Name: Rückwärts Genetische Morpholino Ansatz mit Herz ventrikuläre Injektion auf mehrere Schwer zu Zielgeweben in der Zebrafisch-Larve Transfektion (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-06-17T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: Lernen Sie den reversen genetischen Morpholino-Ansatz mit intraventrikulärer Injektion zur Gen-Knockdown-Analyse in Zebrafisch-Larven. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Genfunktionen während der Geweberegeneration.

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Diese Arbeit wurde von der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DFG) unterstützt wird, wollen wir Ayele Tsedeke Taddese für technische Unterstützung danken.

1. Herstellung der Glas-Nadeln (Abbildung 1) <ol><li> Verwenden Glaskapillaren mit einem Durchmesser von 0,75 mm bis Injektionsnadeln (Abbildung 1A) vorzubereiten. </li><li> Legen Sie die Glaskapillare in eine Nadel Zieher und ziehen Sie die Nadel mit dem folgenden Parameter: Heizung Zykluswert: 463; Ziehen Zykluswert: 230; Geschwindigkeit: 150 ms; Zeit: 150 ms (Fig. 1B). </li><li> Brechen Sie das Glas gezogen Kapillare mit Uhrmacher-Pinzette, eine Nadel Durchmesser 20 um unter einem Stereoskop mit einem Mikrometer-Okular zu produzieren. </li><li> Verwenden Sie eine Drehbank mit einem angefeuchteten Gummi Spinnrad, um die Nadel zu schärfen und produzieren ein 20 um Fase (1C und 1D). Hinweis: Sharp, abgeschrägten Nadeln Verbesserung der Leichtigkeit des Einsetzens in die Herzkammer und damit Minimierung der Schädigung des Gewebes und damit die Loch Muskel nach dem Entfernen der Nadel (Fig. 1E-G) wieder zu verschließen. </li></ol> 2. Preparation der Morpholino-Lösung <ol><li> Bereiten Sie die Morpholino Lager durch Auflösen des lyophilisierten Morpholino in 1x Phosphat-gepufferte Kochsalzlösung (PBS) in einer Endkonzentration von 7,5 mM. [Siehe Anweisungen des Herstellers für Details (Material Tabelle)]. </li><li> Bereiten Sie die Morpholino Injektionslösung durch Mischen von 2,5 ul Morpholin-Stammlösung (7,5 mM) mit 2,8 ul Endo-Porter-Stammlösung (1 mM) (Siehe Tabelle Materialien) für eine endgültige Konzentration von 3,5 mM und 0,5 mM Morpholino Endo-Porter. </li></ol> 3. Herstellung der Morpholino-Injektion (Fig. 2) <ol><li> Laden Sie die abgeschrägte Glas Nadel mit 5 ul dieser Lösung mit einer Mikropipette mit einem 10 ul Microloader Pipettenspitze. </li><li> Einfügen der Glas Nadel in den Nadelhalter des Mikromanipulators mit dem pneumatischen pico Pumpe (Fig. 2A-C) verbunden ist. </li><li> Platzieren des Nadelhalters neben dem Mikroskop, so daß die Nadel nur Bedürfnissenin einer planaren Richtung bewegt werden, um in die Herzkammer der Larve (2A) einzufügen. </li><li> Einstellen des Winkels für die Injektionen bei 45 °. </li><li> Stellen Sie die Mikroinjektor Werte wie folgt: Haltedruck: 20 Pfund pro Quadratzoll (psi); Ausstoßdruck: 15 psi; 100 ms Bereich von Gating, Periodenwert von 1,9 (entspricht 10,9 ms). </li><li> Schmelz Agarose in 1x PBS unter Verwendung eines Standard-Mikrowellen zu 20 ml einer 1,5% (w / v) Gel zu erzeugen. Gießen geschmolzenen Gel in eine 10 cm-Petrischale. Legen Sie eine gerillte Form der Injektion in die warme Agarose, so dass einmal ausgehärtet, wird die Agarose-Furchen, in denen die Larve sediert platziert werden 11 (Figuren 2D und 2E) haben. </li></ol> 