Bioengineering

खरगोश स्तन ग्रंथि को intraductal वितरण

Published: March 9, 2017 doi: 10.3791/55209

Amelia Clark¹, Nora K. Bird², Amy Brock¹

¹Department of Biomedical Engineering, The University of Texas at Austin, ²Department of Anesthesiology, UTMB Health at Galveston

Abstract

स्तन कैंसर के लिए स्थानीय intraductal उपचार ट्यूमर को कुशल वितरण और कम प्रणालीगत विषाक्तता और प्रतिकूल प्रभाव ^{^1,} ^{^2,} ^{^3,} ^{^4,} ^{^5,} ^{^6,} ⁷ सहित संभावित लाभ प्रदान करते हैं। हालांकि, कई चुनौतियों इन उपचार अधिक व्यापक रूप से लागू किया जा सकता से पहले रहते हैं। विकास और intraductal चिकित्सा विज्ञान की मान्यता के लिए एक उपयुक्त पशु मॉडल में रोगियों के लिए intraductal चिकित्सीय रणनीतियों के विकास की सुविधा। माउस स्तन ग्रंथि व्यापक रूप से स्तन विकास और tumorigenesis का एक मॉडल प्रणाली के रूप में इस्तेमाल किया गया है, शरीर रचना विज्ञान मानव ग्रंथि से अलग है। एक बड़ा पशु मॉडल, इस तरह के रूप में खरगोश, स्तन ग्रंथि की संरचना और intraductal चिकित्सीय विकास के लिए एक बेहतर मॉडल के रूप में सेवा कर सकते हैं। ग मेंचूहों को ontrast, जिसमें दस नलीपरक पेड़ स्थानिक शरीर धुरी के साथ वितरित कर रहे हैं, एक अलग चूची में प्रत्येक समाप्त, खरगोश स्तन ग्रंथि और अधिक बारीकी से मानव ग्रंथि, कई अतिव्यापी नलीपरक सिस्टम एक चूची में अलग उद्घाटन के माध्यम से है कि बाहर निकलने के साथ जैसा दिखता है। यहाँ, हम सीधे खरगोश स्तन नली में और उच्च संकल्प अल्ट्रासाउंड इमेजिंग के साथ प्रसव खुद के दृश्य के लिए अभिकर्मकों के वितरण के लिए न्यूनतम इनवेसिव तरीकों प्रस्तुत करते हैं।

Introduction

चिकित्सीय एजेंट के intraductal वितरण कृंतक मॉडल में और प्रारंभिक चरण मानव परीक्षण ^{^3,} ^{^4,} ^{^5,} ^{^6,} ^{^11,} ¹² में अध्ययन किया गया है। हाल ही में एक चरण मैं अध्ययन सुरक्षा और intraductal Carboplatin या आक्रामक कैंसर ² के उपचार के लिए स्तन का इंतजार कर महिलाओं में intraductal PEGylated लिपोसोमल डॉक्सोरूबिसिन की व्यवहार्यता का प्रदर्शन किया।

Intraductal वितरण के लिए पिछले प्रोटोकॉल माउस और चूहा स्तन ग्रंथियों ^{^6,} ^{^7,} ^{^8,} ⁹ के लिए विकसित किया गया है। अनुसंधान प्रयोजनों, intraductal ट्यूमर सेल इंजेक्शन और ओंकोजीन की lentiviral वेक्टर प्रसव के लिए भी कृंतक मॉडल में प्रदर्शन किया गया हैरेफरी "> ^13, ^{^14,} ^{^15,} ^16। हालांकि, intraductal वितरण की प्रक्रिया के vivo मॉडल में एक आदर्श चिकित्सीय यौगिकों के उपन्यास वर्गों के विकास के लिए परमिट और preclinical आकलन की सुविधा चाहिए। मूषक और मनुष्यों के बीच शारीरिक मतभेद इन का अनुवाद जटिल है अध्ययन करते हैं।

