Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Immunology and Infection
Click here for the English version

Immunology and Infection

Fekal (mikro) RNA-isolasjon

Published: October 28, 2020 doi: 10.3791/61908
Automatic Translation
1,2, 1,2, 1,2
1Ann Romney Center for Neurologic Diseases, Department of Neurology, Partners Multiple Sclerosis Center, Brigham and Women's Hospital and Harvard Medical School, 2Evergrande Center for Immunologic Diseases, Harvard Medical School and Brigham and Women's Hospital

Summary

Denne protokollen isolerer total RNA av høy kvalitet fra fekale prøver av dyr og mennesker. Et kommersielt miRNA-isolasjonssett brukes med betydelig tilpasning for å isolere rent RNA med optimalisert kvantitet og kvalitet. RNA-isolatene er gode for de fleste nedstrøms RNA-analyser som sekvensering, mikro-array og RT-PCR.

Abstract

Det blir klart at RNA eksisterer i tarmlumen og avføring hos dyr og mennesker. Protokollen beskrevet nedenfor isolerer totalt RNA inkludert mikroRNA fra fekale prøver av dyr og mennesker. Målet er å isolere totalt RNA med høy renhet og mengde for nedstrømsanalyser som RNA-sekvensering, RT-PCR og mikromatrise. Fordelene med denne optimaliserte protokollen i miRNA-isolasjonen er evner til å isolere høyt rensede RNA-produkter med ytterligere vasketrinn beskrevet, økt mengde RNA oppnådd med en forbedret metode i resuspendering av prøven og viktige tips om dekontaminering. En begrensning er manglende evne til å behandle og rense større prøve på mer enn 200 mg, da disse prøvestørrelsene vil føre til vanskeligheter med den klare dannelsen av interfasen. Følgelig kan den store prøvestørrelsen forurense den vandige fasen som skal ekstraheres som beskrevet i protokollen med organiske forhold som påvirker kvaliteten på RNA isolert til slutt. RNA-isolater fra en prøve på opptil 200 mg er imidlertid tilstrekkelig for de fleste nedstrømsanalyser.

Introduction

Ekstracellulært RNA blir anerkjent som en viktig faktor som formidler mange biologiske prosesser1. Ekstracellulært RNA i avføring ble først rapportert i 2008 som en markør for tykktarmskreft og aktiv ulcerøs kolitt2, og det ble nylig avslørt som en normal komponent i tarmlumen og avføring og formidler vertsmikrobekommunikasjon 3,4,5. Formålet med denne RNA-isolasjonsprotokollen er å trekke ut ekstracellulært RNA av høy kvalitet fra fekale prøver samlet inn fra dyr og mennesker. Protokollen ble tilpasset fra et kommersielt miRNA Isolation Kit. RNA som er anskaffet brukes til nedstrømsanalyser som RNA-sekvensering, RT-PCR og mikro-array. Protokollen inneholder flere viktige og nyttige tips for å maksimere mengden og kvaliteten på RNA som finnes i avføring av dyr og mennesker. Årsaken til å utvikle og optimalisere denne metoden for RNA (inkludert mikroRNA) isolasjon er å redusere mikrobiell RNA i avføringen, begrense variablene i forskningsstudiene og analysere RNA-sammensetningen i tarmen uten å regnskapsføre ulike forstyrrende faktorer og forurensningskilder. Merk at denne RNA-isolasjonen minimerer frigivelsen av RNA fra levende celler og levende mikrober (cellulær RNA). Det fokuserer på ekstracellulære RNA som har blitt frigjort av tarmceller eller blitt anskaffet via matinntak. Hovedsakelig er denne metoden ikke egnet for studier der det mikrobielle transkriptomet undersøkes.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle metoder som involverer forsøksdyr beskrevet her, er godkjent av Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) ved Brigham and Women's Hospital, Harvard Medical School.

Alle metoder som involverer mennesker som er beskrevet her, er i samsvar med retningslinjene fastsatt av Partners Human Research Committee.

