Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Environment
Click here for the English version

Environment

Metode til test af kontrolmidler og insekticider mod kaffebærboreren Hypothenemus hampei

Published: March 23, 2022 doi: 10.3791/63694
Automatic Translation
1, 1, 1, 1
1Department of Entomology, National Coffee Research Center

Summary

En metode ved hjælp af grønne kaffefrugter (GF'er) blev udviklet til at teste toksiciteten af insekticider mod kaffebærboreren (CBB). Insekticider eller giftige stoffer blev anvendt på desinficerede GF'er før eller efter CBB-angreb. Insektdødelighed, frastødning og reproduktionsevne ud over andre parametre blev evalueret.

Abstract

Før man anbefaler insekticider til behandling af kaffebærboreren (CBB) Hypothenemus hampei, er det værdifuldt at kende dødeligheden og afstødningen af disse insekticider mod voksne insekter eller deres indvirkning på reproduktionsproduktionen. Imidlertid vurderer de nuværende tilgængelige metoder kun voksendødelighed, hvilket begrænser udvælgelsen af nye insekticider med en anden virkningsmekanisme. I dette arbejde blev forskellige eksperimentelle metoder undersøgt for at identificere de forskellige virkninger på CBB under laboratorieforhold. Til dette blev grønne kaffefrugter (GF'er) opsamlet og desinficeret ved nedsænkning i natriumhypochloritopløsning efterfulgt af UV-lysbestråling. Parallelt blev CBB voksne fra en koloni desinficeret ved nedsænkning i natriumhypochloritopløsning. For at vurdere frugtbeskyttelse (forangreb) blev frugterne anbragt i plastkasser, og insekticiderne blev anvendt. Derefter blev CBB-voksne frigivet med en hastighed på to CBB'er pr. GF. GF'erne blev efterladt under kontrollerede forhold for at evaluere CBB-angreb og overlevelse efter 1, 7, 15 og 21 dage. For at evaluere insekticideffektiviteten efter CBB-angreb (postinfestation) blev CBB-voksne frigivet til GF'erne i forholdet 2: 1 i 3 timer ved 21 ° C. Inficerede frugter, der viser CBB-voksne med deres underliv delvist udsatte, blev udvalgt og anbragt i 96-brøndstativer, og CBB'erne, der borede sig ind i frugterne, blev behandlet direkte. Efter 20 dage blev frugterne dissekeret, og CBB biologiske stadier inde i hver frugt blev registreret. GF'erne fungerede som substrater, der efterligner naturlige forhold for at evaluere giftige, kemiske og biologiske insekticider mod CBB.

Introduction

Kaffebærboreren (CBB), Hypothenemus hampei, blev først opdaget i 1988 i Colombia og er siden blevet den vigtigste skadedyrsart af kaffeafgrøden. CBB-hunner forlader fødselsfrugten allerede befrugtet og søger nye frugter styret af de flygtige kemikalier, som de udsender 1,2. En komplet cyklus er opfyldt inden for 23 dage3 ved en temperatur på 25 °C. Cyklussen starter med, at grundlæggerkvinden trænger ind i frøet og lægger æg i frugtens endosperm. De lukkede larver spiser frøet. Hvis frugterne dissekeres på dette tidspunkt, ville det være muligt at observere både grundlæggerkvinden og hendes afkom. Efter 14 dage bliver larverne pupper - generelt varer puppestadiet 5 dage. I voksenstadiet kopulerer hunnerne med deres søskende, og de nyligt befrugtede hunner flyver væk fra de beskadigede frugter på udkig efter nye kaffefrugter for at starte en ny cyklus4.

Både penetrationsprocessen og resultatet af larvefodring beskadiger kaffefrøet, hvilket reducerer kaffedrikkens kvalitet og reducerer indtægterne betydeligt; mere end 5% angreb i kaffeplantager betragtes generelt som den økonomiske tærskel.

CBB-bekæmpelse er baseret på en integreret strategi for bekæmpelse af skadegørere (IPM), herunder kulturel bekæmpelse og agronomisk praksis, naturlige biologiske agenser og anvendelse af kemiske insekticider, hvilket kræver sikkerhedsforhold og rettidig anvendelse4.

