و في المختبر اختبار حساسية الجلد (SIT) باستخدام البشرة البشرة الإنسان (ري) الموديل
July 13th, 2009
في هذا الفيديو ، نبدي تهيج الجلد البشرة الاختبار (البشرة SIT) المتقدمة والتحقق من صحتها ل في المختبر اختبار حساسية الجلد للمواد الكيميائية ، بما في ذلك مكونات مستحضرات التجميل والصناعات الدوائية.
البشرة هي خلية بشرية طبيعية مشتقة من نموذج مختبري للبشرة البشرية طورتها شركة Matt Tech Corporation. يحل بروتوكول اختبار تهيج البشرة المعتمد من EC VM محل الاختبارات التقليدية القائمة على للمنتجات مثل مستحضرات التجميل والمواد الخام والعوامل الصناعية التي تتلامس مع جلد الإنسان. يبدأ هذا الاختبار في اليوم صفر عندما تصل مجموعة تهيج الجلد وأنسجة البشرة إلى المختبر ويتم تكييفها لاحقا بوسيط فحص بعد الحضانة الليلية.
في اليوم الأول ، يتعرض السطح غير النمطي لأنسجة البشرة لمدة ساعة واحدة بمركب مهيج مفترض ثم تتم إزالة المهيج بخطوة غسيل في اليوم الثاني. بعد حضانة لمدة 24 ساعة ، يتم وضع إدراج الثقافة في وسائط جديدة ويمكن استخدام الوسائط القديمة لتحليل السيتوكينات والكيموكينات المنبعثة يتفاعل النسيج مع مركب يعرف باسم MTT ، والذي يتم تحويله بواسطة اختزال الميتوكوندريا إلى اللون الأرجواني الداكن للماوز والملح.
توفير قراءة لصلاحية الخلية. يعد نقص اللون الأرجواني الداكن في العينة مؤشرا على انخفاض الجدوى. وعندما تكون قراءة مقياس السعرات الحرارية لمركب الاختبار أقل من 50٪ من عناصر التحكم السلبية ، يمكن تصنيف مركب الاختبار على أنه مهيج.
مرحبا ، أنا هيلينا كافا من شركة مات. سنعرض لك اليوم إجراء اختبار تهيج الجلد في المختبر باستخدام بشرة الجلد البشري النموذجية المعاد بناؤها. يمكن استخدام هذا الإجراء ، اعتمادا على المتطلبات التنظيمية ، كبديل كامل أو جزئي لاختبار تهيج الجلد السريع في الجسم الحي.
يمكن استخدام هذا الإجراء الجديد في المختبر لتحديد المخاطر ووضع العلامات على المواد الكيميائية ومستحضرات التجميل الخام. لذلك دعونا نبدأ. تشتق البشرة من ثقافة الخلايا الكيراتينية للبشرة البشرية لتشكيل نموذج ثلاثي الأبعاد ومتعدد الطبقات وشديد التمايز للبشرة البشرية.
الأنسجة نشطة انقساميا واستقلابيا ، وتحاكي عن كثب نظيراتها في الجسم الحي من الناحية الهيكلية والكيميائية الحيوية ، وتفعل ذلك مع قابلية مضمونة للتكاثر مثل البشرة البشرية. تتكون البشرة من طبقات قاعدية شائكة وحبيبية منظمة وطبقة قرنية متعددة الطبقات. يحتوي هذا الأخير على طبقات دهنية بين الخلايا لام: ميلر مرتبة في أنماط مماثلة لتلك الموجودة في الجسم الحي.
يتم زراعة هذه الأنسجة في وسط خال من المصل. كل نسيج ينمو في إدراج مزرعة خلية فردية. تتوفر تكوينات أخرى بما في ذلك تنسيق إنتاجية عالية 96 بئر.
يستغرق إنتاج الأنسجة حوالي ثلاثة أسابيع حتى يكتمل في نقطة محددة من هذه العملية ، ويتم رفع الأنسجة إلى واجهة سائل الهواء وتتم إزالة كل السائل من سطح APIC للأنسجة. يتم تغذية أنسجة N فقط من خلال السطح القاعدي الجانبي ، والذي يظل على اتصال بوسط الاستزراع الخاص ب mat tech. تحتوي مجموعة البشرة النموذجية على 24 نسيجا لكل نسيج ، قطرها تسعة ملليمترات في ملحق زراعة الأنسجة الخاص بها بالإضافة إلى وسيط فحص كاف لإجراء اختبار تهيج الجلد هذا.
يتم تثبيت الإدخالات ال 24 بإحكام على جل ورد AGA متوسط المنقوعة ، ونسيج واحد في كل بئر من شحنة لوحة قياسية 24 بئر يتم بواسطة ناقل بين عشية وضحاها عند درجة حرارة تتراوح من ثلاث إلى أربع درجات مئوية قبل الشروع في اختبار المواد الكيميائية. باستخدام نظام اختبار EPIDERM ، قم بإعداد وتعقيم جميع الأدوات والأدوات المستخدمة في الفحص كما هو موضح في البروتوكول المكتوب. يجب أن يأتي جزء من المواد مثل مسحات القطن في عبوات معقمة أو يتم تعقيمها.
يجب استخدام 70٪ من الإيثانول لتعقيم الأدوات مثل الملقط ويجب استخدام الأشعة فوق البنفسجية أو تشعيع جاما لتعقيم زجاجات الغسيل. وينبغي أن يكون هناك حلان حاسمان مستخدمان في الاختبار هما DPBS معد مسبقا وحل SDS بنسبة 5٪. في الماء المقطر ، سيتم استخدام ما يقرب من لترين من الأس الهيدروجيني المعقم DPBS سبعة في الفحص مع مجموعة واحدة تحتوي على 24 أنسجة بشرة.
يعمل DPBS المعقم كتحكم سلبي وكذلك محلول غسيل. يجب تحضير 5٪ SDS واستخدامها كعنصر تحكم إيجابي. يبدأ فحص تهيج الجلد عند استلام مجموعة EPIDERM EPI 200 SIT.
تأكد من التحقق من جميع مكونات المجموعة للتأكد من سلامتها واتصل بشركة Mat Tech على الفور مع أي قلق إذا كان كل شيء موجودا ، فانتقل إلى الخطوة التالية. لبدء الاختبار ، دع وسيط الفحص المرفق بالمجموعة يصل إلى درجة حرارة الغرفة. لا تسخن مسبقا في غطاء التدفق الرقائقي.
قم بإعداد صفيحة واحدة معقمة من ستة آبار لكل ثلاثة إدخالات لأنسجة البشرة وماصة 0.9 مل من وسط الفحص في كل بئر في ظل ظروف معقمة. افتح الكيس البلاستيكي الذي يحتوي على صفيحة 24 بئر تحتوي على أنسجة البشرة تحت تدفق هواء معقم. قم بإزالة الشاش المعقم واستخدم ملقطا معقما لإخراج كل حشد يحتوي على أنسجة البشرة بعناية.
قم بإزالة أي قوارب متبقية تلتصق بالجوانب الخارجية للملحق عن طريق النشاف اللطيف على شاش معقم أو ورق ترشيح. ثم ضع المناديل في لوحة البئر المعقمة الفارغة 24 في غضون الدقائق الخمس التالية. افحص الإدخالات بصريا.
سجل أي عيوب في الأنسجة ورطوبة زائدة على السطح. لا تستخدم الأنسجة أو الأنسجة المعيبة. مغطاة بالكامل بالسائل.
إدراج الأنسجة المثلى. يجب أن يكون له سطح جاف وخالي من المفرزات أو الأجزاء غير المستوية أو السوائل الزائدة على السطح. بعد ذلك ، باستخدام مسحة قطنية معقمة ، جفف سطح الأنسجة بعناية.
حاول ألا تلمس الأنسجة مباشرة. التأثيرات الشعرية كافية لإزالة الرطوبة من السطح بعد تجفيف السطح. انقل ثلاثة مناديل إلى الصف العلوي من كل ستة.
لوحة جيدة مملوءة مسبقا بوسط فحص 0.9 ملليلتر. حرر أي فقاعات هواء محاصرة أسفل الحشوات. بعد ذلك ، ضع ألواح البئر الستة التي تحتوي على الإدخالات في الحاضنة لمدة ساعة واحدة.
ما قبل الحضانة عند 37 درجة مئوية. في نهاية فترة ما قبل الحضانة الأولى ، انقل الإدخالات من الآبار العلوية إلى الآبار السفلية للوحة الآبار الستة. ضع الأطباق مرة أخرى في الحاضنة لإجراء حضانة مسبقة طوال الليل.
ضع باقي وسيط الفحص في الثلاجة. بعد الحضانة المسبقة طوال الليل ، يمكن تطبيق مواد الاختبار الكيميائية على إدخالات أنسجة البشرة. قبل البدء في فحص التعرض الكيميائي ، ضع جميع الأجهزة والمحاليل والمواد الكيميائية اللازمة في درجة حرارة الغرفة.
في الغطاء المعقم ، امسح جميع الزجاجات غير المعقمة بنسبة 70٪ من الإيثانول قبل وضعها داخل الغطاء. يجب وضع التحكم السلبي المعقم DPBS والتحكم الإيجابي و 5٪ SDS والماء المقطر في غطاء المحرك ودرجة حرارة الغرفة أيضا. يجب وضع قارورة كبيرة جانبا للنفايات.
تحضير واحد ستة. لوحة البئر لكل مادة كيميائية عن طريق ملء الصف العلوي فقط ب 0.9 مل من وسط الفحص لكل بئر. قم بتسمية كل لوحة برقم الأنسجة والاسم الكيميائي.
قبل حوالي خمس دقائق من التعرض المخطط للمواد الكيميائية. قم بإزالة ألواح البئر الستة التي تحتوي على أنسجة الشرط من الحاضنة. ثم قم بتقييم سطح الأنسجة بصريا.
قم بإزالة أي رطوبة باستخدام أطراف قطنية معقمة ولا تضغط على سطح الأنسجة. أخيرا ، قم بتسمية أغطية ألواح البئر الستة برموز أو أسماء مواد الاختبار. لا تختبر أكثر من ست مواد كيميائية ، بما في ذلك الضوابط السلبية والإيجابية لكل منها ثلاث نسخ في اختبار واحد.
استخدم تطبيقا كيميائيا وفاصل غسيل مدته دقيقة واحدة للتعامل مع مواد الاختبار المعروفة. اتبع التعليمات الواردة في ورقة بيانات سلامة المواد أو MSDS للعينات المشفرة أو غير المعروفة. اتبع إرشادات السلامة الكيميائية واستخدم خزانة جيدة التهوية.
ارتد القفازات واحم عينيك وأنسجة الوجه بالمواد الكيميائية على فترات زمنية دقيقة واحدة لتسهيل شطف المواد الكيميائية للاختبار بعد التعرض ، واحتفظ بالصفائح التي تحتوي على أنسجة الجرعة في الغطاء الرقائقي حتى يتم تناول الأنسجة الأخيرة. سيتم استخدام لمبة متجهة إلى الماصة طوال الإجراء لمعالجة الأنسجة واختبار المركبات. يمكن استخدام اشتعال الموقد بنسن لتوليد طرف على شكل لمبة لاختبار المواد الكيميائية السائلة.
قم بتوزيع 30 ميكرولترا من مادة اختبار السائل مباشرة فوق المنديل وابدأ المؤقت على الفور حتى يتم العد التنازلي. ضع شبكة النايلون على سطح الأنسجة عندما يصل المؤقت إلى دقيقة واحدة ، أضف المركب السائل الثاني. استخدم ثلاثة أنسجة لكل اختبار كيميائي تذكر إضافة كل مركب على فترات دقيقة واحدة.
لاختبار المواد شبه الصلبة، استخدم ماصة إزاحة موجبة لتوزيع 30 ميكرولترا مباشرة فوق الأنسجة. إذا لزم الأمر ، انشر المادة الكيميائية بماصة المراعي لتتناسب مع حجم الأنسجة. قبل وقت قصير من تطبيق المادة الصلبة ، قم بترطيب سطح الأنسجة ب 25 ميكرولترا من DPBS المعقم لتحسين ملامسة سطح الأنسجة مع مادة الاختبار الكيميائية التي تملأ ملعقة تطبيق حادة 25 ملليغرام بمادة الاختبار الأرضية الدقيقة.
ضع مادة الاختبار الكيميائية الصلبة على سطح الأنسجة. إذا لزم الأمر، استخدم لمبة معقمة تتجه إلى جانب الماصة لتفريغ الملعقة تماما. رج الحشوات برفق لتحسين انتشار المادة الصلبة على السطح.
يمكنك أيضا استخدام المصباح الذي يمر عبر الماصة لتتناسب مع حجم الأنسجة. لا تضغط على سطح الأنسجة. أخيرا ، قم بتطبيق DPBS كتحكم سلبي و 5٪ SDS كتحكم إيجابي على إدخالات الأنسجة أيضا في ثلاث نسخ بعد جرعات الأنسجة الأخيرة ، انقل جميع الألواح لمدة 35 زائد أو ناقص دقيقة واحدة إلى الحاضنة المرطبة 37 درجة مئوية.
خلال هذه الحضانة ، تأكد من وضع جميع المواد اللازمة لخطوات الغسيل في الغطاء. بعد الحضانة لمدة 35 دقيقة ، قم بإزالة جميع الأطباق من الحاضنة. ضعها في الغطاء المعقم وانتظر حتى فترة 60 دقيقة حتى يكتمل التعرض للمواد الكيميائية لأنسجة الجرعة الأولى.
بعد ذلك ، ابدأ إجراء الغسيل. اشطف المناديل باستخدام DPBS المعقم 15 مرة. لإزالة أي مادة اختبار متبقية ، املأ إدخال الأنسجة باستخدام تيار مستمر من DPBS يتم توفيره على بعد 1.5 سم من سطح الأنسجة وتفريغه.
تأكد من أن دفق DPBS ليس ضعيفا جدا وإلا فلن تتم إزالة مادة الاختبار. تذكر أن تحافظ على الفاصل الزمني لمدة دقيقة واحدة لغسل أربعة مناديل بشبكة من النايلون خمس مرات وقم بإزالة الشبكة بعناية باستخدام ملقط حاد مدبب. ثم استمر في الغسيل ال 10 المتبقية بعد يوم 15 ، اشطفه باستخدام زجاجة الغسيل المغمورة بالكامل ثلاث مرات و 150 مل من DPBS ورجها لإزالة ما تبقى من مادة الاختبار.
أخيرا ، اشطف الأنسجة. أدخل مرة واحدة من الداخل ومرة من الخارج باستخدام DPBS معقم. قم بإزالة أي فائض من DPBS من الأنسجة عن طريق هز الملحق برفق ونشفه على ورق النشاف المعقم.
بعد ذلك ، انقل إدخالات الأنسجة الملطخة إلى لوحة الآبار الستة الجديدة المملوءة مسبقا بوسط الفحص. مرة أخرى ، تذكر أن كل هذه الخطوات يجب أن تتم خلال فترة دقيقة واحدة للحفاظ على وقت التعرض البالغ 60 دقيقة لكل مكشوف. بعد شطف الأنسجة الأخيرة ، جفف سطح كل منديل بعناية باستخدام قطعة قطن معقمة.
إذا كانت آثار المادة الكيميائية لا تزال موجودة على السطح ، فحاول إزالتها باستخدام قطعة قطن معقمة. آخر احتضان للأنسجة في الحاضنة لمدة 24 ساعة قادمة. سجل وقت بدء الحضانة في ورقة وثائق الأساليب.
قم أيضا بتسجيل جميع التطبيقات المختلفة في ورقة وثائق الطريقة. ملحق لإجراءات التشغيل القياسية التي توفرها شركة Mat Tech Corporation لتحريك الألواح في غطاء المحرك. انقل الملحق إلى الجزء السفلي من ستة ألواح جيدة مملوءة مسبقا بوسائط 0.9 ملليلتر.
اجمع الوسائط من الصف العلوي وقم بتحرير الأنبوب في صفيحة 24 بئر مسبقة ، ثم يتم وضعها عند درجة حرارة 20 درجة مئوية تحت الصفر. حتى التحليل ، يعد تحليل السيتوكينات و / أو الكيموكينات التي يتم إطلاقها في وسط الثقافة خطوة اختيارية. استمر في الحضانة لمدة 18 إلى زائد أو ناقص ثلاث ساعات أخرى لتسمية فحص MTT 2 24 ألواح بئر مع الأسماء أو الرموز الكيميائية.
تذكر أن MTT سام ، لذا تأكد من ارتداء قفازات واقية. عند المناولة. قم بإعداد محلول MTT عن طريق إذابة تركيز MTT وتخفيفه باستخدام مخفف MTT.
احم من الضوء لأن MTT حساس للضوء واستخدمه في غضون ساعتين إلى ثلاث ساعات. نظرا لأن MTT تتحلل بمرور الوقت ، فإن الماصة 300 ميكرولتر من وسط MTT في كل بئر من لوحة 24 بئر. الآن قم بإزالة ألواح البئر الستة من الحاضنة.
امسح الجزء السفلي من الإدخالات على ورق نشاف وانقلها إلى 24 لوحة بئر مملوءة مسبقا ب MTT. ضع طبق 24 جيدا في الحاضنة واحتضنه لمدة ثلاث ساعات. لا تنس تسجيل وقت بدء حضانة MTT في MDS الالتزام الصارم بوقت الحضانة لمدة ثلاث ساعات لتجنب الحصول على قراءات MTT مختلفة عند اكتمال حضانة MTT ، استخدم مضخة شفط مع مصيدة نفايات سامة لشفط وسط MTT برفق من جميع الآبار.
أعد ملء الآبار ب DPBS والشفاط. مرة أخرى ، كرر هذا الشطف مرتين أخريين وتأكد من جفاف الأنسجة بعد الشفط الأخير. بعد الغسلات ، انقل الإدخالات إلى لوحة جديدة 24 بئر ، اغمر الإدخالات عن طريق سحب ملليلترين من محلول الاستخراج برفق في كل إدخال.
سيرتفع المستوى فوق الحواف العلوية للملحق ، وبالتالي يغطي الأنسجة بالكامل من كلا الجانبين. أغلق الصفيحة المكونة من 24 بئرا باستخدام مادة مانعة للتسرب حراري أو طفيلي لمنع الاستخراج والتبخر. سجل وقت بدء الاستخراج في ورقة توثيق الطرق واستخرج لمدة ساعتين على الأقل في درجة حرارة الغرفة مع الرج اللطيف على شاكر اللوحة بعد اكتمال فترة الاستخراج، اخترق الإدخالات بإبرة حقن أو لمبة متجهة إلى الماصة واترك المستخلص يتدفق إلى البئر الذي تم أخذ الإدخال منه.
تخلص من الإدخالات المثقوبة وقم بسحب المحلول في البئر لأعلى ولأسفل ثلاث مرات حتى يصبح متجانسا. يمكن أيضا استخدام شاكر لوحة مضبوطة على 120 دورة في الدقيقة لكل منديل. انقل قطعتين من 200 ميكرولتر من الشكل الأزرق والمحلول إلى صفيحة عيار دقيقة ذات قاع مسطح سعة 96 جيدا.
انقل التكرارات وفقا لتصميم اللوحة الثابتة الوارد في جدول البيانات المصاحب لبروتوكول الفيديو هذا للفراغات. استخدم بروبانول ISO ، واقرأ الكثافة الضوئية أو OD ومقياس الطيف الضوئي للوحة 96 بئر باستخدام طول موجي يبلغ 570 نانومتر دون استخدام مرشح مرجعي. أدخل النتائج في جدول البيانات لحساب النتائج تلقائيا.
ضع في اعتبارك التصحيحات الناتجة عن اختبار التداخل الكيميائي كما هو موضح في البروتوكول المصاحب ، يتم تصنيف مادة كيميائية للاختبار على أنها مهيجة. إذا كانت النسبة المئوية لصلاحية الأنسجة تساوي أو أقل من 50٪ بعد التحليل الضوئي الطيفي ، فإن OD خمسة 70 من أنسجة NC أكبر من أو يساوي واحدا وأقل من أو يساوي 2.5. ومتوسط صلاحية أنسجة الكمبيوتر المعبر عنها كنسبة مئوية من أنسجة التحكم السلبية أقل من 20٪ و SD المحسوبة من النسبة المئوية الفردية لتقلبات الأنسجة لثلاثة مكررات معالجة بشكل متماثل أقل من 18٪ يمكن اعتبار المركبات التي تنتج قيم بقاء الخلية أقل من 50٪ مهيجات.
لقد أوضحنا لك للتو كيفية إجراء اختبار تهيج الجلد الذي تم التحقق من صحته لمدة 60 دقيقة و 42 ساعة باستخدام نموذج جلد الإنسان المعاد بناؤه. البشرة. عند إجراء هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر أن جزءا كبيرا من الاختبار يتم إجراؤه في ظل ظروف معقمة أو إنتانية. إذا كانت هناك حاجة لأي تعديل للطريقة أو إذا كنت بحاجة إلى شرح أفضل لأي من خطوات الإجراء ، فلا تتردد في الاتصال بنا للحصول على المساعدة والمشورة.
هذا كل شيء. شكرا لك على المشاهدة ونتمنى لك التوفيق في تجاربك.
النظرة العامة
يوضح هذا الفيديو اختبار تهيج الجلد EpiDerm (EpiDerm SIT)، وهو طريقة في المختبر لتقييم تهيج الجلد الناجم عن المواد الكيميائية، بما في ذلك المكونات التجميلية والصيدلانية.
مكونات الدراسة الرئيسية
مجال العلم
- علم السموم في المختبر
- اختبار الأمراض الجلدية
- تقييم تهيج الجلد
الخلفية
- نموذج EpiDerm هو البشرة البشرية المعاد بناؤها المستمدة من الخلايا البشرية العادية.
- يهدف هذا النموذج إلى استبدال طرق اختبار الحيوانات التقليدية.
- تم التحقق من صحة بروتوكول الاختبار لمختلف المنتجات التي تلامس الجلد البشري.
- تشبه الأنسجة البشرة البشرية في الجسم من حيث التركيب البنيوي والكيمياء الحيوية.
غرض الدراسة
- توفير بديل موثوق به في المختبر لاختبار تهيج الجلد.
- تسهيل تحديد المخاطر ووضع العلامات للمواد الكيميائية.
- لضمان الامتثال للمتطلبات التنظيمية للمنتجات التجميلية والصيدلانية.
الطرق المستخدمة
- تحضير وزراعة أنسجة EpiDerm.
- تعرض الأنسجة للمركبات المهيجة.
- تقييم حيوية الخلايا باستخدام اختبار MTT.
- تحليل السيتوكينات والكيموكينات المنبعثة في الوسط.
النتائج الرئيسية
- يوفر نموذج EpiDerm نتائج قابلة للتكرار قابلة للمقارنة باختبارات الجسم الحي.
- تظهر المركبات المختبرة المصنفة كمهيجات انخفاض في حيوية الخلايا.
- تسمح الطريقة بتقييم عدة مواد كيميائية في وقت واحد.
- تدعم النتائج تقليل اختبار الحيوانات في تقييمات سلامة المنتجات.
الاستنتاجات
- اختبار تهيج الجلد EpiDerm هو طريقة معتمدة لاختبار تهيج الجلد.
- يعزز هذا النهج في المختبر المعايير الأخلاقية في الاختبار.
- يوفر بديلاً علميًا متينًا للامتثال التنظيمي.
الأسئلة الشائعة
Executive Industry Relevance
The EpiDerm in vitro skin irritation test enables pharmaceutical and biotechnology R&D teams to assess chemical irritancy using a validated, human-relevant model, supporting regulatory compliance and ethical mandates. This approach replaces animal-based assays, providing reproducible, quantitative viability data for hazard identification and labeling. Integration of this model at the early safety assessment stage de-risks portfolios and streamlines candidate triage for topical and transdermal products.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Supports mechanistic de-risking by directly measuring human epidermal response to candidate compounds.
- Enables functional validation of irritation potential, informing early go/no-go decisions.
- Provides quantitative viability thresholds for robust target confidence in safety profiling.
Screening & Assay Development
- Delivers standardized, reproducible tissue-based assays for high-throughput screening of chemical libraries.
- Facilitates assay transferability and platform reuse across multiple compound classes.
- Generates quantitative MTT readouts, supporting reliable compound ranking and selection.
Translational & Preclinical Research
- Aligns in vitro irritation data with regulatory hazard identification requirements for translational continuity.
- Enables risk-adjusted advancement of candidates by providing human-relevant safety data prior to preclinical studies.
- Supports biomarker analysis through optional cytokine and chemokine measurement in culture media.
Pipeline & Workflow Integration
This validated in vitro assay fits within the early discovery to preclinical safety continuum, enabling rapid hazard identification and candidate triage before animal studies or clinical translation.
- Discovery Biology: Provides direct hypothesis testing of irritancy mechanisms in a human epidermal context.
- Screening: Offers reproducible, quantitative viability outputs for robust compound comparison.
- Analytics: Supplies spectrophotometric readouts and optional cytokine data for multi-parametric analysis.
- Translational Research: Bridges in vitro findings to regulatory hazard labeling and preclinical risk assessment.
- Enterprise Reuse: Standardized protocol and kit format enable broad adoption across R&D programs.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence in human skin response and reduces mechanistic ambiguity.
- Operational Value: Enhances standardization, reproducibility, and scalability for safety testing workflows.
- Strategic Value: Improves early go/no-go decisions and reduces late-stage attrition due to unforeseen irritancy.
- Portfolio Impact: Enables risk-adjusted prioritization and advancement of topical and transdermal candidates.
Implementation Considerations
- Requires expertise in tissue culture and sterile technique for assay reliability.
- Needs access to spectrophotometric instrumentation and validated analytical protocols.
- Demands strict cross-team adherence to standardized procedures for reproducibility.
- Adaptable to various chemical formats but may require protocol adjustments for unique substances.
- Limitations include the need for careful control selection and viability threshold adherence as defined in the protocol.
Biopharma FAQs
Chapters in this video
0:05
Title
1:32
Introduction
2:07
The EpiDerm - Reconstructed Human Epidermal Model
4:02
Day 0 - Preparing for the Assay
5:21
Day 0 - Tissue Conditioning
8:09
Day 1 - Chemical Exposure
16:03
Day 3 - MTT Viability Assay
19:55
Representative Results
20:33
Conclusion
15:28
Day 2 - Media Change
