Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 3:01 min. • April 30th, 2023
La metabolómica es el estudio para identificar y cuantificar los metabolitos presentes en las células. Para preparar la muestra, comience por sembrar células de cáncer de mama junto con el medio de crecimiento en dos placas etiquetadas como prueba y control. Incubar durante tres días a 37 grados centígrados. Ahora, retire el medio y agregue medio fresco con estradiol en la placa de prueba y medio simple en la placa de control.
El estradiol se une al receptor de estrógeno alfa en las células de cáncer de mama para inducir ciertas expresiones, lo que provoca un cambio en la composición del metabolito. Incube las placas durante el tiempo deseado. Reemplace el medio con solución salina tamponada con fosfato helado o PBS para lavar las células y luego agregue acetona helada. Los reactivos helados detienen la acción de las proteasas y, por lo tanto, evitan la degradación de las proteínas.
Ahora use un raspador para separar las células de las placas y transfiéralas a los tubos con la ayuda de una pipeta. Tome 20 microlitros de esta suspensión celular en un hemocitómetro y cuente el número de células. Almacene las muestras a menos 80 grados centígrados hasta que se utilicen para un análisi
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