For at evaluere nye insekticider til bekæmpelse af CBB er der behov for billige metoder, der gør det muligt at opnå hurtige resultater. Både laboratorie- og feltprocedurer er i øjeblikket i brug, herunder kunstige diæter indeholdende kaffe, hvor insekticiderne er inkorporeret 5,6, eller sprøjtning af insekticiderne på tør pergamentkaffe 7,8,9. Derudover er der rapporteret om eksperimenter udført i marken ved hjælp af kaffetrægrene dækket med entomologiske ærmer10,11; disse metoder kræver imidlertid intens arbejdskraft og lange evalueringsperioder.

En tilstand, der ligner naturlige markforhold, der også er hurtig og billig, er brugen af grønne eller modne kaffefrugter. Disse frugter skal dog opretholdes under forhold, der er egnede til udvikling af CBB, idet man undgår ændringer og forurenende stoffer fra mikroorganismer for at opretholde deres kvalitet og egenskaber. Til dette formål er der anvendt forskellige desinfektionsmidler samt procedurer, der involverer varme og stråling 7,9,12,13,14,15,16.

Derudover kræver metoderne til insekticidevaluering mod CBB simuleringer af voksne kvinder, der flyver på jagt efter frugter eller trænger ind i disse frugter17,18. Til dette er der udført kunstige frugtangreb i marken 8,11,19, selvom denne proces er arbejdskrævende og afhænger af miljøforholdene.

Her beskriver vi en standardiseret metode til evaluering af produkter, der kan have forskellige virkninger på CBB under kontrollerede miljøforhold, der ligner feltforhold.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

BEMÆRK: Denne protokol omhandler forskellige metoder til at identificere forskellige virkninger på CBB under laboratorieforhold.

1. Indsamling af frugt

  1. Vælg GF'er med en udviklingsalder på ~ 120-150 dage efter blomstring fra træer i en kaffeplantage tidligt om morgenen.

2. Desinfektion af frugt20

  1. Tag omkring 300 GF'er med til laboratoriet. Vælg ensartet størrelse og sunde GF'er og træk peduncles.
  2. Dyp GF'erne i en sæbeopløsning (2 ml flydende opvaskemiddel i 998 ml ledningsvand) efterfulgt af gnidning for at vaske GF'erne. Skyl derefter frugterne med vand, skift vandet tre gange.
  3. GFs nedsænkes i 0,5% natriumhypochloritopløsning (100 ml i 900 ml ledningsvand) og omrøres en ryster ved 110 o / min i 15 minutter. Skyl derefter GF'erne med vand ved at røre i en ryster og skifte vandet tre gange hvert 10. minut.
  4. Tør GF'erne med sterile papirhåndklæder.
  5. Placer GF'erne i bakker (33 cm x 25 cm x 2 cm) og bestråle dem i 15 minutter, og placer GF'erne i en afstand af 55 cm fra UV-kilden inde i en UV-aktiveret vandret laminær flowstation.
  6. I løbet af 15 minutters perioden, hvert 5. minut, skal du flytte GF'erne for at sikre bestråling af hele frugten.

3. Desinfektion af insekter21

  1. Brug nyligt fremkomne (samme dag) CBB-insekter til at opsætte bioassays.
  2. Dyp CBB'erne i 0,5% natriumhypochloritopløsning, og agitér dem langsomt med en børste i 10 minutter.
  3. Cbb'erne filtreres gennem en muslinklud og vaskes tre gange med sterilt destilleret vand.
  4. Fjern overskydende vand med sterile papirhåndklæder.

