Name: 稳定纵向 在Vivo 细胞级可视化胰腺在穆林模型与胰腺内活性成像窗口 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-05-06T14:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 52 s
Description: 学习使用新型胰腺活体成像窗口技术，在小鼠模型中实现稳定、长期的细胞级三维成像。该方法可连续追踪胰岛和癌细胞长达三周，适用于胰腺生理与病理研究。

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本研究由首尔国立大学盆唐医院研究基金（编号：14-2020-002）以及韩国国家研究基金会（NRF）资助，NRF 基金由韩国政府（MSIT）资助（NRF-2020R1F1A1058381，NRF-2020R1A2C3005694）。

本文所述所有实验操作均依照第8版th 《实验动物护理和使用指南》第8版（2011）26 并经韩国科学技术院（KAIST）和首尔国立大学盆唐医院（SNUBH）机构动物护理与使用委员会批准。
1. 窗口及其他材料的准备
<ol>
	<li>定制设计胰腺活体成像窗口，以将胰腺与腹腔内的肠道隔离18（图1A、B）。该窗口的详细设计蓝图已在先前研究的补充图中描述18。</li>
	<li>使用8至12周龄的雄性C57BL/6N小鼠进行胰腺活体成像。为标记血管，成像前2小时注射与Alexa 647荧光染料偶联的抗CD31抗体18。</li>
	<li>针对胰岛研究，构建一种胰岛标记有荧光报告蛋白的转基因小鼠模型。本研究中使用了MIP-GFP小鼠，其中绿色荧光蛋白在小鼠胰岛素1基因启动子的调控下表达，该启动子在小鼠所有胰岛的β细胞中具有活性24。</li>
	<li>针对胰腺癌研究，准备标记有荧光报告蛋白的转基因癌细胞及BALB/C裸鼠。本研究中使用了PANC-1 NucLight Red细胞。PANC-1癌细胞25被NucLight Red荧光探针标记。</li>
	<li>使用高压灭菌器对所有手术器械、盖玻片（无论是否含PEG涂层）以及成像窗口进行灭菌处理。</li>
	<li>对盖玻片进行PEG涂层处理，以防止炎症反应并提高生物相容性，适用于长期成像。</li>
</ol>
2. 手术
<ol>
	<li>准备无菌手术平台，并用70%乙醇对表面进行消毒。 
	注意：对于纵向成像实验，无菌操作技术至关重要。</li>
	<li>使用替来他明/唑拉西泮（30 mg/kg）和赛拉嗪（10 mg/kg）混合物对小鼠进行麻醉。 
	注意：建议使用替来他明/唑拉西泮而非氯胺酮，因为后者可能引起高血糖的不良反应。应根据实验目的选择最佳麻醉方案9,27。</li>
	<li>使用直肠探头配合恒温控制加热垫监测小鼠体温。</li>
	<li>剃除小鼠左侧 flank 区域的毛发，并交替使用酒精和碘伏进行三轮擦拭消毒。 
	注意：若使用脱毛膏，&#160;停留时间不得超过1分钟，以避免化学灼伤。</li>
	<li>在小鼠左侧 flank 区域做一道1.5 cm的切口，并分离皮肤和肌肉组织。</li>
	<li>在切口边缘使用黑色或尼龙4-0缝线进行荷包缝合。</li>
	<li>在切口处使用微型牵开器，轻柔暴露脾脏。</li>
	<li>使用环形镊子小心托起脾脏，并识别胰腺。</li>
	<li>将成像窗放置于小鼠 flank 部位，将脾脏和胰腺穿过成像窗的开口。&#160;操作胰腺时必须极为轻柔，以免引起出血或胰腺炎。</li>
	<li>将胰腺轻柔地放置在成像窗的基板上；脾脏则置于成像窗的开口区域。</li>
	<li>在肿瘤细胞研究中，直接向胰腺内注射PANC-1 NucLight Red细胞（1.0 × 106 个细胞）。 
	注意：为成像原位人源胰腺癌异种移植模型，可直接植入PANC-1或其他人源胰腺癌细胞28。为实现活体荧光显微成像，使用NucLight Red慢病毒试剂将PANC-1细胞转导表达红色荧光蛋白，以标记细胞核29。&#160;尽管最大注射体积尚不明确，但仍应尽可能减少注射量，以避免对胰腺造成压力效应。</li>
