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DOI: 10.3791/61437-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
仿生学以前被用作研究叶-微生物相互作用的工具。但是,根不存在此类工具。在这里,我们开发一个协议,形成合成表面模仿根表面微观结构的研究根环境相互作用。
该协议使得开发一种模拟根面微观结构的合成系统成为可能。该系统可用于以控制方式研究根环境相互作用,重点是表面结构。这是一个简单的技术,可以在任何实验室研究根环境相互作用。
此外,该技术还能够从各种材料中形成表面。最困难的步骤是去除负模的自然根。此步骤需要温和处理根部,以避免撕裂根毛。
可视化演示将增强查看器复制此过程的能力。在生长三周后将植物从土壤中去除开始。在与茎相互作用时,将根系从植物中切开,将无根植物放入水杯中。
几天后,切断从茎中浮现的冒险根,并使用它们进行复制。为了准备种子发芽的根,在培养皿中用水将滤纸弄湿,并在纸上放上几个M82种子。在25摄氏度下孵育这道菜,每天为纸水合。
大约五天后,发芽根将足够长的时间用于复制。将 9.49 克利尿烷二甲酸二甲酸盐添加到 50 毫升的杯子中,准备负复制溶液。将 1.45 毫升乙基甲基丙烯酸酯添加到杯子中,并在室温下储存,直到溶液变得均匀且看起来清晰。
加入三毫升的增塑剂,搅拌溶液一小时。然后添加 300 微升的照片启动器,搅拌过夜或直到所有气泡被移除。要生成根的负副本,请拿一个干净的玻璃幻灯片,将负副本溶液倒入一毫升。
在溶液上放置两到三个根,确保根没有完全覆盖。将幻灯片在 8 瓦紫外线灯下保持 8 到 10 分钟,然后关闭紫外线灯。从玻璃滑梯上取下复制品,放入装满乙醇的培养皿中,取出未反应的单体。
使用钳子缓慢而轻轻地从副本中删除根。要为正副本准备 PDMS 溶液,请将 10 克二甲基硅氧烷放在杯子中。加入一克固化剂,彻底混合。
在真空下将混合物在干燥器中加热两小时,以清除气泡。将聚氨酯负性复制品放入培养皿中,将 PDMS 混合物倒在负性复制品的顶部。应用真空两小时,以确保微结构覆盖,并保持培养皿在室温过夜。
第二天,使用钳子将固化的阳性副本与负副本分开。要准备乙基纤维素的阳性复制品,在100毫升的杯子中加入20毫升乙醇。然后加入1.32毫升增塑剂和3.3克乙基纤维素。
并在室温下搅拌溶液两小时。第二天,将乙基纤维素溶液倒在培养皿的负复制品上,将盘子放在引擎盖下过夜。然后用钳子慢慢从负副本中删除正副本。
如果正确遵循协议,可以生成良好的负副本。此副本将显示根面的单元格结构以及表示根毛位置的孔。如果根液浸入聚氨酯溶液中,它将被夹住硬聚合物,并在固化后保留在负复制品中。
当使用紫外线固化时,超过建议的固化时间,将导致极硬的聚氨酯模具,使得在不破坏根部的情况下无法去除根部。有时根片太小,需要显微镜才能看到它们。使用PDMS和乙基纤维素生成正副本。
根毛位于伸长区,开始出现。它们的长度随根面而变化,因为它们变长,类似于自然根。乙基纤维素复制品上的一些毛毛甚至在光显微镜下可见。
将根放在负副本解决方案上时,必须选择右侧并避免根在解决方案内淹没。开发这项技术为研究根面环境相互作用提供了一条新途径。具体来说,由表面的微观结构和材料特性引起的物理力。
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