Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 3:31 min. • July 8th, 2025
La administración de genes lentivirales asistida por láser es una técnica para transferir un transgén a un sistema huésped.
Para producir ratones transgénicos, comience con huevos fertilizados de ratón aislados en un medio de cultivo adecuado. Coloque la placa de cultivo que contiene huevos fertilizados en una platina de microscopio preinstalada con un aparato láser y conectada a un software de control. Observe con un aumento adecuado.
Los huevos fertilizados están rodeados por zona pelúcida, una capa protectora de glicoproteína que protege las partículas lentivirales. Para penetrar esta barrera, encienda el aparato láser y asegúrese de que el LED láser sea visible sobre la zona pelúcida. Usando el software de control, dispara el láser. Ajuste la duración de la cocción de acuerdo con el diámetro de perforación deseado.
Coloque los huevos en una incubadora para su recuperación. Después de una breve incubación, retire los huevos y agregue partículas de lentivirus que lleven el gen de interés y un marcador seleccionable fluorescente.
Con la zona pelúcida perforada, el lentivirus se difunde fácilmente hacia la membrana del óvulo y entra a través de la endocitosis. El lentivirus se dese
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