	<li>在成像窗边缘滴加数滴N-丁基氰基丙烯酸酯胶水。
	<ol>
		<li>为尽量减少胶水量，建议使用31 G导管针进行点胶。若液滴过大，则组织可能意外粘附于成像窗或盖玻片上。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将直径12 mm的圆形盖玻片轻柔地贴合至成像窗边缘。</li>
	<li>拉紧缝线环，使其嵌入成像窗的侧槽中，并打结三次固定。</li>
	<li>在结扎点尽可能靠近结的近端处剪断线头&#160;，以防止小鼠苏醒后活动导致缝线绷紧而中断。</li>
	<li>让小鼠从麻醉中恢复（2–3小时），并注射酮洛芬（5 mg/kg，皮下注射于颈部或髋部松弛皮肤处）以缓解疼痛。每12小时重新评估一次疼痛体征，&#160;并考虑在术后1–3天内每24小时给予一次酮洛芬。 
	&#8203;注意：镇痛药物会影响葡萄糖刺激下的胰岛素分泌9。镇痛药的选择和给药时机应根据实验目的个体化调整。</li>
	<li>将小鼠安置于垫料充足的笼具中，避免成像窗与笼壁接触。禁止将接受过成像窗手术的小鼠与未接受手术的小鼠同笼饲养。</li>
</ol>
3. 活体成像
<ol>
	<li>开启活体显微镜及其激光电源。</li>
	<li>打开加热垫，并将恒温控制系统设置为 37 °C。 
	注意：若无恒温控制系统，可改用被动式加热垫或加热灯，并需频繁监测温度。</li>
	<li>采用替来他明/唑拉西泮（30 mg/kg）与赛拉嗪（10 mg/kg）混合物进行肌肉注射麻醉。 
	注意：推荐使用替来他明/唑拉西泮而非氯胺酮，因后者可引起高血糖等不良反应。应根据实验目的选择最适宜的麻醉方案9,27。</li>
	<li>插入血管导管以供注射。
	<ol>
		<li>可用食指和中指压迫尾部近端作为止血带的替代方法；必要时可用灯加热尾部以扩张血管。</li>
		<li>用70%乙醇喷雾对尾静脉进行消毒。</li>
		<li>将30 G导管插入尾侧静脉，可在PE10管中观察到血液反流。</li>
		<li>用丝线胶带固定导管以保持其稳定。</li>
		<li>根据所用荧光探针的组合，适当注射FITC/TMR葡聚糖或其他荧光探针（如25 µg Alexa 647标记的抗CD31抗体）18。 
		注意：对于荧光标记抗体探针，建议在成像前2小时注射。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将小鼠从手术平台转移至成像载物台。</li>
	<li>插入直肠探头，通过恒温加热系统自动控制动物体温。</li>
	<li>将胰腺成像窗插入活体显微镜装置中预先准备好的窗固定架内（图2）。对于倒置显微镜，可能无需使用窗固定架。</li>
	<li>进行活体成像。
	<ol>
		<li>对胰腺进行成像时，首先使用低倍物镜（例如4x）扫描胰腺成像窗内的整个胰腺区域（推荐视野：2500 × 2500 µm）。</li>
		<li>确定感兴趣区域后，切换至高倍物镜（20x或40x）进行细胞水平成像（推荐视野：500 × 500 µm或250 × 250 µm）。本实验中，横向和轴向分辨率分别约为0.5 µm和3 µm。</li>
		<li>进行z轴层扫或时间序列成像，以观察三维结构或细胞水平动态过程（如细胞迁移）。 
		注意：对于表达荧光蛋白的转基因动物（MIP-GFP）的成像，间歇性使用488 nm激光（功率最高达0.43 mW），每次照射30秒，未观察到明显光漂白或组织损伤。对于Alexa 647标记的荧光蛋白成像，640 nm激光功率最高达0.17 mW时亦可耐受，无明显光漂白或组织损伤。若激光照射时间过长或功率超过上述设定，可能导致光漂白或光毒性引起的组织损伤。应调整适当的增益和激光功率，以清晰成像感兴趣区域。活体显微成像的具体参数设置需根据各研究机构所建立的活体显微系统进行个性化优化。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

