Aislamiento de CTC a partir de una muestra de sangre completa: un método para obtener CTC a partir de un modelo murino de cáncer colorrectal

- Las células tumorales circulantes, o CTC, son las células cancerosas que se derivan del tumor primario y entran en la circulación sanguínea. La mayoría de las CTC pueden sobrevivir en el torrente sanguíneo sin adherirse a la superficie; Por lo tanto, podemos detectarlos directamente de la sangre de la mayoría de los pacientes con cáncer.

Las CTC en la sangre pueden indicar la propagación del tumor dentro del cuerpo, por lo que identificarlas ayuda a comprender la progresión del cáncer. Comience tomando un modelo de ratón de cáncer colorrectal anestesiado y obtenga sangre por punción cardíaca. Transfiera la sangre a un tubo cónico que contenga medio de gradiente de densidad y centrifugue para separar los componentes de la sangre.

Deseche la capa superior que contiene plasma y recoja la fracción de células mononucleares de sangre periférica, o PBMC, presente en la interfaz en un tubo separado. A continuación, agregue el anticuerpo anti-EpCAM a las células PBMC y observe bajo un microscopio fluorescente. Las CTC circulantes expresan un marcador celular conocido como molécula de adhesión celular epitelial o EpCAM. Por lo tanto, los anticuerpos anti-EpCAM pueden ayudar a identificar l