Summary
For å undersøke musen visjon, gjennomførte vi en truende test. Mus ble plassert i en stor firkantet arena med en skjerm på taket. Den truende visuelle stimulans konsekvent fremkalt frysing eller fly reaksjoner i mus.
Abstract
Det visuelle systemet i det sentrale nervesystemet behandler ulike visuelle signaler. Selv om den overordnede strukturen har blitt karakterisert fra netthinnen gjennom lateral geniculate kjernen til den visuelle cortex, systemet er kompleks. Cellulære og molekylære studier har blitt utført for å belyse mekanismene som underbygger visuell prosessering og, i forlengelsen av, sykdoms mekanismer. Disse studiene kan bidra til utvikling av kunstige visuelle systemer. For å validere resultatene av disse studiene er atferds visjons testing nødvendig. Her viser vi at den truende stimulering eksperimentet er en pålitelig mus visjonstest som krever et relativt enkelt oppsett. Den truende eksperimentet ble gjennomført i et stort kabinett med en ly i ett hjørne og en dataskjerm plassert på taket. En CCD kameraet oppstilt nærmest computeren dataskjerm betjent å observere musen opptreden. En mus ble plassert i kabinettet i 10 minutter og lov til å acclimate til og utforske omgivelsene. Deretter skjermen projisert et program-avledet truende stimulans 10 ganger. Musen reagerte på stimuli enten ved frysing eller ved å flykte til gjemmested. Musa atferd før og etter den truende stimuli ble registrert, og videoen ble analysert ved hjelp av Motion Tracking-programvare. Hastigheten på musen bevegelsen betydelig endret etter truende stimuli. I kontrast ble ingen reaksjon observert hos blinde mus. Våre resultater viser at det enkle truende eksperimentet er en pålitelig test av mus synet.
Introduction
Det visuelle systemet starter på netthinnen, der visuelle signaler fanges opp av fotoreseptorene, ledet til bipolare celler (2nd-Order neurons), og til slutt gikk til Ganglion celler (3Rd-Order neurons). Retinal 2nd-og 3Rd-Order neurons antas å danne flere nevrale trasé som formidler bestemte aspekter av visuelle signalering som farge, bevegelse, eller form. Disse ulike visuelle funksjoner er videresendt til lateral geniculate kjernen og den visuelle cortex. I kontrast blir visuelle signaler som fører til øyebevegelse, sendt til den overlegne colliculus. Klassisk, to retino-kortikale trasé har blitt identifisert: den magnocellular og parvocellular trasé. Disse banene kodes bevegelige og stasjonære objekter, henholdsvis, og deres eksistens uttrykker det grunnleggende begrepet parallell prosessering1,2,3,4,5, 6i den. Nylig, mer enn 15 typer bipolar celler7,8,9,10,11 og Ganglion celler12,13,14 ,15,16 har blitt rapportert i netthinnen av mange arter, inkludert primater Retina. Disse cellene skilles ikke bare av morfologiske aspekter, men også av uttrykk for distinkte markører og gener8,10,17,18, noe som tyder på at ulike funksjoner i visuelle signalene behandles parallelt, noe som er mer komplisert enn det som opprinnelig var forventet.
Cellulære og molekylære teknologier har bidratt til vår forståelse av visuell prosessering og potensielle sykdoms mekanismer som kan oppstå fra avvikende visuell behandling. En slik forståelse kan bidra til utvikling av kunstige øyne. Selv om mobilnettet undersøkelser og analyser tilbyr inngående kunnskap på cellenivå, en kombinasjon av atferds eksperimenter og cellulære eksperimenter vil betydelig øke vår nåværende forståelse av minutt visuelle prosesser. For eksempel, Yoshida et al.19 fant at starburst amacrine celler er de viktigste neurons for bevegelsesdeteksjon i musen Retina. Etter mobilnettet eksperimenter, utførte de optokinetic nystagmus (OKN) atferdsdata eksperiment for å vise at mutant mus der starburst amacrine celler var dysfunksjonelle ikke svare på bevegelige objekter, og dermed bekrefter deres mobilnettet Undersøkelser. I tillegg har Pearson et al.20 gjennomført Foto reseptoren transplantasjon i musen Retina å gjenopprette synet i syke mus. De gjennomførte ikke bare cellulære eksperimenter, men også målt mus atferd gjennom bruk av optomotor respons innspillinger og vann-labyrint oppgaver dermed tillater Pearson et al. å verifisere at transplantert fotoreseptorene restaurert syn i den tidligere blinde mus. Til sammen er atferds eksperimenter sterke verktøy for å vurdere muse visjonen.
Flere metoder er tilgjengelige for måling av muse visjonen. Disse metodene har fordeler og begrensninger. In vivo ERG gir informasjon om hvorvidt musen Retina, spesielt fotoreseptorene og på bipolar celler, hensiktsmessig reagerer på lys stimuli. ERG kan testes enten under scotopic eller photopic forhold21,22. Imidlertid krever ERG anestesi, som kan påvirke output måling23. Den optokinetic refleks (OKR) eller optomotor respons (OMR) er en robust metode for å vurdere kontrast følsomhet og romlig oppløsning, begge funksjonelle komponenter av mus visjon. Men OKR krever kirurgi for å feste en fiksering enhet til musen skallen24. OMR krever verken kirurgi eller mus trening; men det krever opplæring for å tillate en eksperimentator å subjektivt oppdage subtile mus hodet bevegelser som svar på en bevegelig gitter i en optisk trommel 25,26. Elev lys refleks tiltak elev innsnevring som svar på lys stimuli, som ikke krever anestesi og utstillinger objektive og robuste tiltak 19. Selv om eleven refleks simulerer retinal lys respons in vivo, refleks er mediert hovedsakelig av egentlig lysfølsomme retinal Ganglion celler (ipRGCs) 27. Fordi ipRGCs representerer et lite mindretall av RGCs og ikke tjene som konvensjonelle bilde-forming Ganglion celler, gir denne målingen ikke informasjon vedrørende de fleste av Ganglion celler.
Den truende lyset eksperimentet har ikke tidligere blitt betraktet som en stor test for måling musen visjon. Imidlertid, det er en likeledes en robust og pålitelig syn test vannrett forskjellige art, som musen28,29, sebrafisk30, Locust31,32, og Human33,34, 35. viktigere, den truende eksperimentet er en av bare noen få metoder for å teste bildet-forming Pathway-det er ikke en refleks sti-gitt den visuelle og limbiske systemer i sentralnervesystemet er involvert i denne kretsen36, 37,38. Vi har etablert en truende visuell stimulans systemet og har vist sin evne til å lokke fram bevegelsesdeteksjon i musen, som vi bruker som en proxy for å vurdere intactness av musen visuelle systemet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle eksperimenter og dyr omsorg ble gjennomført i samsvar med protokollen godkjent av institusjonelle Animal Care og bruk komiteer ved Wayne State University (protokoll nr. 17-11-0399).
1. forberedelse til eksperimentet
- Bygge en rektangulær åpen lokk kabinett for å huse musen under truende visuelle stimuli presentasjon. Vi konstruerte en 40 cm x 50 cm x 33 cm kabinett ved hjelp av aluminiums innramming og PVC-paneler (figur 1a, B). Legg et papirark for å dekke hele gulvet i skapet for å sikre enkel opprydding mellom forsøkene. Legg til en ugjennomsiktig ly i et hjørne av kabinettet med en inngang vendt mot midten av arenaen for enkel inngang og utgang.
- Sett opp et kamera med vidvinkelobjektiv for å fange muse atferden. Fest kameraet til et bord montert stativ ved siden av skapet. For best kvalitet video fange, bruk en kamera bildefrekvens på 60 FPS eller høyere.
- Sett opp en dataskjerm på toppen av kabinettet. Fordi skjermen ikke kunne sees fra utsiden, en annen skjerm ble utarbeidet, som dupliseres bildene som vises på hovedskjermen.
- Forbered et truende mønster for projeksjon. En måte å gjøre dette på er å bruke PsychToolbox3 innen MatLab programvare for å kode for en voksende svart sirkel (figur 1C). Sett stimulans til å begynne med en visuell vinkel på 2 ° og utvide til 50 ° over 250 MS; disse parametrene bestemmer stimulans hastighet (se figur 1D for visuell vinkel beregning). Angi koden for å gjenta stimulans 10 ganger med et intervall på 1 s.
Merk: stimulans begynte hver repetisjon umiddelbart etter opphør av den forrige presentasjonen. For ytterligere informasjon om stimulans presentasjonen, kan du se avsnitt 3. - Velg mus av interesse for den truende stimuli. Her bruker 32 sunne øyne-mus av en C57 bakgrunn, mann og kvinne, 4 til 14 uker gammel. Bruk også 3 blinde mus (alvorlig grå stær i begge øyne) for å vurdere om responsen på truende stimulans var virkelig en visuelt guidet oppførsel. Disse blinde musene hadde ingen Pupillary lys refleks og ingen optomotor respons.
2. mus acclimation
- Plasser en mus i skapet og la den fritt utforske omgivelsene. Dersom det er mulig, prøve å minimere trykk i løpet av dyr forflytning av benytter baksiden av din ledig hånd som hvilested for musa istedet for utleie den hang uten oppbacking. Musen skal finne hele kabinettet for å være trygg og bør oppdage gjemmested. Drop noen mat pellets i hjørnet på motsatt side av tilflukt å oppmuntre musen til å forbli utenfor tilflukt.
- Tillate musa å acclimate noen steder fra 7 å 15 min29,39. Vi tillot 10 min av acclimation før stimulans utbruddet. Videre kan 10 min acclimation en dag før eksperimentet lette musene.
3. truende visuelle stimuli projeksjon
- Før du setter inn musen inn i arenaen, må du kontrollere at stimulans koden er klar til å kjøre for å lette så få lys endringer som mulig mens musen er i kabinettet. Når programvaren er klar til å kjøre, forsiktig plassere musen i kabinettet.
- 10 sekunder før stimulering, start video innspillingen.
- Start truende visuelle stimuli når musen er borte fra ly og beveger seg fritt i den åpne arenaen. Vent 10 sekunder etter siste stimulans presentasjonen for å avslutte innspillingen.
- Begynn stimulans presentasjonen når musen er i hjørnet lengst fra tilflukt. Men når mus synes uvillig til å utforske det fjerne hjørnet, presentere stimulans når musen er i et annet hjørne av arenaen. Denne er ikke komme å lage en differansen inne dyr opptreden svaret.
- Forflytning musa rygg å dens original bur. Rengjør kabinettet for neste mus ved å spraye veggene og tilflukt med 70% etanol og tørk det ned. Skift ut papir gulv duken hvis det er skittent, og plasser tilfluktsstedet på samme sted hvis det blir flyttet under rengjøring av dyr.
4. video analyse
- Bevare det video hefte for hver musen inne. avi formatter uten arkiv sammenntrykking for at sikre nei data forlis i løpet av forflytning å analysen programvare.
Merk: mangel på kompresjon vil føre til større filstørrelse; Bruk derfor ekstern harddisk til lagring. - Bruk analyseprogramvare for å spore dyrets bevegelse rundt arenaen før, under og etter stimulans presentasjonen. Bruk kommersielt tilgjengelig programvare (se tabell over materialer) med en manuell sporing evne til å spore posisjonen til musen hodet i hver videoramme, som genererte X og Y koordinering hver 1/60 MS. andre Motion Tracking-programvare inkluderer FIJI (NIH )40 og EthoVision (Noldus).
- Beregn hastigheten og avstanden til musen fra tilflukt. Hvis bildet av arenaen er forvrengt på grunn av video vinkelen, må du rette X-og Y-koordineringen før beregningen (figur 2).
- Sammenlign parametrene før og etter truende stimulans debut for å bestemme hvordan musen reagerte på stimuli, enten ved frysing, flyktet, eller demonstrere ingen endring i atferd29. Definer frysing som episoder der hastigheten var mindre enn 20 mm/s for 0,5 s eller lengre. Definer fly som episoder hvor hastigheten økte til 400 mm/s eller større og endte med musen i tilflukt. Definisjoner for frysing og flukt var basert på de som ble satt av Franceschi et al.29
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
En mus med sunne øyne ble plassert i skapet og lov til å acclimate i 10 min. Arenaen med skjermen på taket ble holdt under mesopic lysforhold (7 x 105 fotoner/μm2/s). I løpet av acclimation perioden utforsket musen plassen og fant den ugjennomsiktige kuppelen som et tilfluktssted. Når musen beveget seg bort fra tilfluktssted, videoopptak startet, etterfulgt av initiering av den visuelle stimulans. Som svar på den truende stimulans, de fleste mus løp inn i kuppelen (Flight respons), som ble observert i 30 av 31 mus (97%). Noen av musene viste fryse responser før de flyktet (19/31-mus, 61%). Den truende stimulans reduserte lysforholdene 1 log (6 x 105 fotoner/μm2/s).
Fanget video hefte var analysert benytter enten den ene eller den andre av en reklamen analytisk programvare med en håndbok oppsporer funksjonen (Image Pro addisjonstegn) eller FIJI (NIH). Ved hjelp av sporing funksjonen, musen posisjon ble identifisert i hver ramme av video (60 frames/s) før, under og etter truende stimuli. Vi analyserte hastigheten endringer over tid samt avstanden til ly (Figur 3). Når flyreise hendelse, det fart brått forhøyet og avstanden til det Le nedsatte følgelig. I kontrast var hastigheten nær 0 mm/s når mus frøs. Ventetiden fra utbruddet av den truende stimuli til fly varierte fra 0,1 til 6,0 sekunder (gjennomsnittlig 2,2 s, 30 mus). Rekkevidden av maksimal hastighet for fly responsen var 500-3000 mm/s (30 mus).
Figur 1 : Eksperimentell system. (A) skjematisk av den truende stimuli kabinettet. En dataskjerm (21 ") dekker taket. Det er en ugjennomsiktig kuppel i et hjørne av kabinettet der en mus kan ta tilflukt. En video skjerm med vidvinkellinse fanger opp muse atferden. (B) helhetssyn på hele vårt oppsett. Den sekundære skjermen dupliserer bildet som vises på stimulans displayet. (C) diagram av truende stimulans. Den truende stimulans begynner ved 2 ° (1.15 cm) og holder på denne størrelsen for 250 MS. den utvides deretter til 50 ° (30.8 cm) i løpet av 250 MS og forblir 50 ° for en ekstra 500 MS. denne 1s sekvensen gjentar deretter 9 ganger før avslutning. (D) diagram av stimulans beregninger. Høyden på buret dikterer den nødvendige start og slutt størrelse (i centimeter) av stimulans for å produsere en stimulans som utvides fra 2 ° til 50 ° når direkte over musen. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2 : Analyse beregninger. Beregninger for å korrigere skew fra vidvinkelobjektiv. På grunn av plasseringen av kameraet vises gulvet på arenaen som en trapes i stedet for et rektangel (venstre). Derfor må X-og Y-koordinatene til musen rettes for å nøyaktig analysere muse posisjonen (Mid). Ved hjelp av geometrien av sammenfallende trekanter, er det mulig å finne hvor mye x-koordinaten må skifte for å riktig representere musen bevegelse i 3-dimensjonale rommet (høyre). Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3 : Representative reaksjoner på truende stimuli. (A) et eksempel på en mus bevegelse spores i arenaen. En rød sirkel viser kuppelen der musen flyktet til og oppholdt seg til den truende forsvant. 1 = startpunktet for muse posisjonen når videoopptak startet. 2 = bevegelse før stimulans utbruddet når musen utforsket arenaen. 3 = truende stimulans startet. Musa stiplede til kuppelen (vist ved en rød stiplet linje). 4 = musa oppholdt seg i kuppelen til og etter opphør av stimulans. (B) Velocity endringer som en funksjon av tid for denne musen. Den stiplede linjen indikerer når den truende stimulering begynte. Stimulans varighet indikeres med den gule bakgrunnen. Hele 10 andre syklus er ikke vist her siden musene forble stasjonære i tilflukt for hele stimulans varighet. (C) avstand fra kuppelen over tid for samme mus i (A) og (B). (D) og (E) hastighet og avstand til kuppelen for en mus som viste fryse reaksjonen (frysing varighet vist av den røde tosidige pilen) før flyturen. Hastigheten ble redusert i forhold til kontroll (før truende). Avstanden til kuppelen ble ikke endret i denne perioden. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Med den truende visuelle stimuli system, et flertall (97%) av sunne øye-mus viste Flight Response. En av 29 musene viste ikke en åpenbar fly respons. Men musen gikk mot kuppelen og forble i nærheten av det før truende forsvant, noe som indikerer at musen var minst forsiktige når truende stimuli skjedde. Derfor, den truende stimuli konsekvent elicited medfødt frykt svar i sunn-eyed mus. På den annen side, gjorde tre blinde mus ikke viser noen svar på truende (foreløpige resultater). Til sammen viser vi at truende eksperimenter er en nyttig og konsistent visjonstest for mus.
Vi setter hastigheten på den truende stimuli på 192 grader/s. Franceschi et al.29 undersøkte den truende svar på varierende hastigheter, 5 til 84 grad/s og observert fryse responser fortrinnsvis ved lavere hastighet nivåer. Yilmaz og Meister28 observerte fly responser på 35 til 350 grader/s; fly forsinkelsen var imidlertid lengre ved høyere hastigheter. Derfor, for å fremkalle konsistent fly respons, truende bør være med en hastighet på 50 grader/s eller over. Truende stimuli kan genereres enkelt selv med standard presentasjonsprogram. Men slik programvare kan ikke skape høyere hastigheter på truende stimuli. Vi i stedet brukte MatLab og PsychToolbox3 å skape den visuelle stimuli på 192 grader/s.
Vi acclimated musene i 10-15 min før truende stimuli, som er den acclimation tiden tidligere forskerne beskrev 28,29,39. Vi testet videre om acclimation dagen før Endret truende oppførsel. Vi plasserte musene i kabinettet i 10 min uten truende stimuli dagen før den truende stimuli. Dette acclimation betydelig forkortet fly ventetiden (p < 0,01, n = 7 mus, data ikke vist). Selv om 10 min av acclimation på dagen for truende konsekvent forårsaket Flight svar, 1 dag tidligere acclimation redusert ventetid på fly respons.
Det er noen begrensninger for bruk truende stimuli som en visjon test. For det første er det vanskelig å teste ett øye om gangen. Med mindre suturing det ene øyet, er begge øyne testet sammen. For det andre har mekanismer av atferdsdata truende respons ikke blitt fullstendig etablert. I netthinnen foreslo Yilmaz og Meister 28 at ventrale av-DSGCs (retning-selektive Ganglion celler), men ikke on-DSGCs, formidler de truende signalene for å forårsake reaksjoner. Denne konklusjonen oppsto fra deres resultater at mus reagerte på mørke truende stimuli, men ikke til hvit truende. I hjernen demonstrerte Wei et al.36 og Shang et al.37 at veiene fra den overlegne colliculus gjennom amygdala og den periaqueductal grå er ansvarlig for den truende. Imidlertid bør flere studier gjennomføres for å bekrefte disse undersøkelsene.
Selv om noen begrensninger eksisterer med hensyn til den truende eksperimentet, genererer den truende visuelle stimulans konsistent og robust frykt respons i mus og bør være en nyttig test av mus visjon som krever minimal opplæring av eksperimentator.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingenting å avsløre.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble støttet av NIH R01 EY028915 (TI) og RPB tilskudd.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 10.1" monitor (2° display) | Elecrow | Elecrow 10.1 Inch Raspberry Pi 1920x1080p Resolution Display | |
| 14" Business Class Laptop 5490 | Dell | 84 / rcrc961481-4860836 | |
| 20" x 50" Absorbant Liners | Fisher Scientific | AL2050 | works well to protect floor of arena, could use any type of liner |
| 21.5" monitor (1° display) | Acer | Acer R221Q bid 21.5-inch IPS Full HD Display | |
| CCD Camera | Lumenera Corporation | Infiniyy3S-1UR | excellent for behavioral studies due to high fps rate (60 fps) |
| Enclosure (alminum frames and PVC panels) | 80/20 Inc. | 4x cat.#9010, 4x cat.#9005, 1x cat.#9000, 5x cat.#65-2616 | excellent, used quick build tab to find PVC, joints, and frame |
| Ethanol | Fisher Scientific | 22-032-601 | |
| Excel Spreadsheet Software | Microsoft Office | user friendly and widespread knowledge of Microsoft Office software | |
| Freearm | Amazon | used to mount camera to the table, could use any mountable extendable arm | |
| ImagePro Premiere 3D | Media Cybernetics | version 9.3 | good program, could use some updating with the automated tracking feature |
| Matlab software (Psychotoolbox 3) | MathWorks | Matlab R2018b 64-bit (9.5.0.944444) | excellent software to generate pattern stimuli of any conditions |
| SteamPix sorftware | Norpix | StreamPix 7 64-bit Single Camera | works well, a few problems with frame dropping but good customer service |
| WD My Book External Hard Drive | Western Digital | WDBBGB0080HBK hard drive 8 TB USB 3.0 | necessary if using .avi files with no compression codec due to large size of files |
| Wide angle lens | Navitar | NMV-5M23 | excellent and necessary to capture entire arena |
References
- Enroth-Cugell, C., Robson, J. G. The contrast sensitivity of retinal ganglion cells of the cat. The Journal of Physiology. 187 (3), 517-552 (1966).
- Boycott, B. B., Wässle, H. The morphological types of ganglion cells of the domestic cat's retina. The Journal of Physiology. 240 (2), 397-419 (1974).
- Livingstone, M. S., Hubel, D. H. Segregation of form, color, movement, and depth: anatomy, physiology, and perception. Science. 240 (4853), 740-749 (1988).
- Livingstone, M. S., Hubel, D. H. Psychophysical evidence for separate channels for the perception of form, color, movement, and depth. The Journal of Neuroscience. 7 (11), 3416-3468 (1987).
- Wässle, H.
- Awatramani, G. B., Slaughter, M. M. Origin of transient and sustained responses in ganglion cells of the retina. The Journal of Neuroscience. 20 (18), 7087-7095 (2000).
- Ghosh, K. K., Bujan, S., Haverkamp, S., Feigenspan, A., Wässle, H. Types of bipolar cells in the mouse retina. The Journal of Comparative Neuroscience. 469 (1), 70-82 (2004).
- Wässle, H., Puller, C., Muller, F., Haverkamp, S. Cone contacts, mosaics, and territories of bipolar cells in the mouse retina. The Journal of Neuroscience. 29 (1), 106-117 (2009).
- Helmstaedter, M., et al. Connectomic reconstruction of the inner plexiform layer in the mouse retina. Nature. 500 (7461), 168-174 (2013).
- Shekhar, K., et al. Comprehensive Classification of Retinal Bipolar Neurons by Single-Cell Transcriptomics. Cell. 166 (5), 1308-1323 (2016).
- Wu, S. M., Gao, F., Maple, B. R. Functional architecture of synapses in the inner retina: segregation of visual signals by stratification of bipolar cell axon terminals. The Journal of Neuroscience. 20 (12), 4462-4470 (2000).
- Sun, W., Li, N., He, S. Large-scale morphological survey of mouse retinal ganglion cells. The Journal of Comparative Neuroscience. 451 (2), 115-126 (2002).
- Volgyi, B., Chheda, S., Bloomfield, S. A. Tracer coupling patterns of the ganglion cell subtypes in the mouse retina. The Journal of Comparative Neuroscience. 512 (5), 664-687 (2009).
- Kong, J. H., Fish, D. R., Rockhill, R. L., Masland, R. H. Diversity of ganglion cells in the mouse retina: Unsupervised morphological classification and its limits. The Journal of Comparative Neuroscience. 489 (3), 293-310 (2005).
- Sumbul, U., et al. A genetic and computational approach to structurally classify neuronal types. Nature Communications. 5, 3512 (2014).
- Baden, T., et al. The functional diversity of retinal ganglion cells in the mouse. Nature. 529 (7586), 345-350 (2016).
- Lindstrom, S. H., Ryan, D. G., Shi, J., DeVries, S. H. Kainate receptor subunit diversity underlying response diversity in retinal Off bipolar cells. The Journal of Physiology. 592, Pt 7 1457-1477 (2014).
- Euler, T., Haverkamp, S., Schubert, T., Baden, T. Retinal bipolar cells: elementary building blocks of vision. Nature Reviews Neuroscience. 15 (8), 507-519 (2014).
- Yoshida, K., et al. A key role of starburst amacrine cells in originating retinal directional selectivity and optokinetic eye movement. Neuron. 30 (3), 771-780 (2001).
- Pearson, R. A., et al. Restoration of vision after transplantation of photoreceptors. Nature. 485 (7396), 99-103 (2012).
- Saszik, S. M., Robson, J. G., Frishman, L. J. The scotopic threshold response of the dark-adapted electroretinogram of the mouse. The Journal of Physiology. 543, Pt 3 899-916 (2002).
- Reuter, J. H., Sanyal, S. Development and degeneration of retina in rds mutant mice: the electroretinogram. Neuroscience Letters. 48 (2), 231-237 (1984).
- Woodward, W. R., et al. Isoflurane is an effective alternative to ketamine/xylazine/acepromazine as an anesthetic agent for the mouse electroretinogram. Documenta Ophthalmologica. 115 (3), 187-201 (2007).
- Cahill, H., Nathans, J. The optokinetic reflex as a tool for quantitative analyses of nervous system function in mice: application to genetic and drug-induced variation. PLoS One. 3 (4), 2055 (2008).
- Prusky, G. T., Alam, N. M., Beekman, S., Douglas, R. M. Rapid quantification of adult and developing mouse spatial vision using a virtual optomotor system. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 45 (12), 4611-4616 (2004).
- Lu, Q., Ganjawala, T. H., Hattar, S., Abrams, G. W., Pan, Z. H. A Robust Optomotor Assay for Assessing the Efficacy of Optogenetic Tools for Vision Restoration. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 59 (3), 1288-1294 (2018).
- Xue, T., et al. Melanopsin signalling in mammalian iris and retina. Nature. 479 (7371), 67-73 (2011).
- Yilmaz, M., Meister, M. Rapid innate defensive responses of mice to looming visual stimuli. Current Biology. 23 (20), 2011-2015 (2013).
- De Franceschi, G., Vivattanasarn, T., Saleem, A. B., Solomon, S. G. Vision Guides Selection of Freeze or Flight Defense Strategies in Mice. Current Biology. 26 (16), 2150-2154 (2016).
- Temizer, I., Donovan, J. C., Baier, H., Semmelhack, J. L. A Visual Pathway for Looming-Evoked Escape in Larval Zebrafish. Current Biology. 25 (14), 1823-1834 (2015).
- Guest, B. B., Gray, J. R. Responses of a looming-sensitive neuron to compound and paired object approaches. Journal of Neurophysiology. 95 (3), 1428-1441 (2006).
- McMillan, G. A., Gray, J. R. A looming-sensitive pathway responds to changes in the trajectory of object motion. Journal of Neurophysiology. 108 (4), 1052-1068 (2012).
- Vagnoni, E., Lourenco, S. F., Longo, M. R. Threat modulates neural responses to looming visual stimuli. Eur The Journal of Neuroscience. 42 (5), 2190-2202 (2015).
- Coker-Appiah, D. S., et al. Looming animate and inanimate threats: the response of the amygdala and periaqueductal gray. Social Neuroscience. 8 (6), 621-630 (2013).
- Tyll, S., et al. Neural basis of multisensory looming signals. Neuroimage. 65, 13-22 (2013).
- Wei, P., et al. Processing of visually evoked innate fear by a non-canonical thalamic pathway. Nature Communications. 6, 6756 (2015).
- Shang, C., et al. Divergent midbrain circuits orchestrate escape and freezing responses to looming stimuli in mice. Nature Communications. 9 (1), 1232 (2018).
- Salay, L. D., Ishiko, N., Huberman, A. D. A midline thalamic circuit determines reactions to visual threat. Nature. 557 (7704), 183-189 (2018).
- Vale, R., Evans, D., Branco, T. A Behavioral Assay for Investigating the Role of Spatial Memory During Instinctive Defense in Mice. Journal of Visualized Experiments. (137), 56988 (2018).
- Tungtur, S. K., Nishimune, N., Radel, J., Nishimune, H. Mouse Behavior Tracker: An economical method for tracking behavior in home cages. Biotechniques. 63 (5), 215-220 (2017).
