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DOI: 10.3791/56901-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a microfluidic method for analyzing individual bacterial cell lineages, specifically using Bacillus subtilis. The technique allows for long-term observation of cell generations under controlled growth conditions, addressing limitations of traditional microbiological methods.
Wir präsentieren Ihnen eine Methode zur Analyse von einzelnen Bakterienzelle Linien mit Bacillus Subtilis als Beispiel mikrofluidischen. Die Methode überwindet Mängel der traditionellen analytischen Methoden in der Mikrobiologie durch Beobachtung von Hunderten von Generationen der Zelle unter eng kontrollierbar und einheitliche Wachstumsbedingungen ermöglicht.
Das übergeordnete Ziel dieses mikrofluidischen Versuchsaufbaus ist es, die Langzeitbeobachtung einzelner Bakterienzellen unter konstanten, hochgradig kontrollierten Umweltbedingungen zu ermöglichen. Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen im Bereich der bakteriellen Physiologie zu beantworten, z. B. wie die langfristigen Reaktionsmuster einzelner Zellen auf Stress aussehen oder wie sich ein heterogener Phänotyp in einer Population mit der Zeit verändert. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass wir einzelne Zelllinien über Dutzende oder sogar Hunderte von Generationen unter konstanten, einheitlichen und streng kontrollierten Umweltbedingungen beobachten können.
Nach der Herstellung des PDMS-Polymers gemäß dem Textprotokoll legen Sie einen Silikonmaster auf ein Stück unbeschädigte Aluminiumfolie in einer Petrischale aus Styropor. Gießen Sie das entgaste PDMS-Gemisch bis zu einer Tiefe von etwa fünf Millimetern über den Master. Dann entgasen Sie das Gericht für mindestens 10 Minuten.
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