Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Biology
Click here for the English version

Biology

איסוף טפילי דגים איזופודים ימיים עם מלכודות אור

Published: September 25, 2023 doi: 10.3791/65059
Automatic Translation
1, 1, 1,2, 3,4
1Institute of Environmental and Marine Sciences, Silliman University, 2Neurolinx Research Institute, 3Department of Marine Biology and Ecology, Rosenstiel School of Marine Atmospheric and Earth Sciences, University of Miami, 4Water Research Group, Unit for Environmental Sciences and Management, North-West University

Summary

אנו מציגים שיטה לאיסוף טפילי דגים איזופודים ימיים באמצעות מלכודות אור המוצבות באתרי שדה באמצעות צלילה עוצרת נשימה או צלילה.

Abstract

מוצגת שיטה לאיסוף טפילי דגים איזופודים ימיים באמצעות מלכודות אור. איזופודים גנתידים הם קבוצה עיקרית של טפילי דגים ימיים הניזונים מדם ונוזלים מדגים פונדקאים, בעיקר בלילה. כמו קרציות ויתושים על היבשה, הם מתקשרים רק באופן זמני עם הפונדקאי שלהם ומבלים את רוב חייהם החופשיים בבנטוס. בהתחשב בניידות הגבוהה שלהם ובקשר הארעי והלילי בעיקר שלהם עם המארחים, לא ניתן לאסוף אותם בקלות על ידי לכידת מארחים חופשיים. עם זאת, הם נמשכים בקלות למקורות אור מתחת למים, מה שיוצר את ההזדמנות לאסוף אותם במלכודות אור. כאן מתוארים התכנון והצעדים האישיים הכרוכים בפריסה ועיבוד של מלכודות אור מותאמות במיוחד לאיסוף שלבי חיים חופשיים של איזופודים גנתיאידים. תוצאות הדגימה ושינויים אפשריים של הפרוטוקול הבסיסי למגוון צרכי דגימה שונים מוצגים ונדונים.

Introduction

סרטנים טפיליים חשובים באקולוגיה ובתולדות החיים של דגי שונית. הביומסה והאנרגיה שהם מוציאים מהפונדקאים שלהם הם ניכרים ומשפיעים על התנהגות, פיזיולוגיה והישרדות1. סרטנים איזופודים גנתידים מייצגים את הקבוצה הבולטת ביותר של טפילי דגים במערכות שוניות טרופיות וסובטרופיות, שם הם נפוצים ומגוונים2,3 והם פריט המזון העיקרי של דגים נקיים 4,5. גודל הגנתיאידים הוא בדרך כלל 1-3 מ"מ. יש להם תולדות חיים יוצאות דופן שבהן רק שלושת שלבי הנעורים ניזונים מהדם ומנוזלי הגוף של דגים 6,7. הם פעילים ביותר בלילה 8,9, ובעוד שנראה כי הראייה משחקת תפקיד כלשהו, מציאת פונדקאי 10 מסתמכת במידה רבה על רמזי ריח כדי למצוא מארחים11,12. כל אחד משלושת שלבי ההאכלה הצעירים ניזון מדג פונדקאי יחיד, כאשר כל מזון מופרד בשלב ההתכה. לאחר ההזנה הסופית, הזחלים בשלב השלישי עוברים מטמורפוזה למבוגרים שאינם ניזונים, אשר מתרבים ואז מתים. בהתחשב בכך שהאכלה דורשת קשר קצר בלבד עם הפונדקאי, בעוד שכל מרווח בין האכלות נמשך ימים, הגנתיאידים מבלים את רוב חייהם החופשיים בבנטוס.

Gnathiids להשפיע על המארחים במספר דרכים1. מלבד תפקידם כמניעים של אינטראקציות בין דגים נקיים יותר לבין לקוחות 13,14,15, גנאתיאידים יכולים להעלות את רמות הקורטיזול ולהפחית את המטוקריט בדגים בוגריםפונדקאים 16 ובמספרים גבוהים, יכול אפילו לגרום למוות 17. עבור דגים צעירים, אפילו גנתיאיד בודד יכול להיות קטלני18,19,20, וגם אם הדג שורד, יכולתו להתחרות על מקום ולברוח מטורפים נפגעת20,21,22. הימנעות מכרסמים עשויה אף להוות את אחד היתרונות של נדידה לילית אצל חלק מדגי השונית23 .

בנוסף לדגים נקיים יותר, אוכלוסיות מכרסמים יכולות להיות מושפעות מדגים טורפים זעירים אחרים24, כמו גם אלמוגים25,26. נראה כי להתחממות האוקיינוס ולאובדן הנלווה של אלמוגים חיים יש השפעות מנוגדות על גנתיאידים27,28,29.

בהתחשב בחשיבותם האקולוגית הברורה ובהשפעה הצפויה של שינויים סביבתיים אנתרופוגניים על אוכלוסיותיהם, יש סיבות משכנעות לכלול אותם במחקרים אקולוגיים של שוניות אלמוגים. עם זאת, היסטוריית החיים הייחודית שלהם והמספר הקטן של החוקרים החוקרים אותם יוצרים מחסום לפיתוח, יישום והפצה של שיטות דגימה אמינות הניתנות לשחזור כדי לאסוף אותם למחקר.

מלכודות אור שימשו זה מכבר לאיסוף אורגניזמים ימיים קטנים בלילה30,31. הם מנצלים ומבוססים על העובדה שאורגניזמים פעילים ליליים רבים, כולל פרוקי רגליים, נמשכים לאור. באופן מסורתי הם שימשו לאיסוף אורגניזמים פלנקטוניים בעמודת המים30. עם זאת, ניתן ליישם את העקרונות הבסיסיים לאיסוף אורגניזמים השוחים בחופשיות הפעילים ליד הבנתוס. כאן אנו מציגים שיטת לכידת אור המותאמת לאיסוף שלבי חיים חופשיים של איזופודים גנתידים ליד קרקעית האוקיינוס בסביבות שוניות אלמוגים מרוחקות כמו הפיליפינים. עבור איסוף באזורים מרוחקים, מלכודות האור האלה (איור 1) מציעות כמה יתרונות על פני שיטות אחרות שפותחו לאיסוף האורגניזמים האלה32. הם ניידים ועמידים מאוד, דורשים רק שלושה חלקים, אשר ניתן להשיג בקלות וזול. הם גם צפים באופן שלילי, שכן כאשר הם פרוסים, הם מלאים לחלוטין במי ים. מכיוון שהם תלויים באור למשיכה, הם יעילים רק בלילה לאיסוף מינים פעילים ליליים. הם גם מושכים יותר ממיני היעד, מה שדורש מיון של הדגימות תחת טווח ניתוח כדי להשיג את אורגניזמים המטרה. שלוש שיטות שימשו עד כה את הצוות שלנו ואת משתפי הפעולה שלנו כדי לאסוף גנאתידים במערכות שוניות אלמוגים ברחבי העולם32. אלה כוללים מלכודות הופעה, מלכודות פיתיון דגים חיים, ומלכודות אור, כל אחת עם יתרונות ומגבלות.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

איסוף הדגימות הותר על ידי משרד החקלאות - לשכת הדיג ומשאבי המים (0154-18 DA-BFAR) בהתאם לחוקים ולתקנות הפיליפינים (RA 9147; FAO 233) ואושר על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים באוניברסיטת סילימן (SU).

