JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:42 Min. • June 17th, 2025
Nehmen wir eine anästhesierte transgene Maus, die fluoreszierende Proteine in Mikroglia exprimiert. Befestigen Sie es auf einem stereotaktischen Rahmen mit einem motorisierten Tisch unter einem Zwei-Photonen-Mikroskop.
Der Schädel ist mit einem Metallrohr mit Glasboden ausgestattet, das die Alveus über der Region des Hippocampus cornu ammonis 1 oder CA1 sanft abflacht und so eine klare optische Schnittstelle ohne
übermäßigen Druck auf das darunter liegende Gewebe gewährleistet.
Füllen Sie das Metallrohr mit Wasser, um die optische Transmission zu optimieren.
Aktivieren Sie den gepulsten Laser bei der Anregungswellenlänge.
Passen Sie mithilfe der Fluoreszenz aus dem Hirnparenchym und des reflektierten Lichts aus der Metallröhre den Fokus auf die CA1-Region an.
Positionieren Sie den Kopf der Maus so, dass der Glasboden parallel zur Bildebene ausgerichtet ist, um eine gleichmäßige Fokussierung über das gesamte Sichtfeld zu gewährleisten.
Passen Sie das Objektiv für eine optimale Auflösung an und beobachten Sie die In-vivo-Dynamik der Mikroglia in der CA1-Region.
Als nächstes bilden Sie den Gyrus dentatus ab, wo fluoreszierende Mikroglia die CA1-Integrität bestätigen.
Setzen Sie die Maus in di
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