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</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

本文所述方案采用一种新型的集成式胰腺活体成像窗，该成像窗由腹部成像窗改进而来，用于实现胰腺的活体显微成像。在上述步骤中，首要的关键步骤是在小鼠体内植入胰腺活体成像窗。在成像窗上使用胶水时，必须将胶水涂布于成像窗边缘与盖玻片之间，而不能接触胰腺组织，因为胶水可能严重干扰活体成像效果。如果将胶水直接施加于组织上，不仅胶水本身在玻璃与组织之间可能造成影响，附带的灰尘颗粒也可能在成像过程中引起光散射。此外，黏合剂的使用可能对胰腺产生毒性及非生理性的不良影响。
第二步是将适量的胰腺组织放置在金属支撑底板上。由于胰腺组织呈片状结构，因此需要控制其在底板上的体积。若放置的组织体积过大，涂抹在环形边缘的胶水可能会粘附到组织上，且体积效应可能阻碍胰腺的灌注；反之，若放置的组织体积过小，则可能限制可观察的视野范围。这种在观察窗上进行手术的操作方案可能需要经过多次尝试才能达到一致的标准。
在为期3周的长期成像过程中，最令人关注的问题是胰腺成像窗口可能受到的损伤。在长期观察期间，可能会意外破坏胰腺成像窗口中的盖玻片。为防止此类情况发生，安装有成像窗口...

