Aislamiento de células T basado en flotación mediante clasificación de células activadas por flotabilidad

Para aislar las células T, glóbulos blancos esenciales para el sistema inmunológico, mediante la clasificación de células activadas por flotabilidad, BACS, tome una suspensión de células mononucleares de sangre periférica, PBMC. Las PBMC contienen células T diana y células no diana como células B, monocitos, células asesinas naturales y células dendríticas.

Agregue un tampón que contenga una cantidad adecuada de anticuerpo anti-CD3 biotinilado e incube durante el tiempo requerido. El anticuerpo se une al complejo CD3, un complejo de proteínas multiméricas en la superficie celular, una característica definitoria de las células T.

Agregue microburbujas funcionalizadas (pequeñas partículas esféricas recubiertas con estreptavidina) para una selección positiva de células T unidas a anticuerpos. El núcleo de cada microburbuja es una esfera hueca, lo que las convierte en partículas de baja densidad capaces de flotar en una solución acuosa.

Incube la mezcla bajo agitación, permitiendo que las microburbujas y la muestra se mezclen bien. Durante la incubación, la estreptavidina en la microburbuja se une a la biotina en el anticuerpo unido a las células T, inmovilizando las células en las mic