在小鼠体内的横向主动脉缩窄

该程序首先麻醉老鼠，为无菌手术做准备，并将其置于加热垫上的仰卧位。使用 PE 90 管进行气管插管，然后将其连接到啮齿动物呼吸机。接下来，对第二根肋骨进行部分开胸手术，并缩回胸骨。

识别横主动脉，随后在无名动脉和左颈动脉之间结扎。肋腔闭合，然后是具有连续缝合模式的皮肤。最后，取出气管插管，让小鼠恢复。

大家好，我是来自贝勒医学院分子生理学和生物物理学系 Zander Wars 博士实验室的 Angela Dal Meda。今天我们将向您展示小鼠横主动脉缩窄的手术。我们在实验室使用该程序来研究心脏肥大和心力衰竭发展的潜在机制。

那么让我们开始吧。在开始横主动脉缩窄术或 tax 手术之前，用 75% 异丙醇对手术区域进行消毒。打开加热垫并将其设置在合适的温度。

我们推荐的系统是连接到热疗垫的游戏玩家循环水泵，该热疗垫保持在 37 正负 1 摄氏度。手术前在热珠消毒器中对手术工具进行消毒。对于税务外科手术，需要以下手术器械。

一把钝剪刀、两把粗弯曲的镊子，用于找到 45 度倾斜的镊子、一把倾斜的弹簧剪刀、一个胸部牵开器和一个持针器。还应准备好棉签，以防出血。准备好手术区域后，我们可以继续进行小鼠插管。

为了准备插管，在诱导室中麻醉小鼠，并使用理发器将皮毛从颈线剃到胸部中部。将鼠标仰卧在加热垫上。手术期间保持正常体温以避免心率迅速下降和可能的猝死非常重要。

在鼠标甲床上施加压力以确认鼠标已完全麻醉。将橡皮筋套在动物的门牙上以延长颈部 一只手使用弯曲的镊子，用另一只手轻轻地将舌头向一侧纵。将 PE 90 管插入气管。

接下来，将气管插管连接到哈佛容量循环啮齿动物呼吸机。呼吸机应以每分钟 125 至 150 次呼吸的速度循环，潮气量为 0.1 至 0.3 毫升，具体取决于小鼠的体重，用 Betadine 溶液对手术区域内的皮肤进行消毒，然后用 70% 酒精消毒。重复此过程 3 次，以防止手术过程中污染手术区域，在小鼠上放置无菌窗帘，仅使手术区域暴露在外。

我们现在已准备好在此外科手术中进行横主动脉结扎。麻醉维持在 1.5 至 2% 的氟，每分钟 0.5 至 1 升，100% 氧气。通过在小鼠甲床上施加压力来验证正确的麻醉水平。

确认没有标记反射。通过进行部分开胸手术开始手术。从颅端开始切开胸骨，直到第二肋骨水平。

使用手术显微镜，使用胸部牵开器回缩胸骨。接下来，使用细尖 45 度斜镊子轻轻地将胸腺和脂肪组织与主动脉弓分离。确定横主动脉后，在 an 分额动脉和左颈动脉之间放置一小块 6.0 丝缝合线。

在横主动脉周围打两个松散的结，并放置一小块 27 号半的钝针。平行于转移主动脉。快速将第一个结系在针上，然后打第二个结，然后立即取下针，以产生直径为 0.4 毫米的收缩。

结扎横主动脉后，取下胸部牵开器并捏住呼吸机的流出处两秒钟。要小心地给肺部再充气，请使用 6.0 脯氨酸缝合线和间断缝合模式闭合胸腔。最后，使用具有连续缝合模式的 6.0 脯氨酸缝合线闭合皮肤。

用于术后镇痛。用丁丙诺啡腹膜内注射小鼠。如果手术后有脱水迹象，腹膜内给予 0.3 至 1 毫升无菌盐水。

逐渐将麻醉降低到关闭位置。当出现自主呼吸的迹象时，取出气管插管，然后将鼠标移动到俯卧位置，让它在加热垫上恢复。横主动脉缩窄后 1 周，重新麻醉小鼠以确定横主动脉放行诱导的压力超负荷程度。

如前所述保持麻醉和体温。将 20 兆赫兹多普勒探头以 45 度角放置在颈部的左侧和右侧。为了检测颈动脉血流速度，我们使用基于计算机的多普勒信号处理器来显示和存储多普勒信号。

根据实验方案所需的压力过载程度，仅包括右颈动脉或 RC 超过左颈动脉或 lc 流速比在一定范围内的小鼠进行进一步分析。例如，适度的压力过载会导致比率为 5 比 8，而更紧密的收缩导致严重的压力过载导致比率为 8 比 10。然而，假动物的比例预计约为 1。

野生型小鼠 TAC 后的典型手术存活率约为 80% 至 90% 的成功率。与假手术小鼠相比，横主动脉的手术结扎将导致左右颈动脉或 RC 之间的多普勒流速比在 lc 上为 5 到 10。压力超负荷的小鼠预计会在 1 到 2 周内发展为心脏肥大，在 6 到 8 周后发展为心脏扩张，具体取决于收缩的紧密程度。

我们刚刚向您展示了如何对小鼠进行横主动脉收缩术，但执行此程序对于维持正常体温和减少失血很重要。就是这样。感谢您的观看，祝您的实验好运。