Behavior

अवसाद के पशु मॉडल - क्रोनिक निराशा मॉडल (CDM)

Published: September 23, 2021 doi: 10.3791/62579

Stefan Vestring^1,2, Tsvetan Serchov^3,4, Claus Normann^1,5

¹Department of Psychiatry and Psychotherapy, Medical Center - University of Freiburg, Faculty of Medicine, University of Freiburg, ²Berta-Ottenstein-Programme for Clinician Scientists, Faculty of Medicine, University of Freiburg, ³Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Université de Strasbourg, Institut des Neurosciences Cellulaires et Intégratives, ⁴Department of Stereotactic and Functional Neurosurgery, Medical Center - University Freiburg, Faculty of Medicine, University of Freiburg, ⁵Center for Basics in Neuromodulation, Faculty of Medicine, University of Freiburg

Summary

अवसाद के क्रोनिक निराशा माउस मॉडल (सीडीएम) में दोहराए जाने वाले मजबूर तैराकी सत्र और एक रीड-आउट के रूप में एक और विलंबित तैरने का चरण होता है। यह कम से कम 4 सप्ताह के लिए स्थिर एक पुरानी अवसादग्रस्तता की तरह राज्य के प्रेरण के लिए एक उपयुक्त मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है, जो सबक्रोनिक और तीव्र उपचार हस्तक्षेपों का मूल्यांकन करने के लिए संशोधन योग्य है।

Abstract

प्रमुख अवसादग्रस्तता विकार मानसिक बीमारियों के सबसे प्रचलित रूपों में से एक है और जबरदस्त व्यक्तिगत पीड़ा और सामाजिक आर्थिक बोझ का कारण बनता है। इसके महत्व के बावजूद, वर्तमान औषधीय उपचार सीमित है, और उपन्यास उपचार विकल्पों की तत्काल आवश्यकता है। संभावित नई दवाओं की खोज में एक महत्वपूर्ण कारक उपयुक्त पशु मॉडल में उनकी विरोधी अवसादग्रस्तता शक्ति का मूल्यांकन कर रहा है। शास्त्रीय पोर्सोल्ट मजबूर तैरने के परीक्षण का उपयोग दशकों तक इस उद्देश्य के लिए एक अवसादग्रस्तता जैसी स्थिति को प्रेरित करने और मूल्यांकन करने के लिए किया गया था। इसमें मजबूर तैराकी की दो छोटी अवधि होती है: पहला एक उदास राज्य को प्रेरित करने के लिए और दूसरा अगले दिन दो तैराकी सत्रों के बीच दिए गए एजेंट के एंटीडिप्रेसेंट प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए। यह मॉडल संभावित एंटीडिप्रेसिव एजेंटों के लिए स्क्रीनिंग टूल के रूप में उपयुक्त हो सकता है, लेकिन कई एंटीडिपेंटेंट्स की कार्रवाई की देरी से शुरुआत को अनदेखा करता है। सीडीएम को हाल ही में स्थापित किया गया था और उल्लेखनीय अंतर के साथ शास्त्रीय परीक्षण के संशोधन का प्रतिनिधित्व किया गया था। चूहों को लगातार 5 दिनों तक तैरने के लिए मजबूर किया जाता है, इस विचार के बाद कि मनुष्यों में, अवसाद तीव्र तनाव के बजाय पुरानी से प्रेरित होता है। कई दिनों (1-3 सप्ताह) की आराम की अवधि में, जानवरों में निरंतर व्यवहार निराशा विकसित होती है। मानक रीड-आउट विधि एक अतिरिक्त विलंबित तैराकी सत्र में अस्थिरता समय का माप है, लेकिन जानवर की मनोदशा की स्थिति का व्यापक दृष्टिकोण प्राप्त करने के लिए कई वैकल्पिक तरीकों का प्रस्ताव किया गया है। एकाधिक विश्लेषण उपकरणों का उपयोग व्यवहार, आणविक और इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल परिवर्तनों को लक्षित करने के लिए किया जा सकता है। उदास फेनोटाइप कम से कम 4 सप्ताह के लिए स्थिर है, जो तेजी से लेकिन सबक्रोनिक एंटीडिप्रेसेंट उपचार रणनीतियों के लिए एक समय खिड़की प्रदान करता है। इसके अलावा, एक अवसादग्रस्तता जैसी स्थिति के विकास में परिवर्तन को इस दृष्टिकोण का उपयोग करके संबोधित किया जा सकता है। इसलिए, सीडीएम अवसाद को बेहतर ढंग से समझने और उपन्यास उपचार हस्तक्षेप विकसित करने के लिए एक उपयोगी उपकरण का प्रतिनिधित्व करता है।

Introduction

भावात्मक विकार, जैसे कि प्रमुख अवसादग्रस्तता विकार, सबसे लगातार और चुनौतीपूर्ण मानसिक बीमारियों में से एक हैं और उच्च व्यक्तिगत पीड़ा ¹, आत्महत्या के जोखिम में वृद्धि के साथ जुड़े हुए ^हैं2, और ^{समाज के लिए} काफी सामाजिक आर्थिक बोझ का कारण बनते हैं। इसके प्रभाव के बावजूद, उपचार के विकल्प सीमित हैं, और उपन्यास दमनकारी हस्तक्षेपों के विकास की तत्काल आवश्यकता है, विशेष रूप से पिछले दशकों में साइकोफार्माकोलॉजी में नवाचार संकट के कारण। अवसाद के पैथोफिजियोलॉजी को समझने और संभावित नए एजेंटों का परीक्षण करने के लिए, तर्कसंगत और वैध पशु मॉडल की तत्काल आवश्यकता होती ^है। लगभग आधी सदी के लिए, शास्त्रीय मजबूर तैराकी परीक्षण (एफएसटी), मूल रूप से Porsolt5 द्वारा वर्णित, संभावित उपन्यास antidepressants की स्क्रीनिंग के लिए प्रेरण और रीड-आउट के रूप में इस्तेमाल किया गया था। इसमें दिन 1 पर 5-15 मिनट के लिए एक मजबूर तैरने की अवधि, बाद में एक बार दवा आवेदन, और अगले दिन एक और तैरने की अवधि में चूहों द्वारा पानी में स्थिर खर्च किए जाने वाले हिस्से का मूल्यांकन शामिल है। अस्थिरता समय को एक लापता प्राकृतिक भागने के व्यवहार का प्रतिनिधित्व करने के लिए माना जाता था ^{और चूहों} में अवसाद जैसी स्थिति की डिग्री के साथ सहसंबंधित माना जाता था।

शास्त्रीय FST भारी आलोचना की गई है, न केवल वैज्ञानिक समुदाय में ^6,7,8, बल्कि सार्वजनिक मीडिया ⁸ में भी। एफएसटी के आसपास के अधिकांश विवाद शास्त्रीय प्रतिमान में केवल 1 दिन की छोटी प्रेरण और उपचार अवधि के कारण होते हैं। यह तर्क दिया गया था कि एफएसटी मानव अवसाद की तुलना में एक राज्य की तुलना में एक तीव्र आघात मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है। इसके अलावा, पोर्सोल्ट परीक्षण संभावित एंटीडिप्रेसिव एजेंटों के लिए एक स्क्रीनिंग टूल के रूप में उपयुक्त हो सकता है, लेकिन यह कई एंटीडिपेंटेंट्स की कार्रवाई की देरी से शुरुआत को अनदेखा करता है।

