Cromatografía en capa fina de alta resolución: una técnica para la separación preliminar y cuantificación de lípidos de neutrófilos
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 3:59 min. • July 8th, 2025
La cromatografía en capa fina de alta resolución, HPTLC, es una técnica analítica avanzada para separar diferentes analitos utilizando partículas adsorbentes de tamaño fino como fase estacionaria. Esta característica facilita un embalaje eficiente, asegurando una mejor separación.
Para separar los lípidos mediante HPTLC, tome una mezcla de lípidos con diferentes polaridades obtenidos de neutrófilos. Ahora, preequilibre la placa en un disolvente orgánico para eliminar cualquier rastro de vapor de agua y suciedad, luego actívela a alta temperatura para evitar el deterioro de la placa.
Aplique la mezcla de lípidos y un estándar como puntos separados cerca de la base de la placa. Transfiera la placa a una cámara de vidrio saturada con un solvente polar: la fase móvil. Deje que el disolvente se mueva hacia arriba a través de la acción capilar.
Mientras se mueven, más lípidos polares migran a lo largo del frente del solvente debido a su afinidad hacia el solvente polar. Por el contrario, los lípidos menos polares se adsorben en las partículas de sílice y se retrasan. Ejecute los lípidos en un disolvente de polaridad intermedia, seguido de un disolvente completamente no polar, lo que da c
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