1. Fekal prøvesamling

  1. Autoklav eller klargjør et sterilt og nukleasefritt 2 ml mikrosentrifugerrør med en skruehett for hvert dyrefag i et forsøk.
    1. For mennesker, sørg for en passende, nukleasefri og steril avføringsprøveinnsamlingsenhet for hvert.
  2. Samle 25-100 mg (ca. 1-4 fekale pellets for musefekale prøver) av fekale prøver fra hvert dyrefag i et sterilt miljø.
    MERK: To eller flere fekale pellets (~ 50 mg eller tyngre) foretrekkes for å oppnå RNA med høyeste renhet.
    1. Bruk alt nødvendig personlig verneutstyr (PPE) og materialer, for eksempel: et par laboratoriehansker, en desinfiserende spray og et sterilt papirhåndkle, for å sterilisere arbeidsområdet, der dyreforsøkspersonen er plassert på, for å unngå fekal prøvekontaminering.
      1. For mennesker, instruere hver forsøksperson / samler å samle 100-200 mg avføringsprøver i et miljø så sterilt som mulig. Bruk standard steril drift og unngå forurensning av avføringsprøver.
  3. Samle avføringsprøver fra hvert dyrefag direkte inn i et 2 ml mikrosentrifugerrør med en skruehett uten å berøre andre overflater for å unngå forurensning.
    1. For mennesker bør hver forsøksperson instruere hvert forsøksperson om å gjøre sitt fornødne direkte i en aktuell innsamlingsenhet (f.eks. et sterilt avføringsprøvetakingssett) for å unngå kontaminering.
      MERK: Instruer motivet for å unngå forurensning av toalettoverflater, vann, urin eller andre ikke-sterile overflater/gjenstander.
  4. Frys fekale prøver samlet i 2 ml mikrosentrifugerør umiddelbart ved -80 ° C eller legg i en bøtte med tørris for bedre mengde og kvalitet av RNA før avføring resuspenderes som beskrevet i trinnene nedenfor.
    1. For avføringsprøver fra mennesker, aliquot hver fersk prøve på 200 mg i 2 ml mikrosentrifugerør med skruehett og frys dem ved -80 °C før avføring resuspenderes som beskrevet nedenfor.
      1. For oppbevaring av avføringsprøver som ikke er i 2 ml mikrosentrifugerør med skruehett, veie og overfør 100-200 mg hver av frosne prøver til separate 2 ml mikrosentrifugerør med skruehett før avføring resuspenderes som beskrevet nedenfor.
        MERK: For humane avføringsprøver, unngå å ta mer enn 200 mg avføringsprøver for RNA-isolasjon, da det kan føre til vanskeligheter i følgende trinn. Med en overbelastet prøve i et 2 ml mikrosentrifugerør, kan den vandige fasen, organisk fase og interfase ikke være tydelig dannet og separert. Prosedyren kan settes på pause her.

2. Forberedelse av vaskeløsninger

  1. Tilsett 21 ml American Chemical Society (ACS) klasse 100% etanol til vaskeløsningen 1 som følger med i miRNA-isolasjonssettet (se materialtabell) for å nå det endelige volumet på 30 ml, som vist på flasken. Vortex til alt oppløses i flasken.
  2. Tilsett 40 ml ACS-grad 100 % etanol i vaskeoppløsningen 2/3 som følger med for å nå det endelige volumet på 50 ml, som vist på flasken. Vortex i 5 s eller til den endelige blandingen er godt blandet.

3. Forberedelser av utstyr og materialer

  1. Spray arbeidsområdet og utstyret, for eksempel: laboratoriebenken, arbeidsområdet i den kjemiske røykhetten og mikrosentrifugerørstativene, med en ribonuklease (RNase) dekontamineringsløsning (f.eks. kommersielt tilgjengelig RNase dekontamineringsløsning). For å unngå kontaminering, påfør med RNase-dekontamineringsløsningen på overflatene hvor og når det anses nødvendig.
  2. Ta på deg en ren laboratoriefrakk, ta på deg en ansiktsmaske, og bruk passende laboratoriehansker for å beskytte RNA i fekalprøvene mot nukleaser som er tilstede på menneskelig hud. Spray hansker med en RNase dekontamineringsløsning og bytt hansker ofte for å unngå forurensning.
  3. Forbered en bøtte med tørris til avføringsprøver lagret ved -80 °C for å forhindre tining før avføring resuspension og en bøtte med is for materialer, for eksempel: Syre-fenol: Kloroform, for å forlenge holdbarheten.
    MERK: Sørg for at materialer, inkludert mediene som brukes i protokollen, er sterile uten forurensning av nukleaser.

4. Resuspendering av avføring

  1. Resuspendere 25-100 mg fekale prøver i 600 μL steril 1x Dulbeccos fosfatbufrede saltvann (DPBS).
    FORSIKTIG: Fekale prøver bør behandles umiddelbart når de tines fra -80 °C uten engang delvis tining for å minimere frigjøringen av RNaser og cellulært RNA, da iskrystaller brister både innvendige og utvendige cellulære rom når celler i prøven tiner.
    1. Tilsett 600 μL 1x DPBS til 2 ml mikrosentrifugerør med en skruehett som inneholder fekale prøver ved romtemperatur (RT).
    2. Inkuber blandingen av fekale prøver nedsenket i 600 μL 1x DPBS i 2 ml mikrosentrifugerør avkortet i 30 minutter ved RT.
    3. Resuspend blandingen ved å mose med 1 ml pipettespiss og virvel godt med 2 ml mikrosentrifugerør avkortet. For å optimalisere og øke mengden og kvaliteten på RNA, resuspendere blandingen med en homogenisator med innstillingen for en syklus ved S4000 (eller 4000 rpm) og 45 s.

5. Organisk ekstraksjon

FORSIKTIG: Bruk den farlige kjemiske avtrekkshetten i følgende trinn frem til trinn 6 ved bruk av syrefenol: kloroform og ACS-grad 100% etanol på grunn av deres toksisitet og brennbarhet. Endre PPE etter behov og følg riktige standard forholdsregler når du arbeider med farlig materiale.

  1. Utdrag RNA med 600 μL syre-fenol: kloroform (volumet av syre-fenol: kloroform kreves tilsvarer det opprinnelige volumet av tilsatt 1x DPBS i trinn 4.1).
    1. Tilsett 600 μL syre-fenol: kloroform til suspensjonen fra trinn 4.1.
      MERK: Trekk ut syrefenol: kloroform fra den nedre fasen i flasken når den øvre fasen blandes med en vandig buffer. Hvis interfasen mellom disse to fasene forstyrres, vent og trekk ut syrefenol: kloroform bare når interfasen reetablerer seg for å unngå forurensning.
  2. Vortex blandingen i 60 s for å blande grundig. Alternativt, for å optimalisere og øke mengden RNA i utbyttet, bland ved å bruke en homogenisator med innstillingen for en syklus ved S4000 og 45 s.
  3. Sentrifuge i 15 minutter ved 10 000 x g ved RT for å skille de vandige og organiske fasene med en mikrosentrifuge. Etter sentrifugering skal interfasen være kompakt. Hvis ikke, gjenta sentrifugeringen.
    MERK: Hvis interfasen ikke kunne være så kompakt som ønsket, muligens på grunn av ujevnt forhold mellom startvolumet og volumet av tilsatt syrefenol: kloroform etter flere gjentakelser av sentrifugering, fortsett å gjenopprette den vandige fasen med større forsiktighet for å unngå forurensning.
  4. Gjenopprett den vandige fasen og overfør den til et nytt 2 ml mikrosentrifugerør med hengselhette (ikke levert av miRNA-isolasjonssettet).
    1. Fjern den vandige (eller øvre) fasen forsiktig uten å forstyrre den nedre fasen og overfør den til et nytt 2 ml mikrosentrifugerør med hengselhette. Legg merke til volumet som overføres (f.eks. ~500 μL).
      MERK: Når interfasen er kompakt og den øvre fasen er tydelig separert, er det muligens noen få små restpartikler som flyter på toppen av den vandige fasen. Pipette forsiktig for å unngå disse restene og bare gjenopprette synlig og tydelig separert vandig fase for å sikre et kvalitets RNA-utbytte, selv om du bare kunne oppnå et lite volum av den vandige fasen.

6. Endelig RNA-isolasjon

  1. Tilsett 1,25 volumer RT ACS klasse 100% etanol til den vandige fasen i 2 ml mikrosentrifugerøret (f.eks. Tilsett 625 μL 100% etanol hvis 500 μL vandig fase gjenvinnes fra trinn 5.4.). Vortex 3 s.
  2. Legg den vandige fase / etanolblandingen gjennom filterpatronen som følger med i miRNA-isolasjonssettet.
    1. For hver prøve, plasser filterpatronen i et av oppsamlingsrørene som leveres av settet.
      1. Pipette og last 600 μL av den vandige fase / etanolblandingen inn i filterpatronen.
        MERK: Vortex blandingen kort for å blande etanolen grundig med vandig fase før pipettering. Ikke mer enn 700 μL av den vandige fase / etanolblandingen kan lastes om gangen.
    2. Sentrifuge ved 10 000 x g i 90 s for å filtrere gjennom blandingen. Spinning med høyere hastighet kan skade filteret.
    3. Kast filtratet og gjenta trinn 6.2.1 til 6.2.2 til hele blandingen er filtrert gjennom samme filtermembran i påfølgende applikasjoner. Behold og gjenbruk det samme oppsamlingsrøret for vasketrinn nedenfor.
    4. Vask filteret med 700 μL miRNA Wash Solution 1.
      FORSIKTIG: miRNA Wash Solution 1 inneholder guanidin tiocyanat som kan forårsake hudirritasjon og alvorlig øyeskade. Bruk nødvendig PPE, for eksempel: hansker, ansiktsskjold, beskyttende laboratoriefrakk. Bytt hansker ofte etter behov.
      1. Påfør 700 μL miRNA Wash Solution 1, arbeidsløsningen fremstilt med ACS-klasse 100% etanol, i filterpatronen.
      2. Sentrifuge i 60 s for å filtrere miRNA Wash Solution 1 gjennom filterpatronen.
      3. Kast filtratet fra oppsamlingsslangen og plasser den samme filterpatronen i samme oppsamlingsrør.
    5. Vask filteret med vaskeoppløsning 2/3 en gang hver med volumer på 700 μL, 500 μL og 250 μL etter hverandre.
      1. Påfør 700 μL vaskeoppløsning 2/3, arbeidsløsningen fremstilt med ACS-klasse 100% etanol, i filterpatronen.
        1. Sentrifuge ved 10 000 x g i 1 min.
        2. Kast filtratet fra oppsamlingsslangen og plasser den samme filterpatronen i samme oppsamlingsrør.
      2. Påfør 500 μL vaskeoppløsning 2/3 i filterpatronen.
        1. Sentrifuge ved 10 000 x g i 1 min.
        2. Kast filtratet fra oppsamlingsslangen og plasser den samme filterpatronen i samme oppsamlingsrør.
      3. Påfør 250 μL vaskeoppløsning 2/3 i filterpatronen.
        1. Sentrifuge ved 10 000 x g i 1 min.
        2. Kast filtratet fra oppsamlingsrøret.
      4. Overfør filterpatronen til et nytt oppsamlingsrør og snurr enheten i 5 minutter for å fjerne gjenværende væske fra filteret.

7. Elute RNA med 50 μL nukleasefritt vann

  1. Overfør filterpatronen til et nytt oppsamlingsrør. Pipette 50 μL nukleasefritt vann til midten av filteret og deksel oppsamlingsrøret.
    1. Inkuber ved RT i 10 min.
    2. Spinn i 5 minutter ved 8,000 x g for å gjenvinne RNA i det nye oppsamlingsrøret.
    3. Bestem konsentrasjonen og renheten av gjenvunnet fekal RNA ved hjelp av et fluorometer. Gjenvunnet fekal RNA kan lagres ved -80 °C.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Representative RNA ble isolert fra henholdsvis 50 mg mus fekale prøver (2 mus fekale pellets) og 100 mg humane avføringsprøver og eluert i 50 μL nukleasefritt vann. Spektrofotometeranalyse av konsentrasjonen antyder at en total mengde på henholdsvis 49 μg og 16 μg RNA ble isolert (tabell 1). RNA-renheten var høy som indikert med et A260/A280-forhold på ~2,0 og et A260/A230-forhold på ~1,8 (tabell 1). Som rapportert3, er flertallet av RNA i avføringen mikroRNA, og disse mikroRNAene kan eksistere i eksosomet. I samsvar med dette antyder en chipbasert elektroforeseanalyse av RNA at representative RNA-isolater fra mus og menneskelig avføring er lave i eller mangel på 18S og 28S rRNA-sammensetninger, og størrelsen på RNA-isolater faller i den lille RNA-regionen (figur 1A). En ytterligere liten RNA-elektroforese med chipbasert elektroforese viser at en stor del av RNA-ene er av mikroRNA-størrelse (figur 1B). Dette er i samsvar med observasjonen at kvantifiseringen som ble fullført ved bruk av en liten RNA-bioanalysator, er sammenlignbar med den som ble oppnådd med tidligere analyser6.

Eksempel-ID Elution volum (μL) RNA-konsentrasjon (ng/μL) A260/A280 A260/A230 Utbytte (ng)
Mus 50 978.333 2.036 1.897 48916.65
Menneske 50 330.759 1.981 1.849 16537.95

Tabell 1: Representativ nanodropanalyse av RNA isolert med denne protokollen. Representative RNA ble isolert fra 2 mus fekale pellets eller 100 mg humane avføringsprøver, eluert i 50 μL nukleasefritt vann. RNA-konsentrasjon, forholdet mellom A260 / A280 og forholdet mellom A260 / A230 ble målt med nanodrop.

Figure 1
Figur 1: Representative chipbaserte elektroforeseanalyser av størrelsesfordeling av fekale RNA-isolater. (A) Representative RNA isolert fra 2 mus fekale pellets (venstre panel) og 100 mg humane avføringsprøver (høyre panel) ved bruk av protokollen beskrevet her ble karakterisert ved hjelp av den chipbaserte elektroforeseanalysen. Denne analysen antyder at flertallet av RNA-isolatene var små RNA. (B) Isolatene ble deretter utsatt for den lille RNA-elektroforesen med det chipbaserte elektroforesesystemet for å analysere størrelsesfordelingen av isolatene. Vennligst klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Det er viktig å bruke RNase-fri teknikk for å forhindre RNase-forurensning under isolasjonen7. Etter sentrifugering og dannelsen av en kompakt interfase, er det viktig å unngå interfase, nedre fase og partikkelforurensningen som flyter på toppen av den vandige fasen når den vandige fasen gjenopprettes. I tillegg tilsettes to vasketrinn med 500 μL og 250 μL vaskeløsning 2/3 for å eliminere forurensninger i filtermembranen for optimal kvalitet. Videre anbefales ikke et startprøvemateriale på mer enn 200 mg, da det kan skape vanskeligheter med den klare dannelsen av en interfase. Tilsvarende anbefales ikke et prøvemateriale på mindre enn 25 mg, da det kanskje ikke er tilstrekkelig å trekke ut nok RNA-prøver for nedstrømsanalyse.

Den utrolige veksten i mikrobiomstudien har drevet målingene av mikrobielle arter, gener til metatranskripsjonelle studier av den mikrobielle profilen8. MikroRNA i avføringen har blitt studert som markører for sykdommer 9,10,11. Siden den første rapporten om fekalt mikroRNA-mediering av vertsmikrobe-interaksjoner3, begynner økende studier å undersøke bidragene fra vert og diett i tarmøkosystemet12,13,14. Bemerkelsesverdig, på grunn av rikdommen av mikrober i tarmlumen og avføring, krever studier som fokuserer på vertsarmen av vertsmikrobeinteraksjonen minimal RNA-forurensning fra mikrober. Dermed er en RNA-ekstraksjonsprotokoll som inkluderer trinn av cellelysing15 ikke ideell for studiet av RNA frigjort fra vert og diett. Som sådan tilpasset vi denne protokollen for å eliminere lysistrinn for å minimere forurensninger av RNA fra levende bakterier og levende vertsceller i avføring.

Denne protokollen fungerer for studier der ekstracellulært RNA i fekal- eller tarmlumeninnholdet er et mål av interesse. RNA isolert ved hjelp av denne protokollen er totalt RNA, inkludert mikroRNA som hovedkomponent. Denne protokollen skiller ikke om RNA er i eksosom, mikrovesikler eller i vesikkelfri form.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne oppgir ingen relevante eller vesentlige økonomiske interesser som er knyttet til forskningsmetoden beskrevet i denne protokollartikkelen.

Acknowledgments

Vi mottok teknisk assistanse fra Biopolymers Facility ved Harvard Medical School for bioanalyser. Dette arbeidet ble støttet av National Multiple Sclerosis Society forskningsstipend RG-1707-28516 (H.L.W. og SL).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Acid-Phenol: Chloroform, pH 4.5 (with IAA, 125:24:1) Thermo Fischer Scientific AM9720
DPBS, no calcium, no magnesium Thermo Fischer Scientific 14190-144
Gloves
Microcentrifuge
mirVana miRNA Isolation Kit Thermo Fischer Scientific AM1561
Nuclease-Free microcentrifuge tubes (1.5 mL, 2 mL)
Nuclease-Free Water (Not DEPC-treated) Thermo Fischer Scientific AM9937
Pipettor and Nuclease-Free Pipette tips (with filter)
PowerLyzer 24 Homogenizer QIAGEN 13155
RNaseZap RNase Decontamination Solution Thermo Fischer Scientific AM9780
Vortex Shaker

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Das, S., et al. The extracellular RNA communication consortium: Establishing foundational knowledge and technologies for extracellular RNA research. Cell. 177 (2), 231-242 (2019).
  2. Ahmed, F. E., et al. Diagnostic microRNA markers for screening sporadic human colon cancer and active ulcerative colitis in stool and tissue. Cancer Genomics & Proteomics. 6 (5), 281-295 (2009).
  3. Liu, S., et al. The host shapes the gut microbiota via fecal microRNA. Cell Host & Microbe. 19 (1), 32-43 (2016).
  4. Viennois, E., et al. Host-derived fecal microRNAs can indicate gut microbiota healthiness and ability to induce inflammation. Theranostics. 9 (15), 4542-4557 (2019).
  5. Liu, S., et al. Oral administration of miR-30d from feces of MS patients suppresses MS-like symptoms in mice by expanding Akkermansia muciniphila. Cell Host & Microbe. 26 (6), 779-794 (2019).
  6. Masotti, A., et al. Quantification of small non-coding RNAs allows an accurate comparison of miRNA expression profiles. Journal of Biomedicine & Biotechnology. 2009, 659028 (2009).
  7. Green, M. R., Sambrook, J. How to win the battle with RNase. Cold Spring Harbor Protocols. 2019 (2), 101857 (2019).
  8. Franzosa, E. A., et al. Relating the metatranscriptome and metagenome of the human gut. Proceedings of the National Academy of Sciences. 111 (22), 2329-2338 (2014).
  9. Wohnhaas, C. T., et al. Fecal microRNAs show promise as noninvasive Crohn's disease biomarkers. Crohn's & Colitis. 2 (1), 003 (2020).
  10. Tomkovich, S., et al. Human colon mucosal biofilms and murine host communicate via altered mRNA and microRNA expression during cancer. mSystems. 5 (1), (2020).
  11. Tarallo, S., et al. Altered fecal small RNA profiles in colorectal cancer reflect gut microbiome composition in stool samples. mSystems. 4 (5), 70 (2019).
  12. Xing, S., et al. Breed differences in the expression levels of gga-miR-222a in laying hens influenced H2S production by regulating methionine synthase genes in gut bacteria. Research Square. , (2020).
  13. Teng, Y., et al. Plant-derived exosomal microRNAs shape the gut microbiota. Cell Host & Microbe. 24 (5), 637-652 (2018).
  14. Moloney, G. M., Viola, M. F., Hoban, A. E., Dinan, T. G., Cryan, J. F. Faecal microRNAs: indicators of imbalance at the host-microbe interface. Beneficial Microbes. , 1-10 (2017).
  15. Giannoukos, G., et al. Efficient and robust RNA-seq process for cultured bacteria and complex community transcriptomes. Genome Biology. 13 (3), 23 (2012).

Tags

Immunologi og infeksjon utgave 164 mikroRNA fekale prøver avføringsprøver RNA-isolasjon total RNA miRNA
Fekal (mikro) RNA-isolasjon
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Dhang, F. H., Weiner, H. L., Liu, S. … More

Dhang, F. H., Weiner, H. L., Liu, S. Fecal (micro) RNA Isolation. J. Vis. Exp. (164), e61908, doi:10.3791/61908 (2020).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter