Name: 细胞捕获使用一个微流体装置 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T15:28:15.000+00:00
Duration: 29 min 2 s
Description: 了解微流体装置捕获细胞的方法，用于神经科学研究中的实验组件制备与细胞分离。该方案通过标准化试剂盒和精确操作流程，帮助研究人员实现高效、可重复的细胞捕获与染色分析。

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作者无任何利益冲突需要披露。

使用微流控装置捕获细胞

Cell Capture Using a Microfluidic Device

我们制备的设备以每套10个或20个的形式包装成套件。设备送达时将以冷藏状态装在盒中寄送，套件内包含实验所需的所有组件。套件中的实验材料包括装有所有注射器和缓冲液的包装袋，可于室温下保存。此外，还附有一份本次实验将遵循的操作规程副本。还有一个冷藏箱，用于存放实际使用的设备以及所有需要冷藏的运行缓冲液。通常，试剂盒以每组10个或20个的方式包装。不使用时，试剂盒应冷藏保存。每个注射器和试剂盒组分均已仔细标记，标签与我们所遵循的实验方案中的表格相对应，因此在各个步骤中使用哪个注射器或试剂盒组分均无歧义。在打开包装、取出器械并将其放入生物安全柜后，我们将进行中性粒细胞的分离及裂解操作，以用于后续基因组学应用，因为所获得的细胞样本将用于RNA提取。因此，我们必须确保实验区域的清洁，这不仅指无菌意义上的清洁，还包括清除环境中通常存在的各种RNA。因此，使用能够破坏RNA的溶液彻底擦拭整个操作区域和所有设备显得尤为重要。通常情况下，我们会使用RNA SAP或RNAs away等商品化试剂，对所有实验工具和工作台面进行擦拭处理，这类产品可从多家厂商获得。该设备以热封袋包装形式提供。每个设备均经过密封并带有条形码。如果您正在处理任何临床样本，应记录此条形码。因此，将设备打开密封，取下盖子后放入泵的持握式歧管装置中。我们使用的血样为全血样本，将通过标准的1 mL BD注射器进行灌注，该注射器标记为注射器一。通常的做法是，将注射器从包装中取出，并小心地取下采血管的盖帽。然后，吸取700微升（0.7毫升）血液，取其中一半（即350微升）注入1.5毫升离心管中。这样，你的血液样本便可用于后续处理。您的血液样本管可以继续传递使用，同时您体内仍会保留足够的血液，以应对设备故障的情况。接下来，我们将把含有血液的注射器装载到针头上，该针头通过一段管路与这个微流控分离装置相连。我们操作时需要格外小心，尤其是在使用微流控分离装置时。我们必须非常小心，避免将任何气泡引入装置中，否则装置将无法正常工作。通常情况下，我们会先取一支注射器，推动活塞，将液体加至装置的上表面，确保液体完全浸润后，再将注射器中的液体全部排出。此时停止操作，小心地将注射器筒体从针头处取下，然后利用注射器中剩余的缓冲液，将针头尖端或针头的接头部分完全充满。我们将弃去该液体。然后取含有血液的注射器，将其插入此连接接头中，注意避免血液溢出，同时小心不要引入任何气泡。建议使用止血钳夹住注射器管体和管路，以防血液溢出。将注射器与管路接头或针头连接后，轻轻敲击注射器数次，以去除连接处可能存在的气泡。随后将该注射器安装到注射泵上，并用锁紧螺钉固定牢固。启动注射泵，其已预设为我们所需的流速条件。我们将以每分钟30微升的流速使血液流经该装置。将注射器筒体装入注射泵后，按下可移动推杆臂上的按钮，并将其向下滑动，直至接触推杆顶部，开始推动液体从该装

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科研

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生物学

细胞捕获使用一个微流体装置

我们描述了一种用于制备微流控装置的方案，该装置可实现细胞捕获与培养。在此方法中，通过在微流控通道内设计具有特定图案的微结构（如沟槽），以形成低剪切应力区域，从而使细胞能够在其中停靠。...

一种带沟槽图案的微流控装置用于研究细胞行为

本文介绍了一种基于流体动力学流动的微流控粒子束缚方法。我们通过反馈控制机制，在流体停滞点实现了粒子的稳定捕获，从而能够在集成化的微流控器件中对任意粒子进行束缚和微操控。...

一种基于微流控的单颗粒流体动力学捕获装置

本文介绍了一种用于单细胞分析的微流控芯片。该芯片可通过荧光检测或免疫检测方法，对细胞内蛋白质、酶、辅因子和第二信使进行定量分析。...

一种用于单细胞多功能化学分析的微流控芯片

细胞的快速机械变形已成为一种有前景的无载体方法，可用于将大分子和纳米材料递送至细胞内。本方案详细介绍了如何将该系统应用于多种不同场景的操作步骤。...

细胞挤压作为一种稳定且基于微流控的细胞内递送平台

本文展示了一种利用基于毛细管的离心微流控装置制备尺寸可控、单分散性水包油（W/O）微液滴的简单方法。该方法仅需少量样品体积，即可实现高产率制备。我们预计该方法将适用于快速生化分析和细胞分析。...

基于毛细管的离心微流控装置用于可控尺寸的单分散微液滴生成

本文介绍了一种利用微流控平台分离和培养单细胞的实验方案，该平台采用了一种新型的微孔设计概念，可实现高效的单细胞分离和长期克隆培养。...

一种用于高通量单细胞分离与培养的微流控平台

本文介绍了一种利用移液器吸头将稀有细胞群体接种至液滴微流控装置的实验方案，以提高细胞在液滴中的包封效率。...

一种基于移液枪头的细胞接种至液滴微流控平台的方法

本报告介绍了一种基于微流控芯片的方法，用于建立单细胞培养实验，可实现多个单细胞的高效配对及显微分析。...

以微流控芯片确定性建立基于单细胞的共培养体系

突破曲线（BTC）是研究细菌在多孔介质中迁移的有效工具。本文介绍基于微流控装置并结合显微镜观察与流式细胞计数的技术，用于获取突破曲线（BTC）。...

结合微流控装置与显微镜及流式细胞术研究跨空间尺度多孔介质中的微生物迁移

临床微流控芯片是一种重要的生物医学分析技术，可简化临床患者血液样本的预处理，并对循环肿瘤细胞（CTCs）进行免疫荧光染色 原位...

用于分离多种循环肿瘤细胞的临床微流控芯片平台

该方案描述了一种先进的微流控平台，用于定量测量单个外周血单个核细胞的细胞因子分泌动态。以脂多糖刺激为例，该平台可对每个单个细胞并行检测多达三种细胞因子（IL-6、TNFα 和...

微流控方法解析单个多功能细胞同时与顺序性细胞因子分泌

了解微流体装置捕获细胞的方法，用于神经科学研究中的实验组件制备与细胞分离。该方案通过标准化试剂盒和精确操作流程，帮助研究人员实现高效、可重复的细胞捕获与染色分析。

使用微流控装置捕获细胞

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