Name: Transmissionselektronenmikroskopie als Visualisierungstechnik zur Analyse der zirkadianen synaptischen Plastizität im Fasskortex der Maus (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-19T13:30:00.000+00:00
Duration: 12 min 6 s
Description: Erfahren Sie, wie Transmissionselektronenmikroskopie zirkadiane synaptische Plastizität im Fasskortex der Maus analysiert. Diese Methode zeigt tageszeitliche Veränderungen inhibitorischer und exzitatorischer Synapsen auf.

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<ol><li>Jasinska, M., Pyza, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+plasticity+of+mammalian+inhibitory+interneurons%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plast%22%5BJournal%5D)">Circadian plasticity of mammalian inhibitory interneurons.</a> Neural Plast. 2017, 1-12 (2017).</li>
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<li>Jasinska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythmicity+of+synapses+in+mouse+somatosensory+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythmicity of synapses in mouse somatosensory cortex.</a> Eur J Neurosci. 42 (8), 2585-2594 (2015).</li>
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<li>Sterio, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+unbiased+estimation+of+number+and+sizes+of+arbitrary+particles+using+the+disector%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microsc%22%5BJournal%5D)">The unbiased estimation of number and sizes of arbitrary particles using the disector.</a> J Microsc. 134 (2), 127-136 (1984).</li>
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<li>Napper, R. M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Total+number+is+important%3A+using+the+disector+method+in+design-based+stereology+to+understand+the+structure+of+the+rodent+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neuroanat%22%5BJournal%5D)">Total number is important: using the disector method in design-based stereology to understand the structure of the rodent brain.</a> Front Neuroanat. 12, 16(2018).</li>
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<li>Kasthuri, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saturated+reconstruction+of+a+volume+of+neocortex%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Saturated reconstruction of a volume of neocortex.</a> Cell. 162 (3), 648-661 (2015).</li>
<li>Mikula, S., Binding, J., Denk, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staining+and+embedding+the+whole+mouse+brain+for+electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Staining and embedding the whole mouse brain for electron microscopy.</a> Nat Methods. 9 (12), 1198-1201 (2012).</li>
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<li>Nassan, M., Videnovic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythms+in+neurodegenerative+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurol%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythms in neurodegenerative disorders.</a> Nat Rev Neurol. 18 (1), 7-24 (2021).</li>
<li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+disruption+and+sleep+disorders+in+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Neurodegener%22%5BJournal%5D)">Circadian disruption and sleep disorders in neurodegeneration.</a> Transl Neurodegener. 12 (1), 8(2023).</li>
<li>Dufort-Gervais, J., Mongrain, V., Brouillette, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bidirectional+relationships+between+sleep+and+amyloid-beta+in+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Bidirectional relationships between sleep and amyloid-beta in the hippocampus.</a> Neurobiol Learn Mem. 160, 108-117 (2019).</li>
<li>Adler, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+disrupts+the+circadian+patterns+of+protein+expression+in+the+murine+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Aging+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Aging disrupts the circadian patterns of protein expression in the murine hippocampus.</a> Front Aging Neurosci. 11, 368(2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Aclar Film</td><td>Agar wissenschaftlich</td><td>AGL4458</td><td></td></tr><tr><td>Blender-Software&nbsp;</td><td></td><td></td><td>Version: v. 2.91.2</td></tr><tr><td>Cacodylsäure, Natriumsalztrihydrat</td><td>Polywissenschaften</td><td>01131-100</td><td></td></tr><tr><td>Konkave Rutsche</td><td>Menzel</td><td>9.161 151</td><td></td></tr><tr><td>Diamantmesser&nbsp;</td><td>Kieselalge</td><td>15-USA</td><td>Messerwinkel: Ultra 45°; &nbsp;</td></tr><tr><td>Digitalkamera&nbsp;</td><td>Nikon&nbsp;</td><td>DXM 1200 F</td><td></td></tr><tr><td>Di-Natriumhydrogenphosphat Dodecahydrat</td><td>POCH</td><td>799280115</td><td></td></tr><tr><td>Einbetten von Harz</td><td>Polywissenschaften</td><td>08792-1</td><td>Luft-Formulierung&nbsp;</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Pol-Aura</td><td>PA-11-0004</td><td></td></tr><tr><td>GIMP-Software</td><td></td><td></td><td>Version: v 3.0.4</td></tr><tr><td>Bleicitrat</td><td>TAAB</td><td>Nr. L018</td><td></td></tr><tr><td>Lichtmikroskopie&nbsp;</td><td>Nikon&nbsp;</td><td>Optiphot</td><td></td></tr><tr><td>Osmiumtetroxid&nbsp;</td><td>Polywissenschaften</td><td>0223C-10</td><td>Kristallin (99,95%)</td></tr><tr><td>Pinsel</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Photoshop-Software</td><td></td><td></td><td>Ausführung: CS5</td></tr><tr><td>Kaliumferricyanid</td><td>Sigmaaldrich</td><td>Nr. P8131</td><td></td></tr><tr><td>Propylenoxid&nbsp;</td><td>Sigmaaldrich</td><td>82320</td><td>puriss. p.a., &ge; 99,5 % (GC)</td></tr><tr><td>Raster mit einem Schlitz</td><td>Agar wissenschaftlich</td><td>AGG2525</td><td>2 x 0,75 mm oder 2 x 1 mm</td></tr><tr><td>Natriumchlorid&nbsp;</td><td>Chempur</td><td>117941206</td><td></td></tr><tr><td>Natriumdihydrogenphosphat-Dihydrat</td><td>Chempur</td><td>117991808</td><td></td></tr><tr><td>Stereomikroskop</td><td>PZO</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spritzenfilter&nbsp;</td><td>Biosens</td><td>BS25PES045</td><td></td></tr><tr><td>TEM&nbsp;</td><td>Joel</td><td>JEM-2100</td><td></td></tr><tr><td>Ultramikrotom</td><td>Leica</td><td>UC7</td><td></td></tr><tr><td>Uranylacetat</td><td>Lachema</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vibratom</td><td>Leica</td><td>VT1000 S</td><td></td></tr></tbody></table>

transmissionselektronenmikroskopie als visualisierungstechnik zur analyse der zirkadianen synaptischen plastizität im fasskortex der maus

Transmission Electron Microscopy as the Visualization Technique for Analysis of Circadian Synaptic Plasticity in the Mouse Barrel Cortex

Um unsere Methode richtig auf die Analyse zirkadianer synaptischer Veränderungen anzuwenden, ist es notwendig, zunächst mindestens vier Zeitpunkte in gleichen Abständen auszuwählen, mit zwei Punkten für jede Phase der Aktivität der Tiere (alle 6 Stunden). Zu diesen festgelegten Zeitpunkten werden die Tiere geopfert und ihre Gehirne gesammelt. Dieser Ansatz ermöglicht die Identifizierung von täglichen oder zirkadianen Mustern der synaptischen Plastizität und verknüpft sie mit Veränderungen in der Bewegungsaktivität der Ti...

Transmissionselektronenmikroskopie als Visualisierungstechnik zur Analyse der zirkadianen synaptischen Plastizität im Fasskortex der Maus

Examining circadian synaptic plasticity requires housing mice under different lighting conditions (light/dark cycle, LD 12:12, and constant darkness, DD), ...

transmission-electron-microscopy-as-visualization-technique-for

Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

Dieser Bericht zeigt eine Technik zur mechanischen Isolation von einzelnen Neuronen lebensfähig halten befestigt präsynaptischen boutons. Vibrodissociated Neuronen haben die Vorteile der schnellen Produktion, ausgezeichnete pharmakologische Kontrolle und verbesserten Raum-Klemme, ohne Einfluss von benachbarten Zellen. Diese Methode kann für die Bildgebung der synaptischen Elementen und Patch-Clamp-Aufzeichnung verwendet werden.

Vibrodissociation von Neuronen aus Nager Hirnschnitten zu Study Synaptic Transmission and Image präsynaptischen

Quelle: Villarreal, S., et. al., Messung der synaptischen Vesikel-Endozytose in kultivierten Hippocampus-Neuronen. (2017)Dieses Video zeigt die Analyse der synaptischen Vesikelendozytose in kultivierten Hippocampus-Neuronen durch Meerrettichperoxidase-Markierung und Elektronenmikroskopie.

Transmissionselektronenmikroskopische Bildgebung der synaptischen Vesikel-Endozytose in Hippocampus-Neuronen der Maus 

Quelle: Maruoka, H., et. al. Gleichzeitige Bildgebung der Mikrogliadynamik und der neuronalen Aktivität bei wachen Mäusen. J. vis. exp.,  (2022) Dieses Video zeigt ein Zwei-Photonen-Mikroskopieverfahren zur Abbildung der neuronalen Aktivität und der Mikrogliadynamik bei einer wachen Maus während der visuellen Stimulation, wobei Kalziumtransienten und zelluläre Wechselwirkungen hervorgehoben werden.

Gleichzeitige Bildgebung der Mikrogliadynamik und der neuronalen Aktivität bei einer wachen Maus

Zeitraffer-Bildgebung am lebenden Tier liefert wertvolle Informationen über die strukturelle Reorganisation im intakten Gehirn. Hier stellen wir ein verdünntes Schädelpräparat vor, das die transkranielle Bildgebung von fluoreszenzmarkierten synaptischen Strukturen in der lebenden Mausrinde mittels Zwei-Photonen-Mikroskopie ermöglicht.

Zwei-Photonen-<em&gt; In vivo</em&gt; Imaging von dendritischen Dornen in der Maus Cortex Mit einem ausgedünnten Schädel Vorbereitung

Diese Methode erstellt eine greifbare, vertraute Umgebung für die Maus zu navigieren und zu erkunden während der mikroskopischen Abbildung oder Einzelzellelektrophysiologischen Ableitungen, die feste Fixierung des Kopfes des Tieres verlangen.

Flach platt Klima angehoben Plattform: Eine neue Methode zur Kombination von Verhalten mit Mikroskopie oder Elektrophysiologie auf Awake frei bewegen Nagetiere

Dieses Video zeigt das Kraniotomieverfahren, das die chronische Bildgebung von Neuronen im retrosplenialen Kortex der Maus mittels in vivo Zwei-Photonen-Mikroskopie in der transgenen Thy1-GFP-Linie ermöglicht. Dieser Ansatz wird mit der Injektion von mCherry-exprimierenden Adeno-assoziierten Viren in den dorsalen Hippocampus kombiniert. Diese Techniken ermöglichen eine langfristige Überwachung der erfahrungsabhängigen strukturellen Plastizität bei RSC.

Die gleichzeitige Zwei-Photonen<em&gt; In Vivo</em&gt; Imaging der synaptischen Eingänge und Postsynaptische Targets in der Maus retrosplenialen Cortex

Wir entwickeln eine neue Technik in der Elektronenmikroskopie, „flash-and-freeze“, die die Visualisierung von Membrandynamik mit ms zeitlicher Auflösung ermöglicht. Diese Technik kombiniert die optogenetische Stimulation von Neuronen, die mit Hochdruck-Einfrieren. Hier haben wir die Verfahren zeigen, und die Protokolle im Detail beschreiben.

Flash-and-Freeze-: eine neuartige Technik Membrandynamik mit Elektronenmikroskopie zu erfassen

Diese Methode beschreibt eine chronische Zubereitung, die den optischen Zugang zum Hippocampus lebender Mäuse ermöglicht. Dieses Präparat kann verwendet werden, um längsinale optische Bildgebung der neuronalen strukturellen Plastizität und aktivitätsbeschworenen zellulären Plastizität über einen Zeitraum von mehreren Wochen durchzuführen.

Längs-Zwei-Photon-Bildgebung des Dorsal Hippocampal CA1 in lebenden Mäusen

Hier wird ein Protokoll zur Implantation eines chronischen Schädelfensters für die Längsbildgebung von Gehirnzellen in wachen, kopfgefesselten Mäusen vorgestellt.

Implantation eines kranialen Fensters für wiederholte In-vivo-Bildgebung bei wachen Mäusen

Hier stellen wir ein Protokoll vor, das die virale Transduktion diskreter Hirnregionen mit optogenetischen Konstrukten beschreibt, um eine synapsenspezifische elektrophysiologische Charakterisierung in akuten Nagetierhirnschnitten zu ermöglichen.

Ex vivo Optogenetische Befragung der synaptischen Übertragung und Plastizität über große Entfernungen vom medialen präfrontalen Kortex zum lateralen entohinalen Kortex

In dieser Arbeit beschreiben wir ein Protokoll, das die Adeno-assoziierte Virusinjektion mit der Implantation eines Schädelfensters kombiniert, um die Dynamik der Mikroglia und die neuronale Aktivität in wachen Mäusen simultan abzubilden.

Simultane Bildgebung von Mikrogliadynamik und neuronaler Aktivität in wachen Mäusen

Erfahren Sie, wie Transmissionselektronenmikroskopie zirkadiane synaptische Plastizität im Fasskortex der Maus analysiert. Diese Methode zeigt tageszeitliche Veränderungen inhibitorischer und exzitatorischer Synapsen auf.

Transmissionselektronenmikroskopie als Visualisierungstechnik zur Analyse der zirkadianen synaptischen Plastizität im Fasskortex der Maus (Video) | JoVE Journal

Transmissionselektronenmikroskopie als Visualisierungstechnik zur Analyse der zirkadianen synaptischen Plastizität im Fasskortex der Maus

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