1. מלכודות אור

  1. בנייה
    1. בניית מלכודות אור מצינורות פוליוויניל כלוריד מסחריים (PVC) שתוכננו במקור עבור אינסטלציה. השתמשו ב-PVC בקוטר 10-15 ס"מ החתוך לאורך של 30-40 ס"מ (איור 1).
    2. לשני קצוות הצינורות, הוסיפו "מכסים" PVC עם משפך אקרילי שקוף המוכנס במרכז הפתח והדבקו במקומו עם דבק אפוקסי שקוף (איור 1). תנו לו להתייבש.
    3. ודא שבקצה אחד של הצינור יש מכסה מתברג או נשלף בדרך אחרת וששני הקצוות אטומים למים כאשר המלכודת "סגורה" (למשל, בתוספת טבעת O).
  2. מקור אור
    1. לפני הפריסה, הדליקו אור/פנס תת-ימי (ראו טבלת חומרים) והניחו אותו בתוך הצינור, מול אחד המשפכים השקופים, כך שהאור מהפנס התת ימי יאיר את האזור שלפני צד אחד של הצינור. במידת הצורך, ניתן להשתמש במקלות זוהר כימיים במקום לפידים מתחת למים, אם כי עוצמת האור שלהם נמוכה יותר.
      הערה: האור מושך מגוון של אורגניזמים ליליים קטנים31, כולל גנאתיאידים, ומניע אותם לשחות לתוך הצינור דרך המשפך השקוף. ברגע שהם נכנסים לצינור, הם אינם יכולים לברוח בגלל הגיאומטריה של מלכודת האור (פתח משפך קטן) והמשך נוכחותו של מקור אור.
  3. מיקום
    1. כאשר אתם נמצאים במים באתר הפריסה, מלאו מלכודות תאורה, כשהאור דולק, במי ים, ואבטחו את שני הקצוות. כדי לוודא שהפנס אינו נמצא מתחת או חוסם את קצה המשפך, הטה את "חזית" הצינור כלפי מעלה כדי לאפשר לפנס להחליק בחזרה הרחק מהמשפך.
    2. הניחו מלכודות על קרקעית הים, בחול או בהריסות, ליד ראשי אלמוגים או מבנים מורכבים אחרים הידועים כמושכים דגים. מקדו את חרוט האור "פנימה", לעבר אזורים שבהם דגים מצטברים.
      הערה: במים רדודים ניתן להציב מלכודות על ידי צלילה עוצרת נשימה. פריסה עמוקה יותר דורשת צלילה.
  4. אחזור
    1. מיד לפני שליפת המלכודת, אטמו את פתחי שני המשפכים (משני צדי הצינור) עם חתיכת חימר מידול או פקק גומי, תוך שמירה על כל מי הים והאורגניזמים הכלולים בפנים.
      הערה: האורגניזמים יישארו במלכודת ברגע שסוללות האורות יפקעו והאור לא יהיה מואר יותר. הדבר מספק גמישות בעת אחזור המלכודות ("זמן השרייה"). גורמים שיש לקחת בחשבון כאשר מחליטים על זמן ההשריה מוצגים להלן (ראה דיון).
  5. תחבורה
    1. לאחר שהמלכודות חולצו מהקרקעית, נשאו אותן לסירה, או שחו לחוף.
    2. שמרו על מלכודות קרובות לטמפרטורת מי הים לאחר הוצאתם מהאוקיינוס.
    3. העבר אותם למעבדה לעיבוד בהקדם האפשרי מכיוון שלא יתקיימו חילופי גז או מים לאחר הוצאתם מהאוקיינוס.

2 עיבוד מעבדה

  1. אחסון וסינון הדגימות
    1. לאחר שמלכודות האור מוסרות מהאוקיינוס ומוחזרות למעבדה, רוקנו את תכולתן לדליים עם מי ים מתוקים.
    2. הוסיפו אוורור כדי לשמור על אורגניזמים בחיים עד לסינון.
    3. סננו את תכולת הדלי על ידי מזיגה דרך משפך מרופד ברשת פלנקטון של 50-100 מיקרומטר, ואז רוקנו את התכולה למיכל של 100 מ"ל של מי ים מתוקים.
    4. השתמש פיפטה כדי לשאוב ממיכל קטן זה כדי למקם aliquots של הדגימה לתוך צלחת פטרי עבור מיקרוסקופיה. חזור על הפעולה עד לעיבוד הדגימה כולה.
  2. זיהוי וגידול איזופודים Gnathiid
    1. מכיוון שדגימות מלכודת אור מושכות מינים רבים של חסרי חוליות קטנים, סנן בזהירות את הדגימות כדי לזהות ולהסיר איזופודים גנתיאידים. הגדלה של 10-20x היא הטובה ביותר עבור משימה זו (איור 2).
      הערה: זיהוי גנאתיאידים ברמת המשפחה אינו דורש דגימות חיות. עם זאת, גנאתיאידים בוגרים, שרק לעתים רחוקות נתפסים במלכודות קלות, נחוצים לזיהוי ורבייה מורפולוגיים של מינים (ראו סימוכין 1,3,9 למתודולוגיה לרבייה וגידול של גנאתיאידים בשבי).
    2. במקרים בהם יש צורך לשמור את הגנתיאידים בחיים לגידולם, הוציאו אותם בעדינות עם פיפטה והניחו אותם במיכלי פלסטיק קטנים של מי ים מתוקים.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

לצורך דגימה במרכז הפיליפינים נעשה שימוש בעיצוב המלכודת המתוארת (איור 1). כאשר הוצבו 36 מלכודות במהלך הלילה (באתר אחד), נאספו 1 עד 1343 מלכודות לכל מלכודת (275 ± 54). אלה כללו גם שלבים צעירים מוזנים וגם לא מוזנים (איור 2; טבלה 1, 2). תוצאות אלה מדגימות את יעילותן של מלכודות אור לאיסוף איזופודים גנתיאידים בתנאי המחקר. איור 3 מראה את מיקום המלכודת מתחת למים.

שיטה זו לאיסוף גנאתידים יעילה וגמישה דיה לאתרי שדה שונים ולשאלות מדעיות. לדוגמה, התייחסות29 השתמשה במלכודות אור כדי לכמת את ההשפעות של כיסוי אלמוגים וביומסה של דגים על שפע גנאתידים (איור 4), והפניה33 השתמשה במלכודות דומות כדי לכמת את ההשפעות של הוריקנים על הפלוטיפים גנטיים (איור 5). בעוד שטכניקות אחרות פותחו ושימשו לאיסוף גנאתיאידים32, טכניקה זו יעילה במיוחד (טבלה 3). מלכודות הופעה, "אוהלים" עשויים רשת פלנקטון32 דורשים פלטפורמות גדולות לשינוע, קשים לפריסה, נקרעים בקלות, דורשים תיקון מתמיד. יתר על כן, לעתים רחוקות הם אוספים שלבי נוער מוזנים. מלכודות עם דגים חיים32 (הכרחי כי gnathiids לא ניזון דגים מתים), דורשים לכידה ודיור של דגים חיים. זה הופך את השימוש בהם לקשה יותר במקומות מרוחקים. יתר על כן, יעילותם מסתמכת על רמזי ריח11,12, המושפעים מגודל הדג, גודל פתחי המלכודת וזרמי המים. הם נוטים לאסוף פחות גנתיאידים, קשה יותר לשלוף אותם מאשר מלכודות קלות, והם אוספים רק שלבי האכלה.

Figure 1
איור 1: צינורות PVC עם מלכודת אור. מימין: מבט למעלה, עם המשפך השקוף מודבק לתוך הצינור עם דבק אקרילי, גלוי. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 2
איור 2: איזופוד גנתי בצלוחית פטרי לאחר לכידה. שימו לב לנוזל הגוף השקוף של הדג ולדם הדגים האדומים החומים במעיים של הגנתיאיד. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 3
איור 3: מלכודת אור שונה (בחזית) שבה האור מכוון כלפי מטה. ניתן להשתמש בעיצוב זה בתנאי ים רגועים כדי לדגום באופן ישיר יותר את המצע מתחת למלכודת. מלכודות הופעה מוצגות ברקע. נתון זה נדפס מחדש באישור הפניה32. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 4
איור 4: קופסאות המציגות הבדלים בהתפלגות. קופסאות המראות הבדלים בהתפלגות (A) של שפע גנתיאיד בשלב הראשון, (B) היפר-שפע בשלב הראשון, (C) שפע כולל, ו-(D) נפח דם המופק לכל ביומסה של דגים. גודל המדגם עבור כל תת-קבוצה מוצג בסוגריים תחת ממוצע של כל תת-קבוצה. הקופסאות מציגות את הקצוות של הרביעון הראשון והשלישי, ואילו השפם מציג את הרבעון השלישי ועוד פי 1.5 מהטווח הבין-רבעוני. עבור (C), צירים הם קירוב של רווח בר-סמך של 95%. ההבדלים הנראים ב-(A), (B) ו-(C) הם משמעותיים; ראה נספח S1: לוח S7 בהערה29. נתון זה נדפס מחדש באישור הפניה29. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 5
איור 5: רשתות הפלוטייפ המייצגות את המגוון הגנטי של Gnathia marleyi ואת התפוצה המרחבית שלו לפני ואחרי ההוריקנים של 2017. מערכי נתונים לפני ואחרי הוריקן מצוינים בלוחות I ו- II, בהתאמה. ההפלוטיפים שנמצאו במערכי הנתונים לפני ואחרי ההוריקן מסומנים על ידי מספר הפלוטיפ. קבוצות Haplogroup A, B ו- C מסומנות בתיבות מקווקוות. נתון זה נדפס מחדש באישור הפניה33. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

ספירה גנתית מלכודות אור (n) סה"כ ספירה התכוון חציון מינימום (לכל מלכודת) מקסימום (לכל השמנה) שגיאת תקן (+-)
סך 34 9336 275 191 1 1343 54
חי 34 6605 206 114 4 1226 46
מת 34 2667 86 42 1 659 24

טבלה 1: נתונים סטטיסטיים מסכמים של ספירות גנתיאידים מ-36 מלכודות אור שנפרסו במהלך הלילה בשונית האלמוגים בנטיאן, הפיליפינים, בחודשים יולי-ספטמבר 2017. הערך המספרי בעמודה Live מתייחס לגנתיאידים ממלכודת האור שהיו חיים בזמן הספירה, העמודה Dead מתייחסת לגנתיאידים שהיו מתים, והעמודה Total היא הסכום הכולל של ספירת הגנתיאידים המתים והחיים.

ספירה גנתית N סה"כ ספירה התכוון
סך 10 434 43

טבלה 2: נתונים סטטיסטיים מסכמים של ספירות גנאתידים ממלכודות אור שנפרסו במשך 3 שעות בשונית האלמוגים בנטיאן, מחוז נגרוס אוריינטל, פיליפינים, בחודשים יולי-אוגוסט 2022.

סוג השמנה ספירה חציונית רווח בר-סמך 95%
התחתון עליון
הופעה ללא פיתיון 0.31 0.04 0.81
הופעה של פיתיון דגים 0.42 0.19 0.69
חצובה עם פיתיון דגים 0.92 0.46 1.46
פיתיון דגים ברשת פתוחה 1.5 0.35 3.54
מלכודת פלנקטון מוארת 5.69 2.69 9.58

טבלה 3: הושוו הביצועים של עיצובי מלכודות שונים, כולל מלכודות אור, באיים הקריביים. אומדנים של ספירה חציונית למדגם ורווחי סמך של 95% עבור כל תכנון מלכודת הוערכו בהשוואה מרובת המלכודות. האומדנים נגזרו מ-10,000 חזרות אתחול שנלקחו עם החלפה מתוך 26 ספירות הדגימות עבור כל סוג מלכודת. טבלה זו מותאמת באישור הפניה32.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

מלכודות אור מסורתיות, כגון אלה המשמשות לאיסוף דגי הזחל, הן גדולות ומרותות בעמודמים 34. לעומת זאת, מלכודות האור המתוארות כאן קטנות ופרושות על קרקעית הים. מלכודות אלה ניתנות להובלה בקלות ולפריסה מהירה. ניתן למקם אותם על ידי עצירת נשימה (צלילה חופשית) באתרים רדודים (כמו במחקר זה) או על צלילה באתרים עמוקים יותר, ולמשוך גם מוזנים וגם לא מוזנים
שלבי הנעורים.

וריאציות של מלכודות האור הבנטיות המתוארות כאן לחקר גנאתיאידים שימשו למגוון מטרות על-ידי הצוות שלנו ומשתפי הפעולה שלנו, וניתן לבצע שינויים בעיצוב או בפרוטוקול, בהתאם למטרה הספציפית (איור 3). אלה מתוארים להלן.

מחקרים מסוימים דורשים gnathiids חיים. אלה כוללים מחקרים המזהים את המקור (מיני דגים) של ארוחות דם35,36, או מחקרים הדורשים גידול. מלכודות האור במחקר זה היו באורך 30 ס"מ, בקוטר 10.16 ס"מ, ומכאן נפח של ~1.3 ליטר. כאשר הם נעשים צפופים מדי באורגניזמים, דרישת החמצן בתוך הצינור יכולה לעלות על אספקת החמצן דרך היציאות, מה שגורם לאורגניזמים למות ולהחמיר את הבעיה. כדי להימנע מכך, ניתן לפרוס את המלכודת לפרקי זמן קצרים יותר או לשנות אותה על ידי הגדלת נפחה (PVC בקוטר גדול יותר) או הוספת חורים נוספים המכוסים ברשת פלנקטון 9,29,32. שים לב שבעוד PVC בקוטר גדול יותר יכול לשמש להגדלת הנפח, זה נעשה במחיר של ניידות נמוכה יותר, וכתוצאה מכך הובלה של פחות מלכודות לאתר השדה. הדבר מדאיג במיוחד כאשר ההובלה כוללת שחייה ממושכת על פני השטח ו/או שימוש בסירות קטנות עם שטח אחסון מוגבל.

לחלופין, או בנוסף, ניתן לפרוס את המלכודת למשך זמן קצר יותר. יתרון גדול של עיצוב זה הוא שבעוד שהמלכודת תאסוף אורגניזמים רק בלילה (כאשר האור יעיל), ניתן להגדיר אותה בכל עת ולשלוף אותה בכל עת. כדי לאסוף כמה שיותר גנאתיאידים, הצבנו מלכודות לפני השקיעה וחילצנו אותן זמן קצר לאחר הזריחה למחרת. עם זאת, כדי למקסם את מספר הגנתיאידים החיים, אנו מגבילים את הפריסה ל 3-4 שעות של חושך. זמן מוגדר קצר גם מפחית את כמות "bycatch" שיש למיין כדי לחלץ את gnathiids.

המלכודות המתוארות כאן מונחות אופקית, כאשר קרן האור מצביעה לכיוון אחד. לפיכך, אות הגירוי משתרע עד שהאור יזרח, בדרך כלל חוצה מספר סוגי מצע, וחלק מהאור נפלט גם מהמשפך האחורי. כדי למקד את הדגימה על מצע מסוים במרחק קצר מהמלכודת, ניתן לשנות את המלכודת כך שתשב אנכית, כשהאור מכוון כלפי מטה (איור 3). זה מושג על ידי הוספת "רגליים" כדי ליצור חצובה29,32. עם זאת, סוג זה של מלכודת אור שימושי רק במצבים של זרם נמוך.

הפנס שבו השתמשנו (ראה טבלת חומרים) לוקח ארבע (4) סוללות AAA. אנו משתמשים בסוללות נטענות כדי להפחית עלויות ובזבוז. זמן הבעירה של אורות אלה הוא כ-12 שעות, מה שמאפשר להם לתפקד במהלך הלילה. עם זאת, תחליף מתאים הוא "glowsticks". אלה שימושיים במיוחד כאשר שוקעים במים עמוקים יותר, כגון שוניות מזופוטיות.

בעוד מלכודות האור המתוארות כאן מושכות מגוון רחב של חסרי חוליות קטנים וניידים, ההרכב של מלכוד לוואי זה משתנה מאוד. עם זאת, כאשר הם ממוקמים בבית גידול הכולל הריסות ודגים, גנאתידים נתפסים באופן עקבי. למרות שמחקר הדגמה זה התמקד באתרים בפיליפינים, מלכודות בעלות עיצוב דומה שימשו בהצלחה גם למחקרים באתרים באזור הקריביים ושונית המחסום הגדולה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

המחברים מצהירים כי אין לחשוף אותם.

Acknowledgments

המימון ניתן על ידי הקרן הלאומית למדע של ארה"ב (NSF OCE 2023420 ו- DEB 2231250, P. Sikkel PI). אנו מודים לעיריית העיר דומגואטה, נגרוס אוריינטל, הפיליפינים, על הרשות לערוך מחקר זה. אנו מודים גם למתנדבים הרבים על עזרתם בשטח ולצוות ולעמיתינו במכון האוניברסיטאי סילימן למדעי הסביבה והים על תמיכתם.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Buckets, small sample containers hardware store
Funnels Supplier No. 2209-03 Funnels: AMERICAN SCIENTIFIC LLC SE - 75 mm (3”)  https://us.vwr.com/store/product/8884369/plastic-funnels
Main body of light traps (made from commercially available PVC sanitarty pipes) (SKU 145640)  Alasco Sanitary uPVC Pipes Series 1000 107mm/4'  https://alascopvcpipes.com/product/alasco-standard-sanitary-upvc-pipe-series-1000/.  This brand can be found in the Philippines. Other simular brands can also be used
Modeling clay  Can be found in art suppliy and childreans toy stores To seal the funnel after retreival
Plankton mesh (50-100 µm) any reputable brand and source https://www.adkinstruments.in/products/plankton-nets-in-various-mesh-size-1633936883
Screw on lids for the light trap Alasco  Sanitary  Clean-Out  4" https://alascopvcpipes.com/product/alasco-standard-sanitary-upvc-clean-out/. This brand can be found in the Philippines. Other simular brands can also be used
Scuba/snorkel equipment any reputable brand and source
Stereo-microscopes Scientific suppliers
Underwater touches Princeton Tec Ecoflare or Fantasea Nanospotter 6023

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Sikkel, P. C., Welicky, R. L. The ecological significance of parasitic crustaceans. Parasitic Crustacea. 17 (17), Springer. Cham. 421-477 (2019).
  2. Svavarsson, J., Bruce, N. L. New gnathiid isopod crustaceans (Cymothoida) from Heron Island and Wistari Reef, southern Great Barrier Reef. Zootaxa. 4609 (1), 4609 (2019).
  3. Shodipo, M. O., Sikkel, P. C., Smit, N. J., Hadfield, K. A. First record and molecular characterisation of two Gnathia species (Crustacea, Isopoda, Gnathiidae) from Philippine coral reefs, including a summary of all Central-Indo Pacific Gnathia species. International Journal for Parasitology: Parasites and Wildlife. 14, 355-367 (2021).
  4. Losey, G. S. Jr Cleaning symbiosis in Puerto Rico with comparison to the tropical Pacific. 4 (4), 960-970 (1974).
  5. Grutter, A. S., et al. Parasite infestation increases on coral reefs without cleaner fish. Coral Reefs. 37, 15-24 (2018).
  6. Smit, N. J., Davies, A. J. The curious life-style of the parasitic stages of gnathiid isopods. Advances in Parasitology. 58. , 289-391 (2004).
  7. Tanaka, K. Life history of gnathiid isopods-current knowledge and future directions. Plankton and Benthos Research. 2 (1), 1-11 (2007).
  8. Sikkel, P. C., Schaumburg, C. S., Mathenia, J. K. Diel infestation dynamics of gnathiid isopod larvae parasitic on Caribbean reef fish. Coral Reefs. 25, 683-689 (2006).
  9. Santos, T. R. N., Sikkel, P. C. Habitat associations of fish-parasitic gnathiid isopods in a shallow reef system in the central Philippines. Marine Biodiversity. 4, 83-96 (2019).
  10. Nagel, L. The role of vision in host-finding behaviour of the ectoparasite Gnathia falcipenis (Crustacea). Isopoda). Marine and Freshwater Behaviour and Physiology. 42 (1), 31-42 (2009).
  11. Sikkel, P. C., Sears, W. T., Weldon, B., Tuttle, B. C. An experimental field test of host-finding mechanisms in a Caribbean gnathiid isopod. Marine Biology. 158, 1075-1083 (2011).
  12. Vondriska, C., Dixson, D. L., Packard, A. J., Sikkel, P. C. Differentially susceptible host fishes exhibit similar chemo-attractiveness to a common coral reef ectoparasite. Symbiosis. 81 (3), 247-253 (2020).
  13. Grutter, A. S. Parasite infection rather than tactile stimulation is the proximate cause of cleaning behaviour in reef fish. Proceedings of the Royal Society of London. Series B: Biological Sciences. 268 (1474), 1361-1365 (2001).
  14. Sikkel, P. C., Cheney, K. L., Côté, I. M. In situ evidence for ectoparasites as a proximate cause of cleaning interactions in reef fish. Animal Behaviour. 68 (2), 241-247 (2004).
  15. Sikkel, P. C., Herzlieb, S. E., Kramer, D. L. Compensatory cleaner-seeking behavior following spawning in female yellowtail damselfish. Marine Ecology Progress Series. , 1-11 (2005).
  16. Triki, Z., Grutter, A. S., Bshary, R., Ros, A. F. Effects of short-term exposure to ectoparasites on fish cortisol and hematocrit levels. Marine Biology. 163, 1-6 (2016).
  17. Hayes, P. M., Smit, N. J., Grutter, A. S., Davies, A. J. Unexpected response of a captive blackeye thicklip, Hemigymnus melapterus (Bloch), from Lizard Island, Australia, exposed to juvenile isopods Gnathia aureamaculosa Ferreira & Smit. Journal of Fish Diseases. 34 (7), 563-566 (2011).
  18. Grutter, A. S., Pickering, J. L., McCallum, H., McCormick, M. I. Impact of micropredatory gnathiid isopods on young coral reef fishes. Coral Reefs. 27 (3), 655-661 (2008).
  19. Artim, J. M., Sellers, J. C., Sikkel, P. C. Micropredation by gnathiid isopods on settlement-stage reef fish in the eastern Caribbean Sea. Bulletin of Marine Science. 91 (4), 479-487 (2015).
  20. Sellers, J. C., Holstein, D. M., Botha, T. L., Sikkel, P. C. Lethal and sublethal impacts of a micropredator on post-settlement Caribbean reef fishes. Oecologia. 189, 293-305 (2019).
  21. Allan, B. J., et al. Parasite infection directly impacts escape response and stress levels in fish. Journal of Experimental Biology. 223 (16), (2020).
  22. Spitzer, C. A., Anderson, T. W., Sikkel, P. C. Habitat associations and impacts on a juvenile fish host by a temperate gnathiid isopod. International Journal for Parasitology: Parasites and Wildlife. 17, 65-73 (2022).
  23. Sikkel, P. C., et al. Nocturnal migration reduces exposure to micropredation in a coral reef fish. Bulletin of Marine Science. 93 (2), 475-489 (2017).
  24. Artim, J. M., Hook, A., Grippo, R. S., Sikkel, P. C. Predation on parasitic gnathiid isopods on coral reefs: a comparison of Caribbean cleaning gobies with non-cleaning microcarnivores. Coral Reefs. 36, 1213-1223 (2017).
  25. Artim, J. M., Sikkel, P. C. Live coral repels a common reef fish ectoparasite. Coral Reefs. 32, 487-494 (2013).
  26. Paula, J. R., et al. The role of corals on the abundance of a fish ectoparasite in the Great Barrier Reef. Coral Reefs. 40, 535-542 (2021).
  27. Sikkel, P. C., et al. Changes in abundance of fish-parasitic gnathiid isopods associated with warm-water bleaching events on the northern Great Barrier Reef. Coral Reefs. 38 (4), 721-730 (2019).
  28. Shodipo, M. O., Duong, B., Graba-Landry, A., Grutter, A. S., Sikkel, P. C. Effect of acute seawater temperature increase on the survival of a fish ectoparasite. In Oceans. 1 (4), (2020).
  29. Artim, J. M., Nicholson, M. D., Hendrick, G. C., Brandt, M., Smith, T. B., Sikkel, P. C. Abundance of a cryptic generalist parasite reflects degradation of an ecosystem. Ecosphere. 11 (10), (2020).
  30. Richardson, A. J., et al. Using continuous plankton recorder data. Progress in Oceanography. 68 (1), 27-74 (2006).
  31. McLeod, L. E., Costello, M. J. Light traps for sampling marine biodiversity. Helgoland Marine Research. 71 (1), 1-8 (2017).
  32. Artim, J. M., Sikkel, P. C. Comparison of sampling methodologies and estimation of population parameters for a temporary fish ectoparasite. International Journal for Parasitology: Parasites and Wildlife. 5 (2), 145-157 (2016).
  33. Pagán, J. A., Veríssimo, A., Sikkel, P. C., Xavier, R. Hurricane-induced disturbance increases genetic diversity and population admixture of the direct-brooding isopod, Gnathia marleyi. Scientific reports. 10 (1), (2020).
  34. Doherty, P. J. Light-traps: selective but useful devices for quantifying the distributions and abundances of larval fishes. Bulletin of Marine Science. 41, 423-431 (1987).
  35. Jones, C. M., Nagel, L., Hughes, G. L., Cribb, T. H., Grutter, A. S. Host specificity of two species of Gnathia (Isopoda) determined by DNA sequencing blood meals. International Journal for Parasitology. 37 (8-9), 927-935 (2007).
  36. Hendrick, G. C., Dolan, M. C., McKay, T., Sikkel, P. C. Host DNA integrity within blood meals of hematophagous larval gnathiid isopods (Crustacea). Isopoda, Gnathiidae). Parasites & Vectors. 12 (1), 1-9 (2019).

Tags

החודש ב-JoVE גיליון 199
איסוף טפילי דגים איזופודים ימיים עם מלכודות אור
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Shodipo, M. O., Lauguico, R. Y.,… More

Shodipo, M. O., Lauguico, R. Y., Stiefel, K. M., Sikkel, P. C. Collecting Marine Gnathiid Isopod Fish Parasites with Light Traps. J. Vis. Exp. (199), e65059, doi:10.3791/65059 (2023).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter