sikre befolkningen opdræt bure holdes i et kontrolleret miljø og er stor nok til antallet af voksne planlagt, og at en fodring og rengøring regime er etableret og nøje følges for at reducere senere stress-relaterede dødelighed, vil forvirre felt effektivitetsforsøg. For omfattende markforsøg, Planlæg at bageste sekventielle partier i separate godt mærket befolkning bure.
    3. Brug kun kvindelige myg i sentinel bure, helst 3-5 d efter eclosion. Myg pupper kan være sexed under et dissekere muligheder eller adskilt fysisk ved hjælp af et glas puppe separator for at reducere sortering indsats med voksne på sentinel buret lastning trin.
      Bemærk: En koloni skal kunne forevise fordoble antallet af myg planlagt til brug i sentinel bure, fordi kun hunnerne bruges til Sentinel. Bruge 10 voksne hunner for hvert sentinel bur, da dette nummer er hurtige til at indlæse, hurtig at tælle for dødelighed og let at afgøre, om nogen har undsluppet. Det er vigtigt at back-plan fra den foreslåede spray dato, således at 3 til 5 dage gamle voksne myg er tilgængelige. 3-5 d spredning giver dog nogle margen i tilfælde af en vejr hold forhindrer sprøjtning.
  2. Lastning sentinel bure
    1. Forberede et CO2 afdeling af foring i bunden af en ny ½ gal plastic mad opbevaringsbeholder med vatkugler. Direkte ene ende af en 6-ft længde af polyurethan slanger (¼ tommer diameter) til bomuld bolde gennem et hul, tætsiddende udstansede lavt i den ene side af beholderen. Vedhæfte en 20 lb CO2 flaske med en regulator til anden enden af røret og Læg låget løst på beholderen at tillade gas at undslippe efter spreder gennem vatkugler og cirkulerer gennem beholderen. Tape rør til bordpladen til at forhindre letvægts salen fra at blive trukket eller slået til gulvet. Angive en strømningshastighed hvilken art, der anvendes (starter ved ~ 7 L/min. og foretage justeringer efter behov).
    2. Forberede 10% rørsukkeropløsning i en ny ½ gal plastic mad container og nedsænkes 100 bomuld bolde, så de bliver fuldt mættet. Situationsplan sentinel bure fra trin 1.1 i partier af 25 eller 50 som plads tillader, med tyl mesh firkanter og løse kanter på side i nærheden.
    3. Fjerne myg fra befolkningen bur med en mekanisk betjent sug i stand til at kanalisere myg direkte i flytbare ventileret indsamling rør. Ikke mere end 10 ~ myg bør være indsugning i hver tube, og ingen flere rør end kan behandles inden for 10 min skal udfyldes for at mindske stress. Sted 2-4 rør på et tidspunkt ind i CO2 kammeret og indstille en timer for en 4-min eksponering til anaesthetize myg for efterfølgende kønsbestemmelse og overførsel til sentinel bure.
    4. Når timeren chimes, fjerne alle rør fra CO2 kammeret og forsigtigt ryste ud bedøvet myg fra rør til at sprede dem jævnt på tværs af en ren hvid 11,5 x 17 - i ark papir. Angiv timer for 4 min, som er den omtrentlige tid før myg bliver aktiv igen. Bruge en pistol indsugningsventil15,16 eller soft-touch insekt pincet til at udvælge partier af 20 voksne hunner og straks placerer dem i venten åbne sentinel bure. Når alle hunner har været plukket ud af den bedøvet batch, skal du bruge en separat mekanisk betjent sug til at indsamle alle resterende mandlige myg, som vil blive ødelagt ved frysning.
    5. Da hver venter åben sentinel modtager bur en batch af 20 voksne kvindelige myg, fælde en tyl mesh square med en bezel over åben øverste ende af bur cylinder, og tryk ned for at fuldføre sentinel bur forsamling. Når tyl er på plads, pivotere elastikken så at det lægger på tværs af begge mesh ender af sentinel buret, med hook og loop kabelbinderen placeret mod siden af cylinderen. Klemme størstedelen af 10% rørsukkeropløsning ud af et stykke vat, så de er stadig fugtig, lige før punktet af frit dryp, og forsigtigt tuck vat under elastikken mod tyl masken på den ene side af sentinel bur , let tilgængelige for myg.
    6. Gentag trin 1.3.3-1.3.5, indtil alle sentinel bure er indlæst.
      Bemærk: Buret lastning procedure bør omfatte mindst to personale: en til at gennemføre alle myg håndtering af trin og en anden til at foretage alle bur håndtering trin.
  3. Lastning sentinel bur kølere
    1. Forberede en 48-qt isoleret picnic køligere for hver 45-50 sentinel bure (afhængigt af mærke/størrelsen af køligere) ved at placere en våd 18 x 24 - i bomuld håndklæde i bunden er dækket af en 13-gal høje køkken Papirkurv taske. De våde håndklæde bør være vredet til punktet af mætning men ikke drypper. Fold og arrangere 13-gal posen for at helt dække bunden af køleren og mindst 3 i fra bunden på alle sider.
    2. Indlæse køligere ved omhyggeligt placere sentinel bure i stablet lag med bomuld bolde opad. Afhængigt af make af køleren, der bør være omkring 10-12 bure pr. lag og 4-5 lag. Hvis det er muligt, lidt forskudt hvert lag så at et bur ikke dækker helt buret nedenfor for at fremme luft flow. Dække det øverste lag med et andet 13-gal Papirkurv taske (foldet som bunden Papirkurv taske) og sprede en anden vådt håndklæde på toppen af denne taske.
    3. Brug gaffatape til at fastgøre et foldet stykke pap i en forreste hjørne af overlæben i den køligere, sådan at låg er understøttet åbne omkring 3/8 i for at fremme luft udveksling og forhindre overophedning. I hver køligere omfatte en 1-qt resealable plastikpose med 10 ekstra vatkugler gennemblødt i 10% rørsukkeropløsning, og en separat pose med 5 ekstra elastikker og 5 krog og løkke kabelbindere (disse komponenter er lejlighedsvis tabt fra sentinel bure under installation i feltet). Hele tiden i kølere i lab og felt, hinden rørsukkeropløsning i alle bomuld bolde på bure efter behov, ved hjælp af en dråbetæller og 10% rørsukkeropløsning opbevaret i en robust beholder.
      Bemærk: Med denne metode, typisk koloni myg kan indlæses i sentinel bure og gemt i kølere 24-28 h før brug i markforsøg.
  4. Transport af sentinel bur kølere til feltet
    1. Under transporten til feltet site holde sentinel bur kølere i et køretøj med aircondition men beskyttet mod direkte sollys. I feltet steder i mild til varme tempererede omgivelser, kan kølere stablet udendørs for at akklimatisere eller opbevares i køretøjer med aircondition kører; men i begge tilfælde holde kølere ud af direkte sollys. Watch for enhver omgivende betingelser udendørs, der kunne påvirke sentinels i kølere (fx., køretøjets udstødningsgas, trash brande, osv.)
    2. I ekstrem varme miljøer, holde kølere i køretøjer med aircondition løbe tør for direkte sollys, men akklimatisere sentinels gradvist til udendørs forhold før installation til behandlingsområdet for at undgå døden fra chok. I alle miljøer, Overvej at teste en eller to kølere af sentinel bure til at bestemme, hvor længe de kan udelades, eller hvor hurtigt de kan blive akklimatiserede til lokale udendørs forhold.

2. forberedelse af webstedet felt

  1. Om oprettelse af området sentinel gitter og kontrol
    1. Vælg en undersøgelse område, der giver tilstrækkelig plads til spredning af den planlagte tilstand af pesticidudbringningsudstyr (antenne, lastbil eller transportabel) med en klar vej til bevægelse af enhedens spray og klar af menneskelig bosættelse eller aktivitet. Hvis det er muligt, omfatte en bred vifte af vegetation tæthed og generelle heterogenitet af levesteder til at udfordre spray penetration.
    2. Designe et gitter af steder for sentinel bure, der fanger variationer i afstand fra sprøjten, afstand langs linjen spray, vegetation/hindringer spray penetration og højde over jorden. Bruge en 300 ft måling tape hjuls for at markere praktisk intervaller fra sprøjten og langs linjen spray; for eksempel bruge multipla af 25 ft intervaller.
    3. Producere et kort over nettet ved at markere op en udskrift af et satellitbillede med et klart nummerering kode for sentinel bur placeringer og distribuere det til feltet team. Når det er muligt, få GPS koordinater for hvert bur placering eller på mindst koordinater af fremtrædende funktioner, der kan senere bruges til registrering point til at bygge et rumligt sammenhængende kort i GIS.
    4. Markere sentinel bur gitter steder på jorden med udflagning tape, glød pinde og pin flag. Pesticid sprøjtemidler foregår ofte i skumringen eller om natten: forsøger at klare forskellige vandrestier til alle sentinel placeringer, herunder ekstra udflagning tape og/eller glød pinde for at markere tur farer eller andre betydelige hindringer.
    5. Installere sentinel bur montering poler i jorden efter gitter design, og tydeligt mærke hver stang med en kode for sin unikke position med en permanent markør. Mindst 48 inches af stangen skal være over jorden. Hvis levested ikke giver naturligvis vegetation/hindring udfordringer til pesticider spray dispersion, overveje at placere en 1 ft3 papkasse på sin side med den øverste åben ved siden af hver sentinel bur pole, at give en ekstra sentinel placering inden for simuleret refugier. Luftstrømmen gennem boksen kan justeres ved at bore ½-i huller i en eller flere sider, og kasser skal være mærket med en unik positionskode med en permanent markør.
    6. Hvis der er en risiko for myrerne angriber sentinel myg, installere sentinel bur montering poler gennem en tætsiddende hul boret midt på en 18 x 18 - i selvklæbende gulv fliser, med den klistrede side opad for at fælde myrer, før de kan nå sentinels. 1 ft3 kasser fra trin 2.1.5 kan også placeres på den klistrede side af sådanne fliser til at hindre myrer, og også til at holde kasserne på plads i blæsevejr.
    7. Etablere en vindretningen kontrolområdet (bestående af en lignende vækststeder og meteorologi som behandlingsområdet) til indsættelse af ubehandlet kontrol sentinel bure udsat for miljøet på pæle og/eller i 1 ft3 kasser i den samme mængde tid som sentinels i behandlingsområdet. Et bestemt team af personale med separat kølere af sentinel bure skal være dedikeret til håndtering af alle kontrol sentinels.
    8. Ressourcer tillader det, designe en fordeling af passende fælder i hele behandlingsområdet, områder støder op til behandling areal og kontrolområder at foretage overvågning af lokale naturlige populationer af myg, der er tættest på de arter, der er valgt i 1.2.1. Begynde dagen eller natten overvågning, afhængigt af art, under en eller flere af 12-24 h perioder før spray forsøg skal finde sted. Fortsætte overvågning i hele spray forsøg, efterfulgt af overvågning for en eller flere perioder efter spray forsøg.

Figure 2
Figur 2: forberede felt site med sentinel bur polakker. To scenarier for sentinel bur polakker fordelt i (A) vandede tropiske microhabitat i en hot-tørre regionen og (B) hot-golde ørken. (A), tre former for sentinel apparater er vist: "stige" til venstre er en serie af bomuld bånd suspenderet mellem PVC-rør til at fange pesticid i forskellige højder over jorden; pole i midten er for sentinel myg bure; og pole til højre understøtter en slide spinner for at fange pesticid dråber. I (B) der er en lignende bomuld bånd til at fange pesticider, men det skal bemærkes, at den højre støtte af apparatet i forgrunden i åbne fordobler som en sentinel bur pole (sentinel bur knyttet omkring en tredjedel af vejen ned); derimod er apparater i baggrunden placeret således at båndet og sentinel buret (markeret med gul pil) er beskyttet inden for vegetation. Fly i baggrunden er at gennemføre en ULV pesticid spray. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

  1. Praktiserende sikkerhed
    1. Etablere et kommunikationssystem blandt spray team, behandling område sentinel håndtering team, kontrol område sentinel håndtering team, osv., via mobiltelefoner (stemme/tekst) eller håndholdte radioer.
    2. Levere personlige værnemidler (PPE) til alt personel, der er relevante for deres roller og passende for pesticider formulering og anvendelse udstyr.
    3. Etablere et pesticid opbevaring og blanding/Lastefladens beskyttet med sekundære indeslutning og fyldt med nødudstyr, såsom skovle og/eller brandslukkere til termisk tåge applikationer, håndklæder skal indeholde spild eller drypper, affaldscontainere, ren vand, førstehjælp forsyninger og bærbare øjenskyller stationer. Vigtigere, fastlægge protokoller i tilfælde af udslip eller personale eksponering for kemikalier.
  2. Mærkning linjen spray og optagelse meteorologi
    1. For kørsel eller hånd-carry programmer, Sørg for spray linje er klar og at hindringer identificeres og tydeligt mærket med udflagning tape, pin flag, og/eller glød pinde. Antenne applikationer, træffe alle passende foranstaltninger med air traffic control.
    2. Grundlæggende længden af linjen spray skal matche dimensionerne af nettet; dog indstille start og stop punkter godt-før og godt-efter gitteret. Tilføje ca 10% af den grundlæggende længden af linjen spray til begyndelsen og slutningen til at øge muligheden for hele nettet for at blive udsat for, givet uundgåelige forskydninger og ufuldkommenheder i vindmønstre (Se repræsentative resultater).
    3. Når det er muligt, forventer store vind forskydninger, oprettet alternative spray eller linjer og design sentinel gitter til at være informative fra begge spray retninger. Operatoren spray bør være parat til at stoppe sprøjtning kort Hvis vinden begynder at gust dårligt eller skifter pludselig, der kan oprette en sikkerhedsrisiko. Operatøren kan genoptage sprøjtning når det er hensigtsmæssigt, og retssagen kan stadig producere brugbare effektivitetsdataene, så længe kontrollen er holdt i miljøet for en lignende udvidede periode.
    4. Placere mindst én vejrstation med en data recorder kan måle temperatur, relativ luftfugtighed, vindhastighed og Vindretning i spray-området og en anden i kontrolområdet. Også, oprette en simpel vind indikator bånd (ca 2-3 ft af lyse farvede udflagning tape) på en ekstra sentinel bur pole spray operatør og feltet team at øge samlede bevidsthed om betingelser. For sprøjtning ansøgninger, bør flyet ideelt set kunne rapportering meteorologi på release højde.
      Bemærk: Samarbejde med et universitet, offentlige sundhed organisation, myg og vektor kontrol distrikt eller andre agenturet med kendskab til området foreslået at gennemføre markforsøg, sådan at eksisterende partnerskaber og forståelser med grundejere eller jord stewarder kan bygges videre og bidrage til at udvikle forskningsprogrammet. Eksisterende partnerskaber oversætte webstedet sikkerhed, lang tids brug, og i nogle tilfælde, kritiske buy-in og accept af offentligheden. Med struktureret gitre er det ligetil for lokale samarbejdspartnere til at udvikle deres egne nummerering/mærkning ordninger for hurtige og repeterbare installation, samling og dødelighed kontrol af sentinel bure. Når gitter, spray linje og meteorologi er sat op, kan materialerne, der stå i sted (for eksempel natten indtil et praktisk spray, eller hvis der er et vejr hold).
      Forsigtig: Papkasser kan deformeres når vådt hvis det regner, og kraftig vind kan flytte tunge klæbende gulvfliser.

3. installation af Sentinel bure

  1. Bestemme på forhånd positionering af sentinel bure på hver sentinel punkt i gitteret, som højden af bur på montering pole (herunder multi højde, hvor man kan placeres i bunden af stangen og en anden på toppen), eller om bure bliver placeret jeg n 1 ft3 kasser.
  2. Tildele 2-person sentinel bur Distributionsgrupperne: en til at holde køleren og en anden til at trække ud sentinel bure efter behov. Alternativt kan du tildele personer til at bære og placere flere bure afhængigt af miljø- og størrelsen af gitteret. Altid omfatte ekstra sentinel bure i tilfælde af en er faldet eller trådte på, tyl er revet eller en er tabt mens du flytter gennem gitteret.
  3. Per positionering regimet som beskrevet i trin 3.1, bruge krog og løkke kabelbinderen at anbringe sentinel bure til polakker og sørg for, vatkugler med 10% rørsukkeropløsning er stadig på plads under elastikken. Placer bure på deres sider i 1 ft3 bokse, så begge tyl mesh ender er vinkelret på jorden. Orientering af bure på pæle kan specificeres på forhånd; for eksempel, vind sådan at mesh tyl sider er i overensstemmelse med den planlagte spray retning og forventet retning. I varme ørken miljøer, vinkel bure på polerne sådan insekter er ikke i direkte sollys og kan flytte ind i skyggen af siden af cage cylinder.
  4. I både behandling og kontrol, tydeligt mærke hver sentinel bur med en permanent markør som det er sat på plads med to stykker af oplysninger: (1) pole og/eller boksen unikke position kode for senere kortlægning i GIS, og (2) før spray dødelighed for senere korrektion for spray-induceret dødelighed eller dødelighed fra eksponering til miljøet uanset spray. For eksempel, hvis pre spray dødelighed er nul, skrive "pre-0"; Hvis 2 enheder er døde, skrive "pre-2", osv.

Figure 3
Figur 3: placering af sentinel bure indendørs og udendørs. Eksempler på pole placeringer og 1 ft3 kasser a indendørs i en simuleret landdistrikter residence, b udendørs i et simuleret kvarter, og (C) i en dato palm grove i en hot-tørre zone. Også vist er klæbrig fliser under boksen og sentinel bur placeret i åbne i (A), og sentinel bur pole pin skubbet gennem klæbrige flisen ved siden af boksen i (B) at begrænse indtrængen af myrer i sentinel bure. Krydsfiner firkantet med oprejst PVC mount til venstre for feltet i (A) er en støtte til et dias spinner. En lignende apparater kan anvendes til støtte for sentinel bur polak til at tillade placeringen af sentinels i varierende højder. Også vist er slide spinner med dias på en mount til venstre for sentinel bur pole og boks (B). I (C) er vist en high-low placering af to sentinel bure at undersøge bevægelse af pesticider på forskellige niveauer. Toppen af åbnede sentinel buret køligere er kun synlige i forgrunden. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Bemærk: Afhængigt af størrelsen af gitteret, sikre, der er tilstrækkeligt personale til at implementere alle bure i en passende tidsramme at minimere miljømæssige virkninger på sentinel dødelighed. Det kan være nødvendigt at gennemføre praksis kører med Tom bure at afgøre hvorvidt nok personale er til stede. Det forudsættes, at der uundgåeligt vil være nogle spredning i eksponeringstid for sentinel bure til miljøet, som følge af set-up tid med det givne antal bure pr. person. I meget store sentinel gitre (f.eks. for nogle antenne applikationer), har planer om at koordinere flere hold i flere køretøjer til at placere sentinel bure inden for en rimelig tidsramme. Det er uundgåeligt, at nogle dødelighed vil opstå på tværs af sentinel bur myg befolkning, så det skal regnskabsføres med omhyggelig bur mærkning inden miljøeksponering udenfor kølere og før pesticidudbringningsudstyr.

4. udførelse af pesticidudbringningsudstyr

  1. Tildele en tidtager at spore anvendelse spray varighed (start/stop gange) og holde gange benytter et stopur, ur eller digital video med tid/dato frimærker. Tidtager kan også tildeles en skriver at fange flere vigtige variabler, herunder gang på som sentinel bur installation er fuldført, flyver, køre, walking hastighed, ansøgning enhed strømningshastighed, pesticid koncentration og fortyndingsmiddel, spray tid, hold gang, gang på som bur samling er afsluttet og generelle habitat observationer.
  2. Forberede pesticidudbringningsudstyr pr. producent retningslinjer og indlæse pesticid (og fortyndingsmiddel hvis nødvendigt), ved hjælp af minimumsbeløbet dækker målområdet plus et forud fastsat beløb for at tage højde for spray linje diskenheder og pesticider reservoir bundkar at undgå kavitation under spray. Overskrid ikke program satser angivet på etiketten pesticid og ikke bruger pesticider ikke godkendt af US Environmental Protection Agency, medmindre en eksperimenterende brug tilladelse specifikke for placeringen af feltundersøgelse er blevet sikret.
  3. Etablere en tilstrækkelig efter spray hold tid, der vil tillade pesticidrester spray plume at sprede hele gitteret sentinel bur før sentinel bure er indsamlet. Hold tid er baseret på en afbalanceret overvejelse habitat/vegetation tæthed, meteorologiske betingelser (navnlig ekstrem varme eller vind), Doseringsudstyr, programtilstand (antenne, landkøretøj, bærbare), target insekt og pesticidformulering, og kan kræve indledende forsøg at udvikle effektivt.
  4. Når kontrolfugleunger bure er mærket og indsat i både behandling og kontrol områder og alle nøglemedarbejdere har meddelt parathed, har spray operatøren foretage en sidste kontrol om vindens hastighed og retning og indlede antenne, formalet eller bærbare sprøjten pesticidudbringningsudstyr fra den udpegede spray eller alternative spray linjer efter behov. Indstille flyvende, kører eller walking hastigheder afhængigt af anvendelsen enhed strømningshastigheden og pesticider etiket.
  5. Når programmet spray er fuldført, har den tidtager markerer begyndelsen af hold tid og underrette alle personale 1-2 min før hold tid vil forløbe, således at alle personale kan flytte ind i position og forberede indsamling sentinel bure.
    Forsigtig: Overhold alle sikkerhedsforanstaltninger, der er angivet på etiketten pesticid ud over standard pesticid applikator bedste praksis. Pesticid programmer bør foretages af en certificeret pesticid applikator med, hvis det er muligt yderligere certificering i kategorien folkesundheden pesticid. Før programmet spray sikre alle ansatte er vindretningen af modulet, eller i køretøjer med aircondition på recirkulere hvis de skal være i målområdet, og/eller iført passende PPE. Sikre alle sentinel bur kølere er lukkede og at inde i lukkede køretøjer parkeret vindretningen af programmet spray har air conditioning recirkulerer.

Figure 4
Figur 4: køretøj monteret termisk tåge sprøjtning et gitter i varme tørre ækvatoriale placering. En lastbil monteret ULV sprøjte kørsel langs en spray linje lede pesticider spray gennem et gitter af sentinel bure på en åben mark (A). Svarende til figur 2, hver sentinel position er udstyret med en anden Pol til at støtte en bomuld bånd for at indsamle pesticid dråber til senere analyse med gaskromatograf/massespektrometri. Nærbilleder af sentinel bure (B) i varme tempererede omgivelser før spray og (C) i et hot-golde miljø efter spray. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

5. indsamling af Sentinel bure og optagelse dødelighed Data

  1. Brug de samme sentinel bur hold for at indsamle bure hele gitteret, når hold er udløbet. Alle personer, der håndterer post spray bure skal bære engangs nitrilhandsker for at minimere menneskelig kontakt med pesticider. Tilbage efter spray bure til den beskyttende miljø for sentinel bur kølere snarest, gemt i en cool køretøj ud af direkte sollys, og vendte tilbage til laboratoriet til behandling så hurtigt som muligt.
  2. I både behandling og kontrol er det kritisk at registrere post spray dødelighed på hvert sentinel bur med en permanent markør, da det er indsamlet. Efter spray dødelighed count bør omfatte alle døde myg i buret, og dette tal bør skrevet støder direkte op til den "før" tælle, men kredsede klart nok for at skelne det fra pre-eksponering dødelighed tæller. Senere, vil før Greven trækkes fra post count til at opnå den faktiske dødelighed fra eksponering for pesticider (spray område) eller miljø (kontrolområdet). Forsøg ikke at udføre dette math i feltet mens skyndte sig at samle sentinel bure.
  3. Forsøg på at vende tilbage sentinel bure til arbejdsområdet lab indenfor 6 timer efter spray, så 6 h dødelighed count kan registreres. I laboratoriet, overføre alle bure til plastik bakker, kassere alle elastikker, krog og løkke kabler bånd og vatkugler. Hver bakke bør holde ca 20 sentinel bure gemt med mesh tyl parallelt med jorden. Placere en ny 10% saccharose løsning vat på alle bure og dække hver bakke med et nyt fugtig bomuld håndklæde, svarende til dem, der anvendes i sentinel bur kølere. Stak bakker på en lab bænk eller i en inkubator ved hjælp af ½-i PVC rør afstandsstykker. Store bakker med bure fra arealer under behandling godt adskilt eller i forskellige væksthuse, der styrer bur bakker.
  4. At This point, overføre før og efter spray dødelighed data fra hvert bur til dataformularer som 6 h dødelighed optællingen er foretaget: en person iført engangs nitrilhandsker bør tage sentinel bure ud af bakker én efter én for hvert bur, råber 1) unikke lokationskode, derefter 2) før Greven og umiddelbar efter optællingen læse fra buret sig selv, efterfulgt af 3) nuværende 6 h tælle observeret direkte. En anden person skal registrere disse data på forberedte former har en række for hver unik positionskode fra trial (tabel 1). Gentag denne proces på 12 timer og 24 timer efter spray, lagring i skufferne i stabile forhold mellem dødelighed tæller.
  5. Når optællingen 24 h dødelighed er færdig, fastfryse alle bakker af sentinel bure til at dræbe alle enheder, og derefter foretage endelige tæller for hvert bur til at opnå en nøjagtig nævneren for beregningen af procent dødelighed. Hvis der mangler et eksemplar fra et bur, se direkte under den i skuffen, hvor det kan have tørret ud og faldet igennem. Bortskaf alle sentinel bure, bomuld håndklæder og plast Papirkurv taske liners i forseglede skraldeposer i normal trash, og grundigt rense alle kølere og bakker med sæbe og vand og lufttørre dem i direkte sollys.
    Bemærk: Larve bakke spacere er let fremstillet af PVC stock rør, med et hak, skåret i hver ende, så de ikke kan rulle ned af bakkerne. Afstandsstykker tillade stabling af larve bakker at spare plads i køretøjer, væksthuse eller lab bænke. For nogle områder, kan det ikke være muligt at vende tilbage til laboratoriet inden for 6 h; i hvilket tilfælde overføre bure fra kølere til bakker i feltet ved hjælp af ovennævnte protokol og materialer og stak dem forsigtigt i den airconditionerede bil. Optagelse dødelighed i hvert bur umiddelbart efter post Sprayen holde tid og på ca. 6 h, 12 h, og 24 timer efter spray vil give oplysninger om knockdown (kortfristet) vs langtidsvirkninger af pesticidet.

Figure 5
Figur 5: forarbejdning sentinel bure efter spray. To scenarier for at overføre post spray bure i stablet bakker under 6 h dødelighed check: (A) i et hotelværelse nær en remote field site og (B) i en bekvem parkeringsplads vender tilbage til laboratoriet fra en fjern felt site. Bemærk PVC afstandsstykkerne i inset foto i (A), fugtige håndklæder dækker bure, der er fastlagt i bakker i de vigtigste foto af (A), og et eksempel på en unik Lokationskode og pre og cirkel efter spray dødelighed kommenteret direkte på en sentinel bur i inset foto i (B). Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

6. behandling, analyse og kortlægning af dødelighed Data

  1. Overføre alle hånd-indspillet dødelighed data fra formularer i et elektronisk regneark, og Beregn 4 nye kolonner til efter spray, 6 h, 12 h og 24 h dødelighed, (alle korrigeret for pre spray dødelighed).
  2. Korrigere alle behandling område dødelighed data for mortaliteten i 4 yderligere nye kolonner ved hjælp af Abbott korrektion17: beregne en gennemsnitlig mortaliteten på tværs af alle kontrol sentinels for hver tidsperiode, at dødeligheden var registreret (dvs. efter spray, 6 h, 12 h og 24 h; alle korrigeret for pre spray dødelighed), og bruger denne mener at Abbott-rette dødeligheden i hver behandling område sentinel bur for hver tilsvarende tidsperiode. Grænsen for acceptable mortaliteten vilkårligt kan bestemmes baseret på arter af sentinel myg brugt men må ikke overstige 25%18.
  3. I et geografisk information system kort alle unikke sentinel bur placeringer ved hjælp af GPS-data indsamlet i trin 2.1.3 og skabe 4 kolonner for Abbott-korrigeret dødelighed for de 4 dødelighed tidsperioder i tabellen attribut for disse steder. Oprette en interpoleret dækning for dødelighed for hver af de 4 dødelighed tidsperioder på tværs af alle unikke sentinel placeringer i behandlingsområdet. Tilføje disse interpolerede dækningsområder til kortet og bruge en strakte farvekilden på en blå til rød spektrum orienterede lav (blå) til høj (rød).
  4. Forbedre kortet over behandlingsområdet med en underliggende satellitbillede og tilføje sentinel bur positioner (skelne mellem behandling og kontrol sentinels), spray linje, kørsel retning, skalalinjen, north pil, interpoleret dødelighed farve rampe nøglen, nøglen til symboler, og en detaljeret titlen med dato, naturtype, pesticider og fortyndingsmiddel bruges, udstyr anvendes, og målrette arter. Eksportere en kort billede for hver dødelighed periode overflade.
  5. Tilføj meteorologiske oplysninger som en inset graf og omfatter en separat Vindrosen (polar plot) til at vise herskende vind, vindhastighed og variabilitet i hele perioden spray. Tilbyde desuden separat meteorologiske data for frigivelse højde ved sprøjtning ansøgninger.
  6. Graf naturlige lokalbefolkningen overvågningsdata som et indeks over antallet af hunner af hver art indsamlet pr. fælde pr. aften. Output en række grafer partitioneret af placering (støder op til behandling areal, inde i behandlingsområdet, og inde i kontrolområdet) og periode (stikprøven før, under eller efter spray forsøg) og placere dem separat som mellemværker i de vigtigste GIS kort for at vise effekter på naturlige populationer over tid inden, støder op til og fra pesticid programmet.

Representative Results

Her er repræsentative resultater præsenteret fra to ikke-offentliggjorte feltundersøgelser, der indeholdt kernen i de metoder, der er beskrevet ovenfor. I disse undersøgelser sentinel to aspekter af adulticide virkning mod sygdom vektor insekter blev undersøgt.

Den første undersøgelse (ikke-offentliggjorte data 2010-2012) undersøgte, hvorvidt fortyndingsmiddel kan påvirke effekten af pesticid mod myg i en hot-golde ørken miljø påføres med en termisk tåge enhed. Vi gennemførte tre separate programmer med en synergized permethrin adulticide i stand til at være fortyndet i enten olie eller vand. Hvert af programmerne blev gennemført ved hjælp af en lastbil-monteret termisk tåge generator med et andet fortyndingsmiddel: vand, BVA13 mineralolie eller diesel. Derefter et gitter af mindst 20 sentinel myg bure placeret på pæle i et åbent tørre-jord område (figur 6) blev brugt og meteorologi blev indspillet ved hjælp af en bærbar vejr optager.

Den anden undersøgelse (ikke-offentliggjorte data 2011) undersøgt den relative effekt af en enkelt pesticidformulering anvendes samtidig med to slags sprøjter (ULV og termisk tåge) i et varmt Ækvatorial miljø mod sand fluer. Vi brugte to tilstødende gitre af 25 sentinel sand flyve bure placeret på pæle i lavt græs-radiokortet habitat af varierende tæthed i et stort felt i et varmt Ækvatorial dalsænkning (figur 7). Meteorologi blev indspillet ved hjælp af en bærbar vejr optager placeret mellem de to gitre. Én lastbil transporteres ULV enhed og en anden termisk tåge generator, og begge indviede sprays retning spray på samme tid, hver bevæger sig fra øst til vest i en fart er relevant til etiket-angivet dosering og får strømningshastigheden af den sprøjten.

I både feltundersøgelser, efter en 10-min hold tid efter spray, indsamlet vi alle sentinel bure fra behandling og kontrol områder, samtidig indlede processen med at optage efter spray dødelighed. Procent dødelighed data blev derefter kodet, korrigeret for observerede baggrund sentinel mortaliteten, og placeret i en GIS dækning bestående af georefererede point svarer til placeringen af sentinel bure i gitteret behandling område (figur 6 og figur 7). Trods den ideelle situation, hvor et pesticid spray producerer en 100% dræbe hele målområdet, er realistisk tærsklen for acceptabel effekten af et pesticid vilkårlige. Forventninger til effekten kan variere med afstand fra sprøjten (fx indstille en tærskel på 95% dødelighed 50 ft fra linjen spray med 80% dødelighed på 250 ft).

Resultaterne fra begge repræsentative undersøgelser naturligt Vis spektrum af positive til negative resultater, fordi farvekilden repræsenterer områder af 0 til 100% dødelighed (Se farve ramper i figur 6 og figur 7). Alle mortalitetsdata i behandlingsområdet er normaliseret af baggrund dødeligheden i ubehandlede kontrolområdet til en tærskel på 25% kontrol dødelighed18, over hvilket ville have kasseret på grund af overdreven miljømæssige eller koloni effekter på dødelighed. Nytte af den elektroniske kortlægning tilgang til at visualisere mortalitetsdata fremgår her: forskeren og (senere) læseren straks kan forstå de relative effekten af de fokale pesticider og fortyndingsmidler (figur 6) eller den fokale pesticid sprøjter (figur 7) imod myg eller sand flyver, henholdsvis. Det er værdifuldt at sammenligne figur 6 med de underliggende dødelighed data, der ville traditionelt fremlægges i tabelform (tabel 2) og kræver meget mere interne konceptualisering, med rimeligt øgede risikoen for fejl, af forsker og læser ens. Den elektroniske kort letter hvis suppleret med meteorologiske data og et satellit-foto base dækning, også hurtig evaluering af potentielle effekter af habitat på pesticid-programmer. Det skal bemærkes, at indsatser Vindrosen diagram i figur 7 har en vinden vinkel, der passer perfekt til vinklen af rumlige dødelighed i gitteret west, der angiver, at spray lastbil skulle være startet længere mod øst, således at pesticider ville have en mulighed for at nå alle sentinel bure. Hvis dødelighed data er kun været overvejet i tabelform, kan det være let at gå glip af denne svaghed i den eksperimentelle design og tildele en lavere samlet effektivitet til at pesticidudbringningsudstyr, partisk, af nulværdier dødelighed fra områder ikke kontaktet af den pesticid.

Vores erfaring producerer fleste pesticider programmer i feltet en gradient for dødeligheden gennem target område sentinel bure, som automatisk viser, at programmet var gyldig. Men hvis nul dødelighed er observeret i hele behandlingsområdet og hændelsen spray er gyldig (dvs. den spray sky bevæger sig gennem sentinel målområdet er observeret), kan det udledes at pesticidet ikke er effektivt med denne art i takt anvendt, i dette miljø, og med dette udstyr. Dette er naturligvis, at pesticider batch ikke er udløbet eller har været opbevaret forkert. På den anden side nogle antenne pesticid programmer især kan producere ingen synlige eller påviselig spray cloud påvirker målområdet, og nul dødelighed i hele sentinels kan betyde at spray glip af målområdet. Det tilrådes at foregribe dette scenario ved at oprette en serie af ekstra sentinel bure der parentes indvirkning målområdet til nogle afstand vindretningen og vindretningen (f.eks. 50 ft intervaller for mindst én skår bredde i hver retning) så som en indikation af touchdown af pesticidet kan blive forstået, hvis målområdet er savnet.

Figure 6
Figur 6: repræsentant interpoleret sentinel bur dødelighed data fra en feltundersøgelse i hot-golde ørken betingelser rettet mod myg. I denne serie af sprøjtemidler, blev termisk tåge pesticid sprøjten, pesticider og miljø holdt konstant, varierende blandt pesticid fortyndingsmiddel at (A) vand, (B) diesel og c BVA 13 mineralsk olie på tværs af de tre forsøg. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 7
Figur 7: repræsentant interpoleret sentinel bur dødelighed data fra en feltundersøgelse i varmt Ækvatorial betingelser rettet mod sand fluer. I dette sæt af to samtidige spray applikationer pesticid og miljø blev holdt konstant, men pesticider sprøjten var anderledes mellem de to gitre: termisk tåge (west gitter) og ultra-lav lydstyrke (ULV, øst gitter). Bemærk at vindretningen angivet i Vindrosen diagram perfekt matcher vinklen af rumlige dødelighed i gitteret west, der angiver, at spray lastbil skulle være startet længere mod øst, således at pesticider ville have mulighed for at nå alle sentinel bure. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

PROJEKT:
ØKOLOGISK ZONE:
BELIGGENHED:
FELTET WEBSTED:
ANVENDELSESDATO:
SPRAY UDSTYR:
PESTICIDFORMULERING:
FORTYNDER:
SENTINEL INSEKTARTER:
LIVSSTADIUM AF SENTINEL:
DØDELIGHED KONTROL
[kopieret direkte fra sentinel burene data observeret i felt] [observeret fra sentinel bure gemt i magasinerne]
Sentinel bur kode Nej. FØR DØDE Nej. DØD POST-SPRAY/HOLD TID Nej. DØDE 6 timer efter SPRAY Nej. DØDE 12 timer efter SPRAY Nej. DØDE 24 timer efter SPRAY
Behandlingsområde A1
A2
A3
A4
A5
B1
B2
B3
B4
B5
C1
C2
C3
C4
C5
D1
D2
D3
D4
D5
E1
E2
E3
E4
E5
Kontrolområdet Kontrol 1
Kontrol 2
Kontrol 3
Kontrol 4
Kontrol 5
Kontrol 6
Kontrol 7
Kontrol 8
Kontrol 9
Kontrol 10

Tabel 1: prøve dødelighed dataformularen. Formen har rum for generelle oplysninger om feltundersøgelse i øverst til venstre, som er afgørende for at administrere data fra flere feltprojekter. Den vigtigste del af formen har rum for præ- og post spray dødelighed (begge kopieret direkte fra sentinel bure), gennem den senere 6 h, 12 h og 24 h kontrol. Håndskrevne data på denne form er indgået en lignende elektronisk regneark, med ekstra kolonner at korrigere mortalitetsdata for pre spray døde og korrigere spray område dødelighed for eventuelle miljømæssigt induceret dødelighed i kontrolområdet.