चूहों के विपरीत, जिसमें प्रत्येक वाहिनी एक अलग चूची पर समाप्त होता है, मानव स्तन 5 9 को स्वतंत्र नलीपरक प्रणाली, एक अलग उद्घाटन चूची पर समाप्त होने के साथ प्रत्येक के होते हैं। खरगोश स्तन ग्रंथियों चार स्वतंत्र नलीपरक प्रणाली, एक भी चूची में चार orifices में से एक के माध्यम से प्रत्येक को अलग से सुलभ बंदरगाह। एक खरगोश मॉडल और अधिक बारीकी से मानव शरीर रचना विज्ञान मेल खाती है और एक अधिक प्रासंगिक संदर्भ में intraductal दवा वितरण के अध्ययन के लिए परमिट।

यहाँ, हम intraductal वितरण का आकलन करने के लिए दो तकनीकों का उपयोग करें। एक के सह-प्रबंधमहत्वपूर्ण डाई त्वचा के माध्यम से दृश्य परमिट और विधि का एक सरल और तेजी से पुष्टि प्रदान करता है। कुछ अनुप्रयोगों के लिए, नलिकाओं के उच्च संकल्प मानचित्रण पसंद किया जा सकता है। हम यहाँ एक गैर लक्षित विपरीत अभिकर्मक के intraductal वितरण के माध्यम से नलिकाओं का अल्ट्रासाउंड इमेजिंग के लिए एक प्रोटोकॉल उपस्थित थे।

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Protocol

पशु विषयों का उपयोग प्रक्रियाओं ऑस्टिन में टेक्सास विश्वविद्यालय की संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया है।

