Microinjection for Transgenesis and Genome Editing in Threespine Sticklebacks

Priscilla A. Erickson; Nicholas A. Ellis; Craig T. Miller

doi:10.3791/54055

JoVE Journal
Developmental Biology

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Microinjection for Transgenesis and Genome Editing in Threespine Sticklebacks

显微注射转基因的基因组，并在编辑Threespine刺鱼

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08:51 min

May 13, 2016

DOI: 10.3791/54055-v

Priscilla A. Erickson¹, Nicholas A. Ellis¹, Craig T. Miller¹

¹Department of Molecular and Cell Biology,University of California, Berkeley

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

转基因操作和基因组编辑是功能测试基因和顺 -regulatory元素的作用是至关重要的。此处的基因组修饰（包括TOL2介导的荧光报道基因构建体，TALENS和CRISPRs）的生成的详细显微注射协议提出了紧急模型鱼的三刺。

这种显微注射技术的总体目标是生成转基因和基因组编辑的粘背鱼，以测试基因和增强子功能。这种方法可以帮助回答发育和进化遗传学中的关键问题，例如基因和增强子如何发挥作用以产生体型。该技术的主要优点是它可以有效地生成转基因鱼以进行功能遗传分析。

根据文本方案制备 toll 两个质粒和 mRNA 后，从硼硅酸盐玻璃中拉出至少四个微量移液器针。垂直存放在毛细管储存罐中，尖端朝下。要使多达 100 个粘背鱼卵受精，请加入 50 微升精子溶液，并使用移液器吸头轻轻搅拌以确保所有卵子受精。

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