4. Injektionen (Fig. 3) <ol><li> Anesthetize Larve in 100 ml Aquarienwasser mit 20 mg / L Tricaine (L-Ethyl-m-Amino-benzoat-Methan-Sulfonat), bis sie reagiert auf Berührung. </li><li> Mit einem Kunststoff Pasteur pipette, um die Larve sediert transferieren in eine Nut des nassen Agarose-Form, so dass die Bauchseite zugewandt ist gegen die vertikale Agarose Wand der Nut (3A). </li><li> Platzieren der Agarose Platte unter dem Stereomikroskop, so daß die Herzkammer abgewandt ist die Injektionsnadel (Fig. 3A). </li><li> Senken Sie die Nadel, um sie in der Herzkammer einfügen. Führen Sie die Nadel nur 1-2 um in die Herzkammer kümmert sich nicht um die Nadel zu tief (3B und 3C) einfügen. </li><li> Sobald die Nadel eingeführt ist, spritzen die Morpholino-Lösung in die Kammer mit 4-6 Pulse, jeder, die 3 nl der Lösung mit Warteintervalle Lichtung des Herzens (Fig. 3D und 3E) zu ermöglichen. </li><li> Nach der Injektion die Nadel entfernen (parallel zur Ebene der Insertion) und dann sorgfältig übertragen die Larven mit einem Kunststoff-Pasteur-Pipette mit E3 Medium gefüllt back in eine Petrischale mit frischen E3-Medium. </li><li> Platzieren der Nadel in eine Petrischale mit 1x PBS, um das Trocknen der Nadel zu verhindern, wenn die Übertragung der Larven injiziert. </li><li> Wiederholen Sie die Schritte 4.1-4.6 jede 12-24 h für die Dauer des Experiments. Hinweis: Wiederholen der Injektionen gewährleistet die Aufnahme und Aufrechterhaltung der Morpholino in Zellen. </li></ol> 5. Analysen Injektionen (Fig. 4) <ol><li> Anesthetize die Fische im Aquarium 100 ml Wasser mit 20 mg / L Tricaine, bis sie reagiert auf Berührung. </li><li> Legen Sie die Larve seitlich auf einer flachen nassen 1,5% (w / v) Agarose-Platte mit E3 Medium bedeckt. </li><li> Bild Larven mit einem Stereomikroskop mit Hellfeld-und Fluoreszenzbildgebung. Hinweis: Da die Larven durchsichtig sind, sollte der Fluorescein-markierten Morpholino als fluoreszierende grün in den Blutgefäßen im gesamten Tier direkt nach der Injektion sichtbar sein. Diese Fluoreszenz wird weiter in die vaskularisierten Geweben zerstreuen durch15 min (in den 4A-4C). </li></ol> 6. Beurteilung der Regenerative Outgrowth <ol><li> Bewerten Sie die aufgenommenen Bilder mit Fiji Bild J freie Software (http://fiji.sc/Fiji). Zur Untersuchung der Regeneration, verwenden Sie die Line-Tracing-Tool, um die Menge der regenerativen Wachstum, das auf Kontrolle und Morpholino-injizierten Larve tretenen bestimmen. </li><li> Um Bilder zu kalibrieren, öffnen Sie eine der Original-Bilddateien in Fidschi durch Drag &amp; Drop die Datei in das Hauptfenster Fidschi. </li><li> Um den Maßstab für alle folgenden Bilder einzustellen, gehen Sie auf &quot;Analysieren&quot; im Hauptmenü. </li><li> In der Drop-Down-Menü klicken Sie auf &quot;Set scale&quot;. </li><li> In diesem Fenster aktivieren Sie die Option &quot;Global&quot;, indem Sie das Kontrollkästchen. </li><li> Nun öffnen Sie das Bild, um die Menge der regenerativen Wachstum wieder per Drag &amp; Drop (siehe Schritt 6.1) zu messen. </li><li> Wählen Sie die &quot;Freihand-Auswahl&quot;-Werkzeug in der Werkzeugleiste. </li><li> Umkreisen Sie die zu messenden Bereich (Figures 4J-4L). </li><li> Drücken Sie Strg + M. Damit wird ein neues Fenster &quot;Ergebnisse&quot;, die den Wert des eingekreisten Bereichs in quadratischen Pixeln zu öffnen. </li></ol>

