阿加安装：安装活斑马鱼胚胎进行长期成像的基本方法

- 首先添加 E3 中低熔点，然后加热，直到糖完全溶解。 将阿加罗斯冷却到37摄氏度，并加入三卡因溶液。 接下来，通过在含有E3介质胚胎的培养皿中加入三卡因来麻醉胚胎。旋转培养皿，收集中间的胚胎。

使用转移移液器，用最少的介质绘制一个胚胎。将移液器保持直立位置，然后弹跳胚胎将其放置在移液器的尖端。现在，将胚胎放入蔗糖溶液中，无需添加任何多余的介质，从而稀释糖分，防止凝胶。 轻轻混合胚胎中的糖，并使用移液器将溶液转移到成像板的井中。

将板放在显微镜下，使用移液器尖端将胚胎定位在所需的方向。 一旦糖体凝固，将含有三角星的E3介质倒在上面，以保持藻类水分和胚胎图像。 在示例协议中，我们将安装对羟基苯甲酸斑马鱼胚胎进行成像和分析。

要获得融合胚胎的图像，准备 0.8% 的低熔点。将一毫升的阿加罗斯加入1.5毫升的微胶管，设置在37摄氏度的加热块中。将寄生虫胚胎麻醉，在含有胚胎的25毫升E3介质中加入每毫升4毫克的1毫升pH 7.0三角细胞。轻轻旋转盘子，使胚胎在中间池。

然后使用宽尖塑料转移移液器， 用尽可能少的液体提取胚胎。接下来，将移液器直立，轻轻弹跳胚胎，使胚胎沉淀到移液器的底部。然后通过轻轻触摸浮子表面的移液器尖端，将胚胎转移到1毫升的低熔点。从移液器中分离出多余的液体，然后使用移液器将胚胎轻轻地混合在糖中。

然后，用移液器将糖和胚胎转移到玻璃底六井板的井中。在立体显微镜下，使用固定在戏弄针末端的凝胶加载尖端，将胚胎定位在盖玻璃附近，并按所需的方向进行成像。

对于整个胚胎视场，使用4倍主观。使用20倍的目标来成像一个特定的组织。根据文本协议处理图像。