Summary
Anxiété-comme le comportement des rats testés par l’élévation plus labyrinthe varie fortement en fonction de l’environnement de test. Ici, nous montrons comment les paramètres de l’appareil, surtout des structure de bras, affectent comportement sur le labyrinthe et nous expliquer un protocole fiable pour détecter les effets des médicaments anxiolytiques. Ce rapport contribuera à la recherche de l’anxiété.
Abstract
L’élévation et le labyrinthe est un test comportemental pour évaluer l’anxiété animale chez les rongeurs. Bien que ce test est largement appliqué dans le domaine des sciences du comportement, des résultats contradictoires sont souvent fournis par différents laboratoires. Pour identifier les raisons pour différentes réalisations, nous nous sommes concentrés précédemment sur les caractéristiques de bras, qui diffèrent entre les laboratoires, la plupart notamment la présence/absence de rebords sur les côtés des bras ouverts et la transparence/opacité des murs bras fermés. Dans un précédent rapport, nous avons utilisé un conteneur personnalisé conçu pour comparer le comportement du rat sur différentes combinaisons de designs de bras ouverts et fermés dans des conditions expérimentales identiques par ailleurs et a montré que les différences dans les caractéristiques de bras interfèrent avec expérimentale résultats. En bref, corniches bras augmente significativement comportement anxiété chez le rat, tandis que bras transparents peuvent également avoir diminué ce comportement. En outre, nous avons vérifié une plus grande sensibilité de détection de l’effet d’un médicament anxiolytique dans une combinaison non-clocher bras ouverts + opaque fortifiée bras fermés par rapport à une combinaison de bras ouverts soit + transparent bras fermés fortifiée. Dans ce rapport, nous présentons notre protocole pour l’élévation plus le test du labyrinthe, ainsi que de la discussion des résultats clés depuis le précédent rapport et notre expérience expérimentale. Nous pensons que ce rapport fournira des informations utiles pour les chercheurs qui ont employé ou qui prévoient d’utiliser l’élevé plus de labyrinthe dans leurs études.
Introduction
Le nombre de patients souffrant de troubles de l’humeur, y compris le trouble de l’anxiété et la dépression, augmente. Bien que le développement de ces troubles implique des facteurs génétiques et environnementaux, les mécanismes pathogéniques détaillées ne sont pas encore pleinement comprise1. Par conséquent, la recherche doit se concentrer sur découvrir les mécanismes sous-jacents des troubles de l’humeur, ainsi que le développement des médicaments efficaces qui ont moins d’effets secondaires.
Les tests comportementaux des animaux de laboratoire sont utiles pour enquêter sur le fonctionnement du cerveau supérieur, y compris émotion. Comportement animal étant très variable, les résultats expérimentaux diffèrent souvent entre laboratoires, même si une souche consanguine identique a été utilisé2. Ainsi, les chercheurs doivent également comprendre les fonctionnalités de base des dispositifs expérimentaux qu’ils adoptent afin de fournir des résultats fiables et précis en laboratoire.
L’élévation et le test du labyrinthe a été initialement créé pour examiner les réactivité émotionnelle chez les rongeurs3,4. L’ensemble de l’appareil est habituellement situé à 500 mm au-dessus du sol et se compose de deux open et deux bras fermés qui font une forme plue. Mesures d’exploration de bras (y compris la durée et la fréquence des indications figurant sur chaque bras), la distance parcourues et spécifiés les comportements tel que posture tendue-traitant des animaux soumis sont enregistrés pendant les périodes d’observation. Par ces mesures, l’anxiété animale est estimée à un résultat expérimental.
L’élévation plus test de labyrinthe est utilisé dans le monde entier, mais pas de tous les laboratoires utilisent le même appareil design5,6, et ces différences peuvent influer sur les résultats expérimentaux. Par exemple, les différences sont la présence ou l’absence de barres le long des bras ouverts et/ou de l’utilisation de murs transparents ou opaques pour bras fermés5,6. Les corniches le long des bras ouverts et l’utilisation de parois transparentes pour bras fermés ont été développés pour empêcher les animaux tomber l' appareil7et pour faciliter les observations comportementales à l’intérieur des bras fermés, respectivement de8,9. Bien qu’il y a eu quelques études qui ont examiné comment les différences de structure de bras peuvent affecter la capacité à détecter l’anxiété animale1,2,5,10,11 , les effets combinés d’open (avec/sans rebord court) et fermé (parois transparentes/opaques) bras caractéristiques sur le comportement animal n’a pas encore été étudiée.
Dans un rapport récent, nous avons discuté de l’effet de ces combinaisons de designs de bras le comportement anxieux dans rats12. En bref, corniches bras augmente significativement comportement anxiété chez le rat, tandis que bras transparents peuvent également avoir diminué ce comportement. En outre, nous avons vérifié la plus grande sensibilité de détection de l’effet d’un médicament anxiolytique dans une combinaison non-clocher bras ouverts + opaque fortifiée bras fermés par rapport à une combinaison de bras ouverts soit + transparent bras fermés fortifiée. Dans ce rapport, nous va introduire notre protocole pour l’élévation plus labyrinthe test, ensemble avec la discussion sur les principaux résultats du rapport précédent. Nous pensons que ce rapport fournira des informations utiles pour ceux qui ont employé ou qui prévoient d’utiliser l’élevé plus de labyrinthe dans leurs études.
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Protocol
Toutes les procédures expérimentales décrites ici ont été approuvés par l’animalier institutionnel et utilisation Committee de Meiji University (IACUC 14-0002(1)). Animaux utilisés dans les résultats représentatifs ont été préparés comme suit : des rats Sprague-Dawley mâles ont été achetés auprès d’une compagnie animaux de laboratoire et logés en groupe de 4 animaux par cage rat standard (W200 × D410 × H250 mm) pendant au moins une semaine avant le début de la expérience comportementale. La chambre de logement des animaux a été maintenue à des conditions ambiantes de référence pour la lumière (12:12 calendrier clair/foncé avec allume à 10:00 h), la température ambiante (25,0 ± 0,5 ° C), humidité (55 ± 10 %) et ventilation (10 fois / h), où les animaux avait ad libitum à nourriture ( Oriental Yeast Co. Ltd., Tokyo, Japon) et de l’eau. Les animaux ont été maintenus dans une cage rat standard (W410 x D250 x H200 mm, Toyoriko Co., Ltd., Aichi, Japon) avec papier literie (alpha-dri, LSG Corporatin, Tokyo, Japon).
1. élevé Plus le Test du labyrinthe
- Mettre en place la plus élevée labyrinthe appareils dans un récipient adapté (W1, 500 × 500 × H2, 000 mm D1) (Figure 1 a) avec un cadre métallique en forme de plus 500 mm au-dessus du sol pour soutenir la course bras moyen (Figure 1 b), l’éclairage dans le plafond de conteneur à éclairer la surface du labyrinthe à l’intensité lumineuse nécessaire (Figure 1) et une caméra vidéo numérique dans le plafond du Centre afin de permettre une surveillance vidéo direct des tests comportements (Figure 1).
- Fixer les bras (L500 x W100 mm) sur le cadre en forme de plus et puis fixer la plate-forme carrée centrale (W100 x D100 mm) au centre des quatre bras (Figure 1 -F).
NOTE : Dans notre laboratoire, nous avons deux types de bras ouverts (L500 x W100 mm) et deux types de bras fermés (L500 x W100 x H450 mm) (Figure 1). Les bras fermés ont des parois transparentes ou opaques (Figure 1), et les bras ouverts sont conçues avec ou sans une corniche courte (H5 mm, Figure 1E). La plate-forme carrée centrale (W100 × D100 mm) est placée au centre des quatre bras (Figure 1 -F). Ainsi, les quatre combinaisons suivantes d’armes peuvent être préparés selon but expérimental : open arms avec corniches + bras fermés avec des murs transparents (corniches/Transparent), les bras ouverts avec corniches + bras fermés avec des murs opaques (corniches/Opaque), bras ouverts sans rebords + bras fermés avec parois transparentes (non-corniches/Transparent) et les bras ouverts sans rebords + bras fermés opaque avec les murs (non-corniches/Opaque). La surface de la piste de bras est noire, pour permettre le meilleur animal suivi par le logiciel d’analyse de comportement automatisé, tel que décrit à la Section 2, analyse comportementale. - Ajuster l’intensité de la lumière sur la surface de la partie distale de chaque bras et de la plate-forme centrale pour environ 100 Lux.
- Avant chaque essai, nettoyer l’ensemble de l’appareil avec la solution d’éthanol à 70 % et rincer à l’eau distillée.
- Cliquez sur le bouton « record » sur l’enregistreur de disque dur pour démarrer le caméscope numérique qui permettra d’enregistrer un comportement du rat pour la vidéo d’imagerie d’analyse décrite à la Section 2, analyse comportementale.
- Placer un animal sur la plate-forme centrale face à un bras ouvert et permettre une exploration libre sur l’appareil pendant 5 min.
- Cliquez sur le bouton « stop » sur l’enregistreur de disque dur pour terminer l’enregistrement.
- Compter le nombre de selles et de mictions après son retour de l’animal testé à la chambre de logement des animaux.
- Répétez l’étape 1.4 jusqu'à la fin de l’expérience.
NOTE : Une série de tests sec s’effectue toujours avant de commencer chaque expérience pour vérifier que tous les paramètres expérimentaux sont correctement configurés avant tout des animaux de laboratoire sont exposés à des conditions expérimentales. Dans le cas contraire, certains animaux, notamment le premier animal peut-être éprouver différentes conditions environnementales (p. ex., bruits éventuellement induites par l’expérimentateur lors de la manipulation et/ou animal indices éventuellement laissés par l’animal testé précédemment).
Remarque : Les expérimentateurs sont près du conteneur quand un animal est testé. Ainsi, même si les chercheurs ne sont pas visibles le rat peut encore pouvoir leur sens via l’odeur et/ou le son.
2. behavioral Analysis
Remarque : Une analyse comportementale est réalisée par observation manuelle et automatisée de logiciels d’analyse.
-
Observation de manuel
- Après que l’animal est placé sur le rebord, observer ce qui suit : nombre d’entrées (une entrée sur un bras est définie comme toute instance lorsque tous les 4 pattes sont sur le bras), le temps passé sur chaque bras, et nombre de tendu-participation à des postures face à un bras ouvert , tout en s’interrompant la plate-forme centrale vers un bras fermé.
- Mesurer la durée et la fréquence des comportements définis ci-dessus par chronomètre et numération pendant 5 min, à partir de quand les portes du conteneur sont fermés.
-
Analyse automatisée
- Aide du logiciel disponible, d’acter ce qui suit : distance parcourues, temps passé dans différentes positions sur bras ouverts (segments proximaux, moyens et distales de la plate-forme centrale), et une analyse minute par minute du temps passé sur ouvert et fermé Armoiries.
- Cliquez sur le bouton « start » du logiciel d’analyse automatisé en même temps que commence l’observation manuelle (l’enregistrement s’arrête automatiquement si la durée d’enregistrement est définie).
Remarque : Le logiciel d’analyse comportementale utilisé dans cette étude suit l’animal par l’intermédiaire de son contraste avec le champ de fond ; l’animal, qui est assignée une taille fixe, est identifié comme étant l’objet plus lumineux et la locomotion de son point central peut être utilisée pour le suivi des animaux.
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Representative Results
Dans l’étude précédente, nous avons comparé les effets combinés des corniches bras ouvert et la transparence des parois bras fermés sur les comportements exploratoires sur le labyrinthe12. Rats sensiblement passent beaucoup moins de temps sur les bras ouverts sans rebords que sur les bras ouverts avec rebords (F [1, 60] = 13.49, P = 0,0005) (Figure 2 a). Des résultats similaires ont été trouvés également pour le nombre d’entrées dans les bras ouverts (F [1, 60] = 11.17, P < 0,0014)12, ce qui suggère que la présence de corniches augmente le comportement exploratoire de rat à bras ouverts. Significativement, les rats ont montré moins posture tendue-traitant sur l’appareil qui avait fermé le bras avec parois transparentes que sur un appareil qui avait fermé le bras avec des parois opaques (F [1,60] = 4.03, P = 0,0492) (Figure 2 b), ce qui suggère que murs transparent bras fermés a diminué de comportement de type anxiété chez le rat. Des rats passent plus de temps sur le segment distal du bras ouverts sur l’appareil qui avait des murs transparent bras fermés que sur l’appareil avec des murs opaques bras fermés (F [1,60] = 8.00, P = 0.0983) (Figure 2), ce qui suggère que transparent parois peuvent également diminuer le comportement exploratoire de rat les bras ouverts. En outre, exploration des bras ouverts sur le segment distal est significativement plus faible dans l’appareil non-corniches/Opaque par rapport à l’appareil de saillies/Transparent (Figure 2). Pris ensemble, ces résultats indiquent que la sensibilité de détection de comportement de type anxiété peut varier selon les types de caractéristiques de conception de bras utilisés et l’appareil non-corniches/Opaque et corniches/Transparent appareils peuvent avoir une relativement grande différence dans la sensibilité de détection.
Pour vérifier les différences de sensibilité de détection entre les différents types de conception de bras, une autre expérience a été réalisée en utilisant le diazépam de médicaments anxiolytiques (Figures 3 a–D). En bref, l’appareil non-corniches/Opaque détecté l’effet du traitement par diazépam de haut-dose sur le temps passé dans les bras ouverts, contrairement à l’appareil de saillies/Transparent (Figure 3 a–B). Des résultats similaires ont été également trouvés pour le nombre d’entrées dans les bras ouverts12 (données non présentées). L’absence d’effet significatif sur l’appareil de saillies/Transparent a pu dû au fait que l’activité basale (traitement du véhicule) sur cet appareil était plus élevée que sur les appareils non-corniches/Opaque, mais cette exploration de bras ouvert n’a jamais dépassé 33 % des le temps à tout moment sur chaque appareil. Par conséquent, cette plage de temps plus étroite bras exploration rendu plus difficile de distinguer l’effet anxiolytique du diazépam sur l’appareil Ledged/Transparent (Figure 3–D).
Figure 1 : Du matériel conçu pour élevé plus test. labyrinthe Panneau (A) : élevé plus le conteneur de test de labyrinthe. L’appareil est placé dans le récipient noir et un moniteur à côté les images de film live de projets conteneur enregistré pendant l’expérience. Panneau (B) : Plus cadre de labyrinthe dans le conteneur qui prend en charge équipée d’armes. Tout l’appareil est situé à 500 mm au-dessus du sol. Panneau (C) : éclairage de plafond qui peut être ajusté pour l’intensité. Une caméra vidéo numérique (voir flèche) entouré d’éclairage des mouvements des animaux rendus. Panneau (D) : élevé plus d’armes de labyrinthe et plate-forme centrale qui sont montés au cadre ; de gauche à droite, mur opaque fermé bras ouvert non-sances, clocher bras ouverts, plate-forme centrale, bras, bras mur transparent fermé. Panneau (E) : vue rapprochée des bras ouverts ; de gauche à droite, ouverte bras sans rebords, ouvrir les bras avec rebords (H5 mm). Panneau (F) : un exemple d’un labyrinthe construit (appareils de saillies/Transparent). S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.
Figure 2 : Corniches bras ouvert réduisent anxiété-comme le comportement, et les murs transparents partiellement comportement anxieux. Des rats mâles a subi l’élévation plus labyrinthe tester différentes combinaisons de structures de bras (corniches/Transparent, corniches/Opaque, non-corniches/Transparent et non-corniches/Opaque). Ordonnance de dépistage a été normalisée dans les groupes expérimentaux (chaque combinaison de type de l’appareil). Cette procédure normalise des effets inattendus qui aurait pu se produire en raison de l’heure de chaque test. Panneau (A): temps consacré à bras ouverts ; Panneau (B): nombre de postures étirées-traitant ; Panneau (C): temps passé dans le segment distal du bras ouverts. Les lignes solides et en pointillés indiquent respectivement les importants effets principaux de structures de bras ouverts et fermés, (Two-Way ANOVA, #P < 0,1, * P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001). Différentes lettres à côté de bars dans le panneau (C) indiquent une différence significative (test de comparaison multiple Bonferroni, un < b, P < 0,0125). Les données sont exprimées sous forme de moyenne avec SEM (n = 16 par groupe expérimental). Ces chiffres ont été modifiés de notre précédent rapport12. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.
Figure 3 : Appareil non-corniches/Opaque montre une sensibilité plus élevée de détection de l’effet anxiolytique de diazépam. Des rats mâles a subi l’élévation plus labyrinthe tester, avec un appareil soit non-corniches/Opaque ou corniches/Transparent, 30 min après avoir été traités avec véhicule (0 mg/kg), faible (0,25 mg/kg) ou des doses élevé (0,5 mg/kg) du diazépam de médicaments anxiolytiques (intrapéritonéale injection). Solution de diazépam a été dissoute en 0,9 % solution saline normale avec un agent de surface-activation. Dans cette expérience, l’ordonnance de dépistage des groupes de traitement trois drogues et deux types de conception de l’appareil ont été randomisés pour tenir compte de tous les effets qui pourraient découler de l’heure de chaque test. Panneaux (A & B) : Total Pourcentage consacré à bras ouverts des appareils Ledges/Transparent et non-corniches/Opaque, respectivement de temps (5 min). Panneaux (C & D) : pourcentage de temps passé sur les bras ouverts d’appareils Ledges/Transparent et non-corniches/Opaque, respectivement de Minute en minute. Différentes lettres à côté des barres dans le groupe (B) indiquent une différence significative entre les traitements (test de comparaison multiple Bonferroni, un < b, P < 0,0167). Des lignes solides et en pointillés en panneaux (C & D) indiquent respectivement les principaux effets des traitements Time-lapse et du diazépam, (ANOVA, à mesures répétées *P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001). les données sont exprimées en moyenne avec SEM. chiffres dans les colonnes indiquent les animaux qui ont terminé l’expérience (les nombres entre parenthèses indiquent animaux tomber l’appareil). Ces chiffres ont été modifiés de notre précédent rapport12. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.
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Discussion
Comme le nombre de patients atteints de troubles psychiatriques, y compris le trouble d’anxiété, augmente, il est important de développer des études de pointe afin de mieux comprendre le mécanisme de base de l’anxiété. Pour ce faire, il est également important d’optimiser les procédures expérimentales. Par conséquent, à améliorer l’application de l’élévation plus test de labyrinthe, nous avons démontré l’effet des caractéristiques de bras sur des résultats expérimentaux utilisant des rats.
L’élévation plus labyrinthe a été créé pour tester les animaux anxieux dans rongeurs4, mais bien que les structures de base sont généralement compatibles (par exemple, élevé à 500 mm au-dessus du sol avec une forme plu), les diverses conceptions de bras sont souvent utilisées. A l’origine, l’appareil se composait de bras ouverts sans rebords et fermé les bras avec des murs opaques en bois. Toutefois, bras plus récemment ouverts ont été développés avec rebords pour empêcher les animaux tomber l’appareil et bras fermés ont été développés avec des parois transparentes pour faciliter l’observation du comportement sur les bras fermés. Toutefois, on n’a aucun rapports qui abordaient les effets combinés de ces bras caractéristiques sur les résultats expérimentaux dans l’élévation plus le test du labyrinthe. Comme en témoigne de nos résultats, la présence de corniches bras ouvert et la transparence des bras fermés murs éviter une diminution d’exploration bras ouverts chez les rats (Figure 2), qui peuvent diminuer la sensibilité de détection de l’effet anxiolytique de diazépam ( Figure 3). L’appareil de saillies/Transparent est apparu pour encourager une plus grande exploration sur les bras ouverts par véhicule traité des rats (Figure 3). Cela réduit la discrimination comportementale dans l’exploration des bras ouverts activité entre un véhicule et diazépam traité des rats, ce qui rend plus difficile à détecter des différences dans les niveaux d’anxiété. Par conséquent, la sensibilité plus faible des corniches/Transparent appareil peut signifier que plus d’animaux devront être testés pour démontrer des soins importants effets comparés avec l’aide d’appareils non-corniches/opaque.
Dans notre protocole, la durée et le nombre d’entrées sur chaque bras mesurait manuellement par les expérimentateurs bien formés. Cette procédure permet une mesure précise des entrées de bras, définies comme tous les 4 pattes placées sur un bras. S’il est vrai que les systèmes de suivi automatisé des animaux sont disponibles pour certains paramètres du comportement, tels que voyager loin, dans notre expérience, ils ne peuvent pas distinguer toujours fidèlement et entrées non-sur les bras, surtout quand animaux exécuter des postures traitant s’étendait près de la frontière entre la plate-forme centrale et un bras. Ainsi, nous recommandons d’utiliser une combinaison des deux systèmes d’observation automatisés et manuels, basé sur leurs atouts respectifs pour chaque paramètre comportementale.
Il y a d’autres différences de protocole entre laboratoires. Par exemple, certains chercheurs placer les animaux sur la plate-forme centrale face à un bras fermé13,14, alors que d’autres placent les rats face à un bras ouvert15,16. En outre, certains chercheurs test comportement immédiatement après la prise de rats de leur maison-cage, alors que d’autres permettent les rats quelque temps pour s’acclimater au comportement stable salle avant de commencer le test. En ce qui concerne le premier cas, dans des essais préliminaires, nous avons connu comment les résultats diffèrent selon laquelle armer le rat au départ, face ; Il y avait une incidence accrue d’entrer sur le bras que le rat a été placé face à. Aussi, lorsque les rats étaient placés face à un bras fermé, certains animaux ne bougea hors de ce bras fermé après la première entrée. Dans un tel cas, il est difficile de distinguer si les rats expérience des conflits entre les bras ouverts et fermés, ou qu’ils préfèrent simplement être dans un espace clos sans jamais reconnaître la présence des bras ouverts. Bien que dans notre étude, nous avons choisi de placer les rats face à bras ouvert, afin d’assurer un taux élevé d’être en conflit, il est recommandé que d’autres études soient menées pour faire en sorte que l’effet de cette différence de protocole sur les résultats expérimentaux est correctement objet d’une enquête.
Les mesures de l’exploration du segment distal du bras ouverts et analyse minute par minute a fourni des informations supplémentaires détaillées sur comportement anxieux de rat. Ces mesures ont contribué à montrer les différences de sensibilité de détection entre les conceptions de bras différents. Malgré cela, des résultats rapportés d’anxiété de recherche à l’aide de l’élévation plus souvent, test du labyrinthe ne signalent pas ces types de mesures détaillées13,17,18. Par conséquent, nous recommandons fortement que les chercheurs aussi déclarent des informations supplémentaires sur les activités exploratoires de rat, exploration distale, analyse minute par minute, et également posture tendue-traitant.
En conclusion, nos résultats suggèrent que les différents types d’appareils peuvent avoir leurs propres caractéristiques. De ces tests, nous avons démontré que les appareils non-corniches/Opaque peuvent mieux détecter l’effet des médicaments ayant potentiellement un effet anxiolytique. En revanche, il est concevable que saillies/Transparent appareils peuvent avoir un avantage similaire lors de l’essai de médicaments potentiels d’anxiogène. A ce jour, les tests comportementaux ont été utilisés non seulement pour le dépistage des drogues, mais aussi pour des dosages de phénotypage dans animaux mutants. En effet, les techniques d’édition avancée du génome permettent la production rapide d’animaux mutants. Par conséquent, il est très important de développer des procédures de test avec une meilleure précision et sensibilité pour mieux détecter les variations dans le comportement. Ce rapport démontre une meilleure application de l’élévation plus test d’anxiété animale recherche basée sur les fonctions attendues des gènes médicaments ou cible. Ainsi, nous croyons que nos efforts contribueront à faire avancer la recherche utilisant les privilèges élevés plus de labyrinthe.
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Disclosures
Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Acknowledgments
Les auteurs tiennent à remercier M. Akihiro Hirano pour son aide dans la production de l’appareil sur mesure. Les auteurs aimeraient remercier M. Kosuke Takahashi et M. Shingo Nakajima pour leur assistance technique. Ce travail a été soutenu par la recherche sur les risques des Substances chimiques, santé et subventions de recherche en Sciences de laboratoire, ministère de la santé, du travail et bien-être, Japon (H25-KAGAKU-IPPANN-003) et d’un subvention de projet de recherche A Institut de Science et technologie Meiji Université (Japon).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Customized container (W1500 × D1500 × H2000 mm) | NA | NA | Handmade by Mr. Akihiro Hirano |
| Lighting | NA | NA | Handmade by Mr. Akihiro Hirano |
| Elevated plus maze apparatus | NA | NA | Handmade by Mr. Akihiro Hirano |
| Digital video camera | Watec | WAT-250D2 | Any suitable video camera can be attached to a hard disk recorder for recording tracking profiles. |
| Hard disk recorder | TOSHIBA | RD-R200 | Any suitable hard disk recorder can be attached to the digital video camera. |
| Sprague-Dawley rats | Charles River Laboratories Japan, Inc. | NA | Any suitable rats can be used for your study |
| Standard rat cage | Toyoriko | TP-105 | Any suitable rat cage be used for your study |
| Instrument to measure light intensity | AS ONE | 1-5818-02 | Any suitable instrument to measure light intensity |
| EthoVision XT version 8.0 | Noldus | NA | Any suitable software to measure animal behavior |
| Diazepam | Taiyo Pharmaceutical Industry | 1124402A2061 | Any suitable drug can be used for your study |
| Tween 80 | Wako Pure Chemical Industries | 9005-65-6 | Any suitable drug can be used for your study |
References
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