高灵敏度测量与氟素等西洋盐-聚糖小鼠的球状渗透性 70

该方法有助于回答肾病学领域有关肾病肾功能渗透作用的关键问题。该技术的主要优点是，使用荧光铅标记示踪剂可渗透性小而瞬态增加。麻醉后，在雌性小鼠中放置尿导管。

将鼠标放在背背中。紧固下腹部，找到尿道骨。获取 22 G 血管导管的塑料部分，然后用木质凝胶润滑。

使用左食指小心地将张力放在下腹部，将导管引入三毫米的尿道骨中，同时与半边尿道轴平行。将血管导管顶部转动 180 度，将尖端保持在尿道骨内并保持尿道轴。然后，将导管进一步引入小鼠7毫米，以便它被放置在膀胱内。

将1.5毫升棕色管放在血管导管顶部以收集尿液。涂抹一毫升0.9%氯化钠皮，以提高尿液生产。剃掉老鼠的脖子，然后用头朝外科医生放置。

用胶带将鼠标头超长。用70%异丙醇消毒颈部。用钳子和一把剪刀在下颚下做一个五毫米的皮肤切口。

切皮约一厘米的胸骨方向，直到胸骨中间达到。用一把剪刀。小心解剖颈部右侧的皮肤。

在右侧对皮肤进行矩形切口，以露出颈部的软组织。小心不要损坏血管。用一把剪刀和一把钳子用两个夹子固定皮肤皮瓣。

使用细钳的尖端，通过钝处理仔细暴露壶静脉。如有必要，用细剪刀取出纸巾。避免对静脉分支造成伤害。

将一根丝线放在可见壶脉的后半部分，即朝向鼠标头处，用丝线放置并关闭连字。用胶带固定丝线，使连结张紧。这确保了壶脉上的轻微张力。

在血管的近位部分周围准备一个连字。之后，用平衡和融合溶液填充导管。用胶带固定导管，使导管对齐导管静脉。

控制气泡以避免空气栓塞。在插入位置用细钳子抬起壶静脉。将管子平行于壶静脉，并刺穿针对流明的壶状静脉。

插入约两到四毫米平行的壶脉轴。避免任何轻快的动作。关闭连字以修复导管。

通过显微镜仔细观察，控制连字的紧固性。在手术现场放一个潮湿的棉签。将尾袖放在鼠标尾底，而鼠标则躺在背背中。

开始测量，每个时间点重复十次。如果血压测量看起来不正确，并且产生了错误数据，请调整尾袖口的位置。在平衡阶段之前，更换尿液收集管并放在冰上。

折叠一个拭子，并把它放在小血管导管周围，被引入到血管静脉。在拭子上放置一个夹子，以消除逆行血流或空气栓塞。将 27 G 针头与装满 FITC 螺栓的 1 毫升注射器连接到小血管导管的端。

打开夹具并应用 100 微升 FITC 螺栓。再次关闭夹具，将较大的导管与较小的导管连接。重新打开夹子，以每分钟 0.008 毫升的流量启动注射器泵。

继续输液60分钟。在这个阶段，对球状膜选择性的有效药物进行了调查。将尿管形成时间点零分钟更改为另一个 1.5 毫升棕色管。

在小容器导管周围放一个拭子，然后断开大导管与小容器导管的连接。用实验阶段溶液填充注射器。将它放入注射器泵中，让输液泵运行，使大导管充满实验阶段溶液。

重新连接导管，同时避免空气栓塞并重新打开夹具。以每分钟 0.008 毫升的流量启动注射器泵。继续运行注射器泵60分钟，然后收集尿管内的尿液。

将尿管放在冰上。在这项研究中，本地小鼠尿液的荧光扫描显示峰值为395纳米。FITC多糖70在小鼠尿液中每毫升浓度为40微克，最大荧光量为525纳米。

小鼠尿液不会干扰 FITC 聚糖 70 的荧光测量。在525纳米的入院中，FITC聚糖70的浓度增加，表明荧光强度增加。此方法还能够检测球状渗透性的差异。

在实验阶段血管紧张素II刺激开始前，白柱代表70级。白柱代表任何水平。剂量60分钟后，与对照组相比，球状渗透性增加。血管紧张素II洗掉降低球状渗透性。

FITC多糖70水平下降后，额外的60分钟的血管紧张素II刺激或60分钟的血管紧张素II洗净。血管紧张素II导致的球状渗透性增加可能被血管紧张素II受体阻滞剂阻断。用尾袖口法监测的血压没有显示对照组与血管紧张素II治疗组之间的显著差异。

在尝试此程序时，在更换输液溶液时避免空气栓塞非常重要。