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神经科学
0 次观看 • 2:28 分钟 • May 29th, 2025
从分离的小鼠脑组织中获取附着多聚核糖体的云母片开始。
多聚核糖体是多个核糖体结合在一条RNA链上形成的复合物。
使用胶带将云母片固定在样品台上。
将样品台放入原子力显微镜的载物台上。
放置预安装的悬臂梁。调整激光与探测器的对准,以确保成像过程中信号检测的准确性。
调节悬臂的振荡频率,以在保持样品完整性的前提下优化表面特征的检测。
通过使悬臂探针在样品表面振荡,开始成像。
当探针接触到多聚核糖体的隆起表面时,激光会发生偏转。
探测器会捕获激光的这些偏转,从而生成具有纳米级分辨率的图像。
使用适当的软件校正任意倾斜和漂移效应,从而实现多聚核糖体的可视化。
使用双面胶带将制备好的样品固定在原子力显微镜的样品台上。然后,根据制造商的说明,将样品台插入原子力显微镜的载物台。完成校准后,使样品接近,直至悬臂探针接触样品表面。
选择扫描区域为 2 × 2 微米,分辨率至少为 512 × 512 像素。选择实时背景扣除模式,并设置 Z 轴范围为 20 至 25 纳米。然后开始图像采集。检查图像,观察是否存在圆形物体,其高度在空气中成像时介于 10 至 15 纳米之间。
接下来,调节设定点和反馈参数,直至观察到清晰的物体。在质量良好的样品中,背景应相对平坦,可见一些高度为2至4纳米的物体。当图像效果良好后,在样品的不同区域采集多幅2乘2微米的扫描图像。