4. Evaluering af et produkt med en beskyttende virkning på frugterne (forangreb) (figur 1)

  1. Brug en gruppe GF'er pr. eksperimentel enhed. Generelt anvendes en gruppe på 30 GF'er pr. Eksperimentel enhed.
  2. Placer GF'erne i plastkasser (eksperimentel enhed).
  3. Forsøgsproduktet anvendes i de forskellige koncentrationer til evaluering. Udfør applikationen med en bærbar sprøjteenhed. Her blev en alkaloidemulsion på 5% og 6% testet.
  4. Som en kontrol sprøjtes en gruppe GF'er med vand.
  5. Brug mindst tre gentagelser (eksperimentel enhed) pr. behandling, og sprøjt den ene efter den anden.
  6. I en steril hætte frigives to CBB-voksne pr. GF'er (i alt 60 CBB'er indføres i plastkasserne). Efter 30 min skal du dække kasserne.
  7. Efterlad plastkasserne med de angrebne GF'er i et rum eller inkubator under kontrollerede forhold (mørke, 25 ± 2 ° C og relativ luftfugtighed 71% ± 5%).
  8. Efter 1, 7, 15 og 21 dage skal du tælle antallet af borefrugter og levende og døde insekter uden for frugterne i hver kasse.
  9. Ved 20 dage efter angreb dissekeres hver GF under et stereomikroskop, forstørrelse 10x.
  10. Tæl antallet af sunde frø eller frø, der er beskadiget af insekterne i hver frugt.
  11. Tæl de forskellige observerede CBB biologiske stadier22 , og tæl antallet af døde insekter i hvert frø for at bestemme insektdødeligheden pr. Forsøgsenhed.

5. Evaluering af effekten af et produkt efter CBB-angreb (postinfestation) (figur 3)

  1. Brug grupper på 200 frugter pr. Behandling.
  2. I asterilhætte frigives CBB-voksne (2:1-forholdet mellem CBB-voksne og GF'er) til de tidligere desinficerede GF'er, så angrebet kan fortsætte i 3 timer ved 21 °C.
  3. Undersøg GF'erne. Efter 3 timer skal de fleste være inficeret, med CBB'ernes mave stadig udsat (position A20), som vist i figur 2.
  4. Vælg 46 inficerede GF'er (position A) og placer dem i 96-brønd plaststativer (eksperimentel enhed). Frugterne skal forblive i denne position, så behandlingen kan sprøjtes direkte på CBB,der perforerer frugten.
  5. Spray mindst tre gange (tre stativer) pr. behandling, den ene efter den anden, og dæk stativerne efter 30 minutter.
  6. Efterlad stativerne med de inficerede GF'er i et rum eller inkubator under kontrollerede forhold (mørke, 25 ± 2 ° C og relativ luftfugtighed 71% ± 5%).
  7. Efter 20 dage dissekeres GF'erne under et stereomikroskop ved 10x forstørrelse.
  8. Tæl antallet af sunde frø eller frø, der er beskadiget af insekterne i hver frugt.
  9. Tæl de forskellige CBB biologiske stadier22 og antallet af døde insekter i hvert frø for at bestemme insektdødeligheden pr. Forsøgsenhed.

6. Vurdering af et produkt med afskrækkende virkning på CBB

  1. Følg trinene 4.1-4.6 skitseret til evaluering af et produkt med en beskyttende virkning på frugterne.
  2. Når du har frigivet CBB-voksne i plastkasserne, skal du tælle antallet af CBB'er, der flyver væk fra kasserne, og det antal, der angriber GF'erne. Følg derefter trin 4.7-4.11.
  3. Følg de trin 5.1-5.5, der er beskrevet for at evaluere produktet efter CBB-angrebet.
  4. Efter sprøjtning af hver behandling på insekterne i position A skal du tælle antallet af CBB'er, der flyttede ud af GF og / eller fløj væk fra GF. Følg derefter trin 5.6-5.9.

7. Statistisk analyse

BEMÆRK: Responsvariablerne er dødelighedsprocenter over tid og procentdelen af sunde uinficerede kaffefrø.

  1. Anestimer gennemsnits- og standardafvigelsen for hver responsvariabel for hver behandling.
  2. Udfør variansanalyse for hver responsvariabel med en model for et fuldstændigt randomiseret design.
    BEMÆRK: Dunnetts 5% sammenligningstest udføres for at sammenligne behandlingerne med den absolutte kontrol (vandkontrol).
  3. Når behandlingerne er signifikant forskellige fra den absolutte kontrol, skal du bruge en 5% mindst signifikant forskel (LSD) test til at sammenligne behandlingerne.
  4. Evaluer testens kraft; hvis større end 85%, er antagelserne om normalitet og homogenitet af varianserne opfyldt.