PROCENT DØDELIGHED (ABBOTT-KORRIGERET)
Sentinel bur kode (A) Aqualuer + vand (B) Aqualuer + Diesel (C) Aqualuer + BVA13
A1 1 0,78 0,54
A2 1 1 0,05
A3 1 0,29 0
A4 1 0,04 0,03
A5 1 0,04 0
B1 1 0,79 0
B2 1 0,82 0
B3 1 0,15 0
B4 1 0,21 0,15
B5 1 0 0
C1 1 0,93 0
C2 1 0,71 0,01
C3 1 0,32 0
C4 1 0,26 0
C5 1 0,46 0
D1 1 0,67 0
D2 0,78 0,24 0,01
D3 0,97 0,5 0
D4 1 0,27 0,03
D5 1 0,33 0
E1 1 0,82 -
E2 1 0,88 -
E3 1 1 -
E4 1 0,79 -
E5 1 0,78 -

Tabel 2: underliggende dødelighed data bruges til at oprette de interpolerede effekt kort i Figur 6 . Det skal bemærkes, at visse geografisk information kan blive fanget i denne tabel; Dette kan eksempelvis gøres ved at adskille rækker og kolonner af afstand fra sprøjten og afstand langs spray linje, henholdsvis. Dog ville tidsmæssige ændringer i dødeligheden svarende til umiddelbar efter spray, 4 h efter spray og 12 timer efter spray, for eksempel, kræve en mere kompleks tabel eller flere tabeller. På samme måde, separate tabeller for hver infusionsvæsken anvendes i forsøg er nødvendige for klarhed, hvis tabellerne er adskilt af tid og rum.

Discussion

Kombinerer klassiske sentinel bur tilgang med elektroniske kortlægning af interpoleret dødelighed data er en unik og kraftfuld metode til at evaluere pesticider i feltet, og det understøtter sammenlignende pesticid effekt studier på tværs af flere miljøer og forskellige konfigurationer af pesticider og anvendelsen teknikker. Selvom metoden grundlæggende sentinel bur ikke er ny, er visualisering af sentinel bur dødelighed mønstre i en GIS et avancement befordrende for dybere analyse af mønstre af strømmen af aerosol pesticid sprays. Interpolation af punkt målinger af pesticiders effekt i et farvekodede kortdækning er lig tilføjer røg udbrud til en vindtunnel til at visualisere luftstrøm omkring en bil, og det er en stor forbedring for rapportering rumlige og tidsmæssige dødelighed data i en række tabeller.

Nogle dele af pesticid sprays kan ses med det blotte øje, og pesticider dråber fra usynlige dele af sprøjtemidler kan blive fanget på glas dias eller andre medier, som gerne sentinel bure, er veletablerede protokoller. Fordampningsemissioner produkter fra dråber og dråber, sig kan fanget med bomuld bånd og analyseret med en gaskromatograf/masse spektrometer, som giver endnu flere oplysninger om skæbnen af et pesticid spray. Men den realiserede effekt af spray og rumlige mønstre af faktiske pesticid-induceret dødelighed i målområdet, (som kan omfatte både droplet og fordampningsemissioner produktkomponenter) kan kun endeligt måles ved sentinel insekter.

Desuden, den tidsmæssige komponent af effekten kan kun endeligt måles ved en række dødelighed observationer i sentinel insekter at fange kvantificerede indeks af hurtige knockdown versus lang sigt sygelighed og dødelighed på målet arter. Igen, en serie af interpoleret farvekodede kort kan bruges til at visualisere klart udviklingen af post spray dødelighed over tid, med en eksplicit fysisk komponent, således, at en række tabeller ikke er i stand til at kommunikere til en læser. Serie af kort kan være animerede i en løkke til at reproducere fremskridt af spray og dens virkninger på sentinel insekter, yderligere forbedre forståelsen af effekt ikke kun for en enkelt retssag, men i sammenligninger af pesticider, teknikker, ansøgning udstyr, målet insekter og økologiske zoner.

For den højeste kvalitet mortalitetsdata i denne metode, skal stor omhu tages hele start-til-afslutning håndtering og observationer af sentinel insekter. Eksponeringstid og betingelserne for sentinel insekter på miljøet på tværs af både behandling og kontrol områder før pesticid spray bør være så lige som praktisk muligt. Denne eksponering bør omfatte en periode på akklimatisering til de omgivende betingelser og en ensartet hold tid efter spray for både behandling og kontrol insekter. Observationer af dødeligheden før spray, efter hold tid (dvs. under hentning af bure) og for bestemte perioder efter spray skal spores omhyggeligt på formularer. Der tages også pleje til at hente alle sentinels fra feltet inden afrejsen til laboratoriet. Kontrol og behandling sentinel bure skal være fysisk adskilt hele protokollen. Pålidelig observationer af baggrunden baseline dødelighed fra kontrol bure på alle udpegede tidsperioder er afgørende for passende korrektion af observeret dødelighed i zonen behandling. Præcis, nøjagtige, sammenlignelige og meningsfuld effekt kort kan kun opnås fra høj kvalitet dødelighed datainput til det geografiske informationssystem.

Metoden sentinel insekt er naturligt fleksibel at være relevante i en række forskellige scenarier - overalt et lille bur kan være placeret, dødelighed data kan indsamles. For eksempel, har vi gennemført pesticid forsøg med sentinel bure placeret i og omkring simulerede byområder og landdistrikter bygninger10 og amerikanske militær telte (ikke-offentliggjorte data 2017-2018), ud over flere scenarier af ørkenen, tempererede og tropiske vegetation19,20,21,22 [herunder hejse bure op til 60 ft i pine baldakin at måle lodret dødelighed efter en stor sprøjtning (ikke-offentliggjorte data 2011-2017)]. Hvis jorden er for svært at placere sentinel bur polakker eller det foretrækkes at placere dem på beton eller asfalt områder, enkle står eller betonblokke kan konstrueres til at støtte polakkerne. Scenarier til at undersøge sprøjtede flydende larvicides, kan protokollen ændres for at placere tomme plast engangs 1 qt kopper for at fange larvicide på tværs af sentinel steder. Disse kopper kan senere fyldt med vand og myg larver til at måle effekten af programmet7,23,24,25. Bruge gulvfliser med den klistrede side op til holde kopper i plads i vinden og holde låg i nærheden til hurtigt cap og indsamle følgende post spray holde tid. Alternativt kan kopper efterladt på stedet til vejret naturligt eller efterladt åben i et kontrolleret miljø at undersøge levetiden for en resterende larvicide behandling.

For at undersøge droplet tæthed og slipværktøj spektre i hele modulet, dias spinnere kan placeres nær sentinel insekt holdninger - selv motion forsigtighed, at vortex fra spinning dias ikke påvirker strømmen af pesticid spray til den Sentinel insekter. Lig tilknytning dødelighed, ekstra kolonner i tabellen attribut for sentinel placeringer kan føjes til dråbe og farvestof parametre at udlede interpoleret dækningsområder. Bemærk at tilføje droplet samling aspekter vil kræve en stigning i antallet af medarbejdere i feltet med dedikerede teams for eksempel omhyggeligt indsamle dias og bistå operatoren spray med farvestof tilsætningsstoffer. Med yderligere materiale og hold af personale, kan disse metoder flettes til at foretage samtidige forsøg ved hjælp af larve og voksen sentinels, flere program modes (luft, jord, bærbare), eller pesticider side-by-side (Se repræsentative resultater).

Selv om den vigtigste protokol blev skrevet for myg, har vi med held gennemført feltforsøg med sand fluer og skidt-avl fluer som sentinels med kun mindre ændringer til sentinel bure og samlede protokol. For eksempel, det er ikke praktisk at sex adult sand fluer eller filth avl flyver så blandet sex partier bruges i sentinel bure, da dette vil reducere belastningen på kolonien, fordi færre enheder er nødvendige end når man arbejder med myg. Sand fluer, skal en meget finmasket anvendes for sentinel bure; Derudover sand fluer er ikke bedøvet, men i stedet tilføjede med aspirators direkte i færdigsamlede bure gennem en gummi slids limet over et hul, skåret i siden af cylinderen.

