Dunkelfeldmikroskopie zur Visualisierung der Diffusionsdynamik von Nanostäbchen auf Zellmembran

Um die Diffusionsdynamik von Gold-Nanostäbchen auf einer lebenden Zellmembran mit Hilfe der Dunkelfeldmikroskopie (DFM) in Kombination mit Einzelpartikel-Tracking zu untersuchen, beginnen Sie mit einem sterilisierten Deckglas in einer Kulturschale mit geeignetem Medium. Geben Sie die Zellsuspension auf das Deckglas. Das Medium erleichtert das Zellwachstum.

Inkubieren Sie mit positiv geladenen Gold-Nanostäbchen, die über elektrostatische Wechselwirkungen an der negativ geladenen Zellmembran adsorbieren. Pipettieren Sie das Medium aus der Schale in die Rille eines Objektträgers. Legen Sie das Deckglas mit der Zellseite nach unten auf die Nut und versiegeln Sie es.

Legen Sie den Objektträger auf den Dunkelfeld-Mikroskoptisch. Das Mikroskop beleuchtet die Probe mit einem schrägen Licht mit hohem Winkel, das durch einen speziellen Dunkelfeldkondensator fällt.

Bei der Beleuchtung der Nanostäbchen schwingen die freien Elektronen auf der Nanostäbchenoberfläche mit einer Frequenz, die mit dem einfallenden Licht resonant ist. Die oszillierenden Elektronen streuen Licht bei einer bestimmten Wellenlänge, die von der Objektivlinse erfasst wird, und ermöglichen so die Visualisierung von Nanostäb