Figure 1
Figur 1: Procedure for evaluering af insekticiders præinfektionsvirkninger på CBB. Skridt til evaluering af insekticiders præinfektionseffekter på Hypothenemus hampei (CBB) ved hjælp af grønne frugter (GF'er). (A) Valg af frugt. (B) Sprøjtning af insekticiderne på kaffefrugterne. (C) CBB-angreb af kaffefrugter i forholdet 2:1 CBB pr. GF. d) Angrebne frugter. (E) Inkubation af frugterne under kontrollerede forhold. (F) Dissektion af frugt. (G) Optælling af CBB-populationen inde i frøene. Klik her for at se en større version af denne figur.

Figure 2
Figur 2: Behandl kaffefrugters CBB-angreb. De angrebne frugter indeholder CBB-voksne med deres underliv delvist udsat (position A). Klik her for at se en større version af denne figur.

Figure 3
Figur 3: Procedure for vurdering af insekticiders mulige angrebsvirkninger på CBB. Trin til evaluering af insekticiders postinficerende virkninger på CBB ved hjælp af GF'er. (A) Frugtvalg. (B) Angreb af frugterne med CBB i forholdet 2:1 CBB pr. GF. (C) Udvælgelse af inficerede frugter. (D) Sprøjtning af insekticidet på frugterne. (E) Inkubation af frugterne. (F) Dissektion af frugt. (G) Optælling af CBB-populationen. Klik her for at se en større version af denne figur.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Resultaterne viste, at CBB-hunnerne genkendte frugterne, og afhængigt af frugtoverfladens egenskaber og den udsendte lugt begyndte CBB-hunnerne at trænge ind eller bære frugterne inden for 3 timer ved 21 ° C.

Virkningen af et insekticid på CBB, når det påføres kaffefrugterne (forangrebsprocedure) efter 24 timer og over tid, er vist i figur 4. De to insekticider (alkaloidemulsion ved 5% og 6%) forårsagede høj insektdødelighed på dag 20 (tabel 1) og viste signifikante forskelle sammenlignet med vandets absolutte kontrol (P < 0,001), ifølge LSD-testen. Med hensyn til procentdelene af uinficerede sunde frø (tabel 1) var der også forskelle mellem kontrol- og insekticidgrupperne ifølge Dunnetts test på 5% (P < 0,001). I kontrolgruppen blev 37% af frøene ikke angrebet, mens insekticidapplikation beskyttede frøene, hvor 94% af frøene forblev sunde ved anvendelse af insekticid 2 og 89% med insekticid 1.

Figure 4
Figur 4: Præinfektionseffekter af insekticider i kontrol vs. to insekticidgrupper. Præinfektionseffekter af insekticiderne. Procent dødelighedaf voksne H. hampei evalueret på dag 1, 7, 15 og 21 efter angreb. Klik her for at se en større version af denne figur.

Behandling Eksperimentel enhed Dødelighed (%) Sundt frø (%)
Gennemsnitlig Sd Gennemsnitlig Sd
Kontrol (vand) 5 12.4 8.3 37 6.3
Insekticid 1 5 83.9 *b 3.9 89 *b 6
Insekticid 2 5 94.2 *en 3.2 94.2 *en 3.7
* For hver variabel, forskelle med hensyn til kontrol (vand) ifølge Dunnetts test på 5%.

Tabel 1: Effekt af præinfektionsbehandling på CBB. Procent dødelighed og procent sunde frø efter 20 dage. * For hver variabel, forskelle med hensyn til kontrol (vand) ifølge Dunnetts test på 5%.

Resultaterne efter 21 dage er vist i tabel 1, og resultaterne over tid svarer til figur 4. I dette tilfælde blev kaffefrugterne dækket af et giftigt stof, der forårsager insektdødelighed. Insekterne bliver imprægneret, når de går over frugterne, smager frugterne med deres palps eller begynder at tygge frugternes epidermis. Derudover kan de stoffer, der påføres frugtoverfladen, ændre eller ændre frugtens naturlige lugt, så CBB-individerne kan stoppe angrebsprocessen, enten flyve væk eller foretrække at blive adskilt fra frugten uden at røre ved den eller angribe den. Afhængigt af produktets virkningstidspunkt kan insektdødelighed eller undgåelse af angrebsadfærd fortsætte i 24 timer eller længere.

På den anden side, hvis produkterne påføres, efter at insekterne begynder at bære frugterne (postinfestation), kan produkterne trænge ind i insektkotiklen og forårsage insektdødelighed (tabel 2 og figur 5). Den højeste dødelighed forekom med insekticid 2 (P < 0,01). Hvis dødeligheden opstår hurtigt, vil insektet dø, før det kommer ind i frøet, og der findes ingen æg eller insektpopulation inde i frøene.

Figure 5
Figur 5: Postinficeringseffekter af insekticider. Procent dødelighed af voksne H. hampei evalueret på dag 1, 7, 15 og 21 efter angreb. Klik her for at se en større version af denne figur.

Behandling Eksperimentel enhed Dødelighed (%) Sundt frø (%)
Gennemsnitlig Sd Gennemsnitlig Sd
Kontrol (vand) 5 11.1 3.0 57.3 3. 9
Insekticid 1 5 46.8 *b 6.6 79.2 *b 8.6
Insekticid 2 5 77.8 *en 3.7 90.0 *en 2.9
* For hver variabel, forskelle med hensyn til kontrol (vand) ifølge Dunnetts test på 5%.

Tabel 2: Virkninger af behandling efter angreb på CBB. Procent dødelighed og procent sunde frø efter 20 dage. * For hver variabel, forskelle med hensyn til kontrol (vand) ifølge Dunnetts test på 5%. For hver variabel angiver forskellige bogstaver forskelle i henhold til LSD 5%.

Virkningerne af insekticiderne afspejles som procentdelen af sunde uinficerede frø på dag 20 af evalueringen (tabel 2). På grund af høj insektdødelighed trængte insektet ikke ind i kaffefrøene og beskadigede dem. Anvendelse af produkterne beskyttede mellem 79% -90% af kaffefrøene, hvilket viser forskelle med hensyn til kontrollen, hvor 57% af frøene viste sig at være sunde (P < 0,01). Der blev også observeret signifikante forskelle mellem de to insekticider (P < 0,01).

I nogle tilfælde døde insekterne meget hurtigt, selv før de forårsagede skade på frøet. Men hvis insektets død tog længere tid, kunne insektet nå frøet og deponere nogle æg, og senere vil den voksne dø. I dette tilfælde blev der fundet en reduceret insektpopulation inde i kaffefrøene sammenlignet med insektpopulationen, der blev fundet i kontrolgruppen sprøjtet med vand (tabel 3).

Behandlinger Samlet gennemsnitlig insektpopulation/ frø * Duncan gruppering (alfa= 00,05)
Kontrol 5 en
Entomopathogen 2.5 b
Afvisende stof 3.27 b
Entomopathogen + Afstødende 1.5 c
For hver variabel angiver forskellige bogstaver forskelle i henhold til LSD 5%.

Tabel 3: Virkninger efter angreb efter behandling med en entomopathogen svamp og et afvisende stof. Insektpopulation inde i frøene. GF'er blev dissekeret efter 15 dage. * For hver variabel, forskelle med hensyn til kontrol (vand) ifølge Dunnetts test på 5%. For hver variabel angiver forskellige bogstaver forskelle i henhold til LSD 5%.

Figur 6 viser virkningen af et produkt med postinfestationseffekter, et entomopathogen og et afvisende stof samt deres kombinerede virkning.

Figure 6
Figur 6: Postinficeringseffekter af en entomopathogen svamp og et afvisende stof. Procent dødelighed af voksne H. hampei og frøskader. Klik her for at se en større version af denne figur.

Disse metoder gør det muligt hurtigt at bestemme forskellige virkninger af giftige produkter på CBB.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

I denne protokol er desinfektion af frugterne såvel som insekterne kritiske trin. Når frugter fra marken anvendes i laboratoriet, viser de ofte høj forurening og dehydrering, da mikroorganismer og mider er til stede i epidermis 7,15,16. Derfor vil brug af frugter eller insekter, der ikke desinficeres, forårsage insektdød på grund af forurening forårsaget af mikroorganismer, såsom bakterier eller svampe, hvilket forstyrrer bioassayresultaterne. Tidligere evaluerede Tapias et al.20 andre antimikrobielle midler til frugtdesinfektion, såsom carbendazim og benzalkoniumchlorid; Men selvom frugtdesinfektion var god, var disse forbindelser meget giftige for CBB eller miljøet.

Anvendelsen af 0,5% natriumhypochlorit blev evalueret ved at dyppe frugterne i opløsningen i 30 minutter og 15 minutter. Efter begge længder af tider blev mikroorganismer påvirket, men CBB blev også påvirket efter 30 minutters dypning på grund af opløsningens oxiderende kraft23. UV-lys forårsager skade på mikroorganismers DNA24, hvilket mindsker forureningen. Ved højere doser (længere eksponeringstid) opstår der imidlertid frugtskader, der forårsager nekrose og frødehydrering. Desinfektion med 0,5% natriumhypochlorit i 15 minutter efterfulgt af UV-lyseksponering i 15 minutter viste sig at være optimal i denne procedure.

Den anden overvejelse er insektkvalitet. Til denne undersøgelse blev insekterne leveret af en insektopdrætsenhed kaldet BIOCAFE25 (http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html). Svage eller indavlede insekter fra dårlige insektkolonier vil overvurdere resultaterne af et giftigt produkt. Desuden ville laboratorieadfærden i dette tilfælde ikke svare til feltobservationerne af vildtypeinsekter med høj kondition. Derudover kan sådanne insekter indeholde et stort antal mikroorganismer, der kan forstyrre bioassay. Derfor er desinfektion21 et vigtigt skridt for at sikre metodens succes.

Med hensyn til angreb (to insekter til en frugt) blev det tidligere fastslået, at brug af en større mængde insekter ville øge antallet af kaffefrugter med mere end en insektperforering, hvilket gør analysen vanskeligere20. Derudover er temperaturen, hvor forsøgene udføres, vigtig for at opnå frugter med insekter i position A eller opnå en normal insektindtrængning, når frugterne sprøjtes. Ved hjælp af en temperatur på 21 ° C i 3 timer tillod mere end 70% af frugterne at blive inficeret. Når temperaturen steg til mellem 25-27 °C, nåede de fleste insekter position B på kortere tid end ved 21 °C. Den hurtigere indtrængning af CBB i frugten er en konsekvens af insektets større aktivitet på grund af temperaturstigning26. Ulempen ved at bruge en temperatur på 25 °C i længere tid er således, at mange frugter findes med mere end en perforering og med insekter i både A- og B-positioner.

Før udviklingen af denne metode blev kunstige insektdiæter med malet kaffe anvendt til at vurdere virkningerne af giftige stoffer ved at inkorporere stoffet i eller over kosten 5,6; disse diæter er dog dyre på grund af deres specielle komponenter 27,28. Pergamentkaffe er også blevet brugt til insekticidevaluering, hvor kaffebønnerne drysses med eller dyppes i stoffet, der skal evalueres. Da pergamentets struktur og sammensætning er forskellig fra frugtens perikarp, forventes det, at interaktionen mellem insekticidet og kaffen er anderledes. Med pergamentkaffe kan insekticidmolekylet let absorberes og dermed generere større dødelighed end den, der observeres under naturlige forhold. Derudover er pergamentkaffe forholdsvis dyrere, da den skal fjernes fra frugtpulpen og derefter tørres. Desuden er det ikke det naturlige substrat for insektvækst.

Afslutningsvis er brug af ægte grøn kaffe med næringsstoffer, der er tilstrækkelige til insektvækst, den mest hensigtsmæssige måde at evaluere toksiciteten af forbindelser til insekter under simulerede naturlige forhold.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Ingen af forfatterne har nogen interessekonflikter at erklære.

Acknowledgments

Forfatterne udtrykker deres tak til National Federation of Coffee Growers of Colombia, assistenterne fra Institut for Entomologi (Diana Marcela Giraldo, Gloria Patricia Naranjo), Experiment Station Naranjal og Jhon Félix Trejos.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Beaker with spout, low form 500 mL BRAND PP BR87826
Benchtop Shaker New Brunswick Scientific Innova 4000 Incubator Shaker
Dishwashing liquid soap-AXION Colgate-Palmolive AXION
Hood; Horizontal Laminar Flow Station Terra Universal  Powder-Coated Steel, 1930 mm W x 1118 mm D x 1619 mm H, 120 V (https://www.terrauniversal.com/hood-horizontal-laminar-flow-station-9620-64a.html)
Insects CBB BIOCAFE (http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html).
Multi Fold White paper towels Familia 73551
Preval Spray unit  Preval Merck Z365556-1KT https://www.sigmaaldrich.com/CO/es/product/sigma/z365556?gclid=Cj0KCQiAweaNBhDEARIsAJ
5hwbfZOy1TWGj6huatFtRQt
AzOyHe5-oBiKnOUK2T1exuuk
WwJLdvxkvsaAjoYEALw_wcB
Reversible Racks 96-Well heathrowscientific HEA2345A https://www.heathrowscientific.com/reversible-racks-96-well-i-hea2345a
Scalpel blades N 11 Merck S2771-100EA
Scalpel handles N3 Merck S2896-1EA
Sodium Hypochloride The clorox company Clorox
Stereo Microscope Zeiss Stemi 508 https://www.zeiss.com/microscopy/int/products/stereo-zoom-microscopes/stemi-508.html

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Mendesil, E., et al. Semiochemicals used in host location by the coffee berry borer, Hypothenemus hampei. Journal of Chemical Ecology. 35 (8), 944-950 (2009).
  2. Jaramillo, J., et al. Coffee berry borer joins bark beetles in coffee klatch. PLoS ONE. 8 (9), 74277 (2013).
  3. Giraldo-Jaramillo, M., Garcia, A. G., Parra, J. R. Biology, thermal requirements, and estimation of the number of generations of Hypothenemus hampei (Ferrari, 1867) (Coleoptera: Curculionidae) in the state of São Paulo, Brazil. Journal of Economic Entomology. 111 (5), 2192-2200 (2018).
  4. Benavides, P., Góngora, C., Bustillo, A. IPM Program to Control Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei, with Emphasis on Highly Pathogenic Mixed Strains of Beauveria bassiana, to Overcome Insecticide Resistance in Colombia. IntechOpen. , (2012).
  5. Martínez, C. P., Echeverri, C., Florez, J. C., Gaitan, A. L., Góngora, C. E. In vitro production of two chitinolytic proteins with an inhibiting effect on the insect coffee berry borer, Hypothenemus hampei (Ferrari) (Coleoptera: Curculionidae) and the fungus Hemileia vastatrix the most limiting pests of coffee crops. AMB Express. 2, 1-11 (2012).
  6. Padilla, B. E., Acuña, Z., Velásquez, C. S., Rubio, G. J. D. Inhibitors of [alpha]-amylases from the coffee berry borer Hypothenemus hampei in different plant species. Revista Colombiana de Entomología. 32 (2), 125-130 (2006).
  7. Alvarez, J. H., Cortina, H. A., Villegas, J. F. Methods to evaluate antibiosis to Hypothenemus hampei Ferrari in coffee under controlled conditions. Cenicafé. 52 (3), 205-214 (2001).
  8. Arcila, A., Duarte, A. F., Villalba, D. A., Benavides, P. New Product in the Integrated Management of the Coffee Berry Borer in Colombia. National Coffee Research Center (Cenicafé). , Available from: https://biblioteca.cenicafe.org/handle/10778/477 (2014).
  9. Jaramillo, J., Montoya, E., Benavides, P., Góngora, C. Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae for the control of coffee brocade in fruits on the ground. Revista Colombiana de Entomología. 41, 95-104 (2015).
  10. Bastidas, A., Velásquez, E., Benavides, P., Bustillo, A., Orozco, C. Evaluation of preformulated Beauveria bassiana (Bálsam) Vuillemin, for the control of the coffee berry borer. Agronomia. 17, 44-61 (2009).
  11. Villalba-Gault, D., Bustillo, A., Chaves Cordoba, B. Evaluation of insecticides for the control of the coffee berry borer in Colombia. Cenicafe. 46, 152-163 (1995).
  12. Bustillo, A. E., Orozco, J., Benavides, P., Portilla, M. Mass production and use of parasitoids for the control of the coffee berry borer in Colombia. Cenicafe. 47 (4), 215-230 (1996).
  13. Celestino, F. N., Pratissoli, D., Machado, L. C., Santos Junior, H. J. G. D., Mardgan, L., Ribeiro, L. V. Adaptation of breeding techniques of the coffee berry borer [Hypothenemus hampei (Ferrari). Coffee Science. 11 (2), 161-168 (2016).
  14. Domínguez, L., Parzanese, M. Ultraviolet light in food preservation. Argentine Foods. 52 (2), 70-76 (2012).
  15. Jaramillo, J., Chabi-Olaye, A., Poehling, H. M., Kamonjo, C., Borgemeister, C. Development of an improved laboratory production technique for the coffee berry borer Hypothenemus hampei, using fresh coffee berries. Entomologia Experimentalis et Applicata. 130 (3), 275-281 (2009).
  16. Pérez, J., Infante, F., Vega, F. E. Does the coffee berry borer (Coleoptera: Scolytidae) have mutualistic fungi. Annals of the Entomological Society of America. 98 (4), 483-490 (2005).
  17. Benavides, P., Gil, P., Góngora, C., Arcila, A. Integrated pest management. Cenicafe. Manual of the Colombian coffee grower: Research and technology for the sustainability of coffee growing. Manizales: FNC: Cenicafé. 3, 179-214 (2013).
  18. Bustillo, P. A review of the coffee berry borer, Hypothenemus hampei (Coleoptera: Curculionidae: Scolytinae), in Colombia. Revista Colombiana de Entomología. 32 (2), 101-116 (2006).
  19. Arcila, A., Benavides, P., Mejia, J. New Chemical Control Alternative for the Integrated Management of the Coffee Berry Borer. National Coffee Research Center (Cenicafé). , Available from: https://biblioteca.cenicafe.org/handle/10778/557 (2015).
  20. Tapias, L., Martinez, C., Benavides, P., Gongora, C. Laboratory method to evaluate the effect of insecticides on the coffee berry borer. Cenicafé. 68 (2), 76-89 (2017).
  21. Bustillo, A. E., Marín, P. How to reactivate the virulence of Beauveria bassiana to control the coffee berry borer. Manejo Integrado de Plagas. 63, (2002).
  22. Constantino, L. M., et al. morphological and genetic aspects of Hypothenemus obscurus and Hypothenemus hampei (Coleoptera: Curculionidae: Scolytinae). Revista Colombiana de Entomología. 37 (2), 173-182 (2011).
  23. Estrela, C., et al. Mechanism of action of sodium hypochlorite. Brazilian Dental Journal. 13 (2), 113-117 (2002).
  24. Diffey, B. L. Solar ultraviolet radiation effects on biological systems. Physics in Medicine and Biology. 36 (3), 299-328 (1991).
  25. BIOCAFE. , Available from: http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html (2022).
  26. Bustillo, A. E., et al. Integrated Management of the Coffee Berry Borer: Hypothenemus hampei Ferrari in Colombia. , Available from: https://biblioteca.cenicafe.org/hangle/10778/848 (1998).
  27. Portilla, R. Development and evaluation of an artificial diet for the rearing of Hypothenemus hampei. Cenicafé. 50, 24-38 (1999).
  28. Portilla, R. M., Streett, D. A. New techniques for automated mass production of Hypothenemus hampei on the modified Cenibroca artificial diet. Cenicafé. 57, 37-50 (2006).

Tags

Miljøvidenskab udgave 181 Kaffe insekticider dødelighed frastødning udviklingsstadier
Metode til test af kontrolmidler og insekticider mod kaffebærboreren <em>Hypothenemus hampei</em>
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Góngora, C. E., Tapias, J.,… More

Góngora, C. E., Tapias, J., Martínez, C. P., Benavides, P. Methodology to Test Control Agents and Insecticides Against the Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei. J. Vis. Exp. (181), e63694, doi:10.3791/63694 (2022).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter