Summary
식사 기간에 있는 길게하는 것은 구면 고통을 가진 인간의 보호 행동과 유사한 설치류에 있는 구안면 nociceptive 행동을 나타냅니다. 먹는 것은 훈련이나 동물 조작이 필요하지 않으며, 피질 참여가 필요하며, 다른 실험적으로 유발된 행동과 경쟁하지 않는 행동이며, 이 분석이 대체 반사 또는 작동 측정과 구별됩니다.
Abstract
식사 기간의 연장은 구안면 통증을 가진 인간의 보호 행동과 유사성을 갖는 구안면 기계 과색증의 증가를 측정하는 데 사용할 수 있습니다. 절제되지 않은 쥐의 식사 기간을 측정하기 위해 수유 행동을 기록하기 위해 며칠에서 몇 주 동안 전산화 된 수유 모듈을 지속적으로 음쇠화하고 전산화 된 공급 모듈로 유지합니다. 이 음쇠형 챔버에는 차우 펠릿 디스펜서가 장착되어 있습니다. 디스펜서는 트로프 의 바닥에 포토빔이 놓인 펠릿 트로프를 가지고 있으며 설치류가 피더 트로프에서 펠릿을 제거하면 이 빔이 더 이상 차단되지 않아 컴퓨터가 다른 펠릿을 떨어뜨리도록 신호를 보입니다. 컴퓨터는 펠릿이 쓰루에서 가져온 날짜와 시간을 기록하고 이 데이터에서 실험자가 식사 매개 변수를 계산할 수 있습니다. 식사 매개 변수를 계산할 때 식사는 전작에 기초하여 정의되었고 10 분 (즉, 동물이 동물의 식사가 끝날 10 분 동안 먹지 않을 때)로 설정되었으며 최소 식사 크기는 3 펠릿으로 설정되었습니다. 식사 시간, 식사 수, 음식 섭취량, 식사 크기 및 식사 간 간격은 운영자가 원하는 기간 동안 소프트웨어에 의해 계산될 수 있습니다. 식사 기간을 계산할 수 있는 수유 매개변수 중 수컷 쥐와 마우스 및 암컷 쥐에서 구안성 고치의 연속 비침습적 생물학적 마커가 있는 것으로 나타났다. 식사 시간 측정은 정량적이며, 교육이나 동물 조작이 필요하지 않으며, 피질 참여가 필요하며, 다른 실험적으로 유발된 행동과 경쟁하지 않습니다. 이러한 요인은 구안면 고드름을 기록하는 다른 작동 또는 반사 방법과 이 분석법을 구별합니다.
Introduction
동물 모델은 구안면 손상 및 염증1,2와관련된 통증과 고드름을 연구하는 데 사용되었지만 적절한 동물 모델의 부족은 메커니즘에 대한 불완전한 이해를 초래합니다. 현재 모델은 급성 및 만성 구안면 통증에 관련된 다양한 메커니즘을 이해하는 데 도움이되지만 이러한 동물 모델에는 강점과 약점이 있습니다.
대부분의 모델은 짧은 기간 동안 행동 적 향각 응답을 측정합니다. 얼굴 그루밍은 안면 신경3의수축에 따라 알려진 행동 반응이다. 다른 연구는 입시 측포크 또는 힌드포와 얼굴 마찰을 측정뿐만 아니라, 포머틴 주사를 투여 한 후 헤드의 펄럭이는 (TMJ) 또는 입술4-7. 헤드 철수 대기는 수정된 꼬리 플릭 진통 미터가 쥐8의면도 된 바이브리사 패드에 열을 적용 한 후 nociceptive 반응(즉, 헤드 인출)을 양화하는 데 사용되는 모각 동작을 측정하는 또 다른 모델이다. 디거스컬과 안마사 근육 활동은 또한 TMJ9에글루타민염 주사 후 통증의 상관 관계로 기록되었습니다. 또 다른 연구는 염증TMJ와 남성과 여성 쥐에 있는 nociceptive 반응을 평가하기 위하여 잠 매개변수에 있는 변경을 측정했습니다, 이 매개변수는 잠 대기 시간, 급속한 눈 운동 (REM), 비 REM 잠의 백분율 및 REM 잠10의백분율을 포함했습니다. 행동 적 향각 반응을 측정하는 대부분의 동물 모델은 짧은 시간 프레임, 즉 11-14일당 분에서 시간까지를 활용합니다. 또한, 대부분의 동물 모델 시험은 광상 과 야행성 동물에서 발생하며, 쥐와 같이, 이것은15-18의결각 결과를 혼동할 수 있는 스트레스를 유발할 수 있다. 위의 소는 다양한 구안면 조건에서 치각 반응을 측정하지만 짧은 기간 동안 급성 질환을 연구하는 데만 사용할 수 있습니다. 대안 분석법은 적당한 기간의 고드름의 척도로 얼굴 표정을 사용했습니다, 그러나 이 방법론은 주관적인19일수 있습니다.
지속적 또는 만성 구안성 고드름을 평가하기 위해 일부는 신경 수축 또는 TMJ염증3,20을실시 동물의 기계적 감도를 평가하기 위해 피부 표면에 폰 프레이 필라멘트의 적용을 사용했다. Liverman 외. 2009 쥐의 매스터 근육에 CFA 주사 다음 등급 monofilaments를 사용 하 여 금 단 응답을 측정 21,22. 야마자키 외 2008은 CFA로 TMJ를 주입한 다음 14일 동안 TMJ 영역에 적용되는 기계적 또는 열 또는 냉간 자극에 대한 지각 적 행동을 정량화하였다. 불행 하 게도, 이러한 지적 행동 assays 동물 구속을 포함, 스트레스 호르몬을 생산 하는, 학습 또는 측정 된 결과 방해할 수 있는 대체 행동.
치아에서 고드름을 측정하는 모델은 턱 개구부 반사를 활용하지만이 방법은 신뢰할 수없는23 또는 부정확한24일 수 있습니다. 전동 활성은 치아고드름(25)을측정하는 데 사용되어 왔지만, 이 방법은 일반적으로 동물이 의식을 잃을 것을 요구하지만, 한 연구에서 치아 고치름은 자유롭게 움직이는쥐(26)에서조사되었다. 2008년, 칸은 민감한 스트레인게이지(27)를 사용하여 치과 고치와 매스틱 기능 사이의 관계를 연구했지만, 이 물린 지속 시간 모델은 정상적인 활동(28)으로부터동물을 제지해야 한다. 물린 힘은 인간에 있는 치아 고통의 믿을 수 있는 측정입니다 그러나 쥐는 물린 힘을 측정하기 위하여 훈련 및/또는 구속이 필요하기 때문에 긴장의 근원은 의심스러운 생리적 중요성을 가진 사실 인정을 생성할 수 있는 소개됩니다29-31
사용 식 설계를 사용하여 지정 행동을 평가함으로써 구속과 스트레스의 몇 가지 한계를 극복할 수 있습니다. 하나의 작동 모델은 불편한 온도의 회피를 사용하여 구안면 고치(32-35)를평가하고 특성화합니다. 이 보상 충돌 모델은 설치류가 가열 또는 냉각 된 열 프로브34,36에대해 자발적으로 얼굴을 배치하도록 유도하는 가당 우유의 보상을 기반으로합니다. 그러나, 시험은 동물 훈련을 필요로하지만, 분석의 강도는 데이터가 자동화 된 방식으로 수집된다.
또 다른 동물 모델은 구안면 고치(37)의인덱스로 노치 프레이션 유도 gnawing 기능 장애를 사용했다. 그러나 설치류는 튜브에 국한되어 있으며 유일한 탈출은 다웰을 통과하여 빠져 나가는 것입니다. 이 모델의 장점은 마우스에서 급성 또는 만성 턱 부상 후 턱 기능을 측정한다는 것입니다. 그러나 설치류는 제한되어 있어 혼란스러운 대체 경쟁 동작, 즉 탈출을 추가하여 스트레스가 많고 따라서 고치 분석 결과에 영향을 줄 수 있습니다.
식사 기간은 TMJ 관절염38-41,치아 펄프노출(42)및 근육손상(43)을가진 동물의 고치름을 측정하는 데 사용되어 왔다. 동물이 식사를 시작한 후 구안성 고치름을 경험한 설치류가 더 느리게 먹었습니다. TMJ 통증을 경험하는 환자는 또한 그들의 음식을 피하기 위하여 더 오래 걸리고 TMJ 고통이44-46감소될 때 주기 길이 단축. TMJ 통증이 있을 때 식사 기간의 연장은 "보호 행동"이 될 것으로 예상되며, 운영적으로 불각성행동(47)으로정의된다.
식사 기간은 남성과 여성 쥐에서 최대 19일 동안 비침습적 방법을 사용하여 TMJ 고치름을 측정하고 남성 마우스에서 6일(최장 기간 테스트)을 하며고치름 38-41의생물학적 마커로 설명될 수 있다. 식사 기간이 향응을 측정하는 것을 지원하기 위해, 노치프는 동물의 식사 기간이 정상으로 돌아오는 원인이 약리학적 개입에 의해 감소 될 수있다38,40,41. 이것은 또한 피각성 뉴런이 capsaicin을 사용하여 파괴되었을 때 확인되었습니다. 신경 파괴 후 동물 식사 기간은 TMJ 40에 CFA의 주입 다음 증가되지 않았다.
다음은 식사 기간 데이터를 얻고 통계적으로 분석하는 방법에 대한 프로토콜입니다.
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Protocol
이 모델에서 쥐 또는 마우스는 음식과 물 광고 리비툼을주어졌다. 텍사스 A&M 대학 베일러 대학 치과 기관 동물 관리 및 사용 위원회는 모든 실험 프로토콜을 승인. 아래 의 특정 설정은 기울임꼴에 표시되며 쥐 TMJ 관절염 모델에 특별히 활용된다. 마우스는 또한 본 모델및 대체 치아 통증 및 근생성 구안면 통증 동물 모델에서42,43뿐만아니라 사용될 수 있다.
1. 소프트웨어 설정
- 피더 장치에 대한 동물 모니터 소프트웨어를 컴퓨터에 로드합니다.
- 동물 모니터 소프트웨어는 이제 아이콘을 클릭하여 열리고 파일 메뉴 선택에서 "구성"풀 다운 옵션을 선택합니다.
- "동물 모니터 구성" 창에서 "펠릿 전달 입력"(그림1A)이라는제목의 상자를 선택 취소합니다.
참고: 이 상자는 일반적으로 기본적으로 공장에서 선택됩니다. 이 옵션을 선택 해제합니다. 조사자가 이 옵션을 선택 취소하면 펠릿이 분배될 때가 아니라 골짜기에서 펠릿을 제거하여 결과가 기록됩니다.
참고: "자동 파일 이름 지정" 상자가 선택되면 소프트웨어가 자동으로 파일의 이름을 지정합니다(그림1A). 이 상자는 일반적으로 기본적으로 공장에서 선택됩니다. - 타이머 표시등이 06:00(오전 6:00)에 켜지고 20:00(8:00 pm)에 꺼집니다.
참고: 피더 장치의 하드웨어가 수정되어 상자 내의 조명이 소프트웨어에 의해 제어되지 않고 대신 격리된 24시간 타이머에 연결됩니다. 따라서, 구성 소프트웨어에 표시된 "하우스 라이트"는 이러한 예에서 작동하지 않았다. - 편집 풀 다운 메뉴를 선택하고 실험을 선택합니다. 제목 "상자 01 -"가 있는 창이나타납니다(그림 1B).
- 이 창 내에 데이터가 저장될 파일 이름을 입력합니다.
참고: 파일 이름이 입력되지 않으면 소프트웨어에서 자동으로 이름이 지정됩니다. 실험의 세부 정보를 이 창에 추가하고 데이터 파일로 저장할 수 있습니다. 창에 있는 정보를 저장하고 후속 실험에 사용할 수도 있습니다. - "실험 길이(일)"라는 입력 상자에 실험의 총 시간보다 큰 숫자를 입력합니다.
참고: 이렇게 하면 실험이 완료될 때까지 소프트웨어가 데이터를 저장하고, 동물이 여전히 먹이 모듈에 있더라도 소프트웨어가 데이터를 기록하지 못하도록 하는 이 값을 너무 짧게 설정하는 데 실수가 있을 수 있습니다. - "하루 시간 수"라는 제목의 입력 상자에 24를 입력합니다.
참고: 길이는 실험자의 사양으로 수정할 수 있습니다. - "식사 기간 종료 기준(최소):"이라는 제목의 상자에 10을 입력합니다.
참고: 쥐의 경우 식사는 이전연구(48)에 근거한 식사 기준의 10분 끝을 사용하여정의되었으며(즉, 식사는 펠릿을 복용하지 않는 10분 동안 브래킷을 찍었음) 이 소프트웨어 패키지의 식사당 3개의 펠릿으로 최소 식사 크기를 설정하였다. - "펠릿 크기(mg)"라는 제목의 상자에 45를입력합니다. 개인이 이 창 내에서 마우스 입력 20을 사용하려는 경우.
- 쥐의 경우 피더 디스펜서 호퍼에 45 mg 설치류 차우 펠릿을 추가합니다.
참고: 마우스의 경우 차우 호퍼에 20 mg 설치류 차우 펠릿을 추가합니다. - 실험 창의 "위상" 섹션에서 "이름" 필드와 "#of Hours" 필드 유형(24)에서 의 용어를 입력합니다(그림1B).
참고: "위상" 섹션 아래에는 두 개의 큰 열린 필드가있습니다. 첫 번째 큰 열린 필드는 이전 "위상" 및 "이름" 필드에 입력된 텍스트로 채워집니다. - 다음 큰 오픈 필드에는 "데이 페이즈" 헤더가 "이름"이라는 제목의 필드에 라이트라는 단어를 입력하고 숫자 60 "백분율"이라는 제목의 필드에 입력합니다.
참고: 입력된 텍스트는 아래 큰 필드를 채웁니다. - 다음으로 어둡다라는 단어인 "이름"이라는 제목의 필드에 입력하고 숫자 40인 "백분율"이라는 제목의 필드에 입력합니다. 참고: 이러한 항목의 60%는 빛의 위상에 기인하며 40%는 어두운 위상에 기인합니다. 소프트웨어가 식사 패턴을 계산하면 이 정보가 사용됩니다. 이러한 설정은 14:10 빛/어두운 주기에 보관되는 여성 동물을 사이클링하는 데 일반적입니다.
- "이와 같은 모든 상자 설정" 버튼을 선택합니다. 이 정보를 저장한 다음 확인을 누르습니다.
- "시작 상자" 화면이 나타나고, 피더를 선택하여OK(그림 1C)를활성화하고 공격합니다.
- 다음으로 동물 모니터 런타임 창은 식사 패턴데이터(그림 1D)와함께 나타납니다.
참고: 이 창에서 "펠릿 의 #디스펜싱"을 모니터링하고 기록하여 쥐의 현재 상태를 결정합니다. 약 300 g 무게 건강 한 수 컷 쥐 일반적으로 사이 먹을 것 이다 300-800 45 mg 펠 릿 하루. - 파일은 매일 생성되고 자동으로 저장됩니다. CSV 확장. 이러한 파일을 열어 음식 섭취량, 식사 수, 식사 시간, 식사 크기 또는 간 식사 간격과 같은 식사 패턴 데이터를 검색합니다. 이러한 식사 패턴에 대한 간격은 하루 종일 또는 어두운 단계와 빛 단계와 같은 하루의 단계에 대해 계산할 수 있습니다. 위에서 언급 했듯이 설정은 14:10 라이트/어두운 주기용입니다. 각 펠릿이 쓰루에서 제거된 경우의 원시 데이터도 원시로 기록됩니다. CSV 파일입니다.
참고: 이전 버전의 소프트웨어에서는 최소 3개의 펠릿 크기의 최소 식사 크기는 생성을 위한 계산에 사용되지 않습니다. CSV 파일입니다. 또한 이전 소프트웨어를 사용하여 평균 식사 시간을 얻으려면 .의 평균 식사 기간 열의 값에서 10 분 을 빼야합니다. CSV 파일입니다.
소프트웨어가 작동 중일 때 운영자는 수동으로 파일 풀 다운 메뉴 옵션을 선택하고 매일 "원시 데이터 저장"을 선택할 수 있습니다. 이렇게 하면 전체 실험이 아닌 24시간 동안 원시 데이터를 저장합니다. 이 원시 데이터는 사용자의 재량에 따라 대체 소프트웨어에 의해 처리될 수 있습니다.
참고: 표시된 결과에서 우리는 3 펠릿의 최소 식사 크기를 포함하도록 대체 소프트웨어를 사용했습니다.
2. 식사 기간 분석
- 포토빔 컴퓨터 활성화 펠릿 피더가 장착된 음쇠가 있는 챔버에 개별 쥐를 배치합니다.
참고 : 이 공급 단위에는 두꺼운 흡수성 용지 한 장을 배치하는 졸업 된 물병과 폐팬이 있습니다. 피더 디스펜서 호퍼 45 mg 설치류 차우 펠릿은 쥐또는 20 mg 설치류 차우 펠릿을 쥐에 첨가할 수 있다. 차우 펠릿은 V 모양의 먹이 통으로 분배되며이 쓰루의 바닥에는 포토빔이 있습니다. 이 포토빔을 부러뜨려 쓰루에 분배된 펠릿이 발견됩니다. 쥐가 피더 트로프에서 이 펠릿을 제거하면 포토빔이 복원되고 컴퓨터가 다른 펠릿을 떨어뜨리도록 신호합니다. 포토빔의 복원은 또한 날짜를 기록하고 분배 된 펠릿의 실행 집계를 유지하기 위해 컴퓨터를 트리거합니다. 그런 다음 이 펠릿 집계를 분석하여 Med Assoc. Inc. 소프트웨어를 사용하여 하루 중 어느 부분이나 음식 섭취량, 식사 시간, 식사 시간, 식사 크기 또는 간 간격을 결정합니다. 다시 원시 . CSV 데이터 파일은 외부 소프트웨어39,40,49-51에의해 분석될 수 있다. - 총 먹힐환 수, 소비된 물의 양 및 동물의 무게를 기록하여 실험 중에 쥐의 일반적인 건강을 분별합니다.
- 물병을 헹구고 매일 담수를 채우고 필요할 때 차우를 피더 호퍼에 넣습니다.
- 매일 케이지 아래에 있는 두꺼운 흡수성 용지와 덤프 하고 고압 공기를 사용하여 매일 피더의 이동 부분에서 먼지를 날려 버.
참고: 개인 보호장비(예: 가운, 장갑, 마스크 및 마스크)가 필요합니다. - 실험이 완료된 후 바닥, 폐프라이팬 및 물병을 제거하고 이러한 구성 요소를 세척합니다. 또한, 수제 세척에서 수유 전자 제품을 손으로 또는 식기 세척에서 제거합니다.
3. TMJ 관절염의 유도
- 실험을 시작하기 최소 4일 전에 동물을 피더에 배치합니다.
참고: 이 데이터는 기준 공급 동작을 얻기 위한 사전 일로 보고됩니다. 그런 다음 동물을 피더에서 제거하여 치료를 받습니다. 치료의 한 종류는 관절염 TMJ를 유도하는 것이었습니다. 이 모델의 경우 쥐는 08:00(즉, 광상의 시작)에 완전한 Freund의 보조 (CFA)를 주입한 후 쥐는 이소플루란 (5 % 흐름)으로 마취된다. - 각 TMJ의 periarticular 공간에 양자간 50 L에서 250 mg의 CFA를 주입하십시오.
참고: 예에서(도 2)250 mg의 CFA50 mg에서 50 L은 각 TMJ에 주입되었지만, 15 μl의 작은 부피에서 10 mg의 낮은 용량은 시간의 짧은 기간 동안 효과적이다52. - 0.9% 식염수의 50 L로 제어 쥐 TMJ를 주입하십시오. 참고: 모든 동물은 마취를 유도한 후 5분 이내에 이동했습니다. CFA의 작은 복용량이 적은 부피로 주어진 경우에 대조군 쥐는 식염수의 이 동일한 양을 수신할 것입니다.
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Representative Results
식사 기간은 TMJ관절염(도 2)및 충치(도3)를가진 동물에게 구로페이셜 통증 및 식사 기간 측정의 행동 상관관계가 적용되었다. 한 실험에서, 쥐는 높은 투여 후 TMJ 관절염을 했다 250 CFA의 mg 복용량 과이 치료 에 대 한 식사 기간에 상당한 증가 유도 19 일(그림 2). CFA의 낮은 복용량 (10 mg) 각 TMJ 조인트에 주입 만 식사 기간에 작은 증가 생산 2-3 일52 이 식사 기간 분석사용 하 여 CFA 관리에 대 한 복용량 응답을 나타내는. 식사 기간은 구로페이스 부위에서 발절 반응을 측정했지만 무릎 내관절염으로부터의 반응을 감지하지못했다(도 2).
두 번째 실험에서, 식사 기간은 펄프 노출을 가진 쥐에 있는 nociceptive 반응을 검출했습니다(그림 3). 펄프 노출은 충치를 초래하고 인간(42)에서치아 통증의 모델이었다. 음식 섭취량, 식사 수 및 식사 크기와 같은 다른 수유 패턴은 이러한 다른 식사 패턴을 암시하는 식사 기간이 식사 기간39만큼민감하지 않다는 것을 시사하는 식사 기간만큼 큰 범위또는 긴 기간동안 변경되지 않습니다. 식사 기간이 현저히 증가함에 따라 일반적으로 식사 수와 식사 크기에서 중요하지 않은 추세가 있어 음식 섭취가 정상에 가깝기 때문에 처리 된 동물의 체중이 가짜 또는 대조 동물의 체중과 같습니다.
도 1 및 이전 평균 및 표준 편차데이터(38-42)의 데이터로부터 80% 전력(ANOVA 사용)을 가진 최소 2분의 치료 그룹 간의 유의한 차이를 계산하려면 약 9마리의 동물/치료 그룹이 필요하다.
그림 1. 동물 모니터 소프트웨어의 스크린 샷. 패널 1A는 동물 모니터 구성 창입니다. 패널 1B는 편집 풀 다운 메뉴를 선택하고 이 메뉴에서 실험을 선택할 때 나타나는 창입니다. 패널 1C는 특정 피더 유닛의 선택적 활성화를 허용하는 창이다. 패널 1D는 나타나고 동물 모니터라는 제목의 다음 창입니다. 이 창은 활성 피더 단위의 식사 매개 변수에 대한 실시간 계산을 보여 주어 있습니다. 큰 이미지를 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2. 식사 기간은 관절염 템포로큘러 관절 (TMJ)를 가진 남성 쥐에서 19 일 동안 현저하게 길었다. 대조군스프라그 Dawley 랫트는 각 TMJ(SALINE/TMJ, n =13)에 50L 식염수의 주사를 투여하였다. 실험군에서 완전한 Freund의 보조제(CFA)의 250g은 TMJ(CFA/TMJ, n =14) 또는 무릎(KNEE/CFA, n=7)에 주입되었다. 식사 기간 데이터는 주사 (0) 전 1 일 동안 계산되었으며 TMJ 또는 무릎 주사 후 1-21 (1, 2, 3 등)에계산되었습니다. 각 관절은 주사 부위를 확인하기 위해 행동 테스트 후 해부에 의해 검사되었다. 값은 독립적인 변수 처리(식염수 및 CFA)를 갖는 반복적인 측정을 가진 SEM. 양방향 ANOVA를 ± 수단으로 주어지며, 이러한 연구에서는 종속 변수 식사 기간이 사용되었다. CFA 치료에 대한 중요한 주요 효과가 관찰되었다, F (2, 31)=4.7, p<0.05. 데이터는 Duncan의 포스트 호크 테스트를 사용하여 추가로 분석되었습니다. = p<0.05의 경우 SALINE/TMJ 그룹과 CFA/TMJ 그룹 간에 비교가 이루어졌습니다. b = p<0.05의 경우 CFA/TMJ 그룹과 CFA/KNEE 그룹 간에 비교가 이루어졌다.
그림 3. 남성 스프라크 Dawley 쥐의 6개의 상악 어금니가 노출되었고 식사 기간은 수술 후 6 일 동안 측정되었습니다. 제어 쥐는 펄프 노출 수술을하지 않았지만 마취가 투여되었습니다. 처리의 독립적인 변수(대조군, 노출) 및 시간 및 종속 가변 식사 기간을 사용하여 반복된 측정을 가진 양방향 ANOVA는 식사 기간 데이터를 분석하기 위해 사용되었다. 펄프 노출, F(1, 12)=66, P<0.001에 대해 중요한 주요 효과가 관찰되었다. 데이터는 Duncan의 포스트 호크 테스트를 사용하여 추가로 분석되었습니다. 그들의 어금니가 노출된 쥐대 대조군을 비교할 때 * = p<0.05, ** = p<0.01. ± SEM. 5마리의 쥐가 각 치료군에 있었다는 것을 의미한다.
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Discussion
구안면 통증 보고를 받은 TMJ 환자는 츄잉 시간이 증가함에 따라 통증이 증가하여 츄잉 사이클이 길어질수록 개인이45,53-56을구치하고 있다. 우리의 행동 분석은 식사 기간39를측정할 때 쥐와 마우스에서 유사한 시험을 허용합니다. 최근 발표되지 않은 연구에 따르면 폰 프레이 필라멘트 테스트는 식사 기간 측정보다 민감도가 높으며, 더 긴 기간 동안 상당한 변화를 보였지만 폰 프레이 필라멘트 테스트는 반사 반응 구성 요소를 가질 수 있지만 식사 기간 측정은 중추 신경계의 영역에 의한 처리를 필요로 합니다. 따라서 폰 프레이 필라멘트 테스트로 감도가 더 클 수 있지만 반응은 부분적으로 반사를 반영 할 수 있습니다. 비록, 중앙 효과가 있는 약물로 치료는 분석이 중앙 통증 처리의 일부 측면을 반영제안 필라멘트 테스트 결과를수정(57).
식사 기간 분석에서 분배된 총 펠릿 수를 매일 모니터링해야 합니다. 수컷 쥐는 전형적으로 45 mg 펠릿의 400-800을 섭취하고 암컷 쥐는 300-600 펠릿을 섭취할 것입니다. 일일 펠릿 값이 이러한 일반적인 값보다 적은 경우 피더 유닛을 확인해야 하며, 펠릿 디스펜서가 트로프에서 펠릿을 제거하면 5펠릿을 떨어뜨리는 경우; 펠릿 호퍼 근처의 펠릿 센서(트로프가 아님)는 먼지가 많고 청소가 필요할 수 있다. 디스펜서가 5펠릿을 떨어뜨리고 있음에도 불구하고 컴퓨터는 한 개의 펠릿만 떨어졌다는 것을 나타냅니다(낮은 수의). 따라서, 5 또는 1개의 펠릿이 트로프에 있는지 여부는 컴퓨터만 하나의 이벤트를 기록한다. 센서를 청소한 후 피더 트로프에서 펠릿을 제거하면 단일 펠릿을 분배해야 합니다. 또는 센서를 교체할 수 있습니다. 일일 펠릿 값이 이러한 일반적인 값보다 높으면 수유 통에 있는 센서가 먼지가 많고 세척이 필요할 수 있습니다. 센서를 청소하고 다음 날 확인하여 떨어뜨린 펠릿 수가 일반적인 범위 내에 떨어졌는지 확인합니다.
식사 기간은 종 차이에 의해 영향을 받을 수 있는 행동 분석. TMJ 관절염을 가진 마우스를 이용한 이전 연구에서39에는 펠릿을 비축할 쥐의 긴장이 있었습니다. 마우스는 피더 쓰루에서 펠릿을 꺼내 서 고 펠 릿을 먹는 대신 폐기물 팬에 펠 릿을 드롭. 비장 동작으로 인해 식사 패턴 측정은 마우스가 먹는 속도를 반영하지 않으며 TMJ 관절염을 가진 마우스의 기계적 과간증 수준을 반영하지 않을 것입니다. 이 비장 동작을 해결하는 한 가지 방법은 전처리 단계에서 마우스를 검사하는 것이었습니다. 마우스의 대략 40-70%에 관하여 이전 연구 결과에서 취한 총 환골의 5% 이상을 비축할 것입니다. 이로 인해 식사 패턴 데이터가 크게 변경되었습니다. 비장 문제를 제거하기 위해 마우스는 펠릿의 5 % 미만을 비축할 수 있도록 미리 선택되었습니다. 실험은 미리 선택된 동물과 비장 거동을 실험 전반에 걸쳐 모니터링하였다. 실험의 어떤 시점에서든 전체 음식 섭취량의 5% 이상을 쌓아두는 동물은 결과에서 제거되었습니다. 이 사전 선택 과정에 대한 두 가지 문제는 실험을 완료하기 위해 동물의 수를 얻기 에 충분한 마우스를 사전 검사하는 데 시간이 걸리고, 프로세스는 많은 동물을 선별해야하며, 그 중 대부분은 과잉 비용을 초래하는 실험에 사용되지 않습니다.
결론적으로 식사 기간은 실험자를 주관적이지 않은 정량적 측정이다. 먹는 조작 방법처럼 먹는 것은 피질 참여를 필요로하는 행동이지만 먹는 것은 긁힘, 폰 프레이 머리카락 또는 열과 같은 많은 반사 측정과는 다릅니다. 식사 기간을 측정할 때 동물은 테스트 전에 훈련을 하거나 응력과 대체 행동을 복합시킬 수 있는 고정 또는 처리할 필요가 없습니다. 식사 시간 측정은 연속하므로 설치류가 일반적으로 수면할 때 광상에서 테스트하는 것과 달리 어두운 단계와 광상에서 테스트가 수행됩니다. 식사 시간 측정은 특정 시간 간격으로 테스트를 짧게 수행하는 다른 방법과 달리 며칠 동안 발생할 수 있습니다. 이러한 장점은 식사 기간 측정을 헤드 리전에서 고치기 메커니즘을 연구하는 강력한 도구입니다.
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Disclosures
공개할 것은 없습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Animal Monitor software | Med Assoc. Inc | SOF-710 | East Fairfield, VT |
| Dustless Precision Pellets, Rodent, Grain-Based | Bio-Serv | F0165 | 45 mg pellets, 50,000/box |
| Dustless Precision Pellets, Rodent, Grain-Based | Bio-Serv | FO163 | 20 mg pellets |
| Complete Freund's Adjuvant | Chondrex, Inc. | 7001 | No loger provides the 5 mg/ml concentration. Can use CFA from other sources as long as the investigator consistently uses this source |
References
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