Figure 8
Figur 8: ekstra scenarier demonstrerer fleksibiliteten i ordningen sentinel. Sentinel-protokollen for at undersøge pesticiders effekt på området er meget fleksibel, som vist i sentinel bure hejst på intervaller op til 60 ft gennem pine baldakin (A) og et nærliggende åbne område (B) at undersøge antenne ULV pesticid spray evne til at trænge ind baldakin. Sentinel-systemet kan nemt justeres for at undersøge larvicide sprays målretning umodne myg faser ved hjælp af engangs plast kopper for at fange dråber (C) indendørs og (D) udendørs i en simuleret byområde. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Effekten kortlægningsmetode er naturligt fleksibel, fordi den er baseret på interpolation, som er en standard i de fleste GIS-programmer26. Generelt bruger interpolation kendte data på sæt punkter for at vurdere data på nærliggende unsampled point. Der findes flere typer af interpolation teknikker27 der kan vælges baseret på den rumlige udbredelse og tæthed af punkt dødelighed data. Vi har brugt invers afstand vægtning (IDW), som tildeler højere statistiske vægt til kendte data fra point tættere til de ukendte point bliver anslået. Fejlfinding for feltet del af metoden er centreret om mortaliteten sentinel (dvs. hvis dødelighed er > 25% i kontrol, og der er sikkerhed for, at ansøgningen ikke påvirkede kontrolområdet, noget i miljø end pesticidet er forårsager MORTALITET, som vil forvirre analyse; derefter, forsøget skal gentages eller flyttet til en anden placering). De mest almindelige sikkerhedsrisici i kortlægning del af metoden er produktion kvalitet datatabeller i GIS, så det er afgørende at indsætte data, så de rigtige data er afstemt med de rigtige punkter (læsning frame) og korrekt etiket kolonner for hver dødelighed tid periode, pesticider, udbringningsudstyr, osv.

Metoden sentinel insekt er ikke designet til at være et absolut mål for effekt. Snarere, metoden, der giver mulighed for at sammenligne relative effekt af et pesticid (under et bestemt miljø, udbringningsudstyr, fortyndingsmiddel, target insekt og teknik) til de samme pesticider under forskellige betingelser, eller til at sammenligne forskellige pesticider under de samme betingelser. Metoden omfatter ikke pesticider droplet eller aktive ingrediens capture, selvom apparater for at undersøge disse aspekter kan nemt placeres i gitteret støder op til sentinel bure. Sentinel bur metode måler ikke effekten af pesticid sprøjtemidler mod vektorinsekter i flyvning, som er muligt, men ikke praktisk28. En livlig polemik findes om form for mesh på sentinel bure effekter målinger af pesticid spray effekten14,29,30,31. Dette er imidlertid ikke enormt relevant for vores målsætning om at undersøge relative effektivitet af en formulering på tværs af miljøer eller flere formuleringer i et miljø (som kan gennemføres ved hjælp af en standard bur med en standard mesh type).

For eksempel en nylig undersøgelse sammenlignede sentinel bur dødelighed resultater på tværs af tre lignende antenne pesticid program eksperimenter adskilt af årtier, hver med forskellige sentinel bur metoder, alle med sammenlignelige resultater10. Ligeledes findes kontrovers over om du vil overføre sentinel insekter til "ren" bure (dvs. bure, der ikke er blevet sprøjtet). Igen, data fra sentinel insekt dødelighed bør betragtes som relativ og ikke absolut og ikke beskæftiger sig med ekstra dødelighed som følge af sentinel insekter at kontakte pesticid fastholdelsen af buret eller mesh. I virkeligheden, i naturlige miljøer, pesticid sprays vil også holde sig til naturlige overflader, som målet insekter kan kontakte. Vi har tidligere fundet at dødelighed induceret fra håndtering af myg, at medtage CO2- eller kolde-baserede bedøvelse, kan overstige dødelighed fra at kontakte et pesticid, der kunne have været til stede på bure (ikke-offentliggjorte data 2008). En anden begrænsning er, at relevans og anvendelighed af sentinel bur dødelighed resultater i de lokale naturlige populationer af target insektet stadig ikke er fuldt ud kendt; tættere genealogically den koloni-opdrættet sentinel insekter er dog for de lokale arter, den stærkere anvendeligheden af effekten kortene er til lokalbefolkningen.

Fremover variationer af denne metode, det ville være gavnligt at medtage ændringer for at imødekomme pesticid applikationer med ubemandede aerial systemer (UAS). Aktuelle udvikling med UAS brug i operationelle vektor kontrol omfatter pesticider programmer (i bestemt, larvicide formuleringer rettet mod umodne myg levested) over og igennem meget utilgængelige steder. For at få relevante oplysninger fra sentinel forsøg, skulle sentinel insekt stationer placeres i hele utilgængelige steder videst muligt. Et eksempel på relevante oplysninger tester evnen til UAS effektivt at nå frem til et bestemt område med larvicide, med den kun line-of-sight lodsning af en erhvervsdrivende, der ikke direkte iagttage målområdet. Dette scenario kan kræve udvikling af andre UAS at implementere og hente sentinel bure eller larvicide samling kopper og andre til at optage meteorologi i disse utilgængelige målområder. Dødeligheden data fra et sådant scenario kan analyseres i GIS som med etablerede scenarier, med tilføjet kortfunktioner som virkningerne af naturlige hindringer, microhabitat og mikrometeorologiske, der kan variere fra sådanne virkninger under mere standard applikationer med lastbil, fly eller bærbare sprøjter. Avancerede funktioner af GIS som visualisering af 3-dimensionelle interpolation af dødelighed fra forbedrede sentinel placering i lodrette og vandrette gitre er også muligheder for både standard og nye applikationsteknologi.

Disclosures

Forfatterne har ingen interessekonflikter at videregive.

Acknowledgments

Vi vil gerne takke de forskere og teknikere på Coachella Valley myg og vektor kontrol District og den amerikanske hær medicinsk forskning direktorat-Kenya til ekspert produktion af kolonien insekt enheder og samarbejde på feltundersøgelser producerer ikke-offentliggjorte data præsenteret i de repræsentative resultater. Denne forskning blev støttet af det amerikanske landbrugsministerium (USDA) - Agricultural Research Service og US Department of Defense (DoD) installeret krig - Fighter beskyttelse Program (DWFP). Omtale af handelsnavne eller kommercielle produkter i denne publikation er udelukkende til brug for specifikke oplysninger og indebærer ikke anbefaling eller godkendelse af USDA, DoD eller DWFP. USDA er en udbyder af lige muligheder og arbejdsgiver.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Bioassay racks:
plastic tube lid Visipak 192224
1.25-in PVC coupler SCH-40 Lowes PVC 00100 0800
1/4-in OD brass rod K&S Engineering 1165
Name Company Catalog Number Comments
Bioassays:
FDA silicone o-rings S-500-70 Alltek seal and packing PA-2127-12
fine screening Walmart 40310-0000-063 white T-310
cotton balls Fisher Brand Large cotton balls (non-sterile)
plastic tubes Visipak 775674
regulator Norgren R83-200-RNEA
reguilator gauge Wika Instrument Corp 4315031
CO2 canister 20 lb capacity
CO2 chamber Mainstays Modified tupperware container (16 cup)
1/4-in tygon tubing
maglite aspirator and tubes Bioquip 2809D D-cell maglite aspirator
modified PVC pipe for o-rings Lowes PVC 07112 0600 SCH-40 pipe modified by cutting tool on inner surface to accommodate bioassay tube
Pupal separator John W. Hock Co. 5412
Name Company Catalog Number Comments
Field sentinel cages:
1/2 pt cardboard can body Neptune 295
1/2 pt cardboard cup lid Neptune 295A
coarse screening Walmart 41721-0540-063 white T-1721
Velcro cable ties 8-in x 1/2-in Velcro Brand VEL91140
rubber band National Institutes for the Blind 7510-01-058-9974
cotton balls Fisher Brand Large cotton balls (non-sterile)
PVC spacers Lowes PVC 04010 0600 Modified by cutting into 18-in length pieces and cutting half off of the end (lengthwise)
Tray totes Blue Ridge Thermalforming 400-3N-WHT-ABS
Name Company Catalog Number Comments
Field bioassay set-up equipment:
60-in tread-in post Jeffers.com T8T4
1 ft3 cardboard boxes USP S-18344
Deli cups WNA Inc. APCOMBO16
18-in x 18-in linolium tiles Lowes LSS4307BPS
Name Company Catalog Number Comments
Sentinel cage transport:
48 qt Island Breeze cooler Igloo
16-in x 19-in. terry towels Ability One 7920-01-454-1150
garbage bags 13 gal (kitchen size)

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Britch, S. C., et al. A mobile App for military operational entomology pesticide applications. Journal of the American Mosquito Control Association. 30, (3), 234-238 (2014).
  2. Britch, S. C., et al. Evaluation of barrier treatments on native vegetation in a southern California desert habitat. Journal of the American Mosquito Control Association. 25, (2), 184-193 (2009).
  3. Britch, S. C., et al. Residual mosquito barrier treatments on U.S. military camouflage netting in a southern California desert environment. Military Medicine. 175, (8), 599-606 (2010).
  4. Britch, S. C., et al. Longevity and efficacy of bifenthrin treatment on desert-pattern US military camouflage netting against mosquitoes in a hot-arid environment. Journal of the American Mosquito Control Association. 27, (3), 272-279 (2011).
  5. Rogers, A. J., Beidler, E. J., Rathburn, C. J. A cage test for evaluating mosquito adulticides under field conditions. Mosquito News. 17, (3), 194-198 (1957).
  6. Rathburn, C. B. Jr, Rogers, A. J., Boike, A. H. Jr, Lee, R. M. Evaluation of the ultra-low volume aerial spray technique by use of caged adult mosquitoes. Mosquito News. 29, 376-381 (1969).
  7. Aldridge, R. L., Golden, F. V., Britch, S. C., Blersch, J., Linthicum, K. J. Truck mounted Natular 2EC (spinosad) ULV residual treatment in a simulated urban environment to control Aedes aegypti and Aedes albopictus in North Florida. Journal of the American Mosquito Control Association. 34, (1), 53-57 (2018).
  8. Chaskopoulou, A., Latham, M. D., Pereira, R. M., Koehler, P. G. Droplet sampling of an oil-based and two water-based antievaporant ultra-low volume insecticide formulations using Teflon- and magnesium oxide-coated slides. Journal of the American Mosquito Control Association. 29, (2), 173-176 (2013).
  9. Bonds, J. A. S., Greer, M. J., Fritz, B. K., Hoffmann, W. C. Aerosol sampling: comparison of two rotating impactors for field droplet sizing and volumetric measurements. Journal of the American Mosquito Control Association. 25, (4), 474-479 (2009).
  10. Britch, S. C., et al. Aerial ULV control of Aedes aegypti with naled (Dibrom) inside simulated rural village and urban cryptic habitats. PLoS One. 13, (1), e0191555 (2018).
  11. Knapp, F. W., Roberts, W. W. Low volume aerial application of technical malathion for adult mosquito control. Mosquito News. 25, 46-47 (1965).
  12. Lofgren, C. S., Anthony, D. W., Mount, G. A. Size of aerosol droplets impinging on mosquitoes as determined with a scanning electron microscope. Journal of Economic Entomology. 66, (5), 1085-1088 (1973).
  13. Haile, D. G., Mount, G. A., Pierce, N. W. Effect of droplet size of malathion aerosols on kill of caged adult mosquitos. Mosquito News. 42, 576-583 (1982).
  14. Hoffmann, W. C., Fritz, B. K., Farooq, M., Cooperband, M. F. Effects of wind speed on aerosol spray penetration in adult mosquito bioassay cages. Journal of the American Mosquito Control Association. 24, (3), 419-426 (2008).
  15. Aldridge, R. L., Wynn, W. W., Britch, S. C., Linthicum, K. J. Aspirator gun for high-throughput mosquito bioassays. Journal of the American Mosquito Control Association. 28, (1), 65-68 (2012).
  16. Aldridge, R. L., et al. High-throughput mosquito and fly bioassay system for natural and artificial substrates treated with residual insecticides. Journal of the American Mosquito Control Association. 29, (1), 84-87 (2013).
  17. Abbott, W. S. A method of computing the effectiveness of an insecticide. Journal of Economic Entomology. 18, 265-267 (1925).
  18. Healy, M. J. R. A table of Abbott's correction for natural mortality. The Annals of Applied Biology. 39, (2), 211-212 (1952).
  19. Britch, S. C., et al. Evaluation of ULV and thermal fog mosquito control applications in temperate and desert environments. Journal of the American Mosquito Control Association. 26, (2), 183-197 (2010).
  20. Britch, S. C., et al. Evaluation of ULV applications against Old World sand fly (Diptera: Psychodidae) species in equatorial Kenya. Journal of Medical Entomology. 48, (6), 1145-1159 (2011).
  21. Dunford, J. C., et al. SR450 and Superhawk XP applications of Bacillus thuringiensis israelensis against Culex quinquefasciatus. Journal of the American Mosquito Control Association. 30, (3), 191-198 (2014).
  22. Haagsma, K. A., Breidenbaugh, M. S., Linthicum, K. J., Aldridge, R. L., Britch, S. C. Development of Air Force aerial spray night operations: high altitude swath characterizations. U.S. Army Medical Department Journal. 47-59 (2015).
  23. Henke, J. A. Fighting Aedes aegypti in the desert. Proceedings and Papers of the Eighty-Fifth Annual Conference of the Mosquito and Vector Control Association of California. 85, 24-25 (2017).
  24. Britch, S. C., et al. Ultra-low volume application of Natular 2EC (spinosad) larvicide as a residual in a tropical environment against Aedes and Anopheles species. Journal of the American Mosquito Control Association. 34, (1), 58-62 (2018).
  25. Golden, F. V., et al. Ultra-low volume application of Natular 2EC (spinosad) as a residual in a hot-arid environment against Aedes aegypti. Journal of the American Mosquito Control Association. 34, (1), 63-66 (2018).
  26. Hay, S. I., Lennon, J. J. Deriving meteorological variables across Africa for the study and control of vector-borne disease: a comparison of remote sensing and spatial interpolation of climate. Tropical Medicine & International Health. 4, 58-71 (1999).
  27. Tunalioğlu, N. Quality test of interpolation methods on steepness regions for the use in surface modelling. Technical Gazette (Tehnički vjesnik). 19, (3), 501-507 (2012).
  28. Rathburn, C. B., Rogers, A. J. Field tests of mists and dusts against caged adults of Aedes taeniorhynchus (Wied.). Report of the Thirtieth Annual Meeting, Florida Anti-Mosquito Association. 38-43 (1959).
  29. Breeland, S. G. Effect of test cage materials on ULV malathion evaluations. Mosquito News. 30, 338-342 (1970).
  30. Boobar, L. R., Dobson, S. E., Perich, M. J., Darby, W. M., Nelson, J. H. Effects of screen materials on droplet size frequency-distribution of aerosols entering sentinel mosquito exposure tubes. Medical and Veterinary Entomology. 2, 379-384 (1988).
  31. Bunner, B. L., Posa, F. G., Dobson, S. E., Broski, F. H., Boobar, L. R. Aerosol penetration relative to sentinel cage configuration and orientation. Journal of the American Mosquito Control Association. 5, (4), 547-551 (1989).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics