FFPE 肿瘤组织大面积解剖:一种从未染色标本中获得特定肿瘤组织的技术

要开始宏观解剖，请取载玻片，并携带组织标本。此外，取载有相同组织标本的参考载玻片，并使用苏木精和伊红进行 H&E 染色。

在正常细胞中，苏木精赋予核酸蓝色染色，而伊红复染则显示细胞蛋白呈粉红色。细胞核的深蓝色有助于将癌细胞与正常细胞区分开来。

H&E 染色载玻片与未染色载玻片叠加以对齐组织标本。在 H&E 染色载玻片上找到含有肿瘤细胞的部分。在未染色的载玻片上标记相应的区域。

从未染色的载玻片上刮掉所需的组织。使用湿移液器吸头收集刮削的组织，以确保组织标本的轻松转移。将组织转移到含有裂解缓冲液的管中。裂解缓冲液的成分消化组织，释放细胞成分。

用合适的蛋白酶处理裂解物并在高温下孵育。蛋白酶裂解污染的 DNase，从而保护 DNA 免于降解。储存含有组织裂解物的 DNA 以进行下游分析。

根据适当的H&E染色切片，确定最适合宏观解剖的肿瘤区域的癌组织。然后，根据标记的切片对癌组织进行宏观解剖。拿一把干净的剃须刀片，轻轻地从载玻片上刮下癌组织，尽量将其保持成一体。使用移液器吸头将刮擦的组织转移到裂解缓冲瓶中。

对其余幻灯片重复此过程。将所有组织放入管中后，使用尖端确保组织完全浸没并且不会粘在墙上。将 20 微升枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶加入小瓶中，轻弹混合。将小瓶放入 55 摄氏度的热块中至少 4 小时或过夜，确保 2 小时后轻微涡旋。