تقنية في المختبر لدراسة تفاعل الخلايا التائية مع الطبقات الدهنية المستوية المدعومة

خذ شريحة تدفق تحتوي على طبقة ثنائية دهنية مدعومة ، أو SLB.

يتم اقتران SLB مع روابط محددة - جزيء الالتصاق بين الخلايا 1 أو ICAM-1 والأجسام المضادة المضادة ل CD3 - المسمى بالفلوروفورات.

أضف الخلايا التائية ومضاد CD107a Fab الذي يحمل علامة الفلوروفور - الجزء المرتبط بالمستضد لجسم مضاد ضد علامة التحلل.

يرتبط مركب مستقبلات الخلايا التائية CD3 أو TCR-CD3 بالجسم المضاد ل CD3 ، مما يؤدي إلى تشغيل TCR.

تعمل

الإشارات من الداخل إلى الخارج التي يسببها الزحف على تنشيط الإنتجرينات على السطح ، والتي ترتبط ب ICAM-1 الثابت.

يؤدي الاقتران إلى إعادة تنظيم الهيكل الخلوي - إعادة ترتيب الأنابيب الدقيقة ، وبلمرة الأكتين التي تؤدي إلى الانتشار الجانبي للخلية على سطح SLB.

يسمح الانتشار لمزيد من تفاعلات مستقبلات الترابط لتشكيل مجموعة تنشيط فوق الجزيئات أو SMAC ، مما يؤدي إلى إنشاء مشبك مناعي.

تتحرك حبيبات الخلايا التائية اللايتية على طول الأنابيب الدقيقة وتندمج مع غشاء البلازما ، مما يكشف عن علامات التحلل على سطح الخلية ، والتي ترتبط بمضاد CD107a Fab.

باستخدام المجهر الفلوري ، تصور المشبك المناعي المخصب بمجمعات TCR-CD3 والإنتجرينات وعلامات التحلل.

ابدأ باستخدام ملقط من نوع مقص البولي بروبلين لغمر الأغطية الزجاجية في محلول سمكة المفترسة الحمضية المحضرة حديثا لمدة 25 إلى 30 دقيقة. في نهاية الغسيل، اشطف الغطاء