पुरानी निराशा मॉडल (सीडीएम) 9,10,11,12,13,14,15, जो मूल एफएसटी से व्युत्पन्न है, अवसाद के लिए एक अधिक उपयुक्त पशु मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है। सीडीएम में, लगातार 5 दिनों में बार-बार तैरने का तनाव तीव्र दर्दनाक प्रभावों से बचता है। एक बार-बार और चल रही तनावपूर्ण स्थिति से बचने में विफल रहने से, चूहों को असहायता, आत्मसमर्पण और अंततः निराशा की स्थिति विकसित करने के लिए सोचा जाता है। यह प्रतिमान एक एकल तीव्र आघात की तुलना में मनुष्यों में अवसाद के विकास के लिए वर्तमान मनोवैज्ञानिक सिद्धांतों के लिए अधिक तुलनीय है, जो आमतौर पर पोस्टट्रूमैटिक तनाव विकार की शुरुआत में अनुभव किया जाता है। सीडीएम में परिणामी अवसाद जैसी स्थिति ^{4 सप्ताह तक} स्थिर है और इसलिए लंबे समय तक उपचार की अवधि के लिए संभावना खोलती है, जो नैदानिक स्थितियों के लिए बेहतर तुलनीय हैं, जहां एंटीडिप्रेसेंट को आमतौर पर लाभ दिखाने के लिए 2-4 सप्ताह की आवश्यकता होती ^है16।

अवसादग्रस्तता जैसी स्थिति का मूल्यांकन तब बहुआयामी होना चाहिए। अस्थिरता समय का माप, जैसे कि शास्त्रीय एफएसटी में, उपयोगी है, लेकिन इसका उपयोग केवल परिणाम पैरामीटर के रूप में नहीं किया जाना चाहिए। विभिन्न तरीके, जो नीचे वर्णित हैं, आमतौर पर उदास मनुष्यों में पाए जाने वाले लक्षणों के अनुरूप अवसादग्रस्तता की स्थिति के विभिन्न आयामों को मैप करने में सक्षम होना चाहिए। उपयुक्त रीड-आउट आकलन में एस्केप व्यवहार (अस्थिरता समय ^9,10,17), पूंछ निलंबन परीक्षण (टीएसटी)⁹, एनहेडोनिया (शास्त्रीय सुक्रोज वरीयता परीक्षण (एसपीटी)¹⁸), प्रेरणा-उन्मुख व्यवहार (नाक-प्रहार सुक्रोज वरीयता परीक्षण (एनपीएसपीटी)¹⁰), उम्मीद / अन्वेषण-व्यवहार (अस्पष्ट सिग्नल ¹⁹ की प्रतिक्रिया) शामिल हो सकते हैं; Y-भूलभुलैया ^test9), electrophysiology (दीर्घकालिक प्लास्टिसिटी के माप (दीर्घकालिक potentiation, LTP; दीर्घकालिक अवसाद, LTD)²⁰), आणविक आकलन (तत्काल प्रारंभिक जीन (IEGs) के सक्रियण पैटर्न; आगे तनाव ^{पैटर्न21})।

सैद्धांतिक रूप से, एक बार-बार तैरने के परीक्षण का उपयोग अस्थिरता समय के किसी भी मूल्यांकन के बिना एक उदास राज्य को प्रेरित करने के लिए किया जा सकता है। हालांकि, यह दृढ़ता से गतिहीनता समय के साथ कम से कम एक प्रूफ-ऑफ-कॉन्सेप्ट प्रयोगात्मक श्रृंखला प्रदान करने की सिफारिश की जाती है। इसके अतिरिक्त, सीडीएम प्रेरण चरण के दौरान अस्थिरता समय को मापकर अवसादग्रस्तता जैसी स्थिति के विकास का आकलन करने के लिए एक उपयुक्त मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है। तैराकी से पहले इलाज किए गए विशिष्ट माउस उपभेदों या चूहों का मूल्यांकन लचीलापन या तनाव के लिए भेद्यता और व्यवहारिक निराशा के प्रेरण के संबंध में किया जा सकता है।

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Protocol

सभी प्रयोगों को यूरोपीय दिशानिर्देशों (ईयू 2010/63) के साथ समझौते में और जर्मन पशु संरक्षण कानून (TierSchG), FELASA (www.felasa.eu/guidelines.php), राष्ट्रीय पशु कल्याण निकाय जीवी-SOLAS (www.gv-solas.de/index.html) प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए गाइड के अनुसार किया गया था, और फ्रीबर्ग विश्वविद्यालय की पशु कल्याण समिति द्वारा और Comite d'Ethique en Matiere d'Experimentation Animale de Strasbourg (CREMEAS) द्वारा अनुमोदित किया गया था। CEEA35), साथ ही साथ स्थानीय अधिकारियों। C57Bl6N जंगली प्रकार के चूहों के दोनों लिंगों की आयु 10-14 सप्ताह (70-98 प्रसव के बाद के दिन, पीएनडी) का उपयोग जंगली-प्रकार (डब्ल्यूटी) संकेतित प्रयोगों के लिए किया गया था। एक तनाव-लचीली रेखा के रूप में, फोरब्रेन न्यूरोनल CaMKII प्रमोटर के तहत एडेनोसिन ए ₁ रिसेप्टर्स की बढ़ी हुई अभिव्यक्ति के साथ ट्रांसजेनिक माउस लाइन का उपयोग ^9,15 किया गया था। प्रयोगों के बाद, चूहों को गर्भाशय ग्रीवा अव्यवस्था द्वारा बलिदान किया गया था।