胰腺是一个位于腹腔内的器官，具有在消化道中发挥外分泌功能以及向血液中分泌激素的内分泌功能。对胰腺进行高分辨率的细胞成像，有助于揭示涉及胰腺的各种疾病的病理生理学机制，包括胰腺炎、胰腺癌和糖尿病1。目前临床上广泛应用的传统诊断成像工具包括计算机断层扫描、磁共振成像和超声检查1,2。然而，这些成像方式仅限于显示结构或解剖学上的变化，无法检测细胞或分子水平的改变。鉴于人类糖尿病或胰腺癌的分子变化可能在确诊前十余年就已开始3,4，若能在潜伏期通过分子转变过程检测胰腺疾病，将有望实现早期诊断和及时干预。因此，能够突破分辨率限制并提供功能信息的成像技术，将因可在胰腺癌早期诊断或糖尿病发展过程中胰岛结构变化的精确诊断方面提供重要见解而受到广泛关注5。
特别是对于胰岛，核成像、生物发光成像以及光学相干断层扫描已被提出作为非侵入性的胰岛成像技术6。然而，这些方法的分辨率显著偏低，典型范围为几十到几百微米，难以有效检测胰岛细胞水平的变化。另一方面，以往对胰岛的高分辨率研究均在离体ex vivo7,8（例如胰腺切片或消化）、非生理9（例如胰腺外置）和异位条件10,11,12（例如移植至肾包膜下、肝内或眼前房）下进行，限制了其结果的解释及临床意义。如果能够建立一种活体in vivo、生理性和原位的高分辨率成像模型，将为胰腺胰岛的研究提供一个关键平台。
活体显微成像技术能够在活体动物中以显微分辨率揭示病理生理过程，近年来受到广泛关注13。在多种in vivo成像方法中，腹腔成像窗技术14通过将观察窗植入小鼠腹腔，已促成多项新发现（例如早期肝转移的微小转移前阶段15，以及肠道上皮干细胞维持机制16）。尽管腹腔成像窗提供了重要的研究结果，但其在胰腺相关疾病中的应用以及由此开展的胰腺活体显微成像研究仍缺乏系统探索。
与人类胰腺明确的实质性器官特征不同，小鼠胰腺是一种弥散分布的类似软组织的结构17。因此，它持续受到包括蠕动和呼吸在内的生理运动的影响。此前一项关于腹部成像窗口在胰腺中应用的研究表明，由于肠蠕动引起的运动伪影，导致成像位置发生漂移18。在最终的平均图像中观察到严重的模糊现象，阻碍了微尺度结构的可视化与识别。
本文中，我们描述了一种新型的集成式胰腺活体成像窗支持底座，结合活体显微技术19,20，用于研究涉及胰腺疾病的纵向细胞水平事件。除了在先前研究中对方法学进行的详细描述18外，本文还将探讨胰腺成像窗在多种胰腺相关疾病中的扩展应用。在本实验方案中，采用了一套自行构建的视频速率激光扫描共聚焦显微系统作为活体显微成像系统。系统使用四个激光模块（波长分别为405、488、561和640 nm）作为激发光源，并通过光电倍增管（PMT）结合带通滤光片（BPF1：FF01-442/46；BPF2：FF02-525/50；BPF3：FF01-600/37；BPF4：FF01-685/40）检测四个通道的发射信号。激光扫描由一个旋转多边形镜（X轴）和一个检流计扫描镜（Y轴）组成，可实现视频速率扫描（每秒30帧）。有关活体显微成像技术的详细信息已在先前的研究中有所描述10,18,19,20,21,22,23。
在我们之前关于胰岛的研究中18，我们利用一种转基因小鼠模型（MIP-GFP）24，成功且稳定地对活体小鼠体内的胰岛进行了成像，该模型中胰岛被标记了GFP。该方法实现了对胰岛变化为期1周的高分辨率可视化观察，并支持对同一胰岛持续成像长达3周，表明该技术可用于糖尿病发病过程中胰岛功能的长期追踪或监测18。此外，我们建立了一种原位胰腺癌模型，将荧光标记的胰腺癌细胞（PANC-1 NucLight Red）25直接植入小鼠胰腺中。结合胰腺活体成像窗的应用，该模型可作为研究胰腺癌肿瘤微环境中细胞与分子病理生理过程，以及评估新型候选药物疗效的平台。

<table><tbody><tr><td>Alexa Fluor 647 琥珀酰亚胺酯（NHS 酯）</td><td>Invitrogen</td><td>A20006</td><td>用于与抗体偶联的荧光探针</td></tr><tr><td>BALB/C Nude</td><td>OrientBio</td><td>BALB/C Nude</td><td>BALB/C Nude</td></tr><tr><td>BD Intramedic 聚乙烯导管</td><td>BD Biosciences</td><td>427401</td><td>PE10 导管，用于与针头连接</td></tr><tr><td>C57BL/6N</td><td>OrientBio</td><td>C57BL/6N</td><td>C57BL/6N</td></tr><tr><td>圆形盖玻片</td><td>Marienfeld</td><td>0111520</td><td>用于胰腺成像窗的盖玻片</td></tr><tr><td>FITC 葡聚糖 2MDa</td><td>Merck（原 Sigma Aldrich）</td><td>FD200S</td><td>用于血管识别</td></tr><tr><td>IMARIS 8.1</td><td>Bitplane</td><td>IMARIS</td><td>图像处理</td></tr><tr><td>活体显微镜</td><td>IVIM tech</td><td>IVM-C</td><td>活体显微镜</td></tr><tr><td>IRIS 剪刀</td><td>JEUNGDO BIO &amp; PLANT CO, LTD</td><td>S-1107-10</td><td>该产品可用其他公司的产品替代</td></tr><tr><td>Loctite 401</td><td>Henkel</td><td>401</td><td>N-丁基氰基丙烯酸酯胶水</td></tr><tr><td>微型持针器</td><td>JEUNGDO BIO &amp; PLANT CO, LTD</td><td>H-1126-10</td><td>该产品可用其他公司的产品替代</td></tr><tr><td>微型牵开器</td><td>JEUNGDO BIO &amp; PLANT CO, LTD</td><td>17004-03</td><td>该产品可用其他公司的产品替代</td></tr><tr><td>微型镊子</td><td>JEUNGDO BIO &amp; PLANT CO, LTD</td><td>F-1034</td><td>该产品可用其他公司的产品替代</td></tr><tr><td>MIP-GFP</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>006864</td><td>B6.Cg-Tg(Ins1-EGFP)1Hara/J</td></tr><tr><td>尼龙 4-0</td><td>AILEE</td><td>NB434</td><td>不可吸收缝合线</td></tr><tr><td>Omnican N 100 30G</td><td>B BRAUN</td><td>FT9172220S</td><td>用于血管导管，仅使用针头部分</td></tr><tr><td>PANC-1 NucLightRed</td><td>定制</td><td>定制</td><td>实验室制备</td></tr><tr><td>胰腺成像窗</td><td>Geumto Engineering</td><td>定制订单</td><td>胰腺成像窗 - 定制订单</td></tr><tr><td>Physiosuite</td><td>Kent Scientific</td><td>PS-02</td><td>恒温控制器</td></tr><tr><td>纯化 NA/LE 大鼠抗小鼠 CD31 抗体</td><td>BD Biosciences</td><td>553708</td><td>用于体内血管标记的抗体</td></tr><tr><td>环形镊子</td><td>JEUNGDO BIO &amp; PLANT CO, LTD</td><td>F-1090-3</td><td>该产品可用其他公司的产品替代</td></tr><tr><td>Rompun</td><td>Bayer</td><td>Rompun</td><td>麻醉剂</td></tr><tr><td>TMR 葡聚糖 65-85kDa</td><td>Merck（原 Sigma Aldrich）</td><td>T1162</td><td>用于血管识别</td></tr><tr><td>窗片固定器</td><td>Geumto Engineering</td><td>定制订单</td><td>窗片固定器 - 定制订单</td></tr><tr><td>Zoletil</td><td>Virbac</td><td>Zoletil 100</td><td>麻醉剂</td></tr></tbody></table>

在小鼠模型中通过胰腺活体成像窗口实现胰腺的稳定纵向体内细胞水平可视化

Stabilized Longitudinal In Vivo Cellular-Level Visualization of the Pancreas in a Murine Model with a Pancreatic Intravital Imaging Window

在活体小动物模型中对胰腺进行直接的 体内 细胞分辨率成像在技术上一直具有挑战性。最近一项采用腹腔成像窗口的活体成像研究，实现了对腹腔器官中细胞动态过程的 体内 可视化。然而，由于小鼠胰腺具有柔软的片状结构，易受生理运动（如肠蠕动和呼吸）的影响，因此难以在数周时间内对小鼠胰腺中的胰岛或癌细胞进行稳定、纵向的 体内 细胞水平成像，从而实现识别、追踪与定量分析。本文中，我们描述了一种新型支撑基底——集成式胰腺活体成像窗口的植入方法，该方法可在空间上将胰腺与肠道分离，从而实现对胰腺微结构的长期延时活体成像。利用该成像窗口进行的纵向 体内 成像可实现稳定的可视化效果，能够在正位胰腺癌模型中连续3周追踪胰岛，并对胰腺微结构进行高分辨率的三维成像。通过本方法，未来的活体成像研究有望在细胞水平上阐明多种胰腺相关疾病的病理生理机制。

活体显微镜结合带有支撑底座的集成式胰腺活体成像窗口，可实现对小鼠胰腺在细胞水平上的长期纵向成像。该胰腺活体成像窗口方案提供了长期的组织稳定性，能够获取高分辨率图像，对单个胰岛进行长达3周的追踪观察。因此，可实现大视野的拼接成像、z轴层扫图像的三维（3D）重建，以及对同一位置的长期连续追踪。此外，我们的活体显微镜具备四个激发通道（405、488、561和647 nm），可同时可视化多种细胞及其相互作用。
在初步成像实验中，将成像窗植入一只经尾静脉注射与Alexa 647荧光染料偶联的抗CD31抗体的C57BL/6N小鼠体内。利用该系统实现了胰腺的大视野成像（图3A）以及放大后的三维成像（图3B–D，补充视频1）。胰腺组织通过自发荧光进行可视化，同时可识别由抗CD31抗体标记的邻近血管结构。未观察到由肠蠕动或呼吸引起的图像抖动，因而获得了信噪比较高、经平均处理的成像结果（图4...

利用胰腺活体成像窗实现了对胰腺的体内高分辨率成像。

在活体小型动物模型中对胰腺进行直接的体内细胞分辨率成像在技术上一直具有挑战性。近期的活体成像……

本方案描述了一种利用新型胰腺活体成像窗口对活体小鼠胰腺进行稳定且可重复的细胞水平在体成像的方法。该技术的主要优势在于，可在活体小鼠的胰腺中实现长达三周的无运动干扰、三维、细胞水平分辨率的成像。首先准备手术平台，并用70%乙醇对表面进行消毒。麻醉后，使用带有恒温控制加热垫的直肠探针监测小鼠体温。去除小鼠左侧 flank 部的毛发，并交替使用酒精和碘酒消毒，从切口部位向外周旋转擦拭，切勿返回切口区域，最后以碘酒擦拭结束。随后，在小鼠左侧 flank 部做一长度为1.5厘米的切口，逐层分离皮肤和肌肉组织。使用黑色或尼龙4-0缝线在切口边缘行荷包缝合。用环形镊子小心牵拉脾脏，辨认胰腺。将窗口置于小鼠侧腹部，使脾脏和胰腺通过窗口的开口处。然后，将胰腺轻轻放置在成像窗口的平板上，同时将脾脏置于窗口的开放区域。将 PANC-1 nuclite red 直接注射到胰腺中。使用 31 号导管针将 n-丁基氰基丙烯酸酯胶水滴加至成像窗口边缘，注意胶水量应尽可能少。轻轻将一个12毫米圆形盖玻片置于成像窗口边缘。然后，握住缝合线环，使其嵌入窗口的侧沟槽内，并打结三次。最后，为防止小鼠清醒后活动导致这些紧密缝线断裂，剪断结扎线最靠近近端的位置。首先打开活体显微镜及其激光电源。插入血管导管时，用食指和中指按压尾部近端以施加压力。如有需要，可用灯加热尾部。用70%乙醇喷雾消毒尾静脉，然后将30号导管插入侧尾静脉，并观察PE-10管中血液反流。用丝线胶带固定导管以保持稳定。根据荧光探针的组合，注射FITC葡聚糖和TMR葡聚糖，或其他适当的荧光探针。插入直肠探头，通过恒温加热垫系统自动控制体温。然后，将活体显微镜设置过程中制备的胰腺成像窗插入窗夹持器中。将小鼠从手术平台转移至成像载物台。进行活体成像时，首先使用较低放大倍数（例如4倍）对胰腺进行成像，以扫描胰腺成像窗口中胰腺的整体视野。确定感兴趣区域后，切换至较高放大倍数的物镜（如20倍或40倍），以实现细胞水平的成像，其横向和轴向分辨率分别约为0.5微米和3微米。通过Z轴层扫或时间序列成像，观察三维结构或细胞水平的动态过程，例如细胞迁移。活体显微镜结合胰腺活体成像窗口可提供长期的组织稳定性，从而实现高分辨率成像，能够对单个胰岛进行长达三周的追踪观察。在C57 black 6 N小鼠体内植入的成像窗口，结合静脉注射的与Alexa 647荧光染料偶联的抗CD31抗体，实现了胰腺的大范围成像以及放大后的三维成像。通过自发荧光和抗CD31抗体分别对邻近血管系统进行可视化，可在胰腺组织的平均图像中识别出腺泡细胞。利用马赛克成像法（该方法结合了宽视野与高分辨率成像），在MIP-GFP小鼠中可视化了约40至50个胰岛及其邻近的血管结构。先前的研究表明，利用这种稳定的成像方法可对胰岛进行长达三周的追踪观察。为了可视化癌细胞，在手术过程中将PANC-1 nu

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稳定纵向 在Vivo 细胞级可视化胰腺在穆林模型与胰腺内活性成像窗口

在此，我们介绍一种小鼠胚胎胰腺的分离、培养与操作方法。该方法是一种极佳的 离体...

一种系统 离体 胚胎胰腺的培养

本视频展示了植入胰腺成像窗口的操作步骤，该方法可将胰腺与肠道分离，从而实现对胰腺微结构进行长期、延时、高分辨率的成像观察。...

小鼠模型中胰腺活体成像窗口的安装：一种用于小鼠胰腺微结构延时活体成像的集成式胰腺成像窗口

在本视频中，我们介绍了通过稳定窗口对小鼠胰腺进行活体成像，以实现对细胞动态的长期可视化观察。...

活体成像：通过稳定成像窗口在细胞水平观察小鼠胰腺的方法

本方案的目的是持续监测人胰岛移植过程的动力学变化以及宿主细胞与供体细胞的贡献情况。通过将人胰岛移植到NOD.(Cg)-Gt(ROSA)26Sortm4-Rag2-/-小鼠受体的眼前房（ACE），随后进行多次双光子成像，即可实现该目标。...

活体纵向成像与定量分析人胰岛移植物及前房眼内微环境宿主细胞的贡献

本文介绍了一种利用光学透明硅胶窗进行长期活体成像的方法，该窗口可直接粘接于目标组织/器官及皮肤上。 与其他目前常用的方法相比，这些窗口成本更低且更具灵活性，且手术植入过程对动物造成的炎症反应和不适程度较轻。...

通过透明硅胶窗进行纵向活体成像

我们介绍一种用于小鼠胰腺亚细胞分辨率成像的稳定植入式光学窗口的外科手术植入方案，可实现对健康和病变胰腺的连续性及纵向研究。...

小鼠胰腺活体成像的稳定窗口技术

通过结合抛光加固的薄颅骨（PoRTS）颅窗和胶质母细胞瘤（GBM）细胞注射，我们能够对活体小鼠脑内注射的GBM细胞所引发的胶质瘤发生及生长过程进行长期纵向观察。...

成像胶质瘤起始过程 在体 内 通过抛光并加固的薄颅骨颅窗

本文描述了一种小鼠颈动脉支架植入模型。与其他类似方法相比，该手术操作极为快速、简便且易于实施，能够方便地研究血管壁对不同药物洗脱支架的反应以及再狭窄的分子机制。...

用于研究再狭窄的颈动脉支架植入小鼠模型

一种结合眼内移植与共聚焦显微镜的新方法，可实现对移植组织内细胞的纵向、无创实时成像，分辨率达单细胞水平...

移植至眼前房以实现纵向、非侵入性 在体 实时单细胞分辨率成像

在体内生长阶段，人源肿瘤异种移植模型具有血管化特征，并被来源于小鼠的细胞浸润。in vivo...

耗竭人源肿瘤异种移植组织中的小鼠细胞显著改善靶细胞的下游分析

学习使用新型胰腺活体成像窗口技术，在小鼠模型中实现稳定、长期的细胞级三维成像。该方法可连续追踪胰岛和癌细胞长达三周，适用于胰腺生理与病理研究。

在小鼠模型中通过胰腺活体成像窗口实现胰腺的稳定纵向体内细胞水平可视化

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