1. शल्यक्रिया पूर्व तैयारी

प्रत्येक खरगोश के शरीर के वजन रिकॉर्ड। सभी preclinical अध्ययन के साथ के रूप में, संभावित विषाक्तता का आकलन करने के लिए नियमित रूप से पशु वजन की निगरानी।
खरगोश anesthetizing करने से पहले, व्यावसायिक रूप से उपलब्ध अल्ट्रासाउंड जेल और 30 एस के लिए 500 XG पर स्पिन के साथ एक 50 एमएल शंक्वाकार ट्यूब भरने; वहाँ centrifugation के पूरा होने पर जेल में नहीं दिखाई बुलबुले होना चाहिए।
0.75 मिलीग्राम / किग्रा की एक खुराक पर 0.1 मिलीग्राम / किग्रा की एक खुराक पर glycopyrrolate subcutaneously प्रशासन और acepromazine intramuscularly। शामक के लिए 15-20 मिनट रुको महत्वपूर्ण संकेत है और व्यवहार की निगरानी करते हुए प्रभावी करने के लिए।
नोट: Glycopyrrolate एक विरोधी कोलीनर्जिक एजेंट है कि bradycardia रोकता है और श्वसन और सैनिक स्राव को कम कर देता है। Acepromazine एक शामक है कि एक premedicati रूप में कार्य करता हैसंज्ञाहरण के लिए पर।
प्रशासन 35 मिलीग्राम / ketamine के किग्रा और किलो के xylazine subcutaneously एक संवेदनाहारी के रूप में 5 मिलीग्राम /। हालांकि, ऑपरेटर और अधिक अनुभवी हो जाता है और intraductal वितरण और अधिक तेजी से पूरा कर सकते हैं, ketamine और 3 मिलीग्राम / किलो 15 मिलीग्राम दवा dosages में कमी के रूप में / xylazine subcutaneously किलो; इस संज्ञाहरण समय और बार संज्ञाहरण से उबरने के लिए पशुओं के लिए आवश्यक छोटा होगा।
चेक करें और हृदय गति, एसपीओ _2, तापमान, श्वसन दर, और बलगम झिल्ली रंग हर 15 मिनट दस्तावेज़। दोनों आंखों के लिए नेत्र स्नेहक लागू करें।
नोट: केवल कर्मियों को जो उचित प्रशिक्षण प्राप्त किया है और उनकी संस्था के IACUC द्वारा अनुमोदित किया गया है प्रशासन या संज्ञाहरण की निगरानी करनी चाहिए। एक पशु चिकित्सा संज्ञाहरण की निगरानी के उपयोग महत्वपूर्ण संकेत प्राप्त करने और सिफारिश की है में सहायता कर सकते हैं। पशु चिकित्सा संज्ञाहरण मॉनिटर, तथापि, मैन्युअल पशु जाँच करने के लिए हर 15 मिनट की जरूरत की जगह नहीं है। निर्माता के निर्देशों देखें चया एक पशु की निगरानी के समुचित उपयोग।
एक सज्जन पैर की अंगुली चुटकी द्वारा संज्ञाहरण की शुरुआत सत्यापित करें; खरगोश जारी रखने से पहले गैर जिम्मेदार होना चाहिए।
ध्यान से वंक्षण निपल के तीसरे और चौथे जोड़े के आसपास के क्षेत्र में खरगोश की दुम पेट दाढ़ी।
हटा बालों के बहुमत के साथ मुंडा क्षेत्र के लिए एक से अधिक-काउंटर बालों को हटाने क्रीम लागू होते हैं। गर्म पानी से गीला नम कागज तौलिए का उपयोग कर आवेदन के बाद क्रीम 10 मिनट निकालें।
नोट: खरगोश त्वचा बहुत नाजुक / प्रति संवेदनशील है। बालों को हटाने क्रीम कोई 10 से अधिक मिनट के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए। वास्तव में, यह 5 मिनट पर एक "परीक्षण हाजिर" कोशिश करने के लिए और अगर परीक्षण जगह एक लंबे समय अवधि की जरूरत है इंगित करता है पर अब केवल छोड़ सुरक्षित है।
शराब से लथपथ धुंध पैड इंजेक्शन साइट को साफ करने के साथ क्षेत्र को साफ कर लें।
अपनी पीठ पर खरगोश एक वी के आकार का गर्त एक recirculating गर्म पानी कंबल और एक शोषक पैड के साथ लाइन में खड़ा में रखें।

2. पीआरइसके विपरीत एजेंट की eparation

निर्माता के निर्देशों के अनुसार गैर लक्षित विपरीत अभिकर्मक Reconstitute। पिपेट और नीचे धीरे मिश्रण करने के लिए।
नोट: इसके विपरीत इस प्रोटोकॉल में इस्तेमाल एजेंट 4 के लिए कमरे के तापमान पर स्थिर है - 6 h पुनर्गठन के बाद। धीरे प्रत्येक पुनर्प्राप्ति के बीच शीशी रॉक।
नोट: नलिकाओं की संख्या पर निर्भर करेगा आवश्यक समाधान की मात्रा इंजेक्शन जा। के समाधान के लिए एक वयस्क न्यूजीलैंड सफेद खरगोश (Oryctolaguscuniculus) में से एक नलीपरक पेड़ को भरने के लिए पर्याप्त है खरगोश चूची प्रति 4 नलीपरक उद्घाटन, और 0.2 एमएल है। इस प्रकार, 0.8 एमएल की कुल मात्रा एक स्तन ग्रंथि के लिए दिया जा सकता है।