1. तैयारी

एक पशु अनुसंधान लाइसेंस प्राप्त करें, जिसमें पूरी तरह से प्रयोगात्मक योजना शामिल है।
आगमन: आगमन पर, सीडीएम करने के लिए पशु सुविधा में जानवरों को उठाएं। यदि जानवरों को एक बाहरी आपूर्तिकर्ता से खरीदा जाता है, तो उन्हें नए वातावरण के अनुकूल होने के लिए कम से कम 2 सप्ताह की अनुमति दें।
आवास: जानवरों को घर देने के लिए, सुनिश्चित करें कि अतिरिक्त तनाव से बचने के लिए पिंजरों को अधिकतम संख्या में जानवरों के साथ कब्जा नहीं किया गया है। गारंटी है कि आवास की स्थिति माउस आवास की अंतरराष्ट्रीय सिफारिशों के अनुरूप हैं (अधिक जानकारी के लिए, ^see22) और लगातार उन्हें हर समय बनाए रखें।
नोट: सबसे महत्वपूर्ण मानक आवास की स्थिति में प्रति घंटे 25-120 हवा परिवर्तन, 12 घंटे प्रकाश-अंधेरे चक्र, यथासंभव स्थिर तापमान (20-24 डिग्री सेल्सियस के बीच कम से कम स्थिर), आर्द्रता यथासंभव स्थिर (कम से कम 45% -65% के बीच), नगने वाली सामग्री और आश्रय वर्तमान के साथ व्यक्तिगत रूप से हवादार पिंजरे शामिल हैं, कोई व्यक्तिगत आवास नहीं।
समय बिंदु: दिन के एक ही समय में सभी प्रयोगों को करें।
नोट: सीडीएम पर दिन के प्रभाव को सत्यापित करने के लिए कोई प्रत्यक्ष मूल्यांकन नहीं किया गया है, लेकिन अवसादग्रस्तता जैसे राज्यों का मूल्यांकन करने वाले अधिकांश व्यवहार परीक्षण दिन ^23,24,25 के समय के आधार पर भिन्नताएं दिखाते हैं, और यह अत्यधिक संभावना है कि दिन का समय भी सीडीएम को प्रभावित करता है।
घोंसले के शिकार सामग्री: एक न्यूनतम करने के लिए घोंसले के शिकार सामग्री को कम करें। सुनिश्चित करें कि पिंजरे में कोई चलने वाले पहिये आदि मौजूद नहीं हैं।
नोट:: समृद्ध वातावरण एक उदास स्थिति के प्रेरण को रोकता है।
समूह संरचना: जानवरों को पूरे प्रयोग के दौरान एक ही समूह में रहने की अनुमति दें। मादा चूहों को अलग-अलग कूड़े से भी एक साथ समूहित करें; नर चूहों को लिटरमेट नर जानवरों के साथ एक साथ समूहित करें। आगामी आक्रामकता के कारण, विशेष रूप से पुरुषों की, काटने और नाई एक समस्या बन सकती है, इसलिए समूह संरचना पर विशेष जोर दें। एकल आवास से बचें क्योंकि अभाव एक प्रमुख अतिरिक्त तनाव है।
जानवर: विभिन्न माउस उपभेदों का उपयोग करें, भले ही विशिष्ट अंतर ^9,10 देखे गए हों। एक अक्सर इस्तेमाल किया माउस तनाव C57Bl6N है। युग्मित सांख्यिकीय विश्लेषण करने के लिए लेबल चूहों (चरण 3.2.4 देखें)।
पशु सेक्स: समान रूप से नर और मादा दोनों चूहों का उपयोग करें।
पशु आयु: सुनिश्चित करें कि जानवर कम से कम 10 सप्ताह (70 पीएनडी) पुराने हैं। तैराकी के कारण होने वाली थकावट के कारण छोटे जानवरों का उपयोग न करें।
उपकरण: कम से कम 2 एल की क्षमता, 24-26 सेमी के व्यास और 30 सेमी की न्यूनतम ऊंचाई के साथ एक पारदर्शी ग्लास सिलेंडर / बीकर का उपयोग करें। आगे की आवश्यकताओं में पानी के तापमान, पेपर तौलिए, लाल प्रकाश हीटिंग लैंप / हीटिंग चटाई या हीटिंग के तुलनीय स्रोत, टाइमर, स्टॉपवॉच, शांत परिवेश की जांच करने के लिए एक थर्मामीटर शामिल है। ऑफ़लाइन विश्लेषण और प्रलेखन के लिए तैरने के सत्रों को वीडियो टेप करें. सुनिश्चित करें कि दिनांक और समय टेप / फ़ाइल पर लगातार दिखाई दे रहे हैं, साथ ही व्यक्तिगत जानवर के लिए एक पहचान कोड संख्या के साथ। बाद के विश्लेषण और आगे के संदर्भ के लिए फ़ाइलों को संग्रहीत करें। विश्लेषण की सुविधा के लिए कांच के सिलेंडर के किनारे से फिल्म, ऊपर से नहीं।

2. प्रेरण चरण

शुरू करने से पहले
1. नेत्रहीन असामान्यताओं के लिए जानवरों का निरीक्षण करें, जिसमें काटने या नाई के लक्षण शामिल हैं। प्रयोगात्मक श्रृंखला से पूरे पिंजरे को बाहर निकालें यदि कोई जानवर किसी भी न्यूनतम चोटों को दिखाता है। सुनिश्चित करें कि एक पशुचिकित्सक किसी भी समय उपलब्ध है क्योंकि प्रयोग के दौरान चोटें खराब हो जाएंगी और तनाव के प्रभाव में चूहे अधिक आक्रामक हो जाने के कारण निरंतरता को रोकेंगे।
2. प्रयोग शुरू करने से पहले प्रत्येक जानवर के लिए bodyweight प्राप्त करें। सुनिश्चित करें कि वजन घटाने अक्सर मनाया प्रारंभिक शरीर के वजन के 20% से अधिक नहीं है। 20% से अधिक वजन घटाने वाले जानवरों को बाहर करें और तुरंत उच्च पीड़ा के कारण उन्हें euthanize करें।
3. कमरे के तापमान (22-23 डिग्री सेल्सियस) पर पानी के साथ एक बीकर या सिलेंडर को नीचे से कम से कम 20 सेमी की ऊंचाई तक भरें, पानी की सतह और पोत की ऊपरी सीमा के बीच कम से कम 10 सेमी छोड़ दें।
प्रदर्शन
1. धीरे से जानवरों को पानी में स्थानांतरित करें। तैरने के चरण के दौरान, जानवर को डूबने से रोकने के लिए निरंतर निगरानी में रखें। एक ऐसी स्थिति से निरीक्षण करें जहां जानवर प्रयोगकर्ता को नहीं देख सकता है (उदाहरण के लिए, अगले दरवाजे के कमरे से वीडियो अवलोकन)।
2. प्रयोग की शुरुआत में एक क्रोनोमीटर सेट करें। जानवरों को 10 मिनट के बाद पानी से बाहर निकालें बस उनकी पूंछ को हथियाकर। धीरे से उन्हें एक कागज तौलिया के साथ सुखाएं और उन्हें या तो हीटिंग लाइट के नीचे या हीटिंग मैट पर रखें।
3. एक समय में केवल एक जानवर का मूल्यांकन करें। सुनिश्चित करें कि जानवर एक-दूसरे को नहीं देख सकते हैं (उदाहरण के लिए, आवास पिंजरे को कमरे के डिवाइडर द्वारा प्रयोगात्मक सेट-अप से अलग करें)।
4. लगातार 5 दिनों के लिए प्रत्येक दिन 10 मिनट के लिए मजबूर तैराकी सत्र का प्रदर्शन करें।
परिष्करण
1. पांच तैराकी सत्रों के बाद जानवरों को अपने घर के पिंजरों में वापस स्थानांतरित करें और उन्हें कम से कम 2 दिनों के लिए आराम करने की अनुमति दें। बाद में विशिष्ट उपचार हस्तक्षेप शुरू करें।

3. एक विरोधी अवसादग्रस्तता उपचार का मूल्यांकन

समय पाठ्यक्रम
1. सीडीएम के साथ तीव्र और उप-कालिक उपचारों का आकलन करें। वैज्ञानिक प्रश्न के आधार पर, प्रेरण चरण और रीड-आउट के बीच आराम की अवधि को अनुकूलित करें।
2. केटामाइन की तीव्र और तेजी से अभिनय शक्ति का मूल्यांकन करने के लिए, सीडीएम के प्रेरण चरण के बाद एक छोटी आराम अवधि (कुछ दिन) चुनें। उपचार (यानी, इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शन) लागू करें, और फिर कुछ ही समय बाद मूल्यांकन (अतिरिक्त तैराकी सत्र या विभिन्न मूल्यांकन विधि) करें।
3. एक उप-कालिक उपचार के प्रभावों का मूल्यांकन करने के लिए, उपचार की अवधि को 4 सप्ताह तक बढ़ाएं (लंबे समय तक उपचार अवधि के लिए कोई डेटा उपलब्ध नहीं है)। उदाहरण के लिए, प्रेरण चरण के बाद 4 सप्ताह के दौरान जानवरों को इमिप्रामाइन के साथ मौखिक उपचार दें और उसके बाद मूल्यांकन करें।
4. उपचार की अवधि के अंत के ठीक बाद उदास स्थिति का मूल्यांकन करना शुरू करें, उदाहरण के लिए, अगले दिन। हमेशा नियंत्रण और प्रयोगात्मक स्थितियों के लिए एक समान समय अवधि चुनें।
गतिहीनता काल
1. प्रूफ-ऑफ-कॉन्सेप्ट
  1. पठन-पाठन विधि के रूप में गतिहीनता समय का उपयोग करने के लिए, प्रेरण चरण के प्रत्येक दिन और परीक्षण के दिन का मूल्यांकन एक प्रूफ-ऑफ-कॉन्सेप्ट प्रदान करने के लिए करें ( चित्रा 1 देखें)। आगे की प्रयोगात्मक श्रृंखला के लिए, दिन 1, दिन 5 और परीक्षण के दिन के लिए आकलन को कम करें ( चित्रा 1 सी देखें)।
  2. प्रत्येक प्रयोग वीडियो टेप. दो प्रशिक्षित पर्यवेक्षकों को स्वतंत्र रूप से विश्लेषण करने के लिए प्रयोगात्मक परिस्थितियों में अंधा करने की अनुमति दें। वीडियो विश्लेषण प्रयोगकर्ता को एक अलग कमरे से व्यवहार का निरीक्षण करने में सक्षम बनाता है, इसलिए परीक्षण के साथ हस्तक्षेप को कम करता है (उदाहरण के लिए, पूरक सामग्री में वीडियो फ़ाइल देखें)।
2. शर्तें: तैरने के परीक्षण के दौरान तीन अलग-अलग व्यवहार स्थितियों का निरीक्षण करें और पहचानें: संघर्ष, तैराकी और अस्थिरता। अधिकांश शोधकर्ताओं ने अस्थिरता पर ध्यान केंद्रित किया; संघर्ष और तैराकी के बीच एक और अंतर शायद ही कभी उपयोगी है और नाटकीय रूप से विश्लेषण की जटिलता और अवधि को बढ़ाता है।
  1. संघर्ष: जानवर सक्रिय रूप से धमकी की स्थिति से बचने की कोशिश करता है। इसमें दीवार की ओर उन्मुख सिर और सभी अंगों के आंदोलनों के साथ सिलेंडर के किनारे को पंजा लगाना शामिल है। पानी की सतह आमतौर पर थोड़ी अशांत होती है।
  2. तैराकी: जानवर कम से कम दोनों हिंद पंजे को हिलाता है और पूरे पानी में एक दूरी तय करता है। यह सक्रिय रूप से एक रास्ता खोजता है लेकिन पोत की कांच की दीवार को दूर करने की कोशिश नहीं करता है। तैराकी में पानी की सतह के ऊपर पंजे उठाना शामिल नहीं है, और शरीर आमतौर पर सिलेंडर की दीवारों के समानांतर उन्मुख होता है। इस स्थिति में, जानवर अक्सर चारों ओर घूमते हैं या हलकों में चलते हैं।
  3. अस्थिरता: जानवर अभी भी रहता है, एक ठंड जैसी स्थिति में, और बिल्कुल भी नहीं चलता है या केवल पूंछ को स्थानांतरित करता है, या पानी की सतह के ऊपर अपना सिर रखने के लिए फोरपाव्स। निष्क्रिय फ्लोटिंग को छोड़कर कोई दूरी सक्रिय रूप से यात्रा नहीं की जाती है, और सामने के पंजे का कोई निर्देशित आंदोलन नहीं देखा जाता है।
3. नज़र रखना
  1. ऑफ़लाइन वीडियो रिकॉर्डिंग का उपयोग करके मूल्यांकन करें. दो स्वतंत्र और अनुभवी परीक्षकों द्वारा अंधे रेटिंग का उपयोग करें और दो रेटिंग के बीच औसत की गणना करें।
  2. रेटिंग को दोहराएँ यदि दो रेटर के परिणाम पहले से निर्धारित सीमा से ऊपर भिन्न होते हैं। लगातार चूहों का निरीक्षण करें क्योंकि विभिन्न स्थितियां अक्सर संघर्ष, तैराकी और अस्थिरता के बीच बदलती हैं।
  3. एक केंद्रित चरण (आमतौर पर अस्थिरता) में बिताए गए कुल समय को मापने के लिए एक स्टॉपवॉच का उपयोग करें 10 मिनट में माउस पानी में रहता है। चल रहे समय माप को बदलने से पहले लगभग एक सेकंड की छोटी विलंबता पर विचार करें (उदाहरण के लिए, यदि कोई जानवर अस्थिरता में 20 सेकंड तक रहता है और केवल एक सेकंड से भी कम समय के लिए एक बार चलता है और एक और 10 सेकंड के लिए अस्थिरता पर लौटता है, तो कुल गतिहीनता समय 30 सेकंड है)।
4. सांख्यिकी: अपेक्षाकृत उच्च अंतर-व्यक्तिगत मानक विचलन के कारण (संभवतः पिंजरे से तैरने के परीक्षण तक पदानुक्रम-निर्भर व्यवहार के हस्तांतरण के कारण), बाद में युग्मित (अनपेयर के बजाय) पैरामीट्रिक परीक्षण करने के लिए जानवरों को चिह्नित या लेबल करें। सामान्यता वितरण का मूल्यांकन करें और, विशिष्ट प्रश्न के आधार पर, विभिन्न समूहों की तुलना करने के लिए पोस्ट-हॉक टी-परीक्षण या युग्मित टी-परीक्षणों के साथ विचरण (एनोवा) का विश्लेषण करें। अस्थिरता समय (s) या सामान्यीकृत मानों के रूप में निरपेक्ष मानों का उपयोग करके विश्लेषण निष्पादित करें.
  1. निरपेक्ष मान: दिन 1 से दिन 5 तक और SEM के परीक्षण दिन के लिए गतिहीनता समय ± माध्य मान दें ( चित्रा 1A देखें)। दिन 1 और दिन 5 के लिए औसत मानों की तुलना करें, अधिमानतः एक उदास राज्य के प्रेरण को मान्य करने के लिए एक युग्मित टी-टेस्ट का उपयोग करके। यदि दिन 1 और 5 के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर है, तो दिन 5 के औसत मूल्यों की तुलना परीक्षण दिन के औसत परिणामों से करें। सुनिश्चित करें कि एक प्रयोग में एक विशिष्ट समूह का आकार 6 और 10 जानवरों के बीच है और जंगली प्रकार के जानवरों में बेसलाइन और पोस्ट-इंडक्शन अस्थिरता समय के बीच महत्वपूर्ण अंतर की उम्मीद है। एक unpaired टी-परीक्षण के साथ विभिन्न समूहों की तुलना करना मुश्किल है यदि आधार रेखा मतभेदों के कारण पूर्ण मूल्यों का उपयोग किया जाता है; इसलिए, सामान्यीकृत मानों का उपयोग करें।
  2. सापेक्ष /सामान्यीकृत मान: दिन 5 पर व्यक्तिगत परिणाम के लिए सामान्यीकरण द्वारा विभिन्न उपचार प्रभावों की तुलना करें, और फिर मानों को दिन 5 के प्रतिशत के रूप में व्यक्त करें ( चित्र1B देखें)।
5. नियंत्रण प्रयोगों
  नोट: तैराकी प्रदर्शन लोकोमोशन के साथ सहसंबद्ध किया जा सकता है। हाइपर-लोकोमोशन का कारण बनने वाले पदार्थ झूठे-सकारात्मक परिणामों को प्रेरित कर सकते हैं (अर्थात्, अस्थिरता समय की कमी); के रूप में के रूप में अच्छी तरह से शामक एजेंटों कृत्रिम रूप से अस्थिरता समय में वृद्धि कर सकता है.
  1. तैरने का विश्लेषण करने से पहले अज्ञात पदार्थों के लिए लोकोमोशन में परिवर्तन का मूल्यांकन करें। कम से कम 10 मिनट के लिए जानवरों के एक अलग समूह में ओपन फील्ड टेस्ट (ओएफटी) का उपयोग करें।
  2. परीक्षण किए गए यौगिक के अविशिष्ट हाइपर-लोकोमोटिव प्रभावों का पता लगाने के लिए सीडीएम के रूप में ओएफटी में एक ही अवलोकन समय (10 मिनट) चुनें जो उच्च वैधता के साथ गतिहीनता-समय के माप के माध्यम से सीडीएम रीड-आउट को प्रभावित कर सकता है।
  3. महत्वपूर्ण हाइपर-लोकोमोटिव प्रभावों के मामले में, विरोधी अवसादग्रस्तता शक्ति का आकलन करने के लिए तैराकी सत्र का मूल्यांकन न करें, लेकिन विभिन्न रीड-आउट विधियों (उदाहरण के लिए, सुक्रोज वरीयता, पूंछ निलंबन परीक्षण, आदि) का उपयोग करें।

4. एक अवसादग्रस्तता की तरह राज्य के विकास का मूल्यांकन

अवसादग्रस्तता विकार के विकास का मूल्यांकन करने के लिए, गतिशीलता-समय को मापने के लिए प्रेरण चरण के प्रत्येक दिन का आकलन करें।
नोट: इस मामले में, प्रत्येक दिन के बीच अस्थिरता-समय की एक मामूली वृद्धि लचीलापन का वर्णन करती है, जबकि अनुपचारित या जंगली-प्रकार के जानवरों की तुलना में एक मजबूत और पहले की वृद्धि तनाव-प्रेरित निराशा के लिए एक बढ़ी हुई भेद्यता का प्रतिनिधित्व करती है। तैराकी की घटना से पहले चूहों का इलाज करके, निवारक हस्तक्षेप या ट्रांसजेनिक माउस लाइनों का मूल्यांकन व्यवहारिक निराशा के विकास के बारे में किया जा सकता है।

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Representative Results

सीडीएम के प्रेरण चरण के पहले तैरने के सत्र में, चूहे आमतौर पर 190 और 230 सेकंड के बीच एक औसत अस्थिरता समय दिखाते हैं, जो लगातार हर अतिरिक्त तैरने के सत्र (चित्रा 1 ए) के साथ बढ़ता है। यह वृद्धि पहले 3 दिनों में अधिक स्पष्ट है और पिछले 2-3 दिनों के दौरान पठार जैसे चरण तक पहुंचती है। दिन 5 पर मापा गया अस्थिरता-समय 4 सप्ताह तक स्थिर रहता है, जो स्थिर व्यवहार निराशा का संकेत देता है। एक हस्तक्षेप की एंटीडिप्रेसेंट शक्ति का मूल्यांकन प्रेरण चरण के अंतिम दिन और परीक्षण के दिन के बीच जानवर का इलाज करके किया जा सकता है। ध्यान दें कि तैराकी सत्रों के दौरान पूर्ण स्कोरिंग समय काफी व्यक्तिपरक है और प्रयोगकर्ता, उम्र, लिंग और उपयोग की जाने वाली माउस-लाइन पर निर्भर करता है। हालांकि, सत्रों के बीच सापेक्ष अंतर केवल छोटे इंटररेटर मतभेदों के साथ काफी स्थिर है।

चित्र 1 में, कई प्रतिनिधि उपचार दिखाए गए हैं। इमिप्रामाइन, नींद की कमी, और केटामाइन ने अस्थिरता-समय को काफी कम कर दिया, जबकि नींद की कमी ने वसूली नींद के साथ मिलकर अवसादग्रस्तता-जैसे फेनोटाइप का एक महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं दिखाया। ये परिणाम लागू उपचारों की एक विरोधी अवसादग्रस्तता शक्ति के साथ संगत हैं और मानव रोगियों में देखे गए प्रभावों के समान हैं। उपचार में पीने के पानी के माध्यम से 3 सप्ताह के लिए 20 मिलीग्राम / किलोग्राम / दिन, परीक्षण से पहले 24 घंटे पहले एक इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शन द्वारा 3 मिलीग्राम / किलोग्राम केटामाइन और परीक्षण से पहले 6 घंटे के लिए नींद की कमी शामिल थी।

अनुसंधान प्रश्न के आधार पर, विभिन्न अभ्यावेदन प्रदर्शित किए जा सकते हैं। निरपेक्ष मूल्यों का एक प्रतिनिधित्व एक वास्तविक डेटा अवलोकन दे सकता है और प्रेरण चरण और एक एकल उपचार (चित्रा 1 ए, डी) के अच्छे मूल्यांकन की अनुमति देता है। हालांकि, विभिन्न उपचारों के अंतर की सीधे तुलना नहीं की जा सकती है; इसलिए प्रत्येक उपचार समूह में दिन 5 पर गतिहीनता-समय के अलग-अलग माध्य मान होते हैं। इसलिए, इस मामले में सामान्यीकृत माध्य मानों के प्रतिनिधित्व का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है (चित्रा 1B)। अंतरिक्ष सीमाओं (चित्रा 1 C) के कारण एक कम प्रतिनिधित्व चुना जा सकता है। ध्यान दें कि कम से कम दिन 1, दिन 5 और परीक्षण के दिन के परिणामों को दिखाना अनिवार्य है।

चित्रा 1: पूर्ण और सामान्यीकृत मानों में सफल परिणाम। (ए) 30 चूहों में एक उदास जैसी स्थिति का सफल प्रेरण देखा जा सकता है। प्रत्येक बिंदु एक विशिष्ट दिन पर एक ही जानवर के गतिहीनता समय का प्रतिनिधित्व करता है और सलाखों परीक्षण किए गए जानवरों के औसत मूल्यों का प्रतिनिधित्व करते हैं। अस्थिरता समय प्रेरण चरण के प्रत्येक दिन (दिन 1 से दिन 5 तक) के लिए और परीक्षण दिन (बिंदीदार रेखा के बाद) के लिए उपचार के साथ या बिना प्रतिनिधित्व किया जाता है। ध्यान दें कि इस नमूने में, दिन 1 और दिन 2 के बीच एक महत्वपूर्ण वृद्धि देखी जा सकती है। कुछ मामलों में, महत्व के स्तर को पहले दिन 1 और दिन 3 के बीच प्राप्त किया जाता है। प्रयोग की निरंतरता के लिए, दिन 1 और दिन 5 के बीच एक सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण वृद्धि अनिवार्य है। विशिष्ट छत प्रभाव पर ध्यान दें (दिनों 4 और 5 के बीच के अंतर की तुलना में दिन 1, 2 और 3 के बीच वृद्धि)। दिन 5 और परीक्षण के दिनों के बीच, जानवरों को अपने घर के पिंजरों में 4 सप्ताह के लिए रखा गया था, या तो आगे के उपचार (सीडीएम) के बिना या इमिप्रामाइन (इमिप) के साथ इलाज किया गया था; नींद की कमी (एसडी); नींद की कमी और वसूली नींद (आरएस), और केटामाइन (केट)। (बी) प्रत्येक दिन के लिए अलग-अलग जानवरों के प्रदर्शन का अनुकरणीय समय पाठ्यक्रम दिया जाता है। (C) चित्र 1A में पहले से ही दिखाए गए समान परिणामों का सामान्यीकृत प्रतिनिधित्व। प्रत्येक जानवर और दिन की गतिहीनता समय को 5 वें दिन अपने संबंधित अस्थिरता समय के लिए सामान्यीकृत किया गया था और प्रतिशत में व्यक्त किया गया था। विभिन्न समूहों के उपचार के बाद के मूल्यों को इस दृष्टिकोण का उपयोग करके बेहतर तरीके से प्रदर्शित और तुलना की जा सकती है। (D) दिन 1, दिन 5, और परीक्षण दिवस (CDM) के लिए सामान्यीकृत मानों का प्रतिनिधित्व। अवधारणा अध्ययन के सफल प्रमाण के बाद, मूल्यांकन समय बिंदुओं को एक दिन, पांचवें दिन और परीक्षण के दिन तक कम किया जा सकता है। इन समय बिंदुओं की आवश्यकता होती है क्योंकि दिन 1 और दिन 5 के बीच एक महत्वपूर्ण वृद्धि एक सफल प्रेरण प्रदर्शित करने के लिए आवश्यक है, और उपचार प्रभावकारिता पर एक बयान देने के लिए दिन 5 की तुलना में परीक्षण दिवस की तुलना करने की आवश्यकता है। (ई) तीन अलग-अलग माउस लाइनों के गतिहीनता समय की तुलना: वाइल्डटाइप (डब्ल्यूटी) एक सफल प्रेरण दिखाता है; एक अनुकरणीय लचीला-रेखा (आरएल) पहले तीन दिनों में और परीक्षण के दिन काफी कम अवसाद जैसे व्यवहार को दर्शाता है। Bonferroni पोस्ट हॉक परीक्षण के साथ एक तरफा एनोवा: ^{∗ / #} पी < 0.05, ^{∗∗ / # #} पी < 0.01, ^{∗∗∗ / # # #} पी < 0.001, ^{∗∗∗∗ / # # # #} पी < 0.0001। (^#दिन 1 के माध्य मानों के अंतर को इंगित करते ^{हैं, ∗}अर्था 1A, C में दिन 5 के माध्य मानों के लिए अंतर को इंगित करते हैं और चित्र 1E में WT माउस लाइन के लिए)। डेटा को SEM के साधन के रूप ± में व्यक्त किया जाता है। कृपया इस आकृति का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

सभी 5 दिनों (चित्रा 2) के दौरान एक अपरिवर्तित अस्थिरता समय के मामले में, लागू तनाव व्यवहार को प्रासंगिक रूप से बदलने में सक्षम नहीं था, और कोई उपचार प्रभाव मूल्यांकन नहीं किया जा सकता है; जानवरों की बलि देने की आवश्यकता है और आगे इसका उपयोग नहीं किया जाना चाहिए।

चित्र 2: असफल परिणाम। एक अप्रभावी प्रेरण का एक प्रतिनिधित्व चित्र में दिखाया गया है। ध्यान दें कि दिन 1 और दिन 5 के बीच अस्थिरता समय में कोई महत्वपूर्ण वृद्धि नहीं होती है। इसलिए, प्रयोग की निरंतरता के लिए मानदंड प्राप्त नहीं किए गए थे, और कोई और लंबाई तर्कसंगत नहीं है (इस मामले में, केवल पुरुष चूहों का परीक्षण किया गया था, और पूर्वव्यापी जांच के बाद, यह पाया गया कि वे लिटरमेट नहीं थे)। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

जानवरों के व्यवहार की निराशा के व्यापक दृष्टिकोण का वर्णन करने के लिए आगे पढ़ने के तरीकों का उपयोग किया जाना चाहिए। विभिन्न प्रकार के व्यवहार परीक्षण, इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल माप, और तनाव-प्रेरित परिवर्तनों के आणविक आकलन उपलब्ध हैं। सीडीएम, इमिप्रामाइन और केटामाइन उपचार, नाक-प्रहार-सुक्रोज वरीयता परीक्षण (एनपीएसपीटी) के साथ टेल सस्पेंशन टेस्ट (टीएसटी) के लिए अनुकरणीय परिणाम, और पैच-क्लैंप तकनीक का उपयोग करके दीर्घकालिक potentiation का मूल्यांकन चित्रा 3 में दिया गया है। ये परिणाम व्यवहारिक निराशा के प्रेरण के लिए एक सामान्य उपकरण के रूप में सीडीएम प्रेरण चरण का उपयोग करने को प्रोत्साहित करते हैं। उपयोग की गई तकनीकों (टीएसटी, एनपीएसपीटी, एलटीपी-मूल्यांकन) के अधिक विवरण के लिए ^9,10,17,20 देखें।

चित्रा 3: CDM चूहों के साथ अतिरिक्त परिणाम। (A) टेल सस्पेंशन टेस्ट में CDM के प्रभावों का एक अनुकरणीय निरूपण। चूहों को उनकी पूंछ द्वारा निलंबित कर दिया गया था, और स्थिर बिताए गए समय को रिकॉर्ड किया गया था (methodological विवरण के लिए ^{देखें9})। प्रत्येक बिंदु एक ही जानवर के अस्थिरता समय का प्रतिनिधित्व करता है, और सलाखों का प्रतिनिधित्व करता है परीक्षण किए गए जानवरों के औसत मूल्यों का प्रतिनिधित्व करते हैं। Bonferroni पोस्ट हॉक परीक्षण के साथ एक तरफा एनोवा: ^∗∗∗p < 0.001. डेटा को SEM ± साधन के रूप में व्यक्त किया जाता है। (B) CDM चूहों में हाल ही में स्थापित नाक-पोक सुक्रोज वरीयता परीक्षण के प्रतिनिधि परिणाम। इस कार्य में, सुक्रोज वरीयता को सुक्रोज की बोतल (नोजपोक की संख्या) तक पहुंचने के क्रमिक बढ़ते प्रयास के साथ मापा गया था (पद्धतिगत विवरण ों के लिए ^{देखें10})। ध्यान दें कि सीडीएम में सुक्रोज वरीयता कम हो गई थी और सीडीएम और नियंत्रण चूहों के बीच का अंतर धीरे-धीरे प्रयास के साथ बढ़ जाता है (प्रत्येक दिन नाक के औसत मूल्यों को एनएसपीके 1-7 के रूप में इंगित किया जाता है) चूहों को मीठा समाधान पीने के लिए लागू करना पड़ा। Bonferroni पोस्ट हॉक परीक्षण के साथ दो तरफा एनोवा: ^∗∗p < 0.01, ^∗∗∗p < 0.001. डेटा को SEM ± साधन के रूप में व्यक्त किया जाता है। (C) दीर्घकालिक सिनैप्टिक प्लास्टिसिटी में CDM-निर्भर परिवर्तनों को WT चूहों के हिप्पोकैम्पल मस्तिष्क स्लाइस में एक साहचर्य LTP प्रेरण प्रोटोकॉल के आवेदन के बाद EPSPs के माध्य मानों के परिवर्तन के रूप में प्रस्तुत किया जाता है। डेटा CA3-CA1 synapse की उत्तेजना द्वारा प्राप्त किए गए थे (विवरण के लिए ^{देखें17,20})। Unpaired t-test, ^∗∗p < 0.01, डेटा को SEM ± साधन के रूप में व्यक्त किया जाता है। कृपया इस आकृति का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

सीडीएम मॉडल नए हस्तक्षेपों की विरोधी अवसादग्रस्तता शक्ति का परीक्षण करने के लिए एक प्रासंगिक और स्थापित मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है और अवसाद के पैथोफिजियोलॉजी को स्पष्ट करने के लिए आणविक या इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल प्रयोगों के लिए एक विस्तारित समय खिड़की खोलता है। विशेष रूप से जब अवसाद जैसी स्थिति का आकलन करने के लिए अन्य परीक्षणों के साथ संयुक्त किया जाता है, तो सीडीएम में एक उच्च चेहरा और अवधारणा वैधता होती है। यह सबक्रोनिक तनाव को जोड़ता है और प्रेरण के लिए असहायता हासिल करता है और लंबे समय तक चलने वाली अवसादग्रस्तता जैसी स्थिति का उत्पादन करता है। यह शास्त्रीय एंटीडिपेंटेंट्स के एकल आवेदन के प्रति असंवेदनशील है, लेकिन उप-कालिक अनुप्रयोग का जवाब देता है और इसलिए मनुष्यों में स्थिति की नकल करता है। 4 सप्ताह की समय खिड़की में, कई अलग-अलग एंटीडिप्रेसिव हस्तक्षेप प्रभावकारिता दिखाते हैं, एंटीडिपेंटेंट्स के विभिन्न वर्गों से लेकर, गैर-आक्रामक मस्तिष्क उत्तेजना, नींद की कमी से लेकर तेजी से अभिनय करने वाले एंटीडिप्रेसेंट्स ^9,10,11 तक। इसके अलावा, प्रेरण चरण के दौरान अस्थिरता समय की माप का उपयोग तनाव लचीलापन या भेद्यता के मार्कर के रूप में किया जा सकता है, जो ट्रांसजेनिक जानवरों या चूहों के परीक्षण के मामले में प्रेरण चरण से पहले इलाज किया जाता है। कुल मिलाकर, सीडीएम लागत, अवधि, मानकीकरण और प्रयोगशालाओं के बीच पुनरुत्पादन के मामले में किफायती है। भले ही प्रदर्शन काफी सरल लगता है- "आप एक माउस को पानी के बर्तन में छोड़ देते हैं और इसे 10 मिनट के बाद बाहर निकालते हैं" - कई महत्वपूर्ण बिंदु हैं जिन्हें उचित और स्थिर परिणाम प्राप्त करने के लिए ध्यान में रखा जाना चाहिए। अधिकांश समस्याएं तैयारी या विश्लेषण के दौरान अपर्याप्त सटीकता के कारण होती हैं।

एक आमतौर पर अनुभवी समस्या यह है कि चूहे, विशेष रूप से पुरुष, प्रेरण चरण में अस्थिरता के समय में महत्वपूर्ण वृद्धि नहीं दिखाते हैं। इन मामलों में, प्रेरण शुरू होने से पहले चूहों को पहले से ही जोर दिया जा सकता है; इसलिए, तैरने के प्रोटोकॉल के दौरान अतिरिक्त तनाव निराशा की प्रासंगिक वृद्धि का कारण नहीं बनता है। ध्यान दें कि अस्थिरता समय का एक छत प्रभाव प्रतीत होता है क्योंकि दिन 1 और 2 के बीच की वृद्धि क्रमशः दिन 2 और 3 के बीच की तुलना में बड़ी है। दिन 3 के बाद, आमतौर पर, कोई और महत्वपूर्ण वृद्धि की उम्मीद नहीं की जा सकती है। अत्यधिक आधारभूत तनाव के सामान्य कारणों में जानवरों के हाल के परिवहन या किशोर / वयस्क नर जानवरों का सहवास शामिल हो सकता है, एक ऐसी स्थिति जो प्रकृति में कभी नहीं होती है। इसलिए, प्रयोगकर्ता को सतर्क रहना चाहिए और हमेशा आश्वस्त करना चाहिए कि जानवर कूड़े के साथी हैं, कि उनके पास नए परिवेश के अनुकूल होने के लिए पर्याप्त समय था और प्रयोग शुरू होने से पहले काटने या नाई के कोई संकेत नहीं हैं। इसके अलावा, जानवरों को प्रत्येक दिन तौला जाना चाहिए और वजन घटाने को प्रारंभिक शरीर के वजन के 20% से अधिक नहीं होने के लिए नियंत्रित किया जाना चाहिए। अधिक वजन घटाने को महत्वपूर्ण माना जाता है, इस तथ्य के कारण कि दोहराए जाने वाले तैराकी थकाऊ है और जो जानवर अपने शरीर के वजन को बनाए रखने में सक्षम नहीं हैं, वे इस थकावट से बहुत अधिक पीड़ित हैं। यहां एक महत्वपूर्ण बात यह है कि थकावट से बहुत अधिक पीड़ित जानवर शायद परीक्षण के दौरान 10 मिनट तक तैरने या संघर्ष करने में सक्षम नहीं होते हैं। जब उन जानवरों की अस्थिरता के समय का विश्लेषण किया जाता है, तो वे शारीरिक थकावट के कारण एक गलत नकारात्मक परिणाम दिखाते हैं।

एक और समस्याग्रस्त परिस्थिति जो कभी-कभी होती है, खासकर जब लंबे समय तक उपचार की अवधि की आवश्यकता होती है, तो परीक्षण मूल्यांकन में अस्थिरता के समय की एक सहज कमी है। 4 सप्ताह के बाद, अस्थिरता का समय आमतौर पर प्रेरण अवधि (एन.B के अंत के 2 दिन बाद किए गए आकलन की तुलना में कम हो जाता है, यह मेल खाता है, हालांकि एक अलग समय पैमाने के साथ, मनुष्यों में स्थिति के लिए जहां उदास एपिसोड आमतौर पर आत्म-सीमित होते हैं)। इस नुकसान को कम करने के लिए, यह गारंटी दी जानी चाहिए कि जानवर के घर के पिंजरे पर कोई अनावश्यक घोंसले के शिकार सामग्री लागू नहीं की जाती है, जिसे एक प्रभावी दमनकारी हस्तक्षेप (समृद्ध वातावरण) के रूप में माना जा सकता है। इसके अलावा, समूह के आकार में वृद्धि विचरण को कम करने में मदद कर सकती है। यदि आवश्यक हो, तो ऊपर वर्णित मानक प्रोटोकॉल के संशोधन के रूप में एक अतिरिक्त तैराकी सत्र जोड़ा जा सकता है। उदाहरण के लिए, लगातार 7 दिनों में पांच से सात तैराकी सत्रों में वृद्धि का प्रदर्शन किया जा सकता है और इसके परिणामस्वरूप जानवरों की अधिक स्थिर उदास स्थिति होनी चाहिए। अत्यधिक थकावट से बचने के लिए व्यक्तिगत तैराकी सत्र की अवधि को और बढ़ाने की सिफारिश नहीं की जाती है।

विश्लेषण करने के लिए सबसे समझदार समय सीमा के बारे में वैज्ञानिक समुदाय के भीतर कोई समझौता नहीं है। जबकि कुछ समूह सभी 10 मिनट को महत्वपूर्ण ^{मानते} ^{हैं9,10}, दूसरों का तर्क है कि पहले कुछ मिनटों के भीतर व्यवहार एक तीव्र तनाव की स्थिति का प्रतिनिधित्व करता है और केवल अंतिम 4 मिनट या 6 मिनट ¹⁸ का विश्लेषण करता है। उत्तरार्द्ध धारणा मुख्य रूप से शास्त्रीय एफएसटी की मूल्यांकन प्रक्रिया में सामान्य अभ्यास से ली गई है। सीडीएम में विश्लेषण किए जाने वाले सबसे तर्कसंगत समय सीमा के प्रश्न को संबोधित करने वाले प्रयोगात्मक साक्ष्य गायब हैं। विभिन्न उच्च रैंक वाले प्रकाशनों ने ^CDM9,10 में पूरे 10 मिनट के विश्लेषण का उपयोग ^{किया।}

स्वचालित वीडियो विश्लेषण के लिए व्यावसायिक रूप से उपलब्ध सॉफ़्टवेयर की बढ़ती संख्या के बावजूद, किसी भी सेट-अप ने प्रशिक्षित पर्यवेक्षक को बदलने के लिए पर्याप्त सटीकता का प्रदर्शन नहीं किया है। अधिकांश सॉफ़्टवेयर पानी में चूहों के लोकोमोशन की ट्रैकिंग पर भरोसा करते हैं और ऊपर से कैमरे की स्थिति की आवश्यकता होती है। कुशल मनुष्यों द्वारा किए गए आकलन का लाभ यह है कि न केवल लोकोमोशन बल्कि अधिक जटिल आंदोलनों के अनुमानित इरादे का भी आकलन किया जा सकता है, जिसमें पंजा आंदोलनों की तीव्रता भी शामिल है। उदाहरण के लिए, चूहे अक्सर अपने शरीर के चारों ओर मुड़कर या अपने सिर को पानी के ऊपर रखने के लिए सूक्ष्म पूंछ आंदोलनों द्वारा चलते हैं, जो सॉफ्टवेयर आमतौर पर तैराकी के रूप में ट्रैक करता है। एक और उदाहरण पोत की कांच की दीवार की ओर निर्देशित आंदोलन है, जिसमें थोड़ी दूरी से लगातार नाक पोक किया गया है। ऊर्ध्वाधर आंदोलनों से बचने के स्पष्ट इरादे के बावजूद, सॉफ़्टवेयर अक्सर छोटे लोकोमोशन के कारण अस्थिरता को ट्रैक करता है। हालांकि, सटीक और विश्वसनीय आकलन कठिन और समय लेने वाले बने हुए हैं। एक अनुभवी प्रयोगकर्ता द्वारा एक रेटर को प्रशिक्षित करने और सामान्य परिभाषाओं और अस्पष्टताओं पर चर्चा करने के लिए दो स्वतंत्र रेटर्स द्वारा नमूना वीडियो के संयुक्त मूल्यांकन तैयार करने की सिफारिश की जाती है। इसके अलावा, सीडीएम के साथ एक प्रयोगशाला के पहले परिणामों की तुलना अन्य समूहों से पहले प्रकाशित परिणामों से की जानी चाहिए।

सीडीएम का उपयोग करने वाले शोधकर्ता अक्सर इस धारणा का अनुभव कर सकते हैं कि बढ़ी हुई गतिशीलता एक अपरिहार्य लेकिन अस्थायी तनावपूर्ण स्थिति के लिए चूहों की एक बुद्धिमान अंत ऊर्जा-बचत सीखी गई प्रतिक्रिया है। हमारी राय में, यह चूहों के संज्ञानात्मक लचीलेपन को ओवररेट करता है; हालांकि, यह एक उदास राज्य के आगे के आकलन के लिए आवश्यकता पर जोर देता है जो गतिहीनता समय से स्वतंत्र है। यह आगे तर्क दिया जा सकता है कि क्रोनिक माइल्ड स्ट्रेस टेस्ट के रूप में अवसाद के अन्य अच्छी तरह से स्थापित पशु मॉडल, समान परिणाम उत्पन्न करते हैं; और यह कि एक उदास राज्य या मजबूत तनाव बाधा डालते हैं, मनुष्यों और जानवरों दोनों में सीखने में वृद्धि नहीं करते ^{हैं17,20,26,27,28,29,30}।

जानवरों के बोझ को आमतौर पर पशु अनुसंधान अनुप्रयोगों में उच्च से चरम के रूप में रेट किया जाता है। जानवरों की संख्या को कम करने के लिए प्रयोगात्मक श्रृंखला को पूरी तरह से योजनाबद्ध किया जाना चाहिए, और तैराकी सत्रों से पहले और बाद में जानवरों को देखभाल और सम्मान के साथ इलाज किया जाना चाहिए। हालांकि, कुछ देशों में, सीडीएम के लिए पशु अनुसंधान लाइसेंस प्राप्त करना संभव नहीं हो सकता है। सीडीएम हस्तक्षेप की एक विस्तृत श्रृंखला के विरोधी अवसादग्रस्तता प्रभावकारिता के मूल्यांकन और अपेक्षाकृत स्थिर उदास राज्य के प्रेरण की अनुमति देता है। मनुष्यों में प्रमुख अवसादग्रस्तता विकार की विषमता और जटिलता को किसी भी पशु मॉडल में दोहराया नहीं जा सकता है। अवसाद के अधिकांश पशु मॉडल चूहों में तनाव-प्रेरित / आघात जैसे अनुभव पर आधारित होते हैं, जो जरूरी नहीं कि मनुष्यों में मामला हो, जहां बचपन की कमी, जटिल सीखने का इतिहास और / या सामाजिक-सांस्कृतिक जोखिम कारक भी महत्वपूर्ण प्रतीत होते हैं। इसलिए अवसाद के माउस मॉडल को पहचाना जाना चाहिए कि वे क्या हैं: एक अत्यधिक जटिल विकार के लिए एक सरलीकृत मॉडल। हालांकि, यदि पर्याप्त रूप से प्रदर्शन किया जाता है और यदि कई रीड-आउट विधियों का उपयोग किया जाता है, तो सीडीएम अवसाद अनुसंधान में उपन्यास अंतर्दृष्टि और लक्ष्यों की खोज में एक उपयुक्त उपकरण है।

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Disclosures

सभी लेखकों ने हितों के टकराव की घोषणा नहीं की है।

Acknowledgments

इस काम को विश्वविद्यालय क्लिनिक फ्रीबर्ग, मनोचिकित्सा और मनोचिकित्सा विभाग और चिकित्सक वैज्ञानिकों के लिए बर्टा-ओटेंस्टीन कार्यक्रम (एसवी के लिए) के आंतरिक धन द्वारा वित्त पोषित किया गया था। टीएस को मेडिकल रिसर्च फाउंडेशन (एफआरएम) (एजेई 201912009450) और स्ट्रासबर्ग इंस्टीट्यूट ऑफ एडवांस स्टडीज (यूएसएस) (2020-035) के अनुदान के साथ-साथ सेंटर नेशनल डे ला रेचेर्चे साइंटिफिक (सीएनआरएस), फ्रांस के अनुदान द्वारा वित्त पोषित किया जाता है।

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Beaker, 2000 mL	Kimble Kimax	14000-2000	any vessel >2000ml and diameter of 24-26 cm possible
Digital Thermometer	Hanna Instruments	846-4708	any digital thermometer possible
Digitalwaage 200 g Dipse	DIPSE	tp200	any digital scale possible
Lenovo ThinkCentre V50a-24IMB AiO 11FJ00DVGE - 60,5 cm	Lenovo	A 908278	any standard Personalcomputer possible
Logitech PTZ Pro	Logitech	1000005246	any high resolution camera possible
Stopwatch ROTILABO	Carl Roth	L423.1	any stopwatch possible
Timer ROTILABO	Carl Roth	A802.1	any timer possible