<ol><li>Gemberlin, M., Bailey, T. J., Hyde, D. R., Poss, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+as+a+model+for+complex+tissue+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Genetics%22%5BJournal%5D)">The zebrafish as a model for complex tissue regeneration.</a> Trends in Genetics. 29, 611-620 (2013).</li>
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Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Die intraventrikuläre Injektion bietet eine schnelle und zuverlässige Beurteilung Verfahren zur Prüfung der Genfunktion in späteren Phasen der Entwicklung oder der Homöostase des Körpers, ohne die Gen-Funktion während der Embryogenese. Um den Erfolg dieser Technik zu gewährleisten, sollte man sich bewusst sein, vier kritische Punkte: 1) Nadel, 2) Trocknen aus der Nadel, 3) zu minimieren Volumen und 4) minimale Belichtungszeit in der Sedierung Lösung. Nadeln, die zu klein sind, werden häufig verstopfen, während Nadeln, d...

Regeneration von Organen und Anhängsel ist grundlegend wichtig für das Überleben und Fitness; jedoch haben mehrere Wirbeltieren einschließlich des Menschen regenerative Fähigkeiten beschränkt. Während mehreren Tiermodellen existieren, die umfangreichen Regenerationsfähigkeit haben, Reverse genetische Techniken, um Gen-Funktion während der Organregeneration und Anhängsel zu beurteilen sind sehr begrenzt oder gar nicht vorhanden. Daher sind neue Methoden erforderlich, um die Molekularbiologie der Regeneration in diesen Modellorganismen zu sezieren. Der Zebrafisch ist ein gut etabliertes Modell für das Verständnis der Zell-und Molekularbiologie der Organregeneration und ein Anhängsel, nicht nur wegen ihrer großen Fähigkeit, mehrere Organe, Gewebe und Anhängsel zu regenerieren, sondern auch, weil mehrere transgene Fische Linien existieren, um Zellen zu verfolgen und Gen-Konstrukte überexprimieren 2, 3. Allerdings ist Gen-Hemmung in Zebrafisch-Larven hauptsächlich auf die overexpre begrenztssion der dominant-negative Konstrukte, die nicht für alle Gene von Interesse sind oder deren Transgen Produkt kann gain-of-function-Effekte, die die endogene Aktivität des Gens spiegeln nicht erwerben. Somit wird eine alternative Methode, um speziell zu entfernen Genexpression durch KO oder Zuschlags notwendig, um diese Probleme zu überwinden. Gen-spezifischen Targeting mit TALENS als Reverse genetische Mittel, um Gen-Knockout-Funktion besteht; Dies ist jedoch Knockout Strategie während der frühen Embryogenese sehr häufig zu funktionellen Beurteilungen, da ursprünglichen Anforderungen des Gens zu verhindern weiteren Verlauf der Embryonalentwicklung. So, das Studium später Phänomene wie Regeneration oder Organ Homöostase nach der Entwicklung mit TALENS ausgeschlossen 4, 5. Daher ist eine alternative Strategie zum Entfernen Gen benötigt, die Gen-Funktion richtet sich nach der frühen Entwicklung bis zur Gen-Anforderungen voll ausgebildete Organe und Strukturen zu beurteilen. </p&gt; Morpholino-Injektion wurde als wirksam bei der Targeting-Gene in einigen adulten Organen und der Erwachsenen Regenerieren Rippen 6-8, aber diese Methoden erfordern Elektroporation und viele innere Organe schwer zu elektroporieren entweder aufgrund ihrer Lage oder wegen ihrer Empfindlichkeit gegenüber elektrischen Störung. Darüber hinaus sind einige Gewebe in der Larve schwer direkt zu injizieren, da eine direkte Injektion kann ihre strukturelle Integrität stören oder weil ihre Größe ist die Begrenzung. Die Schwanzflosse der Larve ist eine solche Struktur, da eine direkte Injektion in die finfold ist nicht möglich. Somit eine Alternative zur Elektroporation und direkte Injektion erforderlich war, um Gene in Geweben, die entweder zu klein oder zu injizieren kann elektroporiert werden Ziel. Um während der Regeneration des Larvenschwanzflosse Ziel und hemmen die Funktion von spezifischen Genen haben wir Morpholino bestehenden Technologien erlauben die eine modifizierteEURTEILUNG der Gen-Funktion während der Schwanzflosse Regeneration in der späten inszeniert Larve. Dieses Verfahren verwendet intraventrikuläre Liefer 9 von Fluorescein-markierten morpholinos zusammen mit Endo-Porter Transfektionsreagenz 10. Sobald im Ventrikel, schnell der Morpholino-Endo-Porter Mischung während der Larve über das Gefäßsystem verteilt und tritt Gewebe, die bisher nicht zum Ziel gewesen. Diese Injektionsverfahren kann modifiziert werden, um Zielgene in spezifischen Geweben und möglicherweise auch in anderen Tiermodellen, die gegenwärtig nicht reversen genetischen Methoden Genfunktion hemmen angewendet werden. So bietet es eine schnelle und einfache Methode mit dem Potenzial für eine breite Palette verwenden, um Gen-Funktion sofort studieren während der allgemeinen Organ-Homöostase und Regeneration bei Larvenstadien.

<table><tbody><tr><td>Morpholino mit 3&akut; Fluoreszein-Tag</td><td>Gene Tools Inc.</td><td>Kundenspezifisch</td><td>Weitere Informationen unter www.gene-tools.com</td></tr><tr><td>Endo-Porter</td><td>Gene Tools Inc.</td><td></td><td>Weitere Informationen unter www.gene-tools.com</td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Serva 120623</td><td></td><td>Zum Ausgießen von Platten zum Platzieren des Fisches während der Injektionen und zur Bildgebung</td></tr><tr><td>Tricain (L-Ethyl-m-amino-benzat-methansulfonat)</td><td>Applichem</td><td></td><td>Für die Anästhesie</td></tr><tr><td>E3 Medium (5 mM NaCl; 0,17 mM KCl; 0,33 mM CaCl2; 0,33 mM MgSO4)</td><td></td><td></td><td>Für die Larvenhaltung</td></tr><tr><td>Petrischalen</td><td>Sarstedt</td><td>821.472</td><td>Zum Platzieren des Fisches während der Injektion und zur Bildgebung</td></tr><tr><td>Dünnwandige Glaskapillaren</td><td>World Precision Instruments, Inc.</td><td>TW100F-3</td><td>Zur Vorbereitung von Injektionsnadeln</td></tr><tr><td>Microloader Pipettenspitzen</td><td>Eppendorf</td><td>5,242,956,003</td><td>Zum Laden der Nadel</td></tr><tr><td>Pasteurpipetten (3 ml/1 ml)</td><td>Marke</td><td>747760/ 74775</td><td>Zum Übertragen von Larven</td></tr><tr><td>Flammender/Brauner Nadelabzieher</td><td>Sutter</td><td></td><td>Weitere Informationen unter www.sutter.com</td></tr><tr><td>Uhrmacher (Dumont) Pinzette (Größe 5)</td><td>World Precision Instrumente, Inc.</td><td>501985</td><td>Zum Bremsen der Nadel vor dem Schärfen</td></tr><tr><td>Präpariermikroskop</td><td>Olympus, Leica, Zeiss</td><td>Variiert je nach Hersteller</td><td>Teil des gesamten Injektionsaufbaus</td></tr><tr><td>Fluoreszenzkamera</td><td>Olympus, Leica, Zeiss</td><td>Variiert je nach Hersteller</td><td>Zur Abbildung der Fluoreszenz nach dem Einstechen</td></tr><tr><td>PicoDüsen-Kit (Mikroinjektorhalter)</td><td>World Precision Instruments</td><td>5430-12</td><td>Für Mikroinjektionen Pneumatische</td></tr><tr><td>PicoPump (Mikroinjektor)</td><td>World Precision Instruments</td><td>SYS-PV820</td><td>Für Mikroinjektionen</td></tr></tbody></table>

rückwärts genetische morpholino ansatz mit herz ventrikuläre injektion auf mehrere schwer zu zielgeweben in der zebrafisch-larve transfektion

Reverse Genetic Morpholino Approach Using Cardiac Ventricular Injection to Transfect Multiple Difficult-to-target Tissues in the Zebrafish Larva

Der Zebrafisch ist ein wichtiges Modell, um die Zell-und Molekularbiologie der Organ-und Anhängsel Regeneration zu verstehen. Allerdings molekularen Strategien zur reversen Genetik beschäftigen haben noch nicht ausreichend entwickelt, um Gen-Funktion bei der Regeneration oder Gewebe-Homöostase während der Larvenstadien nach Zebrafischembryogenese zu bewerten und mehrere Gewebe innerhalb des Zebrafisch-Larve sind schwer zu zielen. Intraventrikuläre Injektion von genspezifischen Morpholinos bieten ein alternatives Verfahren für die aktuelle Unfähigkeit genomisch Zielzebrafisch-Gene in einer zeitlich gesteuerten Weise in diesen Phasen. Dieses Verfahren ermöglicht eine vollständige Dispersion und anschließende Einarbeitung des Morpholino in verschiedenen Geweben im ganzen Körper, einschließlich Strukturen, die bisher unmöglich zu erreichen, wie sie im Larvenschwanzflosse, eine Struktur oft verwendet, um nicht-invasiv zu erforschen Geweberegeneration waren. Mehrere Gene während der Larven finfold Regeneration aktiviert werden auch Präsentationt bei der Regeneration von Geweben erwachsener Wirbeltiere, so dass die Larve ist ein nützliches Modell, um die Regeneration bei Erwachsenen zu verstehen. Diese Morpholino Dispersionsmethode erlaubt die schnelle und einfache Identifizierung von Genen, die für die Regeneration von Gewebe Larven sowie anderen physiologischen Erscheinungen regulieren Gewebshomöostase nach Embryogenese erforderlich. Daher stellt diese Methode ein Liefer aktuell benötigten Strategie zur zeitlichen Steuerung der Auswertung von Genfunktionen nach Embryogenese.

Die scharfe, abgeschrägte Injektionsnadel wird einfach in die Herzkammer des Zebrafisch-Larve platziert, wenn dorsal angefahren (3A). Das Herz pumpt weiter und trotz der Anwesenheit der Nadel (3B und 3C) Blutstrom aufrechterhalten wird. Vorsichtig Injektionen nicht stören die Morphologie der Herzkammer oder der Herzkontraktionen (Fig. 3D), trotz der Injektion des Morpholino in das Herz (Fig. 3E). Innerhalb v...

Ein anpassungsfähiges reversen genetischen Methode für Zebrafisch-Gen-Funktion während der späteren Phasen der Entwicklung und physiologischen Homöostase wie Geweberegeneration unter Verwendung intraventrikuläre Injektion von Gen-spezifischen morpholinos beurteilen.

Rückwärts Genetische Morpholino Ansatz mit Herz ventrikuläre Injektion auf mehrere Schwer zu Zielgeweben in der Zebrafisch-Larve Transfektion

The zebrafish is an important model to understand the cell and molecular biology of organ and appendage regeneration. However, molecular strategies to ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, Morpholino-Oligonukleotide durch Injektionen in die Ventrikel in die Larven, Kardinalflosse einzubringen und Gene auszuschalten, um deren Funktion während der Regeneration zu untersuchen. Dies wird erreicht, indem man zunächst die Larve anästhesiert und sie in eine Nut der Aros-Form platziert. Anschließend wird die Injektionsnadel in den Herzenventrikel eingeführt.Dann wird die Morpho-Lösung vier- bis sechsmal mit gewichteten Intervallen zwischen den Impulsen in das Ventrikel injiziert, um eine Reinigung des Herzens zu ermöglichen. Schließlich wird die Coddle-Flosse amputiert und drei Tage lang regenerieren gelassen. Letztendlich kann der Effekt auf die Flossenregeneration durch Messung des regenerierten Flossenareals mit dem Linienverfolgungswerkzeug der Open-Source-Software Fiji ImageJ bewertet werden.Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber bestehenden Methoden wie Transgenese oder Mutagenese besteht darin, dass sie die Genunterdrückung durch Minos in larvalen Geweben ermöglicht, die sich nicht für direkte Injektionen eignen. Verwenden Sie Glas-Kapillaren mit einem Durchmesser von 0,75 Millimeter, führen Sie eine davon in

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Mikroinjektion ist eine gut etablierte und effektive Methode für die Einführung von Fremdstoffen in befruchtete Zebrafisch-Embryos. Hier zeigen wir eine robuste Mikroinjektionstechnik für die Durchführung von mRNA-Überexpression und Morpholino-Oligonukleotid-Gen Knockdown Studien im Zebrafisch.

Mikroinjektion von mRNA und Morpholino Antisense Oligonukleotide in Zebrafisch-Embryonen.

Gene-Funktion kann in loss-of-function Experimente verdeckt werden, wenn es eine Kompensation durch ein anderes Gen. Der Zebrafisch-Modell bietet eine relativ hohem Durchsatz, um eine solche funktionelle Redundanz in lebenden Embryonen zu offenbaren.

Ein Reverse Genetic Ansatz zur funktionellen Redundanz während der Embryogenese-Test

Eine Methode, bedingt Knockdown ein Zielprotein Ausdruck in der erwachsenen Zebrafisch Retina beschrieben, das geht intravitreal Injektion antisense Morpholinos und Elektroporation sie in der Netzhaut. Das resultierende Protein ist für mehrere Tage, die Prüfung des Proteins Rolle bei der Regeneration oder intakten Netzhaut ermöglicht klopfte.

In-vivo-Elektroporation von Morpholinos in die Adult Zebrafisch Retina

Wir beschreiben ein Verfahren zur bedingten Knockdown die Expression eines Zielproteins im Erwachsenenalter Zebrafisch Flossenregeneration. Diese Technik beinhaltet Mikrospritzvorrichtung und Elektroporation Antisense-Oligonukleotid in Morpholinos Flossengewebes das Testen des Proteins Rolle in verschiedenen Stadien der Flossenregeneration, einschließlich Wundheilung, Blastembildung und regenerative Auswachsen ermöglicht.

In-vivo-Elektroporation von Morpholinos in das Regenerations Adult Zebrafisch Leitwerk

Das Protokoll beschreibt den gezielten Knockdown der Genexpression im Zebrafisch durch Morpholino-Injektion in den Schwanz.

Morpholino-Injektion: Eine Methode zur Unterdrückung der Zielgenexpression zur Untersuchung der Funktion im Zebrafisch

Hier präsentieren wir einen systematischen Ansatz für die Entwicklung physiologisch relevant, sensitive und...

In Vivo Modellierung des Morbid Human Genome mit Danio rerio

In diesem Artikel zeigen wir ein Verfahren zur Manipulation der Genexpression in den Zellen des ventrikulären erwachsenen Zebrafisch telencephalon Verwendung von Antisense-Morpholino-Oligonukleotide. Wir präsentieren diese Methode als eine effiziente und schnelle Protokoll, das für funktionelle Studien in der erwachsenen Gehirn von Wirbeltieren eingesetzt werden können.

Mikromanipulation der Genexpression in der Erotik-Zebrafischgehirn Mit cerebroventricular Mikroinjektion von Morpholino Oligonukleotiden

Live Verfolgung einzelner WT retinalen Progenitoren in verschiedenen genetischen Hintergründen ermöglicht die Bewertung des Beitrags der Zelle nicht autonomen Signalisierung während der Neurogenese. Hier wird eine Kombination von Knock-Down, Chimäre Generation über Embryo - Transplantation und in - vivo - Zeitraffer-konfokale Abbildung wurde für diesen Zweck verwendet.

In - vivo - Bildgebung von Expression Transgene Gene in einzelnen Retinal Vorläufern in Chimäre Zebrabärblingembryonen Studie Zellnichtautonome Einflüsse

Nach Neuralrohr Bildung, verengt die Neuroepithel und Falten, während der Schlauch füllt sich mit embryonalen Liquor (eCSF), um die embryonale Hirnventrikel bilden. Wir haben dieses Ventrikels Injektionstechnik zur besseren Visualisierung der Flüssigkeit gefüllten Raum im Gegensatz zu den neuro-Form in einer Live-Embryo.

Zebrafisch Gehirn Ventrikel Injection

Hier zeigen wir, wie retro-orbitalen Injektion bei erwachsenen Zebrafisch zu tun.

Retro-Orbital-Injection in Adult Zebrafisch

Lernen Sie den reversen genetischen Morpholino-Ansatz mit intraventrikulärer Injektion zur Gen-Knockdown-Analyse in Zebrafisch-Larven. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Genfunktionen während der Geweberegeneration.

Rückwärts Genetische Morpholino Ansatz mit Herz ventrikuläre Injektion auf mehrere Schwer zu Zielgeweben in der Zebrafisch-Larve Transfektion (Video) | JoVE Journal

Rückwärts Genetische Morpholino Ansatz mit Herz ventrikuläre Injektion auf mehrere Schwer zu Zielgeweben in der Zebrafisch-Larve Transfektion

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