3. intraductal वितरण

उचित निपल इंजेक्शन जा पता लगाने; वंक्षण निपल की ³ और 4 ^वें जोड़े सिफारिश कर रहे हैं, के रूप में वे आसानी से कल्पना कर रहे हैं जब जानवर अपनी पीठ पर तैनात है।
में बाँझ 0.9% खारा का लोड 0.2 एमएलएक 22 जी सुई के साथ एक 1 एमएल luer ताला ट्यूबरकुलीन सिरिंज। ठीक से 22 जी सुई के निपटान के लिए एक बार खारा सिरिंज में है और एक बाँझ 25 गेज सुई के साथ बदलें। धीरे से एक धुंध पैड पर 85% isopropyl शराब के साथ क्षेत्र पोंछे।
सुई और जानवर के शरीर के लिए सिरिंज समानांतर के उठाव के साथ, चूची के पक्ष में सुई के बेवल डालने और धीरे-धीरे खारा के 0.1-0.2 एमएल इंजेक्षन; इस नलीपरक के उद्घाटन के बेहतर दृश्य के लिए अनुमति देगा।
लोड 1 एमएल luer ताला ट्यूबरकुलीन सिरिंज में इंजेक्शन समाधान के 0.2 एमएल।
अंगूठे और तर्जनी के साथ धीरे चूची पकड़ और intraductal इंजेक्शन के लिए यह स्थिति थोड़ा उठा; एक पहनने योग्य नेत्र लूप नलीपरक उद्घाटन visualizing में सहायता कर सकते हैं।
जबकि चूची की स्थिति को बनाए रखने को उठा लिया, ध्यान से एक 25 जी कुंद टिप सुई का उपयोग ब्याज की वाहिनी cannulate।
केन्युलेशन के बाद, धीरे कुंद-टी का केंद्र पर Luer ताला सिरिंज मोड़आईपी अर्क सुई जब तक यह जगह में बंद कर दिया है।
चूची लिफ्ट और तेजी से वाहिनी के भीतर तरल पदार्थ ले जाकर वजह से संभावित नुकसान को कम करने के लिए धीरे-धीरे समाधान इंजेक्षन; कुछ ही समय में वहाँ प्रतिरोध जब समाधान इंजेक्शन होना चाहिए।

4. अल्ट्रासाउंड इमेजिंग

ब्याज की क्षेत्र की त्वचा के लिए Centrifuged अल्ट्रासाउंड जेल के एक उदार राशि लागू करें। सुनिश्चित जेल में कोई बुलबुले देखते हैं कि, के रूप में इन छवि गुणवत्ता के साथ समझौता होगा।
6 मिमी के लिए इमेजिंग गहराई सेट करें। जेल के साथ संपर्क में 21 मेगाहर्ट्ज ट्रांसड्यूसर की जगह और बी मोड में ब्याज की क्षेत्र स्कैन। नलीपरक उद्घाटन और वाहिनी के दौरान सहित स्कैन क्षेत्र में विपरीत मध्यम निरीक्षण करें।
नोट: ये सेटिंग्स एक विशिष्ट photoacoustic अल्ट्रासाउंड मशीन के साथ उपयोग के लिए विकसित किया गया है। अधिक जानकारी के लिए सामग्री की तालिका देखें। यह शक्ति संचारित और अन्य इमेजिंग सिस्टम की इमेजिंग गहराई स्तन अनुकूलन करने के लिए समायोजित करने के लिए आवश्यक हो सकता हैग्रंथि दृश्य।
एक धुंध पैड के साथ पशुओं की त्वचा से अल्ट्रासाउंड जेल निकालें।

5. पश्चात की देखभाल

इंजेक्शन स्थल का निरीक्षण करें: वहाँ चूची क्षेत्र के लिए या आसपास के ऊतकों को आघात के कोई संकेत नहीं होना चाहिए, और चूची के आसपास के क्षेत्र में सूजन की संभावना एक सफल intraductal इंजेक्शन एक स्तन वसा पैड इंजेक्शन के बजाय इंगित करता है।
एक स्टर्नल स्थिति में खरगोश रखें। यदि आवश्यक हो, 0.2 मिलीग्राम / नसों के सीमांत कान की नस को yohimbine की किलो दे; इस xylazine के प्रभाव को पलट और पशु संज्ञाहरण से अधिक जल्दी से ठीक करने के लिए अनुमति देगा।
खरगोश मॉनिटर वसूली की अवधि के दौरान हर 15 मिनट तक पशु चेतावनी, उत्तरदायी है, और एक स्टर्नल स्थिति बनाए रखता है।
नोट: यह प्रक्रिया ऊतकों को नुकसान या सूजन में परिणाम नहीं चाहिए। लाली या सूजन मनाया जाता है, meloxicam 0.1-0.2 मिलीग्राम / किग्रा पीओ की एक खुराक प्रशासन एक बार पशु सतर्क और सक्षम हैदवा मौखिक रूप से ले। आगे मार्गदर्शन के लिए संस्था के पशु चिकित्सा स्टाफ से संपर्क करें।

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Representative Results

यहाँ, हम बताते हैं कि एक खरगोश की स्तन नलिकाओं के विपरीत अभिकर्मकों के intraductal वितरण ऊतक (चित्रा 2) को आघात के बिना प्राप्त किया जा सकता है। खरगोशों में, चार अलग नलीपरक सिस्टम एक चूची पर एकाग्र है और इस तरह पहुँचा और इस पद्धति का उपयोग व्यक्तिगत रूप से imaged किया जा सकता है। व्यक्तिगत नलीपरक उद्घाटन आसानी से कल्पना कर रहे हैं; नोक एक दूसरे नलीपरक उद्घाटन चित्रा 2B में cannulated वाहिनी से सटे अंकन ध्यान दें।

रैखिक इमेजिंग मोड में अलक्षित विपरीत अभिकर्मक के साथ उच्च संकल्प अल्ट्रासाउंड इमेजिंग intraductal वितरण की एक वास्तविक समय readout प्रदान कर सकते हैं। छवियों प्रतिनिधि 45 मिनट के बाद वितरण (चित्रा 3) के लिए अभिकर्मक का पता लगाने दिखा। इस तकनीक को भी नलिकाओं के माध्यम से चिकित्सीय वितरण के कैनेटीक्स की निगरानी के लिए उपयोगी हो सकता है।

(चित्रा 4) तक पहुँच जाता है और किसी भी नलिकाओं प्रसव के दौरान क्षतिग्रस्त हो रहे हैं कि क्या किया जा सकता है।

आकृति 1
चित्रा 1: खरगोश स्तन ग्रंथियों के योजनाबद्ध। दो डॉट्स के निचले जोड़े वंक्षण ग्रंथियों के निपल प्रतिनिधित्व करते हैं। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 2: तैयार करना और intraductal प्रसव के लिए वंक्षण स्तन ग्रंथि की नलिका। (ए) सही वंक्षण स्तन ग्रंथि की चूची तुरंत 0.2 0.9 एमएल% बाँझ खारा की डिलीवरी के बाद यहाँ दिखाया गया है। इंजेक्शन पर, नलीपरक उद्घाटन अधिक स्पष्ट रूप से कल्पना कर रहे हैं। (बी) एक ही चूची में एक नलीपरक उद्घाटन तो एक 25 जी कुंद की नोक अर्क सुई के साथ cannulated है। तीर एक प्रवेशनी के बिना एक नलीपरक उद्घाटन पता चलता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र तीन
चित्रा 3. गैर लक्षित कंट्रास्ट अभिकर्मक अल्ट्रासाउंड मैं द्वारा स्तन वाहिनी के भीतर कल्पितmaging। (ए) विपरीत अभिकर्मक तुरंत प्रसव के बाद स्थानीय है और कल्पना है (बी) के 30 मिनट के बाद वितरण और (सी) 45 मिनट के बाद डिलिवरी। स्तन वाहिनी के अंदर अभिकर्मक के हठ इस प्रोटोकॉल की अवधि के दौरान दृश्य की अनुमति देता। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 4: एक वंक्षण स्तन ग्रंथि इवांस ब्लू खारा समाधान के साथ चूची इंजेक्शन के माध्यम से। (ए) इवांस ब्लू समाधान के 0.2 एमएल की intraductal इंजेक्शन के बाद बाहरी उपस्थिति। (बी) त्वचा खोलने पर, इवांस ब्लू पूरे स्तन नलीपरक पेड़ के दृश्य के लिए परमिट और बरकरार नलीपरक संरचना की पुष्टि करता है। (<strong> सी) निर्धारण और लाल फिटकिरी के साथ धुंधला के बाद वंक्षण स्तन ग्रंथि का एक क्षेत्र का नमूना पूरे माउंट। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

खरगोश स्तन ग्रंथि को intraductal वितरण का यह तरीका अल्ट्रासाउंड विपरीत अभिकर्मकों और महत्वपूर्ण रंगों और चिकित्सा विज्ञान सहित कई अन्य जलीय समाधान के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। पिछले अध्ययनों हार्मोन ^{^17,} ^{^18,} ¹⁹ के intraductal वितरण का प्रदर्शन किया है। कृंतक मॉडल, न्यूक्लिक एसिड ⁸ की intraductal वितरण, केमोथेरापी ^{^6,} ^7, और nanoparticle वाहक ⁸ ^में, ²⁰ प्रदर्शन किया गया है। प्रोटोकॉल यहाँ वर्णित के रूप में अच्छी तरह से इन अनुप्रयोगों के लिए अनुकूलित किया जा सकता है।

कुछ अनुप्रयोगों के लिए, इवांस ब्लू महत्वपूर्ण डाई द्वारा intraductal वितरण की पुष्टि, के रूप में त्वचा के माध्यम से कल्पना, पर्याप्त हो सकता है। हालांकि, त्वचा के माध्यम से दृश्य फैलाना है, और व्यक्तिगत नलिकाओं में अच्छी तरह से नहीं हैं demarcaटेड। समापन बिंदु अध्ययन में, इवांस ब्लू महत्वपूर्ण डाई पूरे नलीपरक पेड़ की एक स्पष्ट नक्शा प्रदान करता है, लेकिन यह स्तन के ऊतकों के अलगाव की आवश्यकता है। इसलिए, विपरीत बढ़ाकर अल्ट्रासाउंड लाइव जानवरों के अध्ययन में अलग-अलग नलिकाओं को intraductal वितरण visualizing के लिए एक वैकल्पिक तरीका प्रदान करता है। हम ध्यान दें कि इवांस ब्लू डाई, छोटी-व्यास टर्मिनल नलिकाओं सहित पूरे नलीपरक पेड़, नक्शे विपरीत अभिकर्मक और अल्ट्रासाउंड के नक्शे, जबकि केवल बड़े नलिकाओं में शामिल हैं। जबकि इवांस ब्लू केवल एक ही स्नैपशॉट माप प्रदान करता है एक और भेद, संभावना अल्ट्रासाउंड में अस्थायी गतिशीलता की निगरानी करने के लिए है।

कृंतक स्तन वाहिनी ^{से 9} intraductal वितरण के लिए विधि के रूप में, सबसे महत्वपूर्ण चुनौती है और इस तकनीक के लिए सीमा ऑपरेटर विशेषज्ञता पर निर्भरता होने की संभावना है। हालांकि, एक खरगोश मॉडल में नलीपरक के उद्घाटन के बड़े आकार प्रक्रिया को सरल, प्रदर्शन के लिए की आवश्यकता समाप्तएक stereomicroscope की सहायता के साथ तकनीक हैैं, और समय नए ऑपरेटरों के लिए आवश्यक दक्षता विकसित करने के shortens। हमारे अनुभव में, intraductal वितरण करने से पहले चूची की तरफ से खारा के 0.1-0.2 एमएल के इंजेक्शन एक महत्वपूर्ण कदम है कि नलीपरक उद्घाटन (3.2 कदम, ऊपर) का स्पष्ट दृश्य के लिए सक्षम बनाता है। सही स्थिति और वितरण साइट के उठाने भी जरूरी है, यह है कि समाधान वाहिनी में बहती है (3.5 और 3.6, ऊपर कदम) सुनिश्चित करता है। हम ध्यान दें कि इसके विपरीत अभिकर्मक के सह-प्रबंध जरूरी अन्य अभिकर्मकों या चिकित्सा विज्ञान के परीक्षण के लिए उपलब्ध मात्रा कम हो जाएगा। हालांकि, intraductal वितरण भी इमेजिंग के बिना या साधारण निरीक्षण के साथ इवांस ब्लू द्वारा डिलीवरी की पुष्टि करने के लिए किया जा सकता है।

स्तन का सबसे आम noninvasive घाव बगल में नलीपरक कार्सिनोमा (DCIS), जिसमें असामान्य नलीपरक उपकला कोशिकाओं स्तन वाहिनी के अंदर पैदा करना, लेकिन throug घुसना नहीं हैज आसन्न ऊतकों को तहखाने झिल्ली। mammographic इमेजिंग के क्षेत्र में प्रगति के साथ, DCIS की पहचान दरों में नाटकीय रूप से वृद्धि हुई है। संयुक्त राज्य अमेरिका में नव निदान स्तन घावों का लगभग 25% DCIS के रूप में वर्गीकृत कर रहे हैं, और 2020 तक 1 लाख से अधिक महिलाओं को अकेले ^{^22,} ^{^23,} ^{^24,} ²⁵ संयुक्त राज्य अमेरिका में DCIS के साथ रहने दिया जाएगा। हालांकि, कई DCIS घावों निष्क्रिय बने हुए हैं, और सबसे अनुमान पाते हैं कि केवल 15-40% ^{^21,} ^{^22,} ^{^23,} ^{^24,} DCIS घावों के ²⁵ कभी आक्रामक कैंसर के लिए प्रगति होगी। हालांकि, वर्तमान में पहचान की जो ट्यूमर आक्रामक हो जाएगा करने में सहायता करने के लिए कोई भविष्य कहनेवाला बायोमार्कर हैं।

अधिक महिलाओं को इस पूर्व कैंसर घाव के साथ का निदान कर रहे हैं, अति निदान और overtreatment के बारे में गंभीर सवाल उभरा है। premalignant रोग के उपचार के लिए आम तौर पर आक्रामक है। DCIS के साथ अधिकांश रोगियों को सर्जरी (lumpectomy या स्तन) से गुजरना होगा, और कई लोग भी विकिरण ²⁵ प्राप्त करते हैं। हार्मोन रिसेप्टर पॉजिटिव DCIS के साथ कुछ रोगियों को भी अंत: स्रावी चिकित्सा, जो पुनरावृत्ति को कम करने के लिए दिखाया गया है की 5 साल या उससे अधिक प्राप्त होगा। इस इलाज के साइड इफेक्ट स्ट्रोक, रक्त के थक्के, हड्डी हानि, और गर्भाशय और एंडोमेट्रियल कैंसर के ऊंचा जोखिम शामिल हो सकते हैं। इन विकल्पों में से सभी गंभीर प्रणालीगत साइड इफेक्ट होते हैं और जीवन की गुणवत्ता को प्रभावित रोगी। कम आक्रामक चिकित्सीय रणनीतियों ^{25 के} लिए एक महत्वपूर्ण आवश्यकता है।

दोनों माउस मॉडल में और स्तन कैंसर के रोगियों में एजेंटों के intraductal वितरण इससे पहले, प्रभावी होना दिखाया गया है प्रणालीगत विषाक्तता या लंबी अवधि के histopathological परिवर्तन का कोई सबूत के साथरेफरी "> ^3, ^{^4,} ^{^5,} ^6। चिकित्सा विज्ञान के intraductal प्रशासन एक दिन tumorigenesis रोकने के लिए DCIS गया है कि अभी तक एक स्थानीय रूप से आक्रामक घाव करने के लिए प्रगति के साथ का निदान नहीं महिलाओं के लिए नए विकल्प की पेशकश कर सकता। संभावित करते हुए भी संरक्षण नलीपरक संरचना इस बनाता है एक आकर्षक चिकित्सीय रणनीति ^10। महत्वपूर्ण बात है, स्थानीय वितरण दृष्टिकोण है कि उपचार प्रासंगिक असामान्य कोशिकाओं जबकि संभवतः अन्य ऊतकों को जमानत के नुकसान को कम पहुंचता है सुनिश्चित करता है। जबकि खरगोश ट्यूमर मॉडल उपलब्ध नहीं हैं, खरगोश के सामान्य स्तन ग्रंथि के लिए एक प्रासंगिक मॉडल प्रदान कर सकता है स्तन वाहिनी के अंदर का परीक्षण स्थानीय वितरण, सुरक्षा, परिवहन, और चिकित्सा विज्ञान के तेज कैनेटीक्स। ये vivo अध्ययन में एक प्रासंगिक ऊतक वातावरण के भीतर परीक्षण और उम्मीदवार निदान और चिकित्सा के सत्यापन के लिए सक्षम हो जाएगा।

^8, ⁹ को कम आक्रामक और स्थानीय दवा वितरण के लिए अनुमति दी। हालांकि, माउस स्तन ग्रंथि का शरीर रचना विज्ञान के ऊतकों की संरचना और नलिकाओं कि प्रत्येक चूची पर खत्म की संख्या सहित महत्वपूर्ण तरीके की एक संख्या में मानव स्तन से अलग है। यहाँ, हम एक बड़ा पशु मॉडल में जो स्तन उपकला संरचना और अधिक बारीकी से मानव स्तन ^{^12,} ¹⁴ का शरीर रचना विज्ञान का प्रतिनिधित्व करने के लिए इस तकनीक का विस्तार। इस इमेजिंग द्वारा विस्तारित निगरानी के लिए और खरगोश स्तन नलीपरक उपकला के लिए विभिन्न अभिकर्मकों के सहवर्ती intraductal वितरण परख करने की क्रिया के लिए संभावना को खोलता है। एक उपयुक्त पशु मॉडल के लिए स्थानीय वितरण के क्षेत्र में अग्रिम, नलीपरक शरीर रचना विज्ञान के साथ मानव ग्रंथि के समान है, गैर-मैं के आवेदन में तेजी लाने चाहिएnvasive, मानव में चिकित्सीय रणनीतियों को निशाना बनाया।

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Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
MicroMarker non-targeted contrast reagent	VisualSonics	VS-11694
Luer Lock 1 mL Syringes	BD	309628
Glycopyrrolate 0.2 mg/mL	Wedgewood Compounding Pharmacy	GLYCOP-INJ013VC	6 month shelf life, supply may be limited.
Atropine Sulfate 0.5 mg/mL	Animal Health International	15320764	If glycopyrrolate is unavailable. Not to be combined with glycopyrrolate.
Ketamine HCL 100 mg/mL	Animal Health International	21250699	http://www.animalhealthinternational.com/
Acepromazine 10 mg/mL	Animal Health International	17640541
Xylazine 20 mg/mL	Animal Health International	20101547
Yohimbine 0.2 mg/mL	Animal Health International	14588965
Hair Removing Cream	Veet		Sensitive skin solution. Available through local retailers.
Blunt tip infusion needles	Sai Infusion Technology	B14-50	http://www.sai-infusion.com/collections/blunt-needles
Veterinary Pulse Oximeter	EdanUSA	VE-H100B	http://www.edanusa.com/Product/VE-H100B-Veterinary-Pulse-Oximeter.html
Warm Water Pump	Gaymar	TP700
Warm Water Blanket	Animal Health International	21232696	Maxi-Therm Lite Warming Pads
Ultrasound system	VisualSonics	Vevo 2100