在钻石光源进行固定靶连续数据采集

同步辐射序列晶体学（Serial Synchrotron Crystallography，简称 SSX）是 MX 领域中一个相对较新且快速发展的方向。它非常适合低剂量和常温实验，但更重要的是，它非常适用于追踪蛋白质的动态过程，从而能够制作出蛋白质运作过程的“定格动画”电影。在 I24 线站，提供了多种 SSX 实验模式。

本方案聚焦于固定靶SSX技术，该技术可在样品量有限的情况下进行多种连续实验。在加载和清洗硅芯片时，若操作者不熟悉相关流程，则可能造成芯片损伤。此外，芯片对准方案对许多晶体学家而言是全新的，且数据处理方法与标准的旋转数据略有不同。

为制备芯片支架，将两张聚酯薄膜裁剪成约6厘米×6厘米的正方形，分别覆盖在两个底板上。使用金属密封环将薄膜固定，然后小心拉紧多余的薄膜以去除任何褶皱。接下来，根据待分析晶体的尺寸，选择具有合适孔径的硅芯片。

在0.39毫巴气压下，以15毫安电流对芯片进行25秒辉光放电。使用镊子将硅芯片放置在芯片装载台上，使凸起的条状结构朝下。然后，用移液器将200微升微晶悬液加到芯片的平整面，均匀铺展悬液以覆盖芯片上所有微区。

如果芯片受损，需用一小片聚酯薄膜覆盖任何孔洞，以确保能够施加均匀的真空。然后施加轻柔的真空以通过芯片抽吸去除所有多余的液体。将芯片从芯片加载台上取下，并用滤纸小心吸干芯片底部的多余液体。

将已加载的芯片放置在芯片架较大一半的导引标记之间，平整面朝下。将芯片架较小的一半盖在芯片上以密封。芯片架的两部分应卡扣到位。

然后，使用六角螺栓将芯片牢固固定。为对准芯片，应在接近安装位置时将芯片 holder 保持在 30 度角。接着使用运动学安装座将装载好的芯片放置到光束线的 XYZ 平台上。

当磁铁接触时，使芯片架旋转至与流道平行，并卡入到位。芯片放置完毕后，使用光束线在线观察系统和芯片对准图形用户界面，定位芯片的左上角基准点。为在X、Y和Z方向上将基准点0居中，需通过调焦前后移动以对准Z方向，上下移动以对准Y方向，左右移动以对准X方向。然后单击“设置基准点0”。以相同方式对准基准点1和基准点2与X射线束后，单击“生成坐标系”以建立坐标矩阵。

然后单击“Block Check”以将XYZ载物台移动到每个城市区块的第一个孔。如果X射线十字线与孔径对齐，则表示芯片已对准。在此DIALS的光斑识别结果的图形表示中，可以观察到实时更新的命中率曲线图。

如果点击命中结果，相应的衍射图像将在DIALS图像查看器中显示。在此表格中，可以实时可视化当前的指标化和积分率，这些数据在访问期间随着数据采集而实时更新。晶胞参数的可视化有助于揭示多晶型现象。

还可以生成有用参数的二维图，以揭示由于上样或脱水效应引起的变化。施密特投影可以揭示是否存在择优取向，这些信息可反馈到上样方案中。例如，在此投影图中，可以观察到在芯片上过量加载溶菌酶晶体所产生的效应。

加载芯片时，应缓慢使用移液器，并用手指将移液器悬停在芯片上方。这样可以避免触碰芯片，防止意外刺穿硅片。处理数据时，应利用现有的自动化分析流程。

这将使您清楚了解实验的进展情况，并判断是否需要调整某些条件。该方法可应用于任何能够以较大量结晶的蛋白质体系。反应可通过光照、X射线或快速混合来触发。

对一系列结构进行动态研究可以揭示蛋白质的功能机制。