Cuantificación de la formación de ondulaciones en la membrana mediante microscopía electrónica de barrido

Los estimuladores externos activan las células e inducen la protuberancia tridimensional de la membrana circular, o la formación de volantes de membrana, esenciales para diversas actividades celulares.

Para visualizar la formación de volantes de membrana, comience con una placa de pocillos múltiples que contenga un cubreobjetos en la base. La parte superior del cubreobjetos tiene macrófagos cultivados.

Tratar estos macrófagos con moléculas estimuladoras que activan las células, facilitando la reorganización del citoesqueleto y la formación de protuberancias de membrana. Superponga las células con una solución fijadora, reticulando las proteínas y preservando la estructura celular.

Trate los macrófagos fijos con concentraciones crecientes de alcohol para una deshidratación completa. Deseque estos macrófagos con un secador de punto crítico, eliminando cualquier rastro de agua para obtener mejores imágenes.

Monte el cubreobjetos en un portamuestras de microscopía electrónica de barrido o SEM con cinta conductora. La pulverización catódica recubre el cubreobjetos que contiene macrófagos con una fina capa de metal, lo que garantiza una buena conductividad electrónica durante la obtenció