Mikrofluidische Strukturierung und fluoreszenzbasierte Verfolgung des einzelligen Bakterienwachstums
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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:27 Min. • October 30th, 2025
Beginnen Sie mit einer fluoreszenzmarkierten Bakterienkultur, die zu einem kohlenstofffreien Puffer hinzugefügt wird.
Zentrifugieren Sie, um die Bakterien zu pelletieren, und entsorgen Sie den Überstand.
Resuspendieren Sie das Pellet in einem frischen kohlenstofffreien Puffer, der ein mildes Reinigungsmittel enthält.
Das Fehlen einer Kohlenstoffquelle stoppt das Wachstum, während das Reinigungsmittel das Verklumpen verhindert und die Zellen in der Schwebe hält.
Laden Sie die Bakteriensuspension in eine Spritze und schließen Sie sie an eine Pumpe an.
Injizieren Sie die Suspension in den Einlass eines mikrofluidischen Chips, der einen Kanal mit in den Boden eingebetteten Fallen enthält.
Ziehen Sie die Flüssigkeit langsam aus dem Kanalauslass heraus.
Wenn die Flüssigkeit zurückweicht, leiten Kapillarkräfte die Bakterien zum Auslass.
Bei diesem Prozess siedeln sich einzelne Bakterienzellen in den Fallen an, was zu einer bakteriellen Musterbildung führt.
Spülen Sie den Kanal kontinuierlich mit einer vorgewärmten, nährstoffreichen Brühe.
Die Bakterien nehmen ihr Wachstum wieder auf und bilden Mikrokolonien in den Fallen.
Verwenden Sie die Fluoreszenzmikroskopie, um Zeitrafferbilder aufzunehmen und
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