C. elegans Disección de blastómeros: un método para extraer la cáscara del huevo y disociar las células embrionarias

- Para esta disección, utilice dos micropipetas: una con una abertura aproximadamente del mismo ancho que un huevo y otra que sea el doble de ancha, y una serie de soluciones organizadas en pocillos para facilitar la transferencia rápida entre ellas.

Primero, coloque a los hermafroditas adultos en una solución de sal de huevo, que está osmóticamente equilibrada para evitar que los embriones revienten. Corta los gusanos por la mitad para liberar los embriones en desarrollo.

A continuación, identifique los embriones en estadio de dos células. Estas células son los blastómeros formados por la división del óvulo fecundado. Use la micropipeta con la abertura más grande para transferir un embrión a una solución de hipoclorito, lejía, que comenzará a descomponer la cáscara protectora del huevo.

Después de solo 40 a 55 segundos, transfiera el embrión al medio de crecimiento de Shelton, o SGM. Lave cada embrión brevemente en dos pocillos de SGM para eliminar todos los rastros de lejía antes de colocarlos en un tercer pocillo.

Ahora, use la micropipeta más pequeña para pipetear repetidamente el embrión proporcionando la fuerza mecánica para eliminar la cáscara del huevo y exponer los blastóm