Name: Aktualisiertes Protokoll für den Aufbau und die Verwendung des Minibioreaktor-Arrays (MBRA) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-05T14:10:00.000+00:00
Duration: 9 min 38 s
Description: Erfahren Sie den Aufbau und die Verwendung des Minibioreaktor-Arrays (MBRA) für Hochdurchsatz-Kulturen komplexer mikrobieller Gemeinschaften. Diese Methode ermöglicht reproduzierbare Experimente zur Erforschung von Darmmikrobiomen.

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<ol><li>Gilbert, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+understanding+of+the+human+microbiome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Current understanding of the human microbiome.</a> Nat Med. 24 (4), 392-400 (2018).</li>
<li>Sarkar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perspective%3A+simple+state+communities+to+study+microbial+interactions%3A+examples+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Perspective: simple state communities to study microbial interactions: examples and future directions.</a> Front Microbiol. 13, 801864(2022).</li>
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<li>McDonald, J. A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+microbial+community+reproducibility%2C+stability+and+composition+in+a+human+distal+gut+chemostat+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microbiol+Methods%22%5BJournal%5D)">Evaluation of microbial community reproducibility, stability and composition in a human distal gut chemostat model.</a> J Microbiol Methods. 95 (2), 167-174 (2013).</li>
<li>Feria-Gervasio, D., Denis, S., Alric, M., Brugère, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+maintenance+of+a+human+proximal+colon+microbiota+using+the+continuous+fermentation+system+P-ECSIM%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Microbiol+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">In vitro maintenance of a human proximal colon microbiota using the continuous fermentation system P-ECSIM.</a> Appl Microbiol Biotechnol. 91 (5), 1425-1433 (2011).</li>
<li>Auchtung, J. M., Robinson, C. D., Farrell, K., Britton, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MiniBioReactor+arrays+%28MBRAs%29+as+a+tool+for+studying+C.+difficile+physiology+in+the+presence+of+a+complex+community%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">MiniBioReactor arrays (MBRAs) as a tool for studying C. difficile physiology in the presence of a complex community.</a> Methods Mol Biol. 1476, 235-258 (2016).</li>
<li>Robinson, C. D., Auchtung, J. M., Collins, J., Britton, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemic+Clostridium+difficile+strains+demonstrate+increased+competitive+fitness+compared+to+nonepidemic+isolates%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Epidemic Clostridium difficile strains demonstrate increased competitive fitness compared to nonepidemic isolates.</a> Infect Immun. 82 (7), 2815-2825 (2014).</li>
<li>Auchtung, J. M., Robinson, C. D., Britton, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cultivation+of+stable%2C+reproducible+microbial+communities+from+different+fecal+donors+using+minibioreactor+arrays+%28MBRAs%29%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">Cultivation of stable, reproducible microbial communities from different fecal donors using minibioreactor arrays (MBRAs).</a> Microbiome. 3 (1), 42(2015).</li>
<li>Auchtung, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+simplified+microbial+communities+that+inhibit+Clostridioides+difficile+infection+through+dilution%2Fextinction%5BTitle%5D)+AND+%22mSphere%22%5BJournal%5D)">Identification of simplified microbial communities that inhibit Clostridioides difficile infection through dilution/extinction.</a> mSphere. 5 (4), e00387-e00320 (2020).</li>
<li>Hobson, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MiniBioReactor+array+%28MBRA%29+in+vitro+gut+model%3A+A+reliable+system+to+study+microbiota-dependent+response+to+antibiotic+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22JAC+Antimicrob+Resist%22%5BJournal%5D)">MiniBioReactor array (MBRA) in vitro gut model: A reliable system to study microbiota-dependent response to antibiotic treatment.</a> JAC Antimicrob Resist. 4 (4), dlac077(2022).</li>
<li>Auchtung, T. A., Lerma, A. I., Schuchart, K., Auchtung, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+effects+of+antibiotics+across+preclinical+models+of+the+human+gastrointestinal+microbiota%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiologyopen%22%5BJournal%5D)">Evaluating effects of antibiotics across preclinical models of the human gastrointestinal microbiota.</a> Microbiologyopen. 14 (4), e70030(2025).</li>
<li>Naimi, S., Viennois, E., Gewirtz, A. T., Chassaing, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+impact+of+commonly+used+dietary+emulsifiers+on+human+gut+microbiota%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">Direct impact of commonly used dietary emulsifiers on human gut microbiota.</a> Microbiome. 9 (1), 66(2021).</li>
<li>Bolyen, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((interactive%2C+scalable+and+extensible+microbiome+data+science+using+QIIME+2%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">interactive, scalable and extensible microbiome data science using QIIME 2.</a> Nat Biotechnol. 37 (8), 852-857 (2019).</li>
<li>Hobson, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microbiota-dependent+response+to+anticancer+treatment+in+an+in+vitro+human+microbiota+model%3A+a+pilot+study+with+hydroxycarbamide+and+daunorubicin%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">A microbiota-dependent response to anticancer treatment in an in vitro human microbiota model: a pilot study with hydroxycarbamide and daunorubicin.</a> Front Cell Infect Microbiol. 12, 886447(2022).</li>
<li>Jensen, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+fiber+monosaccharide+content+alters+gut+microbiome+composition+and+fermentation%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Dietary fiber monosaccharide content alters gut microbiome composition and fermentation.</a> Appl Environ Microbiol. 90 (8), e00964-e01024 (2024).</li>
<li>Ghimire, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positive+synergistic+effects+of+quercetin+and+rice+bran+on+human+gut+microbiota+reduces+Enterobacteriaceae+family+abundance+and+elevates+propionate+in+a+bioreactor+model%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Positive synergistic effects of quercetin and rice bran on human gut microbiota reduces Enterobacteriaceae family abundance and elevates propionate in a bioreactor model.</a> Front Microbiol. 12, 751225(2021).</li>
<li>Hu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minibioreactor+arrays+to+model+microbiome+response+to+alcohol+and+tryptophan+in+the+context+of+alcohol-associated+liver+disease%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Biofilms+Microbiomes%22%5BJournal%5D)">Minibioreactor arrays to model microbiome response to alcohol and tryptophan in the context of alcohol-associated liver disease.</a> NPJ Biofilms Microbiomes. 10 (1), 132(2024).</li>
<li>Jens, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MBRA-2%3A+A+modified+chemostat+system+to+culture+biofilms%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiol+Spectr%22%5BJournal%5D)">MBRA-2: A modified chemostat system to culture biofilms.</a> Microbiol Spectr. 11 (1), e02928-e03022 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>&nbsp; V-Gewindebohrerführung, Standardgrößen 0-80 bis 5/8"</td><td>Große Gator-Werkzeuge</td><td>STD500NP&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>0,22 μm M Spritzenvorsatzfilter</td><td>Fischer</td><td>SLGVR33RS</td><td></td></tr><tr><td>2mag MIXdrive 60 Rührantrieb (nur Antrieb)</td><td>2MAG</td><td>MF 41060</td><td></td></tr><tr><td>Air-tite Injektionsnadeln, 22G x3"</td><td>VWR</td><td>89219-274</td><td></td></tr><tr><td>BD 1mL Slip Tip Sterile Spritzen Steril</td><td>Fischer</td><td>14-823-434</td><td></td></tr><tr><td>Bioreaktor</td><td>Proto-Labore</td><td>NA</td><td>3D-gedruckt aus DMS Somos Watershed Plastic. Siehe ergänzende Datei 1 zur Vorlage</td></tr><tr><td>Bioreaktor-Halterungen</td><td>Proto-Labore</td><td>NA</td><td>3D-gedruckt aus PA 12 Black. Siehe ergänzende Datei 2 für die Vorlage.</td></tr><tr><td>Diba Omnifit Q-Serie Lösemittel-Flaschenverschluss, GL38/38-430 (Glas), 2 UNF(F) Anschlüsse ohne Ventile, Blau</td><td>Cole Parmer</td><td>Artikel-Nr.: EW-21942-86</td><td></td></tr><tr><td>Diba Omnifit Schlauch, PTFE, 1/8" (3,2 mm) AD x 1,5 mm ID</td><td>Cole Parmer</td><td>Artikel-Nr.: EW-21942-76</td><td></td></tr><tr><td>Dibafit Adapter, 1/4"-28 UNF(M) flacher Boden auf 3,2 mm ID, PEEK</td><td>Cole Parmer</td><td>Artikel-Nr.: EW-21941-49</td><td></td></tr><tr><td>IRWIN 12001ZR Windeisen #0-1/4" T-Griff</td><td>Amazonas</td><td>B00004YOB0</td><td></td></tr><tr><td>Irwin Hanson SAE-Fraktionsgewindebohrer aus kohlenstoffreichem Stahl 1/4 Zoll 1 Stk.</td><td>Zoro</td><td>G7695682</td><td></td></tr><tr><td>Loctite Heavy Duty Epoxy Quick Set 8-Flüssig-Unzen-Flasche</td><td>Amazonas</td><td>B0044F59N0</td><td></td></tr><tr><td>Stecker auf Stecker Luer-Lock-Anschluss</td><td>Darwin Mikrofluidik</td><td>DM-MM-LUER-PP&nbsp;</td><td>Alternativ: Strategic Applications Inc Stecker auf Stecker Luer-Anschluss - 10/Stück - Fisher - NC9876577</td></tr><tr><td>Masterflex Adapter Fittings, Luer auf Luer, Nylon, Avantor</td><td>VWR</td><td>MFLX45502-56</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex-Verschraubung, Nylon, gerade, weiblicher Luer-auf-Schlauch-Tüllenadapter, 1/16" ID</td><td>VWR</td><td>MFLX45502-00</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex Verschraubung, Nylon, gerade, weiblicher Luer-auf-Schlauch-Tüllenadapter, 3/32" ID</td><td>VWR</td><td>MFLX45502-02</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex Verschraubung, Nylon, gerade, weibliche Luer-auf-Schlauch-Tülle, 1/8"</td><td>VWR</td><td>MFLX45502-04</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex Verschraubung, Nylon, gerade, männlicher Luer-Lock-auf-Schlauch-Tülle-Adapter, 1/8</td><td>VWR</td><td>MFLX45505-04</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex Fitting, Nylon, gerade, männlich Luer x 1/4-28 UNF</td><td>VWR</td><td>MFLX45505-82</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex-Verschraubung, Polypropylen, Winkel, Luer-auf-Luer-Buchse Adapter</td><td>VWR</td><td>MFLX45508-26</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex Ismatec Pumpenschlauch, 2-Stopp, Tygon S3 E-Lab, 0.89 mm ID</td><td>VWR</td><td>MFLX96460-26</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex Ismatec Pumpenschläuche, 2 Stopps, Tygon S3 E-Lab, 1,14 mm Innendurchmesser</td><td>VWR</td><td>MFLX96460-30</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex&reg; Transferschlauch, C-Flex, undurchsichtig weiß, 1/8" ID x 1/4" AD; 25 Fuß</td><td>VWR</td><td>MFLX06424-67</td><td></td></tr><tr><td>Mohr' s Pinchcock für Tubing&nbsp;</td><td>VWR</td><td>470201-374</td><td></td></tr><tr><td>Neopren Gummi Kotflügel Unterlegscheiben &frac12; &rdquo; OD x &frac14; &rdquo; Innendurchmesser x 1/16" Dicke&nbsp;</td><td>Amazonas</td><td>B01A29F1R0</td><td></td></tr><tr><td>Präzisionsdichtung Gummisepten</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Z553905</td><td></td></tr><tr><td>Spinbar Mikro-Rührstäbchen</td><td>VWR</td><td>58948-375</td><td></td></tr><tr><td>Tetra-Ätzen</td><td>R.S. Hughest Unternehmen</td><td>TE-500</td><td></td></tr><tr><td>Schlauchhalter</td><td>Proto-Labore</td><td>NA</td><td>3D-gedruckt aus PA 12 Black. Siehe ergänzende Datei 3 für die Vorlage.</td></tr><tr><td>Watson-Marlow 205S Mehrkanal-Kartuschenpumpe</td><td>Watson-Marlow</td><td>Artikel-Nr.: 020.3724.00A</td><td>Reduziert, alternativ: Ismatec IPC Digital Schlauchpumpen MFLX7800142 - FISHER - 113-200-014 oder Masterflex Ismatec IPC Schlauchpumpe, 0,1 bis 11,25 U/min, 24-Kanal, 115/230 VAC, Avantor, VWR, MFLX78006-48-CH</td></tr></tbody></table>

aktualisiertes protokoll für den aufbau und die verwendung des minibioreaktor-arrays (mbra)

Updated Protocol for the Assembly and Use of the Minibioreactor Array (MBRA)

Um das Wachstum von anaeroben Bakterien, wie sie im Magen-Darm-Trakt vorkommen, zu erleichtern, kann der MBRA in anaeroben Kammern aufgestellt und betrieben werden. Um die Fähigkeit zu demonstrieren, komplexe Bakteriengemeinschaften direkt von relevanten Stellen im menschlichen Körper zu züchten, wurde eine menschliche Stuhlprobe vorbereitet und in diesem System gezüchtet. Alle Arbeiten wurden in einer anaeroben Kammer durchgeführt, die auf 37 °C eingestellt war, und die Kulturen wurden in unserem Bioreaktormedium BRM37 gezüchtet.
Die Fäkalaufschlämmung wurde hergestellt, indem menschlicher Stuhl anaerob aufgetaut und dann mit phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) auf eine Endkonzentration von 25 Gew.-% gemischt wurde. Nach Bestätigung der Sterilität wurden neun Bioreaktorkammern mit jeweils 3 ml desselben Stuhlgeldes beimpft. Mikrobielle Gemeinschaften wurden über Nacht ohne Medieneinsatz oder Abfallentsorgung gezüchtet, was zu getrennten Chargenkulturen über einen Zeitraum von 16 Stunden führte. Dann wurden die Förderpumpen eingeschaltet und auf eine Fördermenge von 1,92 mL pro h eingestellt. Nach vier Tagen kontinuierlichen Flusses wurden Proben aus den Bioreaktoren entnommen und mittels 16S rRNA-Gensequenzierung auf Zusammensetzung der mikrobiellen Gemeinschaft analysiert, gefolgt von der Rauschunterdrückung mit Deblur und der taxonomischen Klassifizierung mit der SILVA 138 SSU-Datenbank in QIIME 213. Insgesamt wurden 65 Gattungen in allen neun Replikaten nachgewiesen, aber die Bioreaktoren wurden von nur 18 Gattungen dominiert, die jeweils mindestens 2 % der Häufigkeit in einem der neun Replikate aufwiesen (Abbildung 5). Die Bioreaktoren zeigten eine hohe Reproduzierbarkeit, so dass 22 der 65 Gattungen in allen neun Replikaten nachgewiesen werden konnten und weitere 17 Gattungen in mindestens der Hälfte der Replikate nachgewiesen wurden. Die Mehrzahl der Gattungen, die in mindestens einem Reaktor fehlten (37 von 43 Gattungen), waren seltene Spezies, jede mit einer relativen Abundanz von weniger als 2 % in Bioreaktoren. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die kontinuierlichen MBRA-Kulturen komplexe, reproduzierbare mikrobielle Gemeinschaften unterstützten, die aus derselben Stuhlprobe stammten, selbst nach separaten Chargenkulturen für 16 Stunden in jeder Bioreaktorkammer.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68788/68788fig1.jpg"> 
Abbildung 1: Das Minibioreactor Array (MBRA). Fertig montierter MBRA, einschließlich Etiketten für den Schlauchbaum der Zu- und Ableitung, die Bioreaktorkammern und den Bioreaktorstreifen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68788/68788fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68788/68788fig2.jpg"> 
Abbildung 2: PTFE-Ätzführung und MBRA-Anschlussanordnung. (A) Flussdiagramm für das Ätzen der Medien und PTFE-Abfallhalme. (B) Jede Bioreaktorkammer enthält einen Anschluss für einen Medienstrohhalm + männlichen Luer mit Gewinde, einen Abfallstrohhalm + männlichen Luer mit Gewinde und ein Septum + männlichen Luer mit Gewinde. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68788/68788fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68788/68788fig3.jpg"> 
Abbildung 3: MBRA Futter- und Abfallleitungsbäume. Repräsentative Bilder, die bei der Assemblierung von (A) Zuleitungsbaum und (B) Abfallleitungsbaum zu befolgen sind. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68788/68788fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68788/68788fig4.jpg"> 
Abbildung 4: Medienflaschenverschluss und Abfallstufensystem. (A) Ein Beispiel für einen zusammengebauten Flaschenverschluss der Q-Serie, der zum Ansaugen von Medien in die MBRAs verwendet wird. (B) Ein Bild des abgestuften Abfallsammelsystems. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68788/68788fig4large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68788/68788fig5.jpg"> 
Abbildung 5: Relative Abundanz von Bakteriengattungen. (A) Das gestapelte Balkendiagramm zeigt die relative Abundanz aller Gattungen, die in einer der angezeigten Stichproben eine Abundanz von mindestens 2 % aufweisen. (B) Alpha-Diversitätsmetriken der beobachteten OTUs und der Shannon-Diversität zwischen allen neun Bioreaktorkammern. Alle neun Bioreaktorkammern wurden mit der gleichen Fäkalaufschlämmung beimpft, die aus menschlichem Stuhl hergestellt wurde. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68788/68788fig5large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
Tabelle 1: MBRA-Komponenten. Bilder und Beschreibungen aller Einzelteile, die für den vollständigen Zusammenbau des MBRA erforderlich sind, zusammen mit der für jedes Bauteil benötigten Menge. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68788/Table1.xlsx" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um diese Tabelle herunterzuladen.</a>
Tabelle 2: Leitfaden zur Fehlerbehebung. Häufige Probleme, die beim Ausführen des MBRA auftreten, zusammen mit den möglichen Ursachen und empfohlenen Lösungen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68788/Table2.xlsx" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um diese Tabelle herunterzuladen.</a>
Ergänzende Datei 1: Stl-Datei für den 3D-Druck der Minibioreaktor-Array-Streifen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68788/Supplementary%20File%201.stl" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um diese Datei herunterzuladen.</a>
Ergänzende Datei 2: STL-Datei für den 3D-Druck der Bioreaktorhalter, mit denen die Bioreaktoren an den Rührplatten verankert sind. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68788/Supplementary%20File%202.stl" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um diese Datei herunterzuladen.</a>
Ergänzungsdatei 3.: Stl-Datei für den 3D-Druck der Schlauchhalter, die zur Organisation des C-Flex-Abfalls und der Zuführschläuche verwendet werden, die von den MBRAs ausgehen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68788/Supplementary%20File%203.stl" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um diese Datei herunterzuladen.</a>

Aktualisiertes Protokoll für den Aufbau und die Verwendung des Minibioreaktor-Arrays (MBRA)

The human microbiome comprises diverse and dynamic microbial communities that play essential roles in host health. Understanding these communities and ...

updated-protocol-for-assembly-use-minibioreactor-array

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Quelle: Hemmerich, J., et al. Protokoll zur Optimierung der heterologen Proteinproduktion unter Verwendung automatisierter Mikrobioreaktortechnologie. J. Vis. Exp. (2017).Dieses Video demonstriert den Einsatz eines automatisierten Mikrobioreaktors zur Überwachung des Bakterienwachstums und der Sekretion fluoreszierender Proteine als Reaktion auf unterschiedliche Medienformulierungen. Ein gentechnisch verändertes Bakterium, das ein sekretorisches fluoreszierendes Protein exprimiert, wird unter...

Überwachung des bakteriellen Wachstums in unterschiedlichen Medienformulierungen mit einem automatisierten Mikrobioreaktor

In diesem Protokoll wird die Herstellung, der Aufbau und die grundlegende Bedienung eines mikrofluidischen Pikoliter-Bioreaktors (PLBR) für die Einzelzellanalyse von prokaryotischen Mikroorganismen vorgestellt. Industriell relevante Mikroorganismen wurden als Proof of Principle analysiert, was Einblicke in die Wachstumsrate, Morphologie und phänotypische Heterogenität über bestimmte Zeiträume ermöglicht, was mit herkömmlichen Methoden kaum möglich ist.

Mikrofluidischer Picoliter-Bioreaktor für die mikrobielle Einzelzellanalyse: Herstellung, Systemaufbau und Betrieb

Mit einem pneumatischen Bioreaktor demonstrieren wir den Aufbau, den Betrieb und die Leistung dieses Einweg-Bioreaktorsystems für das Wachstum von Säugetierzellen.

Anbau von Säugetierzellen mit einem Einweg-Bioreaktorsystem Pneumatische

Ein neuartiges Reaktordesign, das als High Density Bioreactor (HDBR) bezeichnet wird, wird für die Kultivierung und Untersuchung von mikrobiellen Gemeinschaften mit hoher Dichte vorgestellt. Hier wird der HDBR erfolgreich in einer Photobioreaktor (PBR)-Konfiguration zur Untersuchung des Stickstoffstoffwechsels durch eine gemischte Algengemeinschaft mit hoher Dichte eingesetzt.

A Novel Bioreaktor für High Density Anbau von Diverse mikrobiellen Gemeinschaften

Die Entwicklung der mikrobiellen Gemeinschaften hängt von einer Kombination von Faktoren ab, einschließlich Umweltarchitektur, Mitgliedshäufigkeit, Züge und Wechselwirkungen. Dieses Protokoll beschreibt eine synthetische, mikrogefertigte Umgebung für die gleichzeitige Verfolgung von Tausenden von Gemeinschaften, die in Femtoliter-Vertiefungen enthalten sind, wo Schlüsselfaktoren wie Nischengröße und Einschluss angenähert werden können.

Zusammenbau und Verfolgung der mikrobiellen Gemeinschaftsentwicklung innerhalb einer Microwell Array Plattform

Dieses Manuskript beschreibt einen generischen Ansatz für maßgeschneiderte Gestaltung der mikrobiellen Anbau-Medien. Ermöglicht wird das durch einen iterativen Workflow kombinieren Kriging-basierte experimentelle Design und Microbioreactor Technologie für ausreichend Anbau Durchsatz, gestützt durch Labor-Robotik, Zuverlässigkeit und Schnelligkeit in Flüssigkeit Umgang mit Medien zu erhöhen Vorbereitung.

Generischen Protokoll zur Optimierung der heterologen Proteinproduktion mit automatisierten Microbioreactor Technologie

Ein detailliertes Protokoll für den gleichzeitigen Betrieb von 48 parallel Zellkulturen unter unterschiedlichen Bedingungen in einem Microbioreactor-System wird vorgestellt. Zellprozess Kultur, Ernte und anschließende Antikörper-Titer Analyse werden beschrieben.

Einsatz von Hochdurchsatz-automatisierte Microbioreactor-System für die Produktion des Modells IgG1 in CHO-Zellen

Hier stellen wir ein detailliertes Verfahren zur Ausführung eines Experimentsentwurfs in einem automatisierten Mikrobioreaktor vor, gefolgt von der Zellernte und der Proteinquantifizierung mit einer Protein-A-Säule.

Prozessoptimierung mit automatisierten Mikro-Bioreaktoren mit hohem Durchsatz in der chinesischen Hamster-Ovarialzell-Kultivierung

Hier stellen wir ein Protokoll vor, um die Herstellung von adhärenten Zellen in großem Maßstab durch ein vollständig geschlossenes System auf der Basis von auflösbaren Mikroträgern in GMP-Qualität zu erreichen. Die Kultivierung von humanen mesenchymalen Stammzellen, HEK293T Zellen und Vero-Zellen wurde validiert und erfüllte sowohl die Quantitätsanforderungen als auch die Qualitätskriterien für die Zell- und Gentherapieindustrie.

Großtechnische Zellproduktion auf Basis von auflösbaren porösen Mikroträgern in GMP-Qualität

Dieses Protokoll beschreibt den Zusammenbau von Mini-Bioreaktor-Arrays, die für die kontinuierliche Durchflusskultur komplexer Stuhlgemeinschaften unter anaeroben Bedingungen verwendet werden sollen. Wir besprechen auch die Methoden für den Zusammenbau, die Inokulation und die Probenahme der Reaktoren für die weitere Analyse.

Bioreaktor-Assemblierung für die kontinuierliche Kultivierung komplexer Stuhlgemeinschaften

Ein Protokoll wird für die Produktion von ankerabhängigen Zellen durch Mikroträger-Mikrobioreaktoren als potenzielle zellbasierte Therapien beschrieben. Bei der Zielsetzung eines Anwendungsfalls des akuten Atemnotsyndroms werden vergleichbare Zellausbeute und günstige Genexpression im Vergleich zu kolbenbasierten Prozessbedingungen illustriert. Dieses Protokoll lässt sich auf andere ankerabhängige Zellen und Zielindikationen erweitern.

Mikrobioreaktor-basierte Produktion von ankerabhängigen mesenchymalen Stromzellen, die auf das akute Atemnotsyndrom vorbereitet sind

Erfahren Sie den Aufbau und die Verwendung des Minibioreaktor-Arrays (MBRA) für Hochdurchsatz-Kulturen komplexer mikrobieller Gemeinschaften. Diese Methode ermöglicht reproduzierbare Experimente zur Erforschung von Darmmikrobiomen.

Aktualisiertes Protokoll für den Aufbau und die Verwendung des Minibioreaktor-Arrays (MBRA)

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