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Visualisierung der Endosomen Dynamics in lebenden Nerven Klemmen mit Vier-dimensionale Fluoreszen...
Visualisierung der Endosomen Dynamics in lebenden Nerven Klemmen mit Vier-dimensionale Fluoreszen...
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JoVE Journal Neuroscience
Visualization of Endosome Dynamics in Living Nerve Terminals with Four-dimensional Fluorescence Imaging

Visualisierung der Endosomen Dynamics in lebenden Nerven Klemmen mit Vier-dimensionale Fluoreszenz-Imaging

Full Text
9,392 Views
10:51 min
April 16, 2014

DOI: 10.3791/51477-v

Richard S. Stewart1, Ilona M. Kiss1, Robert S. Wilkinson1

1Department of Cell Biology and Physiology,Washington University School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Vierdimensionalen (4D)-Bildgebung verwendet werden, um das Verhalten und die Interaktionen zwischen den zwei Arten von Endosomen in lebenden Wirbeltier-Nervenenden zu studieren. Bewegung dieser kleinen Strukturen in drei Dimensionen gekennzeichnet, wodurch Bestätigung von Veranstaltungen wie Endosomen Fusion und Exozytose.

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, Endosomen im dreidimensionalen Raum über die Zeit oder in vier Dimensionen genau abzubilden. Dazu werden zunächst die Schlangenmuskeln präpariert und das Gewebe in der Bildgebungsschale angeordnet. Der zweite Schritt besteht darin, das Gewebe mit vitalen Farbstoffen zu färben, um die Endosomenbildung anzuregen.

Als nächstes wird das Präparat in vier Dimensionen für eine oder mehrere neuromuskuläre Verbindungen abgebildet. Der letzte Schritt ist eine sorgfältige Datenanalyse, um das Verhalten von Makroendosomen zu charakterisieren. Letztendlich kann das Vorhandensein und die Bewegung von Endosomen im Laufe der Zeit innerhalb des präsynaptischen Raums durch vierdimensionale Fluoreszenzbildgebung nachgewiesen werden.

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