Ein Bead-basierter Multiplex-Immunoassay zur Identifizierung von erregerspezifischen Antikörpern im Speichel
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Immunologie
0 Aufrufe • 3:45 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie eine Mischung aus verschiedenen Sätzen von Mikrokugeln – oder mikrometergroßen Polystyrolkügelchen.
Jedes Set ist an ein einzigartiges Antigen aus einem Umweltpathogen gekoppelt und einzigartig fluoreszenzmarkiert
.Geben Sie die Mischung in eine Filterplatte, die am Boden eine Membran enthält.
Einführung von menschlichem Speichel, der Antikörper gegen Umweltpathogene enthält, die an verwandte Antigene auf den Mikrosphären binden.
Entfernen Sie ungebundene Antikörper durch Vakuum. Mikrosphärengebundene Antikörper bleiben aufgrund der geringen Porengröße der Membran erhalten.
Fügen Sie biotinylierte Sekundärantikörper hinzu, um an die Mikrosphären-gebundenen Antikörper zu binden. Entfernen Sie ungebundene Antikörper.
Fügen Sie Streptavidin hinzu, das an einen fluoreszierenden Reporterfarbstoff konjugiert ist, der an Biotin auf den Sekundärantikörpern bindet.
Entfernen Sie den ungebundenen Farbstoff, resuspendieren Sie die Mikrosphären und führen Sie sie durch einen Multiplex-Immunoassay-Analysator.
Ein Laserstrahl detektiert die Fluoreszenz der Mikrosphäre und identifiziert so das Antigen, während ein anderer Strahl das Reportersignal detektiert und damit einen gebundenen
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