Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Environment
Click here for the English version

Environment

Metodikk for å teste kontrollmidler og insektmidler mot coffee berry borer hypothenemus hampei

Published: March 23, 2022 doi: 10.3791/63694
Automatic Translation
1, 1, 1, 1
1Department of Entomology, National Coffee Research Center

Summary

En metode ved bruk av grønne kaffefrukter (GFs) ble utviklet for å teste giftigheten av insektmidler mot kaffebærboreren (CBB). Insekticider eller giftige stoffer ble brukt på desinfiserte GFs før eller etter CBB-angrep. Insektdødelighet, repellency og reproduksjonskapasitet, i tillegg til andre parametere, ble evaluert.

Abstract

Før du anbefaler insektmidler for å behandle kaffebærboreren (CBB) Hypothenemus hampei, er det verdifullt å vite dødeligheten og avstøtningen av disse insektmidler mot voksne insekter eller deres innvirkning på reproduktiv produksjon. Imidlertid vurderer tilgjengelige metoder bare voksen dødelighet, og begrenser valget av nye insektmidler med en annen virkemåte. I dette arbeidet ble ulike eksperimentelle metoder undersøkt for å identifisere de ulike effektene på CBB under laboratorieforhold. For dette ble grønne kaffefrukter (GFs) samlet og desinfisert ved nedsenking i natriumhypoklorittløsning etterfulgt av UV-lysbestråling. Parallelt ble CBB-voksne fra en koloni desinfisert ved nedsenking i natriumhypoklorittløsning. For å vurdere fruktbeskyttelse (preinfestation) ble fruktene plassert i plastbokser, og insekticidene ble påført. Deretter ble CBB-voksne utgitt med en hastighet på to CBBer per GF. GF-ene ble etterlatt under kontrollerte forhold for å evaluere CBB-angrep og overlevelse etter 1, 7, 15 og 21 dager. For å evaluere insektmiddeleffekten etter CBB-angrep (postinfestasjon), ble CBB-voksne frigjort til GF-ene i forholdet 2:1 i 3 timer ved 21 °C. Infiserte frukter som viser CBB-voksne med magen delvis eksponert, ble valgt og plassert i 96-brønns stativer, og CBB-ene som boret seg inn i fruktene ble behandlet direkte. Etter 20 dager ble fruktene dissekert, og CBB biologiske stadier inne i hver frukt ble registrert. GF-ene fungerte som substrater som etterligner naturlige forhold for å evaluere giftige, kjemiske og biologiske insektmidler mot CBB.

Introduction

Kaffebærboreren (CBB), Hypothenemus hampei, ble først oppdaget i 1988 i Colombia og har siden blitt den viktigste skadedyrsarten i kaffeavlingen. CBB-kvinner forlater fødselsfrukten allerede befruktet, og søker nye frukter styrt av de flyktige kjemikaliene de avgir 1,2. En komplett syklus oppfylles innen 23 dager3 ved en temperatur på 25 °C. Syklusen starter med at grunnleggerhunnen trenger inn i frøet og legger egg i fruktendospermen. De lukkede larvene spiser frøet. Hvis fruktene blir dissekert på dette tidspunktet, ville det være mulig å observere både grunnleggeren kvinnelige og hennes avkom. Etter 14 dager blir larvene pupper - generelt varer puppestadiet 5 dager. I voksenstadiet kopulerer hunnene med søsknene sine, og de nylig befruktede hunnene flyr bort fra de skadede fruktene på jakt etter nye kaffefrukter for å starte en ny syklus4.

Både penetrasjonsprosessen og resultatet av larvefôring skader kaffefrøet, reduserer kvaliteten på kaffedrikken og reduserer inntektene betydelig; mer enn 5% angrep i kaffeplantasjer anses generelt som den økonomiske terskelen.

CBB-kontroll er basert på en integrert strategi for skadedyrsbekjempelse (IPM), inkludert kulturell kontroll og agronomisk praksis, naturlige biologiske agenser og bruk av kjemiske insektmidler, som krever sikkerhetsforhold og rettidig anvendelse4.

For å evaluere nye insektmidler for kontroll av CBB, er det nødvendig med rimelige metoder som gjør det mulig å oppnå raske resultater. Både laboratorie- og feltprosedyrer er for tiden i bruk, inkludert kunstige dietter som inneholder kaffe der insekticidene er innlemmet 5,6, eller sprøyting av insektmidler på tørr pergamentkaffe 7,8,9. I tillegg er det rapportert forsøk utført i felt med kaffetregrener dekket med entomologiske ermer10,11; Disse metodene krever imidlertid intens arbeidskraft og lange evalueringsperioder.

En tilstand som ligner naturlige feltforhold, som også er rask og billig, er bruken av grønne eller modne kaffefrukter. Imidlertid må disse fruktene opprettholdes under forhold som er egnet for å utvikle CBB, unngå endringer og forurensninger av mikroorganismer for å opprettholde kvaliteten og egenskapene. Til dette formål har forskjellige desinfeksjonsmidler blitt brukt, samt prosedyrer som involverer varme og stråling 7,9,12,13,14,15,16.

I tillegg krever metodene for insektmiddelevaluering mot CBB simuleringer av voksne kvinner som flyr på jakt etter frukt eller penetrerer disse fruktene17,18. For dette har kunstige fruktangrep blitt utført i feltet 8,11,19, selv om denne prosessen er arbeidsintensiv og avhenger av miljøforhold.

Her beskriver vi en standardisert metodikk for evaluering av produkter som kan ha ulike effekter på CBB under kontrollerte miljøforhold som ligner feltforhold.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

MERK: Denne protokollen tar for seg forskjellige metoder for å identifisere forskjellige effekter på CBB under laboratorieforhold.

1. Frukt samling

  1. Velg GFs med en utviklingsalder på ~ 120-150 dager etter blomstring fra trær i en kaffeplantasje tidlig om morgenen.

2. Frukt desinfeksjon20

  1. Ta med rundt 300 GFer til laboratoriet. Velg jevnt størrelse og sunn GFs og trekk peduncles.
  2. Dypp GF-ene i en såpeoppløsning (2 ml flytende oppvaskmiddel i 998 ml vann fra springen), etterfulgt av gnidning for å vaske GF-ene. Skyll deretter fruktene med vann, bytt vannet tre ganger.
  3. Senk GFs i 0,5% natriumhypoklorittløsning (100 ml i 900 ml vann fra springen) og rør inn en shaker ved 110 o / min i 15 minutter. Skyll deretter GF-ene med vann ved å røre inn en shaker og skifte vann tre ganger, hvert 10. minutt.
  4. Tørk GF-ene med sterile papirhåndklær.
  5. Plasser GF-ene i skuffer (33 cm x 25 cm x 2 cm) og bestråle dem i 15 minutter, og plasser GF-ene i en avstand på 55 cm fra UV-kilden inne i en UV-aktivert horisontal laminær strømningsstasjon.
  6. I løpet av 15 min perioden, hvert 5. minutt, flytt GF-ene for å sikre bestråling av hele frukten.

3. Insekt desinfeksjon21

  1. Bruk nylig oppståtte (samme dag) CBB-insekter for å sette opp bioassays.
  2. Senk CBB-ene i 0,5% natriumhypoklorittløsning, og omrør dem sakte med en børste i 10 minutter.
  3. Filtrer CBB-ene gjennom en musselinduk og vask dem tre ganger med sterilt destillert vann.
  4. Fjern overflødig vann med sterile papirhåndklær.

4. Evaluering av et produkt med en beskyttende effekt på fruktene (preinfestation) (figur 1)

  1. Bruk en gruppe GFer per eksperimentell enhet. Vanligvis brukes en gruppe på 30 GFs per eksperimentell enhet.
  2. Plasser GF-ene i plastbokser (eksperimentell enhet).
  3. Påfør testproduktet ved de forskjellige konsentrasjonene for evaluering. Utfør påføringen med en bærbar sprøytenhet. Her ble en alkaloidemulsjon på 5% og 6% testet.
  4. Som en kontroll, spray en gruppe GFs med vann.
  5. Bruk minst tre repetisjoner (eksperimentell enhet) per behandling, spray etter hverandre.
  6. I en steril hette slipper du to CBB-voksne per GFs (totalt 60 CBB-er blir introdusert i plastboksene). Etter 30 min, dekk boksene.
  7. La plastboksene stå sammen med de infiserte GF-ene i et rom eller en inkubator under kontrollerte forhold (mørkt, 25 ± 2 °C og relativ fuktighet 71 % ± 5 %).
  8. Etter 1, 7, 15 og 21 dager teller du antall borerfrukter og levende og døde insekter utenfor fruktene i hver boks.
  9. Ved 20 dager etter angrep, dissekere hver GF under et stereomikroskop, forstørrelse 10x.
  10. Tell antall sunne frø eller frø som er skadet av insekter i hver frukt.
  11. Telle de forskjellige CBB biologiske stadiene22 observert og telle antall døde insekter i hvert frø for å bestemme insektdødelighet per eksperimentell enhet.

5. Evaluering av effekten av et produkt etter CBB-angrep (postinfestation) (figur 3)

  1. Bruk grupper på 200 frukter per behandling.
  2. I asteril hette, slipp CBB voksne (2: 1 forholdet mellom CBB voksne til GFs) til de tidligere desinfiserte GFs, slik at angrepet kan fortsette i 3 timer ved 21 ° C.
  3. Undersøk GF-ene. Etter 3 timer skal de fleste være infisert, med magen til CBBene fortsatt eksponert (posisjon A20), som vist i figur 2.
  4. Velg 46 infiserte GFer (posisjon A) og plasser dem i 96-brønns plaststativ (eksperimentell enhet). Fruktene bør forbli i denne posisjonen slik at behandlingen kan sprøytes direkte på CBB som perforerer frukten.
  5. Spray minst tre ganger (tre stativer) per behandling, den ene etter den andre, som dekker stativene etter 30 minutter.
  6. La stativene stå sammen med de infiserte GF-ene i et rom eller en inkubator under kontrollerte forhold (mørkt, 25 ± 2 °C og relativ fuktighet 71 % ± 5 %).
  7. Etter 20 dager dissekerer du GF-ene under et stereomikroskop ved 10x forstørrelse.
  8. Tell antall sunne frø eller frø som er skadet av insekter i hver frukt.
  9. Tell de forskjellige CBB biologiske stadiene22 og antall døde insekter i hvert frø for å bestemme insektdødeligheten per eksperimentell enhet.

6. Evaluering av et produkt med avskrekkende effekt på CBB

  1. Følg trinnene 4.1-4.6 som er skissert for å evaluere et produkt med en beskyttende effekt på fruktene.
  2. Etter å ha sluppet CBB-voksne i plastboksene, teller du antall CBBer som flyr bort fra boksene og antallet som angriper GF-ene. Følg deretter trinn 4.7-4.11.
  3. Følg trinnene 5.1-5.5 som er skissert for å evaluere produktet etter CBB-angrepet.
  4. Etter å ha sprøytet hver behandling på insekter i posisjon A, teller antall CBBer som flyttet ut av GF og / eller fløy bort fra GF. Følg deretter trinn 5.6-5.9.

7. Statistisk analyse

MERK: Responsvariablene er dødelighetsprosenter over tid og prosentandelen friske uinfiserte kaffefrø.

  1. Estimer gjennomsnitt og standardavvik for hver responsvariabel for hver behandling.
  2. Utfør variansanalyse for hver responsvariabel med en modell for et helt randomisert design.
    MERK: Dunnetts 5% sammenligningstest utføres for å sammenligne behandlingene mot den absolutte kontrollen (vannkontroll).
  3. Når behandlingene er vesentlig forskjellig fra den absolutte kontrollen, bruk en 5% minst signifikant forskjell (LSD) test for å sammenligne behandlingene.
  4. Evaluer kraften i testen; hvis større enn 85%, er forutsetningene for normalitet og homogenitet av variansene oppfylt.

Figure 1
Figur 1: Prosedyre for evaluering av preinfestation effekter av insektmidler på CBB. Trinn for å evaluere preinfestation effekter av insektmidler på Hypothenemus hampei (CBB) ved hjelp av grønne frukter (GFs). (A) Valg av frukt. (B) Sprøyting av insektmidler på kaffefruktene. (C) CBB-angrep av kaffefrukter i forholdet 2: 1 CBB per GF. (D) Infiserte frukter. (E) Inkubasjon av fruktene under kontrollerte forhold. (F) Frukt disseksjon. (G) Telling av CBB-populasjonen inne i frøene. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 2
Figur 2: Behandle kaffefrukters CBB-angrep. De infiserte fruktene inneholder CBB-voksne med magen delvis eksponert (posisjon A). Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 3
Figur 3: Prosedyre for evaluering av posinfestation effekter av insektmidler på CBB. Trinn for å evaluere postinfestation effekter av insektmidler på CBB ved hjelp av GFs. (A) Frukt utvalg. (B) Angrep av fruktene med CBB i forholdet 2: 1 CBB per GF. (C) Utvalg av infiserte frukter. (D) Sprøyting av insektmiddelet på fruktene. (E) Inkubasjon av fruktene. (F) Frukt disseksjon. (G) Telling av CBB-populasjonen. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Resultatene viste at CBB-hunnene gjenkjente fruktene, og avhengig av egenskapene til fruktoverflaten og den utstrålede lukten, begynte CBB-hunnene å trenge inn eller kjede fruktene innen 3 timer ved 21 °C.

Effekten av et insektmiddel på CBB når det påføres kaffefruktene (preinfestasjonsprosedyre) etter 24 timer og over tid er vist i figur 4. De to insekticidene (alkaloidemulsjon på 5% og 6%) forårsaket høy insektdødelighet på dag 20 (tabell 1) og viste signifikante forskjeller sammenlignet med vannets absolutte kontroll (P < 0,001), ifølge LSD-testen. Når det gjelder prosentandelen av uinfiserte friske frø (tabell 1), var det også forskjeller mellom kontroll- og insekticidgruppene i henhold til Dunnetts test ved 5% (P < 0,001). I kontrollgruppen ble 37% av frøene ikke infisert, mens insekticidapplikasjon beskyttet frøene, med 94% av frøene igjen sunne ved bruk av insektmiddel 2 og 89% med insektmiddel 1.

Figure 4
Figur 4: Preinfestasjonseffekter av insektmidler i kontroll vs. to insekticidgrupper. Preinfestation effekter av insektmidler. Prosent dødelighetav voksen H. hampei evaluert på dagene 1, 7, 15 og 21 etter angrep. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Behandling Eksperimentell enhet Dødelighet (%) Sunt frø (%)
Gjennomsnitt Sd Gjennomsnitt Sd
Kontroll (vann) 5 12.4 8.3 37 6.3
Insektmiddel 1 5 83.9 *b 3.9 89 *b 6
Insektmiddel 2 5 94.2 * En 3.2 94.2 * En 3.7
* For hver variabel, forskjeller med hensyn til kontroll (vann) i henhold til Dunnetts test på 5%.

Tabell 1: Effekt av preinfestasjonsbehandling på CBB. Prosent dødelighet og prosenthelsefrø etter 20 dager. * For hver variabel, forskjeller med hensyn til kontroll (vann) i henhold til Dunnetts test på 5%.

Preinfestasjonsresultatene etter 21 dager er vist i tabell 1, og resultatene over tid tilsvarer figur 4. I dette tilfellet ble kaffefruktene dekket med et giftig stoff som forårsaker insektdødelighet. Insektene blir impregnert når de går over fruktene, smaker fruktene med palpene eller begynner å tygge epidermis av fruktene. I tillegg kan stoffene som påføres over fruktoverflaten endre eller endre den naturlige lukten av frukten, slik at CBB-individer kan stoppe angrepsprosessen, enten flyr bort eller foretrekker å bli skilt fra frukten uten å berøre den eller angripe den. Avhengig av virkningstidspunktet for produktet, kan insektdødelighet eller unngå angrepsadferd vedvare i 24 timer eller lenger.

På den annen side, hvis produktene påføres etter at insektene begynner å kjede fruktene (postinfestation), kan produktene trenge inn i insektskutikulaen og forårsake insektdødelighet (tabell 2 og figur 5). Den høyeste dødeligheten skjedde med insektmiddel 2 (P < 0,01). Hvis dødeligheten skjer raskt, vil insektet dø før det kommer inn i frøet, og ingen egg- eller insektpopulasjon vil bli funnet inne i frøene.

Figure 5
Figur 5: Postinfestation effekter av insektmidler. Prosent dødelighet av voksen H. hampei evaluert på dagene 1, 7, 15 og 21 etter angrep. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Behandling Eksperimentell enhet Dødelighet (%) Sunt frø (%)
Gjennomsnitt Sd Gjennomsnitt Sd
Kontroll (vann) 5 11.1 3.0 57.3 3. 9
Insektmiddel 1 5 46.8 *b 6.6 79.2 *b 8.6
Insektmiddel 2 5 77.8 * En 3.7 90.0 * En 2.9
* For hver variabel, forskjeller med hensyn til kontroll (vann) i henhold til Dunnetts test på 5%.

Tabell 2: Effekter av postinfestasjonsbehandling på CBB. Prosent dødelighet og prosent sunne frø etter 20 dager. * For hver variabel, forskjeller med hensyn til kontroll (vann) i henhold til Dunnetts test på 5%. For hver variabel indikerer forskjellige bokstaver forskjeller i henhold til LSD 5%.

Effekten av insekticidene gjenspeiles som prosentandelen av friske, ikke-infiserte frø på evalueringsdagen 20 (tabell 2). På grunn av høy insektdødelighet trengte insektet ikke inn i kaffefrøene og skadet dem. Påføring av produktene beskyttet mellom 79% -90% av kaffefrøene, og viste forskjeller med hensyn til kontrollen, hvor 57% av frøene ble funnet å være sunne (P < 0,01). Det ble også observert signifikante forskjeller mellom de to insekticidene (P < 0,01).

I noen tilfeller døde insektene veldig raskt, selv før de forårsaket skade på frøet. Men hvis insektets død tok lengre tid, kunne insektet nå frøet og sette inn noen egg, og senere vil den voksne dø. I dette tilfellet ble det funnet en redusert insektpopulasjon inne i kaffefrøene sammenlignet med insektpopulasjonen som ble funnet i kontrollgruppen sprayet med vann (tabell 3).

Behandlinger Total gjennomsnittlig insektpopulasjon / frø * Duncan gruppering (alfa = 00,05)
Kontroll 5 en
Entomopatogen 2.5 b
Avstøtende substans 3.27 b
Entomopatogen + avstøtende middel 1.5 c
For hver variabel indikerer forskjellige bokstaver forskjeller i henhold til LSD 5%.

Tabell 3: Postinfestasjonseffekter etter behandling med entomopatogensopp og et avstøtende stoff. Insektpopulasjon inne i frøene. GFs ble dissekert etter 15 dager. * For hver variabel, forskjeller med hensyn til kontroll (vann) i henhold til Dunnetts test på 5%. For hver variabel indikerer forskjellige bokstaver forskjeller i henhold til LSD 5%.

Figur 6 viser effekten av et produkt med postinfestasjonseffekter, et entomopatogen og et avstøtende stoff, samt deres kombinerte virkning.

Figure 6
Figur 6: Postinfestasjonseffekter av en entomopatogen sopp og et avstøtende stoff. Prosent dødelighet av voksen H. hampei og frøskader. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Disse metodene tillater rask bestemmelse av forskjellige effekter av giftige produkter på CBB.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

I denne protokollen er desinfeksjon av fruktene så vel som insektene kritiske trinn. Når frukt fra åkeren brukes i laboratoriet, viser de ofte høy forurensning og dehydrering siden mikroorganismer og midd er tilstede i epidermis 7,15,16. Derfor vil bruk av frukt eller insekter som ikke desinfiseres føre til insektdød på grunn av forurensning forårsaket av mikroorganismer, som bakterier eller sopp, og dermed forstyrre bioassay-resultatene. Tidligere evaluerte Tapias et al.20 andre antimikrobielle midler for fruktdesinfeksjon, som karbendazim og benzalkoniumklorid; Men selv om frukt desinfeksjon var bra, var disse forbindelsene svært giftige for CBB eller miljøet.

Bruken av 0,5% natriumhypokloritt ble evaluert ved å dyppe fruktene i løsningen i 30 minutter og 15 minutter. Etter begge lengder ble mikroorganismer påvirket, men CBB ble også påvirket etter 30 minutters dypping på grunn av oksidasjonskraften til løsningen23. UV-lys forårsaker skade på mikroorganismer DNA24, og reduserer forurensning. Ved høyere doser (lengre eksponeringstid) oppstår imidlertid fruktskader som forårsaker nekrose og frødehydrering. Desinfeksjon med 0,5% natriumhypokloritt i 15 minutter etterfulgt av UV-lyseksponering i 15 minutter ble funnet å være optimal i denne prosedyren.

Det andre hensynet er insektkvalitet. For denne studien ble insektene levert av en insektoppdrettsenhet kalt BIOCAFE25 (http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html). Svake eller innavlede insekter fra dårlige insektkolonier vil overvurdere resultatene av et giftig produkt. Videre vil laboratorieadferden i dette tilfellet ikke svare til feltobservasjonene av villtype insekter med høy kondisjon. I tillegg kan slike insekter inneholde et stort antall mikroorganismer som kan forstyrre bioassay. Derfor er desinfeksjon21 et viktig skritt for å sikre at metodikken lykkes.

Med hensyn til angrep (to insekter til en frukt) ble det tidligere bestemt at bruk av en større mengde insekter ville øke antall kaffefrukter med mer enn ett insektperforering, noe som gjorde analysen vanskeligere20. I tillegg er temperaturen der forsøkene utføres viktig for å skaffe frukt med insekter i posisjon A eller oppnå en normal insektpenetrasjon når fruktene sprøytes. Ved å bruke en temperatur på 21 °C i 3 timer kunne mer enn 70 % av fruktene infiseres. Når temperaturen økte til mellom 25-27 °C, nådde de fleste insektene posisjon B på kortere tid enn ved 21 °C. Den raskere penetrasjonen av CBB i frukten er en konsekvens av insektets større aktivitet på grunn av temperaturøkning26. Ulempen med å bruke en temperatur på 25 °C over lengre tid er altså at man finner mange frukter med mer enn én perforering, og med insekter i både A- og B-posisjoner.

Før utviklingen av denne metoden ble kunstige insektdietter med malt kaffe brukt til å evaluere effekten av giftige stoffer ved å inkorporere stoffet i eller over dietten 5,6; Imidlertid er disse diettene dyre på grunn av deres spesielle komponenter27,28. Pergamentkaffe har også blitt brukt til insektmiddelevaluering, hvor kaffebønnene drysses med eller dyppes i stoffet som skal evalueres. Siden strukturen og sammensetningen av pergamentet er forskjellig fra fruktens perikarp, forventes det at samspillet mellom insektmiddelet og kaffen er forskjellig. Med pergamentkaffe kan insektmiddelmolekylet lett absorberes, og dermed generere større dødelighet enn det som observeres under naturlige forhold. I tillegg er pergamentkaffe relativt dyrere siden den må fjernes fra fruktmassen og deretter tørkes. Dessuten er det ikke det naturlige substratet for insektvekst.

Avslutningsvis er bruk av ekte grønn kaffe med næringsstoffer som er tilstrekkelig for insektvekst, den mest hensiktsmessige måten å evaluere giftigheten av forbindelser til insekter under simulerte naturlige forhold.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Ingen av forfatterne har noen interessekonflikter å oppgi.

Acknowledgments

Forfatterne uttrykker sin takk til National Federation of Coffee Growers of Colombia, assistentene ved Institutt for entomologi (Diana Marcela Giraldo, Gloria Patricia Naranjo), Eksperimentstasjonen Naranjal og Jhon Félix Trejos.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Beaker with spout, low form 500 mL BRAND PP BR87826
Benchtop Shaker New Brunswick Scientific Innova 4000 Incubator Shaker
Dishwashing liquid soap-AXION Colgate-Palmolive AXION
Hood; Horizontal Laminar Flow Station Terra Universal  Powder-Coated Steel, 1930 mm W x 1118 mm D x 1619 mm H, 120 V (https://www.terrauniversal.com/hood-horizontal-laminar-flow-station-9620-64a.html)
Insects CBB BIOCAFE (http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html).
Multi Fold White paper towels Familia 73551
Preval Spray unit  Preval Merck Z365556-1KT https://www.sigmaaldrich.com/CO/es/product/sigma/z365556?gclid=Cj0KCQiAweaNBhDEARIsAJ
5hwbfZOy1TWGj6huatFtRQt
AzOyHe5-oBiKnOUK2T1exuuk
WwJLdvxkvsaAjoYEALw_wcB
Reversible Racks 96-Well heathrowscientific HEA2345A https://www.heathrowscientific.com/reversible-racks-96-well-i-hea2345a
Scalpel blades N 11 Merck S2771-100EA
Scalpel handles N3 Merck S2896-1EA
Sodium Hypochloride The clorox company Clorox
Stereo Microscope Zeiss Stemi 508 https://www.zeiss.com/microscopy/int/products/stereo-zoom-microscopes/stemi-508.html

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Mendesil, E., et al. Semiochemicals used in host location by the coffee berry borer, Hypothenemus hampei. Journal of Chemical Ecology. 35 (8), 944-950 (2009).
  2. Jaramillo, J., et al. Coffee berry borer joins bark beetles in coffee klatch. PLoS ONE. 8 (9), 74277 (2013).
  3. Giraldo-Jaramillo, M., Garcia, A. G., Parra, J. R. Biology, thermal requirements, and estimation of the number of generations of Hypothenemus hampei (Ferrari, 1867) (Coleoptera: Curculionidae) in the state of São Paulo, Brazil. Journal of Economic Entomology. 111 (5), 2192-2200 (2018).
  4. Benavides, P., Góngora, C., Bustillo, A. IPM Program to Control Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei, with Emphasis on Highly Pathogenic Mixed Strains of Beauveria bassiana, to Overcome Insecticide Resistance in Colombia. IntechOpen. , (2012).
  5. Martínez, C. P., Echeverri, C., Florez, J. C., Gaitan, A. L., Góngora, C. E. In vitro production of two chitinolytic proteins with an inhibiting effect on the insect coffee berry borer, Hypothenemus hampei (Ferrari) (Coleoptera: Curculionidae) and the fungus Hemileia vastatrix the most limiting pests of coffee crops. AMB Express. 2, 1-11 (2012).
  6. Padilla, B. E., Acuña, Z., Velásquez, C. S., Rubio, G. J. D. Inhibitors of [alpha]-amylases from the coffee berry borer Hypothenemus hampei in different plant species. Revista Colombiana de Entomología. 32 (2), 125-130 (2006).
  7. Alvarez, J. H., Cortina, H. A., Villegas, J. F. Methods to evaluate antibiosis to Hypothenemus hampei Ferrari in coffee under controlled conditions. Cenicafé. 52 (3), 205-214 (2001).
  8. Arcila, A., Duarte, A. F., Villalba, D. A., Benavides, P. New Product in the Integrated Management of the Coffee Berry Borer in Colombia. National Coffee Research Center (Cenicafé). , Available from: https://biblioteca.cenicafe.org/handle/10778/477 (2014).
  9. Jaramillo, J., Montoya, E., Benavides, P., Góngora, C. Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae for the control of coffee brocade in fruits on the ground. Revista Colombiana de Entomología. 41, 95-104 (2015).
  10. Bastidas, A., Velásquez, E., Benavides, P., Bustillo, A., Orozco, C. Evaluation of preformulated Beauveria bassiana (Bálsam) Vuillemin, for the control of the coffee berry borer. Agronomia. 17, 44-61 (2009).
  11. Villalba-Gault, D., Bustillo, A., Chaves Cordoba, B. Evaluation of insecticides for the control of the coffee berry borer in Colombia. Cenicafe. 46, 152-163 (1995).
  12. Bustillo, A. E., Orozco, J., Benavides, P., Portilla, M. Mass production and use of parasitoids for the control of the coffee berry borer in Colombia. Cenicafe. 47 (4), 215-230 (1996).
  13. Celestino, F. N., Pratissoli, D., Machado, L. C., Santos Junior, H. J. G. D., Mardgan, L., Ribeiro, L. V. Adaptation of breeding techniques of the coffee berry borer [Hypothenemus hampei (Ferrari). Coffee Science. 11 (2), 161-168 (2016).
  14. Domínguez, L., Parzanese, M. Ultraviolet light in food preservation. Argentine Foods. 52 (2), 70-76 (2012).
  15. Jaramillo, J., Chabi-Olaye, A., Poehling, H. M., Kamonjo, C., Borgemeister, C. Development of an improved laboratory production technique for the coffee berry borer Hypothenemus hampei, using fresh coffee berries. Entomologia Experimentalis et Applicata. 130 (3), 275-281 (2009).
  16. Pérez, J., Infante, F., Vega, F. E. Does the coffee berry borer (Coleoptera: Scolytidae) have mutualistic fungi. Annals of the Entomological Society of America. 98 (4), 483-490 (2005).
  17. Benavides, P., Gil, P., Góngora, C., Arcila, A. Integrated pest management. Cenicafe. Manual of the Colombian coffee grower: Research and technology for the sustainability of coffee growing. Manizales: FNC: Cenicafé. 3, 179-214 (2013).
  18. Bustillo, P. A review of the coffee berry borer, Hypothenemus hampei (Coleoptera: Curculionidae: Scolytinae), in Colombia. Revista Colombiana de Entomología. 32 (2), 101-116 (2006).
  19. Arcila, A., Benavides, P., Mejia, J. New Chemical Control Alternative for the Integrated Management of the Coffee Berry Borer. National Coffee Research Center (Cenicafé). , Available from: https://biblioteca.cenicafe.org/handle/10778/557 (2015).
  20. Tapias, L., Martinez, C., Benavides, P., Gongora, C. Laboratory method to evaluate the effect of insecticides on the coffee berry borer. Cenicafé. 68 (2), 76-89 (2017).
  21. Bustillo, A. E., Marín, P. How to reactivate the virulence of Beauveria bassiana to control the coffee berry borer. Manejo Integrado de Plagas. 63, (2002).
  22. Constantino, L. M., et al. morphological and genetic aspects of Hypothenemus obscurus and Hypothenemus hampei (Coleoptera: Curculionidae: Scolytinae). Revista Colombiana de Entomología. 37 (2), 173-182 (2011).
  23. Estrela, C., et al. Mechanism of action of sodium hypochlorite. Brazilian Dental Journal. 13 (2), 113-117 (2002).
  24. Diffey, B. L. Solar ultraviolet radiation effects on biological systems. Physics in Medicine and Biology. 36 (3), 299-328 (1991).
  25. BIOCAFE. , Available from: http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html (2022).
  26. Bustillo, A. E., et al. Integrated Management of the Coffee Berry Borer: Hypothenemus hampei Ferrari in Colombia. , Available from: https://biblioteca.cenicafe.org/hangle/10778/848 (1998).
  27. Portilla, R. Development and evaluation of an artificial diet for the rearing of Hypothenemus hampei. Cenicafé. 50, 24-38 (1999).
  28. Portilla, R. M., Streett, D. A. New techniques for automated mass production of Hypothenemus hampei on the modified Cenibroca artificial diet. Cenicafé. 57, 37-50 (2006).

Tags

Miljøvitenskap utgave 181 Kaffe insektmidler dødelighet avstøtning utviklingsstadier
Metodikk for å teste kontrollmidler og insektmidler mot coffee berry borer <em>hypothenemus hampei</em>
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Góngora, C. E., Tapias, J.,… More

Góngora, C. E., Tapias, J., Martínez, C. P., Benavides, P. Methodology to Test Control Agents and Insecticides Against the Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei. J. Vis. Exp. (181), e63694, doi:10.3791/63694 (2022).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter